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Protective effects of Shenmai injection on the delayed injury of the cerebral neurons in rat induced by intracerebral hemorrhage

参麦注射液对大鼠脑出血后迟发性神经细胞损伤的保护作用



全 文 :参麦注射液对大鼠脑出血后迟发性
神经细胞损伤的保护作用
何泽云t 3 o李晓峰u o屈 波u
kt1 浙江大学 医学院 第一附属医院 博士后流动站 o浙江 杭州 vtsssv ~
u1 湖南中医学院 o湖南 长沙 wtssszl
≈摘要  目的 }观察参麦注射液对大鼠脑出血后迟发性神经细胞损伤的保护作用 ∀方法 }采用 • ²¶¨±¥¨µª法复
制大鼠脑出血模型 o观察脑出血后大鼠海马 ≤„t 区神经细胞病理形态结构 !神经细胞线粒体 ⁄‘„ 缺失 !≤2°¼¦基
因 !°⁄Šƒ2„基因表达及参麦注射液的防治作用 ∀结果 }参麦注射液减少大鼠脑出血后海马 ≤„t区锥体细胞凋亡数
目 o抑制血肿周围脑组织线粒体 ⁄‘„ 片段缺失 o参麦注射液对出血早期 ≤2°¼¦°• ‘„ 的表达无明显影响 o但可使
°⁄Šƒ2„ °• ‘„表达明显下调并时限延长 ∀结论 }参麦注射液可能通过调节 °⁄Šƒ表达对脑出血后迟发性神经细胞
损伤修复有保护作用 ∀
≈关键词  参麦注射液 ~脑出血 ~线粒体 ⁄‘„ ~°⁄Šƒ基因
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlsz2sxuy2sx
≈收稿日期  ussw2s{2sx
≈基金项目  国家自然科学基金kv||sst||l ~湖南省自然科学
基金k||≠ussvl ~中国博士后基金kussvsvwxutl
≈通讯作者  3何泽云 oר¯ }ksxztl{zuvyx{w o ∞2°¤¬¯}«½¼º­ussv
ƒ ¼¤«²²1¦²°1¦±
研究表明 o脑出血后血肿周围迅速出现广泛的
缺血区域 o并导致广泛的脑水肿 o这种继发性缺血符
合缺血半暗带的所有特征≈t  ∀参麦注射液是化裁于
古方生脉饮的中药注射制剂 o现代药理研究报道 o参
麦注射液能显著减轻氧自由基对细胞的损伤 o改善
细胞能量代谢 o降低脂质过氧化 o提高超氧化物歧化
酶k≥’⁄l的活性 o具有减轻脑细胞缺血损伤及抗细
胞凋亡的作用≈u  ∀本实验试图通过观察参麦注射液
对脑出血后血肿周围神经细胞线粒体 ⁄‘„ 片段缺
失影响 o及其调控 ≤2°¼¦基因 !°⁄Šƒ2„基因的表达 o
探讨参麦注射液对大鼠脑出血后迟发性神经细胞损
伤的保护作用 o为参麦注射液治疗脑出血急性期提
供理论依据 ∀
1 材料与方法
111 动物
健康 ≥⁄系雄性大鼠 o体重kuus ? usl ªo由湖南
省卫生防疫站实验动物中心提供 ∀
112 药物
参麦注射液k≥l }由红参 !麦冬组成 o每支 ts
°含生药各 t ª∀正大青春宝药业有限公司生产 o
生产批号 |wvsvvx|w ∀
113 主要试剂
º 型胶原 o≥¬ª°¤公司 ~⁄∞°≤ o上海生工 ~×µ¬½²¯
核酸提取液k¯ ²·s{ty„usl oŠ¬¥¦²公司生产 ~苯酚 o海
