全 文 ：Εφφεχτ οφ Ζηιµ υ ανδ Ηυανγθι ον Χαρδιαχ Ηψπερτροπηψ ανδ
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¥¬±¨ § º¬·« ∏¤±ª´¬¦¤± ¶¯²º §²º± «¨ ¤µ·µ¤·¨ o ±¨«¤±¦¨ ·«¨ µ¨¶¨µ√¨©²µ¦¨ ²©·«¨ «¨ ¤µ·o¤±§¬°³µ²√¨·«¨ µ¨¶³²±¶¨ ¦¤³¤¦¬·¼ ²©¦¤µ§¬¤¦«¼2
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[ Κεψ ωορδσ] «¬°∏~ ∏¤±ª´¬~¦¤µ§¬¤¦«¼³¨µ·µ²³«¼ ~«¨ ¤µ·µ¤·¨ ~µ¨¶³²±¶¨ ·²¶·¬°∏¯¤·¬²±
≈责任编辑 古云霞
马蹄金提取物镇痛 !
抗炎及抑菌作用的实验研究
曲莉莎t o曾万玲t o谢达莎t o刘玉明u o梁光义u
kt q贵阳中医学院 药理教研室 o贵州 贵阳 xxsssu ~
u q贵州省中国科学院 天然产物化学重点实验室 o贵州 贵阳 xxsssul
≈摘要 目的 }探讨马蹄金提取物的镇痛 !抗炎及抑菌作用 o以验证该药的相关功效 ∀方法 }用小鼠扭体法 !热板
法及电刺激法观察其镇痛作用 ~以小鼠腹腔毛细血管通透法 !小鼠耳肿法及大鼠足肿法观察其抗炎作用 ~以微生物试
验琼脂法 !钢管法及试管法观察其抗菌作用 ∀结果 }实验数据经 τ检验统计 o表明具有镇痛作用 o以中剂量组作用显
著 ~有抗炎作用 o以大剂量组作用显著 ~其提取物对金黄色葡萄球菌及乙型溶血性链球菌等致病革兰氏阳性球菌有较
强的抗菌作用 ∀结论 }实验结果表明 o民族药马蹄金提取物具有较好的镇痛 !抗炎及抗菌作用 o此与其相关的中医临床
功效及主治相符 o为其临床应用提供了一定的实验依据 ∀
≈关键词 马蹄金提取物 ~镇痛 ~抗炎 ~抗菌
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvlsw2svzw2sv
≈收稿日期 ussu2sy2uw
≈通讯作者 ר¯ }ks{xtlxys|zww
≈基金项目 国家自然科学基金资助课题kv||yss{tl
#wzv#
第 u{卷第 w期
ussv年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o²qw
³µqoussv
马蹄金为旋花科马蹄金属植物马蹄金 ∆ιχηον2
δρα ρεπενσ ƒ²µ¶·q的全草 o其味苦辛而性微寒 o入肺 !
肝二经 ∀有清热解毒 o利水活血 o接骨续筋等功效 ∀
中医临床应用广泛且疗效显著 o主治黄疸 !痢疾 !胆
囊炎 !砂石淋痛 !白浊 !水肿 !疔疮肿毒 !跌打损伤
等≈t2v ∀但尚未见其现代药理研究报道 o为此 o据其
功效主治 o本实验着重观察了马蹄金提取物在镇痛 !
