全 文 ：°≤测定射干中 y种异黄酮含量的动态变化
秦民坚 3 o吉文亮 o王峥涛
k中国药科大学 中药学院 o江苏 南京 utssv{l
≈摘要 目的 }研究不同月份南京栽培射干 y种异黄酮成分的动态变化规律 o确定最佳采收期 ∀方法 }采用
°≤进行测定 ∀结果 }不同采收期的射干药材以 w月的总黄酮含量最高 ∀结论 }南京栽培射干的最佳采收期应为
w月 ∀
≈关键词 射干 ~异黄酮 ~含量测定 ~ °≤~最佳采收期
≈中图分类号 u{w1t ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylus2ty{t2sv
≈收稿日期 ussx2sw2uy
≈基金项目 国家自然科学基金资助项目 kvstzstsvl
≈通讯作者 3 秦民坚 o ר¯} k sux l {xv|tu|so ƒ¤¬} k sux l
{vwtuu|to∞2°¤¬¯}°¬±¬¤± ¬´± ¶¬±¤q¦²°
射干为鸢尾科植物射干 Βελαµ χανδα χηινενσισ
k1l⁄≤1的干燥根茎 o主要用于咽喉肿痛等 ≈t ∀近
年来射干用于治疗流感及上呼吸道感染 o效果很好 ∀
现代研究表明射干根茎中主要含异黄酮类化合
物 ≈uov o药理实验等证明为射干抗炎的有效成
分 ≈wox ∀马林等曾采用 °2°≤对不同产地射干
及 v种鸢尾属植物中的 x种异黄酮类化合物即鸢尾
苷 !野鸢尾苷 !鸢尾苷元和次野鸢尾黄素进行了含量
测定 ≈y ∀为合理利用射干 o确定其质量优劣和最佳
采收期 o本研究首次采用 °≤同时测定了不同月
份采收射干药材的鸢尾苷 k·¨¦·²µ¬§¬±lo野鸢尾苷
k¬µ¬§¬±lo鸢尾苷元 k·¨¦·²µ¬ª¨ ±¬±lo野鸢尾苷元 k¬µ¬ª¨ 2
±¬±lo¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬±o¬µ¬¯²±¨ y种异黄酮成分的含量 ∀
1 仪器与试药
惠谱 ° p ttss系列高效液相色谱仪 !紫外检
测器 ~≥色谱数据工作站 k杭州英谱科技开发有限
公司 l~trts万天平 k上海天平仪器厂 l∀鸢尾苷 o野
鸢尾苷 o鸢尾苷元 o野鸢尾苷元 o¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬±o¬µ¬¯²±¨
对照品均为自制 o经 °≤检测纯度均达到 |{h以
上 ~色谱用乙腈为 ƒ¬¶«¨ µ公司生产 ~色谱用甲醇为淮
阴汉邦公司生产 ~其余试剂均为分析纯 ∀
射干根茎采自栽培于中国药科大学药用植物园
的二年生植株 o于 t|||年 v月至 usss年 u月 o每月
取样 t次 o自然干燥 o备用 ∀原植物经作者鉴定 ∀
2 方法
211 色谱条件 色谱柱 ¼³¨ µ¶¬¯ ⁄≥ kw °° ≅ uxs
°°o x Λ°lo预柱 ⁄≥ k°lo柱温 vs ε o流动相乙
腈 2s1sxh磷酸水 o梯度洗脱条件见表 to流速 t °
# °¬±pt o检测波长 uyy ±°∀对照品及样品的色谱
分离情况见图 t∀
表 t 梯度洗脱条件
时间 r°¬± 乙腈 rh s1sxh磷酸水 rh
s ty {w
tu ux zx
uu vs zs
vx vz yv
wx vz yv
图 t 对照品及射干根茎的 °≤图
1对照品 ~
1样品 k采于 |月 l~¤1鸢尾苷 ~¥1野鸢尾苷 ~
¦1鸢尾苷元 ~§1野鸢尾苷元 ~ 1¨ ¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬±~©1 ¬µ¬¯²±¨
212 测定波长选择 通过对鸢尾苷 o野鸢尾苷 o鸢
尾苷元 o野鸢尾苷元 o¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬±o¬µ¬¯²± 紫¨外吸收曲
#t{yt#