特公司 ~°≤• ¤µ®¨µo°µ²°¨ ª¤~„ ∂ 逆转录酶 o
°µ²°¨ ª¤~פ´ ⁄‘„聚合酶 o°µ²°¨ ª¤~• ‘„¶¬±o°µ²°¨ ª¤~
’¯¬ª²k§×lty o°µ²°¨ ª¤~§‘×°¶¬¬¤µ¨k¯ ²·}|l o上海生工 ~
琼脂糖粉 o上海生工 ∀
114 主要仪器
…Œ’ p • „⁄凝胶成像系统 o美国 …Œ’ p • „⁄公
司 ~ŒŽp {u„ 真空干燥箱 o上海实验仪器总厂 ~⁄≠≠
p ¶电泳槽 o北京六一仪器厂 ~⁄≠≠ p ¶ y…型电泳
仪 o北京六一仪器厂 ~°≤°热循环仪 o美国 ~≥‘p v立
体定位仪 o日本 ~’°×’‘多功能显微镜 o西德 ~‹ p
yss透射电子显微镜 o日本 ~‹…tt{s组织修整机 o瑞
典 ~图像分析仪k≥·µ¤·¤ª¨ ±¨ ¤¨ª¯¨ ¼¨¨ ŒŒl o美国 ∀
2 方法
211 分组
实验分批进行 o按完全随机方法将 ≥⁄大鼠分
为 w组 }正常组 o普通饲养 o自动饮水 o不作任何处
理 ~假手术组 o普通饲养 o术前 uw «以 u °注射用
水腹腔注射 o术后仍用上法k每天 t次l o直到处死为
止 ~模型组 o组内再随机分成脑出血后 tu ouw «ou ow o
#yux#
第 vs卷第 z期
ussx年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯oussx
z §共 x个时间点 o术前 uw «以 u °注射用水腹腔
注射 o术后仍用上法k每天 t次l o直到处死为止 ~参
麦组 o组内时间点及动物分配同模型组 o术前 uw «
以参麦注射液 u °k相当于红参 !麦冬各 s1u ªl腹腔
注射 o术后仍用上法k每天 t次l o直到处死为止 ∀
212 脑出血模型方法
按 •²¶¨±¥¨µª法复制大鼠脑出血模型≈v  o使用
5大鼠脑立体定位图谱6≈w 进行苍白球定位k前囟后
t1w °° o中线右侧旁开 v1u °° o深 x1y °°l o局部消
毒切开皮肤暴露颅骨钻孔 o在前囟后 t1w °°中线右
侧旁开 v1u °°处垂直进针 x1y °° o定位于苍白球 o
以微量进样器 o缓慢注射含 s1u ˜#ˏpt的 º 型胶原
酶的灭菌生理盐水 u ˏo留针 x °¬±后缓慢拔出针
头缝合皮肤 ∀假手术组以同样的方法在此位点注入
灭菌生理盐水 u ˏ∀
3 观察指标及方法
311 神经系统病态观察
术后 vs °¬±左右 o造模大鼠清醒后即开始观
察 o以后每天各观察 t次 o包括神经系统病态及爬杆
记分 ∀
31111 神经系统病态 包括躯体倾斜 o立行欲倒 o
旋转爬行 o活动迟缓 o易激惹 ∀
31112 爬杆记分 爬杆长 u ° o宽 u1w ¦° o厚 w1w
¦° o一端抬高 wxβ o术前 v §训练大鼠由低向高爬行 ∀
计分方法 }将木条等分为 w段 o每段计 y分 ow段总
分相加共 uw分 o计分标准见表 t ∀
表 t 运动行为测验记分标准
肢端机能 每段得分 w段总分
不能爬 y uw
患肢拖行 x us
跌下或滑倒  v次 w ty
跌下或滑倒  u次 v tu
四肢软弱无力 u {
四肢支撑变宽 t w
无明显缺陷 s s
312 组织形态学观察
31211 光学显微镜观察 将实验大鼠以 ts h水合
氯醛腹腔注射麻醉后断头处死 o取出全脑 o分离出血
