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Study on the antioxidative effect of Safflor Yellow

红花黄色素抗氧化作用的研究



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≈责任编辑 方文贤 
红花黄色素抗氧化作用的研究
金 鸣 3 o李金荣 o吴 伟
k北京市心肺血管疾病研究所 首都医科大学 附属北京安贞医院 药理研究室 o北京 tsssu|l
≈摘要  目的 }观察红花黄色素k≥≠l的抗氧化作用 ∀方法 }以邻二氮菲2ƒ u¨ n氧化法检测 ≥≠ 清除 ‹u’urƒ u¨ n体
系产生的羟自由基 ~硫代巴比妥酸比色法观察小鼠肝匀浆的脂质过氧化 ~比色法观察 ‹u’urƒ u¨ n体系产生的羟自由
基致红细胞膜的破裂 ∀结果 }t qv| ∗ v qwu ª#pt ≥≠ 的羟自由基清除率为 uz qu h ∗ tss h o呈明显量效关系 ~zz q{ ∗
zzy qt °ª#pt ≥≠ 缓解小鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制率为 ts qx h ∗ |u q{ h o呈明显的量效关系 ~vz qt ∗ u|z qt °ª#pt
≥≠ 抑制羟自由基引发的红细胞破裂呈明显的量效关系 ∀结论 }≥≠ 为红花水溶性抗氧化有效部位 ∀
≈关键词  红花黄色素 ~羟自由基 ~脂质过氧化 ~红细胞
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsx2swwz2sv
红花 Χαρτηαµυσ τινχτοριυσ q为主要的活血化瘀
药 o可活血通经 !化瘀止痛 o临床上红花主要以水煎
液入药 ∀组织缺血r再灌注等过程中 o自由基引发的
氧化反应为许多血液循环障碍疾病的重要损伤机
制 ∀红花水提液可清除羟自由基 o抑制小鼠肝匀浆
脂质过氧化≈t  o红花黄色素k≥≠l为红花主要水溶性
活血化瘀有效部位 o可抑制血小板激活因子诱发的
血小板聚集 o为一血小板激活因子受体拮抗剂≈u  ∀
本室观察了 ≥≠ 的多种抗氧化作用 o以探讨红花活血
化瘀作用的实质 ∀
1 材料
1 q1 试剂与药品 硫代巴比妥酸kׅ„l为国产生物
试剂经活性炭脱色 !重结晶处理 o其他试剂均为国产
分析纯 ∀依文献≈v 方法 o以大孔树脂柱色谱法制备
≈收稿日期  ussv2tt2ts
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kvstzttwyl
≈通讯作者  3 金鸣 o ר¯ }kstslywwtuwvt2uvs{ o ∞2°¤¬¯}­¬±½¤±ªƒ
³∏¥¯¬¦v q¥·¤q±¨ ·q¦±
≥≠ o‹°≤面积归一化法分析结果表明其羟基红花黄
色素 „含量为 {v h ∀
1 q2 设备 zxx…型紫外可见分光光度计 ∀
1 q3 动物 雄性昆明小鼠为本院动物房提供 ~雄性
新西兰家兔 o为中国药品生物制品检定所提供 ∀
2 方法
2 q1 红花黄色素清除羟自由基 参考文献≈w 方法 o
以邻二氮菲2ƒ u¨ n氧化法检测 ‹u’urƒ u¨ n体系产生的
羟自由基 ∀
2 q2 红花黄色素抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化 取小
鼠处死后取肝洗净血污 o剪碎以生理盐水制 v h 匀
浆 o取此匀浆 s qv °加入各种试剂 o反应液总体积
为 s qyz °o含不同浓度 ≥≠ o ‹u’u s qssu w h oƒ ≥¨’w
s qsv °°²¯#pt ovz ε 保温 ys °¬±o加入 t °us h 三