抗炎及抑菌等方面的作用 o以利于其研究开发 ∀
1 材料和方法
1 q1 材料
1 q1 q1 药物和试剂 马蹄金干品 o为贵州产贵阳
市售药材 o经贵阳中医学院陈德媛研究员鉴定为正
品 ∀马蹄金提取物 o由贵州省中国科学院天然产物
化学重点实验室梁光义教授提供 ∀其提取物的制
备 }将 ts ®ª全草常规加工粉碎后过 us 目筛 o用
zx h ∗ |x h乙醇回流提取 v次 o回收乙醇至无醇味
后用正丁醇萃取得到 t xxu ª稠状浸膏 o相当于含生
药 y qx ª#ªp t浸膏 ∀提取物冷藏保存 o临用时以 t h
羧甲基纤维素钠稀释至所需浓度 ∀角叉菜胶 o≥¬ª°¤
产品 o批号 x|≤2svu{ ∀伊文思兰 o≤«µ²°¤进口分装 o
上海化学试剂采购供应站试剂厂 o批号 z|s|tz ∀二
甲苯k分析纯l o上海试剂一厂 o批号 {zsysx ∀羧甲基
纤维素钠 o中国医药k集团l上海化学试剂公司 o批号
ussss|s{ ∀阿斯匹林肠溶片 o西安博华制药有限责
任公司 o批号 usstszuw ∀氨糖美辛肠溶片 o浙江海力
生制药公司 o批号 usstsst ∀罗通定片 o湖南洞庭药
业股份有限公司 o批号 |{susv ∀
1 q1 2 动物 昆明种小鼠 ot{ ∗ uu ªoα ⎯ 兼用 o合
格证书 }医动字第 ststsst 号 ∀ • ¬¶·¤µ大鼠 ouss ∗
uus ªoα ⎯ 兼用 o合格证书 }医动字第 uvsusv{号 ∀
均由贵阳中医学院实验动物研究所提供 ∀
1 q1 q3 仪器 zut型分光光度计 o四川分析仪器厂
产品 ∀2型精密扭力天平 o上海第二天平仪器厂
产品 ∀≤2v型生理实验多用仪k连续脉冲 o频率 xs
次#¶p t o电压 x∂ l o上海国泰电讯器材厂产品 ∀ 2
{wsu型热板测痛仪≈电压 uus ∂ o功率 txs • o温度
kxx ? s qul ε o浙江宁海白石电子医药仪器厂产
品 ∀低速自动平衡离心机 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 马蹄金提取物的镇痛作用≈w
扭体法 取 α ⎯ 各半小鼠 xs只 o随机均分 x
组 ∀对照组给 ≥ o马蹄金提取物 v个剂量组 o按大
中小剂量分别给 vu qx oty qv及 { qu ª#®ªp t o阳性药
组给罗通定 xs °ª#®ªp t ∀各组均 ¬ª给药 o每日 t
次 o连续v日 ∀于末次给药后t« o各组小鼠均¬³
s qy h醋酸溶液 s qu °r只 o记录自注射醋酸致痛后
每只小鼠在 tx °¬±内出现的扭体反应次数 o结果作
组间比较 o并计算镇痛率 ∀
热板法 取 α小鼠若干 o于正式试验前先逐只
用热板测痛仪进行筛选 ∀筛选时每次取小鼠 t只 o
记录自放入测痛仪中至出现舔后足所需时间k¶l o以
此作为该小鼠给药前痛阈值 o凡是 vs ¶内不出现舔
后足者弃之不用 ∀将预选合格的小鼠作正式实验 o
每组 ts只 o共 x组 o分别为对照组 !马蹄金提取物大
中小剂量组 !罗通定组 ∀均¬ª给药 o共 v日 ∀于末次
给药后 t «o测定各组小鼠痛阈值 o超过 ys ¶者则按
ys ¶计算 ∀
电刺法 取 α ⎯ 小鼠若干 o预先用生理实验多
用仪测定各小鼠给药前痛阈值 o筛选合格小鼠 ∀将
电针刺入小鼠距尾根部 t ¦°处 o深度约 u °° o均匀
缓慢旋转输出电压旋钮 o直至小鼠发出第一声嘶叫
为止 o以此电压值作为给药前痛阈值k∂ l o低于 s qux
∂ 或高于 s qzx ∂ 者剔除不用 o给药前后刺激电压均