侧海马 o浸入 ts h中性福尔马林液中固定 o常规梯
度酒精脱水 o石蜡包埋 o‹∞染色 o’°×’‘多功能光
学显微镜观察摄像 ∀
31212 透射电子显微镜观察 按上述方法取出大
鼠出血侧海马组织 ∀t h锇酸固定 os1t °²¯#pt °…≥
漂洗 o梯度丙酮脱水 o∞³²±2{tu包埋 o在 Ž…tt{ss型
组织修整机上切片 o醋酸铀2醋酸铅双重染色 o‹ p
yss型透射电子显微镜观察 !摄像 ∀
313 脑出血 !血肿周围神经细胞线粒体 ⁄‘„ 缺失
的测定
31311 神经细胞线粒体 ⁄‘„提取 取出血侧脑血
肿周围组织称重切碎 o加入适量 ≥∞缓冲液冰上匀
浆 o将匀浆液离心 o取沉淀加入 t °≥∞缓冲液 !悬
浮沉淀k线粒体l o加入 txs ˏ溶液Œkxs °°²¯#pt葡
萄糖 oux °°²¯#pt ×µ¬¶2‹≤¯ ots °°²¯#pt∞⁄ׄl o冰
浴 ts °¬±o加入 uux ˏ预冷为 w ε 的溶液 µks1u °²¯
#pt ‘¤’‹ ot h ≥⁄≥l混匀 o离心 y °¬±o取上清液加入
tru体积平衡酚 o分别加入氯仿 !异丙醇混匀 o冰浴
vs °¬±otw sss µ#°¬±pt w ε 离心 ts °¬±o自然干燥加
入 ∀取 ts ˏ经 s1y h 琼脂糖凝胶电泳检测线粒体
⁄‘„质量 o另取 ts ˏ检测 °·⁄‘„浓度 ∀
31312 °≤• 扩增线粒体 ⁄‘„缺失片段 引物设计
参照文献 o根据 Š¨ ±¨ …¤±®自行设计 t引物 {{x{ xχ2
×≤ׄ××≤„×≤Š×≤×≤ŠŠ„„Š vχ{{zz ~u引物 tu{{x xχ2
ׄ≤≤„××≤≤ׄ„≤„ŠŠŠ××≤2vχ tu|ws ~‹ 引物 tvvvx
xχ2××ׄ׊ŠŠ×Š×„„׊ŠŠŠ2vχtvvxw其中 ur‹ 扩增
野生型 °·⁄‘„片段 otr‹扩增缺失型 °·⁄‘„片段 ∀
如图 t所示 ∀
图 t 野生型 !缺失型 °·⁄‘„片段示意图
31313 °≤• 反应 按照文献≈x 报道的方法进行 ∀
31314 检测与分析 取反应产物 ts ˏ经 t1x h 琼
脂糖凝胶电泳 vs ∗ ws °¬±k电压 tss ∂ l o溴乙啶染
色 o使用凝胶成像系统记录电泳结果 o测定各电泳条
带灰度值 o以目的基因与内参基因的灰度面积比值 o
作为半定量资料进行统计分析 ∀
4 统计学方法
计量资料以 cξ ? σ表示 o实验数据先做方差齐
性检验 o方差齐者两组样本均数间比较用 τ检验 o多
组样本均数间比较用 Φ检验 o组间比较用 θ检验 ~
#zux#
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∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ z
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方差不齐者作数据转换变为方差齐再行上述检验 ∀
5 结果
511 对术后神经系统病态的影响
大鼠术后平均 wx °¬±麻醉清醒 o遗留各种神经
系统病理体征 o假手术组大鼠清醒后未见明显神经
系统病态 ∀模型组 !参麦治疗组大鼠清醒后均出现
活动迟缓 !易激惹 !站立不稳 o病灶对侧肢体无力 !步
阈增宽 o爬行时躯体偏向病灶对侧 o两组大鼠术后神