氯醋酸及 t °s qyz h ׅ„ o|s ε 保温 tx °¬±后水
冷 ov sss µ#°¬±pt离心 us °¬±o取上清测定 xvu ±° 吸
光度 „xvu o以 ‹u’ 代替 ׅ„ 的平行试验管为各反应
管比色空白 ∀以蒸馏水代替红花黄色素溶液的反应
#zww#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ x
¤¼oussw
管为 ‹u’ 管 o则红花黄色素脂质过氧化抑制率为 Œt ∀
Œtk h l € ≈k Α‹u’ p Α¶¼lr Α‹u’  ≅ tss h
2 q3 红花黄色素抑制羟自由基引发的红细胞膜破裂
兔耳正中动脉取血 o„≤⁄k 柠檬酸钠 {x °°²¯#pt o
柠檬酸 zt °°²¯#pt o葡萄糖 tts °°²¯#ptl与全血以
tΒy体积比抗凝 ∀v sss µ#°¬±pt离心 ts °¬±o去除血
浆 o加生理盐水至抗凝血 x 倍体积即得红细胞混悬
液 ∀各反应管加入此红细胞混悬液 s qu °及其他试
剂 o反应液总体积为 t qzx °o含不同浓度的 ≥≠ o‹u’u
t qvz h o ƒ ≥¨’w t q tw °°²¯ # pt 及 ³‹ z q w
‘¤u‹°’wtxs °°²¯ #pt ovz ε 振摇ys °¬±后取出 o
v sss µ#°¬±pt离心 ts °¬±o取上清测定 xss ±° Αxss o
以 ‹u’ 代替反应体系中的全血为各反应管比色空
白 o以 ‹u’ 代替 ≥≠ 溶液反应测得 Α‹u’管数据 o则 ≥≠
的红细胞膜破裂抑制率为 Œu ∀
Œuk h l € ≈k Α‹u’ p Α¶¼lr Α‹u’  ≅ tss h
本结果所列数据均为 v个平行试验管数据的平
均值 ? 标准差 o所有数据均以 ≥°≥≥ ts qs 软件用方差
分析法进行统计检验 ∀
3 结果
3 q1 红花黄色素清除羟自由基的作用 表 t结果表
明 o离体条件下 ≥≠ 清除羟自由基的作用呈明显的量
效关系 ∀
表 t ≥≠ 清除羟自由基的作用
分组 ≥≠ 浓度rª#pt Αxvy 羟自由基清除率r h
‹u’ s qz{| ? s qssy
‹u’urƒ u¨ n n ‹u’ s qvzs ? s qssz
‹u’urƒ u¨ n n ≥≠ s qy| s qvuz ? s qsut s
t qv| s qw{w ? s qss{tl uz qu
u qsx s qyv{ ? s qssztl yw qs
u qzw s qzx| ? s qststl |u q{
v qwu s q{wx ? s qsuvtl tss
注 }与 ‹u’urƒ u¨ n n ‹u’管比较 tlΠ s qsst
3 q2 红花黄色素抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化的作用
表 u结果表明 o离体条件下 ≥≠ 抑制小鼠肝匀浆脂
质过氧化的作用呈明显的量效关系 ∀
表 u ≥≠ 抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化的作用
分组 ≥≠ 浓度r°ª#pt Αxvu 脂质过氧化抑制率r h
‹u’ s qyut ? s qssu
≥≠ zz qy s qxxy ? s qssutl ts qx
txx qu s qwxs ? s qsu{tl uz qx
vts qw s qtw{ ? s qstytl zy qu
wyx qz s qsxv ? s qssvtl |t qx
yus q| s qsyt ? s qsswtl |s qu
zzy qt s qswx ? s qsswtl |u q{
注 }与 ‹u’管比较 tlΠ s qsst
3 q3 红花黄色素抑制羟自由基引发的红细胞膜破裂