保持一致 ∀将筛选合格小鼠用于正式实验 o均¬ª给
药 o共 v日 ∀于末次给药后 t «o测定各组小鼠的痛
阈值 ∀
1 q2 q2 马蹄金提取物的抗炎作用≈x
对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 取小鼠 ys
只 oα ⎯ 各半 o随机均分 x组 ∀对照组及马蹄金提取
物各组给药剂量 !方法同 1 q2 q1 o阳性药组给消炎痛
us °ª#®ªp t ∀连续 w §k消炎痛组 u §l ∀于末次给药
后 t «o每组每只小鼠依次自尾静脉注射 u h伊文思
兰k≥配制ls qt °#ts ªp t ∀ts °¬±后¬³s qy h醋
酸溶液每只 s qu °∀us °¬±后断头处死小鼠 o剪开
腹腔 o每次用 u °≥冲洗腹腔 o共 v次 o用吸管吸
取腹腔洗出液 x ∗ y °o离心 x °¬±kt sss µ#
°¬±p tl o取上清液在 zut型分光光度计上 x|s ±°处
测吸光度 o得到伊文思兰浓度 ∀
对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 将 α ⎯
各半 ys只小鼠随机均分 x组 o分别¬ª给药 ∀对照组
给 ≥ o马蹄金提取物大中小 v个剂量组 o阳性药组
给消炎痛 ∀每日 t次 o共 w日 ∀于末次给药后 t «o
各组小鼠均右耳廓两面均匀涂布二甲苯每只 s qsx
°o左耳不涂为正常耳 ∀致炎肿胀后 t «o脱颈椎处
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第 u{卷第 w期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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死小鼠 o即刻沿耳廓边缘剪下左 !右两耳片 o于精密
扭力天平称重 ∀用右耳片重量减去左耳片重量 o即
得到肿胀净值 o并计算耳肿抑制率 ∀
抑制率k h l 对照组平均肿胀值 p给药组平均肿胀值r
对照组平均肿胀值 ≅ tss h
对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响 取 α
⎯ 大鼠 ws只 o随机均分 x组 ∀对照组及马蹄金提取
物 v组给药剂量同 1 q2 q1 o阳性药组给阿斯匹林 s qu
ª#®ªp t ∀均¬ª给药 o每日 t次 o连续 w §k阿斯匹林组
u §l ∀于实验当日先用游标卡尺测量每只大鼠右后
足跖正常厚度 o给药后 vs °¬±o予每只大鼠右后足跖
k右后足掌心向踝关节方向l¶¦t h 角叉菜胶 s qt
°∀分别测量给药后 t ou ov ow及 y «大鼠右后足跖
厚度 o用致炎后厚度减去正常厚度所得差值 o即为各
时间段足跖肿胀净值 o最后作组间比较 ∀
1 q2 q3 马蹄金提取物的抗菌作用观察≈w
试验采用普通肉汤培养基 o普通营养琼脂及血
琼脂平板培养基 ∀用琼脂平板挖沟法初筛抗菌谱 ∀
以常规钢管法作抗菌强度定性试验 o所用药液相当
含生药 s qvv ª∀以试管法作抗菌强度定量试验 o常
规培养 uw «后观察得到最低抑菌浓度k ≤l和最小
杀菌浓度k
≤l ∀
1 q2 q4 实验数据处理
镇痛 !抗炎各实验结果数据均采用 ξ ? σ表示 o
用 τ检验法作各组间统计学处理 ∀
2 结果
2 q1 对小鼠不同痛反应的影响
2 q1 q1 对扭体反应的影响 各组小鼠在 tx °¬±内
的扭体反应次数及镇痛率分别为 }≥ 组ku{ q{t ?