经系统病态比较无显著差异k Ё s1sxl ∀见表 u ∀
表 u 大鼠术后神经系统病态k ν € wsl 只
组别 躯体倾斜 立行欲倒 旋转爬行 活动迟缓 易激惹
参麦组 v{ vz v{ ws ws
模型组 v| vz vz ws ws
在爬杆实验中模型组 !参麦治疗组大鼠手术后 tu
«otouow §时爬杆计分比较均有明显差异kΠs1sxl∀
512 肉眼观察
造模后 o注射胶原酶侧大脑苍白球均出现出血 o
血肿面积平均约 v °° ≅ u °° ≅ u °° o出血面积以
tu «时平均最大 o以后各时间组血肿逐渐减少 oz §
时 o模型组可见到病灶中含有少量深棕色凝血块 o参
麦组仅见血肿吸收后形成的中风囊腔 ∀
513 组织形态学观察
在低倍镜下确定大鼠出血侧 ≤„t 区后 o用高倍
镜k ≅ uxsl仔细观察海马 ≤„t区锥体细胞的细胞形
态结构 ∀结果 }正常组k ν € wl海马 ≤„t区锥体细胞
层次较多 o细胞排列整齐 o细胞核呈圆形 o常见 t ∗ u
个核仁 ~模型组k ν € tsl内 otu «时海马 ≤„t区锥体
细胞排列松散 o细胞层次减少 o细胞间可见大小不一
着色较深的细胞块 oz §时 o海马 ≤„t区锥体细胞排
列松散 o细胞层次较少 o细胞间仍可见大小不一着色
较深的细胞块 ~参麦组k ν € tslz §时 o海马 ≤„t 区
排列较紧密 o细胞层次较少 o细胞间有大小不一着色
深的细胞块 ∀透射电子显微镜观察模型组 z §时 o
海马 ≤„t区毛细血管和胶质细胞水肿严重 o参麦组
z §时海马 ≤„t区毛细血管和胶质细胞轻度水肿 ∀
514 对大鼠脑出血后脑组织线粒体 ⁄‘„缺失的影响
各组样本均获得野生片段 o正常组 !假手术组均
未获得缺失片段 o模型组 °·⁄‘„片段缺失程度明显
高于参麦组 o参麦组 !模型组大鼠脑出血后存在着不
同程度的 °·⁄‘„缺失 o参麦组脑出血后发生 °·⁄‘„
缺失的样本例数及缺失片断程度均明显少于模型组
k图 u o表 vl ∀
图 u °·⁄‘„表达
1 模型对照组 ~t ov ox oz代表参麦组 °·⁄‘„顺序时间段 ~
u ow oy o{1 模型组 °·⁄‘„顺序时间段
表 v 缺失型r野生型灰度比值kcξ oν € usl
组别 tu « t § u § w § z §
参麦组 s1wv|ktltl s1wzwkul s1wzsktl s1w{ykul s1x|vkultl
模型组 s1xt{kul s1xtskvl s1w|wkvl s1xuukwl s1zx|kwl
假手术组 p p p p p
正常组 p p p p p
注 }括号内为线粒体 ⁄‘„ 缺失样本例数 ~与模型组比较tl Π
s1sx ~与假手术组比较ul Π s1sxk表 w ox同l
515 对大鼠脑出血血肿周围组织 ≤2°¼¦ °• ‘„ o
°⁄Šƒ2„ °• ‘„表达的影响
51511 参麦注射液对大鼠脑出血血肿周围组织 ≤2
°¼¦°• ‘„表达的影响 动态检测大鼠脑出血后 tu
«ot ou ow oz §血肿周围脑组织 o各样本均得到扩增的
¦⁄‘„目的片段k图 v owl ∀模型组与参麦组 ≤2°¼¦
°• ‘„在出血后 tu «表达显著增高 o并达到高峰 o与
假手术组比较有显著性差异k Π s1sxl ~参麦组 w oz
§时 ≤2°¼¦°• ‘„表达接近于假手术组 o已无显著差