第 vt卷第 us期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ us
¦·²¥¨ µoussy
线分析 o发现前 x种对照品的最大吸收峰均在 uyy
±°附近 o而 ¬µ¬¯²± 的¨最大吸收峰在 uzs ±°o综合考
虑 o采用 uyy ±°作为测定波长 ∀
213 标准溶液的制备 精密称取鸢尾苷 t1|z °ªo
野鸢尾苷 u1s| °ªo鸢尾苷元 t1|w °ªo野鸢尾苷元
t1{w °ªo¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬± u1ss °ªo¬µ¬¯²±¨u1sy °ª分别
用甲醇溶解并定容于 x °量瓶 o摇匀 o作储备液 ∀
分别量取各储备液 tos1xos1xot1uos1xos1t °至
x °量瓶中混合 o甲醇定容并摇匀 ∀再分别量取混
合液 s1tos1uos1vos1wos1x °至 u °量瓶中 o甲
醇定容 o摇匀作标准溶液 ∀
214 标准曲线的制备 精密量取上述标准液 us
Λo分别进样 o按色谱条件测定 o每个浓度重复 v
次 o取峰面积平均值 o用最小二乘法以质量浓度 kΞo
Λª# °pt l对峰面积 kΨl进行线性回归 o回归方程
如表 u所示 ∀
表 u y种异黄酮标准曲线的回归方程
化合物 回归方程 ρ
线性范围
rΛª# °pt
鸢尾苷 Ψ {1t{v ≅ tsv Ξ p t tt{1ys s1||| v v1|w ∗ t|. zs
野鸢尾苷 Ψ x1{wu ≅ tsv Ξ p z{t1y{ s1||| { u1s| ∗ ts. wx
鸢尾苷元 Ψ t1sw| ≅ tsw Ξ p w wxy1xz s1||| u t1|w ∗ |. zs
野鸢尾苷元 Ψ {1|uy ≅ tsv Ξ p y v|z1v| s1||| x w1wu ∗ uuqs{
¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬± Ψ {1sy| ≅ tsv Ξ p t s{v1y{ s1||| { u1ss ∗ tsqss
¬µ¬¯²±¨ Ψ |1wt{ ≅ tsv Ξ p t xy|1sv s1||| t s1wt ∗ uqsy
215 样品溶液制备 取射干药材 txs °ªkws目 lo
加入 us °甲醇超声提取 vs °¬±o过滤 o并以适量甲
醇洗涤 u次 o合并滤液 o定容至 ux °o摇匀 ∀微孔
滤膜过滤 o取续滤液 s1w °至 t °量瓶中 o用色谱
甲醇定容 o摇匀 o待测定 ∀
216 精密度试验 取上述样品溶液 us Λ连续进
样 y次 o以各成分峰面积计算 ≥⁄o所得结果 }鸢尾
苷 u1sh o野鸢尾苷 u1sh o鸢尾苷元 u1wh o野鸢尾
苷元 u1wh o¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬± t1th o¬µ¬¯²±¨u1th ∀各成
分 ≥⁄均小于 vh o说明精密度良好 ∀
217 重复性试验 从同一批射干药材中平行取样
y份 o按 215项下样品溶液制备方法制备样品溶液 o
每样品溶液进样 v次 o取平均值 o所得结果为 ≥⁄
分别为鸢尾苷 t1xh o野鸢尾苷 t1{h o鸢尾苷元
t1{h o野鸢尾苷元 t1{h o¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬± u1xh o¬µ¬¯²±¨
v1zh o表明重复性较好 ∀
218 稳定性试验 取射干样品溶液 o每日进样 t
次 o每次 us Λo计算各峰的峰面积 o连续 x §o考察
其稳定性 o结果 ≥⁄分别为鸢尾苷 u1vh o野鸢尾苷
u1|h o鸢尾苷元 t1|h o野鸢尾苷元 u1vh o¬µ¬¶©¯²2