的作用 表 v结果表明 o离体条件下 ≥≠ 抑制羟自由
基诱发红细胞膜破裂的作用呈明显的量效关系 ∀
表 v ≥≠ 抑制羟自由基诱发红细胞膜破裂的作用
分组 ≥≠ 浓度r°ª#pt Αxvu 红细胞破膜抑制率r h
‹u’ s qy{y ? s qss| p
≥≠ vz qt s qx{s ? s qsw{tl tx qw
zw qv s qxxw ? s qsvwtl t| qu
tw{ qy s qwxw ? s qsuxtl vv q{
u|z qt s qwus ? s qssxtl v{ q{
注 }与 ‹u’管比较 tlΠ s qsst
4 讨论
红花在临床上以水煎液入药 o可治疗多种血液
循环障碍性心脑血管疾病 o在组织缺血r再灌注 o炎
症反应等过程中 o自由基反应为一重要的损伤机制 ∀
红花水提液可清除自由基 o抑制脂质过氧化反应 o≥≠
为红花主要水溶性有效组分 o它为一 °„ƒ 受体拮抗
剂≈u  o其抗氧化作用尚未见报道 ∀
‹u’urƒ u¨ n体系可通过 ƒ ±¨·²±反应产生羟自由
基 o引发脂质过氧化 !蛋白质交联等反应 o造成细胞
膜破裂可导致组织坏死等后果 ∀红花以水煎液入
药 o≥≠ 为红花水溶性组分 o实验结果表明 o该组分可
清除羟自由基 !抑制脂质过氧化 o保护细胞膜 o提示
其为红花水溶性抗氧化有效部位 ∀≥≠ 中含大量黄酮
类成分 o其中主要成分羟基红花黄色素 „ 为一查尔
酮类成分 o其分子中含多个酚羟基 o其抗氧化药效可
能为这些酚羟基的作用 ∀在多种血瘀病症中 o在组
织缺血r再灌注 !炎症反应等过程中 o自由基反应对
加剧血液循环障碍起了重要的作用 o而红花成分的
抗氧化效应对其活血化瘀的作用具一定的贡献 ∀
红花为一常用的活血化瘀药 o具抗血栓 !抗心肌
缺血 !改善微循环 !抗氧化等多方面的心血管药理作
用 ∀红花原植物适应性强 o分布广 o易于种植 o≥≠ 在
红花中含量较高 o溶解度好 o在此基础上开发新型心
血管药物 o可望获得明显的经济与社会效益 ∀
≈参考文献 
≈t  金 鸣 o李金荣 o蔡亚欣 o等 q红花水溶性成分抗氧化作用的研
究 q心肺血管病杂志 ot||{ qtzkwl }uzz q
≈u  金 鸣 o吴 伟 o陈文梅 o等 q红花总黄色素体外抑制血小板激
活因子受体结合作用的研究 q中国药学杂志 usst ovykvl }tyz q
≈v  金 鸣 o高子淳 o李金荣 o等 q大孔树脂层析法制备羟基红花黄
色素 „及红花黄色素 q中草药 oussw ovxktl }uu q
≈w  金 鸣 o蔡亚欣 o李金荣 o等 q邻二氮菲2ƒ u¨ n氧化法检测 ‹u’ur
ƒ u¨ n产生的羟自由基 q生物化学与生物物理进展 ot||y ouvkyl }
xxv q
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第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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Στυδψ ον τηε αντιοξιδατιϖε εφφεχτ οφ Σαφφλορ Ψελλοω
Œ‘¬±ªoŒ¬±2µ²±ªo • ˜ • ¬¨
( ∆επαρτµεντ οφ Πηαρµαχολογψ, Βειϕινγ Ινστιτυτε οφ Ηεαρτ , Λυνγ ανδ Βλοοδ ςεσσελ ∆ισεασεσ , Βειϕινγ Ανζηεν Ηοσπιταλ, Βειϕινγ tsssu| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ¤±·¬²¬¬§¤·¬√¨ ©¨©¨¦·²© ≥¤©©¯²µ≠¨¯ ²¯º k≥≠l q Μετηοδ : ‹¼§µ²¬¼¯ µ¤§¬¦¤¯ ¶¦¤√ ±¨ª¨ ©¨©¨ ¦·²© ≥≠