异 ~参麦组与模型组比较差异无统计学意义k表 wl ∀
图 v ¦2°¼¦rΒ2¤¦·¬±k参麦组l
1模型对照组 ~t ov ox oz o| ott otv otx1Β2¤¦·¬±顺序时间段 ~
u ow oy o{ ots otu otw oty1¦2°¼¦顺序时间段
图 w ¦2°¼¦rΒ2¤¦·¬±k模型组l
1模型对照组 ~t ov ox oz o| ott otv otx1Β2¤¦·¬±顺序时间段 ~
u ow oy o{ ots otu otw oty1¦2°¼¦顺序时间段
#{ux#
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∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯oussx
表 w ≤2°¼¦°• ‘„rΒ2¤¦·¬± °• ‘„灰度对比值kcξ ? σoν € usl
组别 tu « t § u § w § z §
参麦组 s1|xu ? s1syzul s1xxz ? s1su| s1xxx ? s1sxtul s1w|s ? s1s{| s1wys ? s1sxv
模型组 t1svu ? s1ttsul s1ywv ? s1sytul s1x|| ? s1sy{ul s1xut ? s1svz s1xuu ? s1sv{
假手术组 s1xyx ? s1svw s1ww| ? s1s|| s1wuu ? s1tuu s1ww{ ? s1sxw s1wwy ? s1s{s
正常组 s1v|x ? s1sxu s1v|z ? s1sxw s1v|x ? s1xvs s1wsx ? s1sww s1v|x ? s1sxu
51512 参麦注射液对大鼠脑出血血肿周围组织
°⁄Šƒ2„ °• ‘„表达的影响 出血后 tu «∗ t §o模型
组 !参麦组 °⁄Šƒ2„ °• ‘„表达均明显上调 o与假手
术组比较有显著性差异k Π s1sxl ~参麦组 °⁄Šƒ2„
°• ‘„ tu «ot §时表达均明显低于模型组 ~w oz §时 o
参麦组 °⁄Šƒ2„ °• ‘„ 表达仍高于正常水平k图 x o
y o表 xl ∀
图 x °⁄Šƒ2„rΒ2¤¦·¬±k模型组l
1 模型对照组 ~t ov ox oz o| ott otv otx1Β2¤¦·¬±顺序时间段 ~
u ow oy o{ ots otu otw oty1°⁄Šƒ2„顺序时间段
图 y °⁄Šƒ2„rΒ2¤¦·¬±k参麦组l
1 模型对照组 ~t ov ox oz o| ott otv otx1Β2¤¦·¬±顺序时间段 ~
u ow oy o{ ots otu otw oty1°⁄Šƒ2„顺序时间段
6 讨论
≤2°¼¦是细胞内的 t种原癌基因 o除具有促进
细胞增殖 !抑制细胞分化外 o还参与细胞凋亡的调
控 ∀…¦¯2u可抑制 ≤2°¼¦诱导凋亡的作用 o但不影响
其刺激增殖的作用≈y  ∀有研究表明 o脑损伤后 o损伤
周围组织 ≤2°¼¦°• ‘„ 表达较为明显 o推测与局部
神经细胞轴突返应和反应性胶质细胞增生有关≈z  ∀
°⁄Šƒ是由 °⁄Šƒ2„ 链 !°⁄Šƒ2…链通过二硫键相连
的二聚体 o研究表明 o当中枢神经系统发生中风 !创
伤等病变时 o激活的单核r巨噬细胞 !血管内皮细胞 !