µ¨±·¬± v1|h o¬µ¬¯²±¨v1sh o说明稳定性较好 ∀
219 加样回收率试验 称取已知含量的射干药材
xs °ªo加入已知质量浓度的混合对照品溶液 o按
215项下操作 o制备 y份 o分别测定含量 o计算回收
率及 ≥⁄∀回收率分别为鸢尾苷 ||1|h o野鸢尾苷
tss1vh o鸢尾苷元 tss1sh o野鸢尾苷 ||1vh o¬µ¬¶2
©¯²µ¨±·¬± tss1yh o¬µ¬¯²±¨tss1{h ~ ≥⁄分别为鸢尾
苷 u1yh o野鸢尾苷 t1vh o鸢尾苷元 t1{h o野鸢尾
苷元 s1|xh o¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬± u1vh o¬µ¬¯²±¨v1uh ∀
2110 含量测定 取不同采收期射干药材样品溶
液 o按上述色谱条件进样 o每次 us Λo所得峰面积
代入相应的回归方程 ∀
3 结果
所得结果如表 v及图 u∀结果表明不同采收期
射干均含有异黄酮成分 o只是各成分的比例有变化 ∀
表 v 不同采收期射干的 y种异黄酮成分含量 h
采收日期 鸢尾苷 野鸢尾苷 鸢尾苷元 野鸢尾苷元 ¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬± ¬µ¬¯²±¨ 总异黄酮 tl
usss2st s1uuz s1u{v s1ty| s1wty s1ust s1svu t1vu{
usss2su s1uuv s1uyz s1tzt s1ww{ s1uuv s1sux t1vxz
t|||2sv s1ttt s1t{s p s1|vx s1wvt s1swx t1zsu
t|||2sw s1tww s1vs| s1vux s1zzx s1w{z s1swu u1s{u
t|||2sx s1szy s1tut s1vsu t1ss{ s1vyx s1swt t1|tv
t|||2sy s1tyv s1t{w s1uz{ s1y|w s1vvv s1sv{ t1y|s
t|||2sz s1uuu s1u{x s1vuw s1z{v s1uuu s1svy t1{zu
t|||2s{ s1ts| s1tyu s1usw s1xvz s1uxt s1su{ t1u|t
t|||2s| s1tyu s1t{t s1tzy s1xtw s1vwv s1svu t1ws{
t|||2ts s1s|w s1tvt s1ty| s1wyu s1uzz s1svu t1tyx
t|||2tt s1tuw s1tzu s1utv s1wyv s1uwy s1sv{ t1uxy
t|||2tu s1swv s1s{{ s1t|v s1xsv s1uzt s1svu t1tvs
注 }tl为 y种异黄酮含量之和
#u{yt#
第 vt卷第 us期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ us
¦·²¥¨ µoussy
图 u 不同月份采收射干根茎中 y种
异黄酮成分的动态变化趋势
1鸢尾苷 ~
1野鸢尾苷 ~≤1鸢尾苷元 ~ ⁄1野鸢尾苷
元 ~∞1¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬±~ ƒq¬µ¬¯²± ~¨×q总异黄酮含量为 y种
异黄酮含量之和
4 讨论
由图 u可见鸢尾苷的含量 t月份最高 o其次为
uoz月份 ~野鸢尾苷的含量 w月份最高 o其次为 tou
月份 ~鸢尾苷元的含量 w月份最高 o其次为 zox月
份 ~野鸢尾苷元的含量 x月份最高 o其次为 voz月
份 ~¬µ¬¶©¯²µ¨±·¬±的含量 w月份最高 o其次为 vox月
份 o另外在 |月份还有 t个含量高峰 o与射干春 !秋
u个传统采收期一致 ~¬µ¬¯²± 的¨含量均较低 o以 v月
份最高 o其次为 wox月份 ∀总异黄酮含量在 w月份