º¤¶·¨¶·¨§º¬·«t ots2³«¨ ±¤±·«µ²¯¬±¨ 2ƒ u¨ n ²¬¬§¤·¬√¨¤¶¶¤¼q¬³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²± ²© °²∏¶¨ ¬¯√ µ¨¶∏¶³¨ ±¶¬²± º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§ º¬·«·«¬²¥¤µ¥¬·∏µ¬¦¤¦¬§
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≈责任编辑 方文贤 
十全大补汤与核桃醌粉针合用对荷瘤小鼠肝脏及
免疫功能的影响
杜 旭 3 o刘 璐 o张英华
k哈尔滨医科大学 第一临床医学院 o黑龙江 哈尔滨 txssstl
≈摘要  目的 }探讨十全大补汤与核桃醌粉针联合使用对小鼠 ≥t{s肝脏的保护减毒作用及免疫增强作用的影
响 ∀方法 }采用体内移植性肿瘤实验与体外细胞培养相结合的方法 o观察了单独使用核桃醌粉针和十全大补汤与
核桃醌粉针合用对小鼠 ≥t{s肝脏谷丙转氨酶 !单核巨嗜细胞吞噬功能 !胸腺指数 !脾指数 !淋巴细胞转化率等指标
的影响 o并在电镜下观察十全大补汤与核桃醌粉针合用对肝脏的保护作用 ∀结果 }单独使用核桃醌粉针 tu qx °ª#
®ªp t有 zv qt h抑瘤作用 o但使 ≥Š°×升高 o而十全大补汤与核桃醌粉针联合使用可对 ≥t{s小鼠肝功能起保护作用 o
≥Š°×与正常对照组相比 Ё s qsx ~十全大补汤与核桃醌粉针合用组吞噬指数明显提高 ~电镜结果表明 }二药合用
组 o肝细胞变化轻微 o未见粗面内质网扩张 ~能明显提高荷瘤小鼠的淋巴细胞转化率 o对 ×细胞介导的细胞免疫功
能有明显促进作用 ∀结论 }提示十全大补汤与核桃醌粉针联合使用 o发挥了增效减毒作用 o从而通过增强机体的免
疫功能达到整体的抗肿瘤效果 ∀
≈关键词  十全大补汤 ~核桃醌 ~保肝作用 ~免疫增强作用
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsx2sww|2sv
寻找高效低毒的抗肿瘤新药或探索抗肿瘤药的
减毒增效措施一直是世界性的研究课题 ∀青核桃是
胡桃科植物核桃楸 ϑυγλανσ µανδσηυριχα ¤¬¬°q的未
熟果实 o是治胃癌验方 ∀记载胡桃入药最早始于 |zw
年宋代5开宝本草6 o历代医书均有记载 ∀国外曾从
胡桃类植物提取胡桃醌用于抗癌试验 o但未见用于
临床 ∀黑龙江省中医研究院经多年研究 o通过动物
实验及临床观察肯定了青核桃的抗肿瘤作用≈t  ∀高
奎滨等≈t 确认抗癌主要活性成分为核桃醌 o其实验
≈收稿日期  ussv2ts2s{
≈通讯作者  3杜旭 oר¯ }kswxtlxvywuwxx
结果表明抗癌效果作用明显 o但有一定的副作用 ∀
本研究根据中医/扶正祛邪 o攻补兼施0的原则 o在已
有的研究工作基础上 o将十全大补汤与核桃醌粉针
合用 o初步探讨了对荷瘤小鼠肝功能及免疫功能的
影响 ∀
1 材料
十全大补汤k⁄…×l }按处方标量投饮片 o常规煎
煮 o浓缩至每毫升含生药 u ªo剂量为 us ª#®ªpt ~核桃
醌粉针k‹×Žl为青核桃分离提取的核桃总萘醌部分
制成粉针 ∀实验时以生理盐水k‘≥l配成所需浓度 o
剂量 tu qx °ª#®ªpt ~°• Œ tyws培养基为美国 Š¬¥¦²
公司产品 ∀噻唑蓝k××l !刀豆球蛋白k≤²±„l为美
#|ww#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ x
¤¼oussw