神经细胞 !胶质细胞均能表达 °⁄Šƒ≈{  ∀פ∏¥°¤±等
证实 ≤2°¼¦可促进 °⁄Šƒ 的表达≈|  ∀本实验发现 }
≠参麦组和模型组 ≤2°¼¦°• ‘„ o°⁄Šƒ2„ °• ‘„ 表
达均在出血后 tu «内显著上调 o参麦组 ≤2°¼¦°•2
‘„表达在 w §时基本接近正常水平 o这与 פ∏¥°¤±
等人的研究基本一致 ∀ 参麦注射液在脑出血急性
期ktu «∗ u §l可明显降低 °⁄Šƒ2„ °• ‘„ 的表达 ∀
说明参麦注射液对快速反应基因 ≤2°¼¦表达无明显
影响 o但可抑制出血后早期 °⁄Šƒ2„的表达 o这可能
与参麦注射液减少血肿周围组织急性期的氧化应激
损害有关 ∀
线粒体 ⁄‘„k°·⁄‘„l是一种双链环状分子 o大
约有 ty1x ®¥o占细胞总 ⁄‘„的 s1t h ∗ t h ≈ts  ∀在
缺血缺氧状态下 o神经细胞线粒体氧化磷酸化功能
表 x °⁄Šƒ2„ °• ‘„rΒ2¤¦·¬± °• ‘„灰度对比值kcξ ? σoν € usl
组别 tu « t § u § w § z §
参麦组 s1{vx ? s1szyt oul s1zyv ? s1tytul s1zss ? s1tsyt oul s1zs| ? s1svvt oul s1xyy ? s1szwt oul
模型组 s1||s ? s1sztul s1|{z ? s1vwyul s1{zz ? s1tstul s1w|u ? s1sxuul s1v|y ? s1svw
假手术组 s1xw{ ? s1su{ s1xwy ? s1vts s1w{y ? s1sw{ s1wsu ? s1sxu s1vwt ? s1sy|
正常组 s1vvx ? s1svs s1vvz ? s1sv| s1vus ? s1sv| s1vwu ? s1su| s1vxv ? s1st{
下降 o„×°合成不足 o胞内 ³‹值下降 o线粒体膜上的
三磷酸腺苷合成酶复合体kƒsƒt2„×°¤¶¨l不但不能
有效合成 „×° o最终导致 „×°耗竭 o使电子链中还原
型辅酶 ´k‘¤⁄‹l与辅酶 ± 两位点间/电子漏0增多 o
氧自由基生成增多≈tt  ∀ Ž«°¨ µ等研究发现 }线粒体
锰依赖式超氧化物歧化酶k±r≥’⁄l通过抑制脂质
过氧化 !过氧化硝基k’‘’’2l的产生及维护线粒体
功能来减轻缺血性神经细胞凋亡≈tu  ∀晚近研究发
现 o°¤µ®¬±¶²±病人的神经细胞中存在 °·⁄‘„ 缺失 o
引发氧化应激反应 o导致神经细胞的凋亡≈tv  ∀本实
验发现脑出血后脑组织神经细胞存在着不同程度的
°·⁄‘„缺失 o以 z §时最为明显 o正常组与假手术组
k青年大鼠l未检测出明显缺失片段 o参麦组样本
°·⁄‘„缺失程度及缺失样本个数明显轻于模型组 ∀
#|ux#
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∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯oussx
结果表明 }脑出血后神经细胞存在 °·⁄‘„ 缺失 o缺
失片段总长度约为 x ®¥左右 o参麦注射液可保护神
经细胞 °·⁄‘„ 的缺失 o使缺失突变程度减轻 o其作
用机制推测与参麦注射液抗氧自由基 !抑制氧化应
激反应 !提高 ≥’⁄活性等作用有关 ∀
作者认为 }脑出血后血肿及周围缺血区域出现
氧自由基爆发 !兴奋性神经递质释放 !凝血酶和血红
蛋白的产生等一系列病理改变 o致使 °·⁄‘„发生突
变 ~而 °·⁄‘„发生突变后 o导致氧自由基产生增多 o
进一步损伤 °·⁄‘„ ~当细胞内发生 °·⁄‘„缺失突变
的线粒体数目达到一定阈值 o过多产生的氧自由基
可影响凋亡相关基因 …¤¬o…¦¯2u表达的改变 o引发脑
出血后迟发性神经细胞凋亡 ∀这一假设可能与脑出
血后血管性痴呆的发生有密切的联系 o其具体机制
需要进一步研究 ∀
≈参考文献 
≈t  ¨¨Ž• oŽ¤º¤¬‘oŽ¬° ≥ o ετ αλq ¦¨«¤±¬°¶²© §¨¨ °¤©²µ°¤·¬²±¤©2