最高 o适合采收 o这与射干春天传统采收期一致 ∀综
上所述 o射干中除了鸢尾苷外 o其余成分在 w月份均
可达到最大值或接近最大值 o参考其生物学产量此
时应为最佳采收期 ∀
从不同采收期射干异黄酮含量动态变化 k表 v
及图 ul可知 ot ∗ y月份 y份样品中野鸢尾苷和野鸢
尾苷元的含量表现出互补关系 o野鸢尾苷含量高时 o
野鸢尾苷元则低 ∀野鸢尾苷为野鸢尾苷元 z2Ο2葡
萄糖苷 o推测它们之间呈现一定的苷与苷元相互转
化关系 ∀
在测定不同采收期射干中 y种异黄酮成分时 o
其中 t|||2sv样品中野鸢尾苷未检测到 o可能与其
含量较低有关 o超出了最低检测限度 ∀
≈参考文献
≈t 国家中医药管理局中华本草编委会 q中华本草 k{l≈ q上
海 }上海科学技术出版社 ot|||}uxyq
≈u 吉文亮 o秦民坚 o王峥涛 q射干的化学成分研究 k´ l≈ q中
国药科大学学报 ousstovukvl}t|zq
≈v 秦民坚 o吉文亮 o王峥涛 q射干的化学成分研究 kµ l≈ q中
草药 oussvovxkxl}w{zq
≈w ≠ ²∏ o ²±ª o ¬° °q ±«¬¥¬·¬²± ²©¦¼¦¯²²¬¼ª¨ ±¤¶¨ r¯¬2
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≈y 马 林 o宋万志 o吴 丰 q射干有效成分的反相高效液相色
谱测定 ≈ q药学学报 ot||yo vtktul}|wxq
Στυδιεσ ον δψναµ ιχ ϖαριατιον οφ σιξ ισοφλαϖονεσ χοντεντσ ιν
ρηιζοµ εσ οφΒελαµ χανδα χηινενσισ
± ¬±2¬¤±o • ±¨2¯¬¤±ªo • «¨ ±ª2·¤²
(Χολλεγε οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινεσ, Χηινα Πηαρµ αχευτιχαλΥνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utssv{, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ ·«¨ °²±·«¯¼ §¼±¤°¬¦√¤µ¬¤·¬²± ²©·«¨ ¦²±·¨±·¶²©¶¬¬¬¶²©¯¤√²± ¶¨¬± ·«¨ µ«¬½²° ¶¨²©Βελαµ χανδα
χηινενσισ¦∏¯·¬√¤·¨§¬± ¤±¬±ªo ¤±§§¨ ¦¬§¨ ²³·¬°∏° «¤µ√ ¶¨·¬±ª·¬° ¶¨q Μετηοδ : °≤ ° ·¨«²§º¤¶∏¶¨§·² §¨ ·¨µ°¬±¨·«¨ ¦²±·¨±·¶²©
¶¬¬¬¶²©¯¤√²± ¶¨¬± ·«¨ ¶¤°³¯ ¶¨¦²¯ ¯¨ ¦·¨§¤·§¬©©¨µ¨±··¬° ¶¨q Ρ εσυλτ: ·º¤¶¶«²º± ·«¤··«¨ ·²·¤¯ ¦²±·¨±·¶²©¶¬¬¬¶²©¯¤√²± ¶¨¬± ·«¨ µ«¬½²° ¶¨
²©Β. χηινενσισ¦²¯¯¨ ¦·¨§¬± ³µ¬¯º µ¨¨ ·«¨ «¬ª«¨ ¶·q Χονχλυσιον: ׫¨ °²¶·²³·¬°∏° ¦²¯ ¯¨ ¦·¬±ª·¬°¨²©µ«¬½²° ¶¨²©Β. χηινενσισ¦∏¯·¬√¤·2
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[ Κεψ ωορδσ] Βελαµ χανδα χηινενσισ~ ¬¶²©¯¤√²± ¶¨~ ¦²±·¨±·¶§¨ ·¨µ°¬±¤·¬²±~ °≤~ ²³·¬°∏° ¦²¯¯¨ ¦·¬±ª·¬°¨
≈责任编辑 张宁宁
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