·¨µ¬±·µ¤¦¨µ¨¥µ¤¯ «¨ °²µµ«¤ª¨ } ©¨©¨¦·¶²©·«µ²°¥¬± ²± ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¥¯²²§
©¯²º ¥¯²²§2¥µ¤¬± ³¨µ° ¤¨¥¬¯¬·¼ ¤±§¦¨¯¯ ¶∏µ¬√¤¯ ¬± ¤µ¤·°²§¨¯q Νευρο2
συργερψot||z o{y }uzu q
≈u  何泽云 o尤昭玲 q参麦注射液对肾 xry切除大鼠腹膜间皮细
胞的保护作用研究 q中国中西医结合急救杂志 ousst o{kvl }
tvw q
≈v  •²¶¨±¥¨µª Š …q≤²¯ ª¯¨ ±²¶¨2¬±§∏¦¨§¬±·µ¤¦¨µ¨¥µ¤¯ «¨ °²µµ«¤ª¨ ¬±µ¤·q
Στροκε ot||s out }{st q
≈w  包新民 o舒斯云 q大鼠立体定位图谱 q北京 }人民卫生出版
社 ot||t qvx q
≈x  萨姆布鲁克 1 分子克隆实验指南 1金冬雁译 1第 u版 1 北京 }
科学出版社 ot||x1xzy1
≈y  Ž¨¯¨ ®¤µ„ o ׫²°³¶²± ≤ …q …¦¯2u2©¤°¬¯¼ ³µ²·¨¬±¶}·«¨ µ²¯¨ ²©·«¨
…‹v §²°¤¬±¬± ¤³²³·²¶¬¶q Τρενδσ χελλ Βιολot||{ o{k{l }vuw q
≈z  王清华 o徐如祥 o钟世镇 q大鼠脑损伤时神经细胞 ¦2©²¶o¦2­∏±
和¦2°¼¦基因表达变化 q第一军医大学学报 oussu ouskul }
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≈{  Žµ∏³¬±¶®¬oŒ¶¶¤ • o …∏­±¼ × o ετ αλq „ ³∏·¤·¬√¨ µ²¯¨©²µ³¯¤·¨·2§¨2
µ¬√ §¨ªµ²º·«©¤¦·²µ¬± ¤±ª¬²ª¨ ±¨ ¶¬¶¤±§±¨ ∏µ²³µ²·¨¦·¬²± ¤©·¨µ¬¶¦«¨ °¬¦
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Προτεχτιϖε εφφεχτσ οφ Σηενµαι ινϕεχτιον ον τηε δελαψεδ ινϕυρψ
οφ τηε χερεβραλ νευρονσιν ρατ ινδυχεδ βψιντραχερεβραλ ηεµορρηαγε
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(t1 Τηε Ποστδοχτορατε Ρεσεαρχη Χεντρε οφ Τηε Φιρστ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtsssv , Χηινα ;
u1 Ηυναν Χολλεγε οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Χηανγσηα wtsssz , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶²©≥«¨ ±°¤¬k≥l¬±­¨¦·¬²± ²±·«¨ §¨ ¤¯¼¨ §¬±­∏µ¼ ²©·«¨ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ±¨ ∏µ²±¶¬±µ¤·º¬·«
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≈责任编辑 方文贤 
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第 vs卷第 z期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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