tt qv{l次 ~马蹄金提取物大剂量组kux qvu ? ty qtwl
次 otu qu h ~中剂量组ktz qzv ? | q{yl次 ov{ qx h ~小
剂量组kuu qvt ? | qutl次 ouu qy h ~罗通定组ktx q{u
? | qy|l次 owx qt h ∀与 ≥组比较 o中剂量组 !罗通
定组均 Π s qsx ∀表明马蹄金提取物中剂量镇痛作
用较好 ∀
2 q1 q2 对热板反应的影响 结果表明 o马蹄金提
取物各剂量组痛阈提高率均达到 xs h以上 o提示该
药可对抗热致痛的小鼠反应 o使其潜伏期明显延长
k表 tl ∀
2 q1 q3 对电刺反应的影响 马蹄金提取物各剂量
组小鼠电刺嘶叫潜伏期均较给药前延长 o以中剂量
组差异显著 ∀给药后痛阈值分别为 }≥对照组ks q
vx ? s qt|l∂ ~马蹄金大剂量组ks qxw ? s quyl∂ o中剂
量组ks qyu ? s quzl ∂ o小剂量组ks qxv ? s qt{l ∂ ~罗
通定组ks qy| ? s qvtl∂ ∀中剂量组 !罗通定组与 ≥
对照组比较差异显著 oΠ s qsx ∀提示该药有对抗
因电刺激而引起的动物痛反应作用 ∀
表 t 马蹄金提取物对小鼠热板
致痛反应的影响k ξ ? σ, ν tsl
组别
剂量
rª#®ªp t
给药前痛
阈值r¶
给药后痛
阈值r¶
痛阈提
高率r h
≥组 t| qtt ? y qvy us qvt ? { q|w y q{
马蹄金 vu qx t| q|t ? w qux vs q|t ? t{ qut xx qv
ty qv ux q|t ? w qzt wt qut ? us qvutl x| qt
{ qu t| qyt ? x qxw vs q|u ? ty qxy xz qz
罗通定 s qsx uu qzu ? w q|x wx qst ? us quttl |{ qu
注 }与 ≥对照组比较 tl Π s qst
2 q2 对动物急性炎症反应的影响
2 q2 q1 对毛细血管通透性的影响 马蹄金提取物
各剂量组小鼠腹腔液中伊文思兰浓度较 ≥对照组
明显减少 o差异非常显著 ∀提示药物对醋酸所致毛
细血管通透性的增加有明显抑制作用k表 ul ∀
表 u 马蹄金提取物对小鼠腹腔
毛细血管通透性的影响 k ξ ? σ, ν tul
组别
剂量
rª#®ªp t
吸光度
伊文思兰浓度
r˪
抑制率
r h
≥组 t qsz ? s qu| tvy qyt ? uy q{u
马蹄金 vu qx s qwu ? s qt{ xs qxt ? vs qx|ul yv qsv
ty qv s qwu ? s qut xu qut ? vu q|tul yt qz|
{ qu s qw{ ? s qty yv qwt ? u{ qttul xv qx|
消炎痛 s qsu s qvx ? s qtt v| qtu ? tz qyvul zt qv{
注 }与 ≥对照组比较 ul Π s qsst
2 q2 q2 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 马蹄金
提取物大 !小剂量组 o可明显抑制二甲苯所致小鼠耳
廓急性炎症性水肿 o与 ≥对照组比较差异显著 ∀各
组耳廓肿胀净值及耳肿抑制率分别如下 }≥组
kvs qvv ? tt qt|l °ª~马蹄金大剂量组kus qyz ?
| qwvl °ªovt q{x h ~中剂量组kux qwu ? { qytl °ªo
ty qt| h ~小剂量组ktz qzx ? z qttl °ªowt qw{ h ~消
炎痛组kts qs{ ? x qvzl °ªoyy qzz h ∀与 ≥ 组比
较 o马蹄金提取物大 !小剂量组的显著差异分别为 Π
s qsx oΠ s qst ~消炎痛组则 Π s qsst ∀
2 q2 q3 对大鼠足肿的影响 结果表明 o用角叉菜
胶予大鼠足跖致炎后 y «内 o马蹄金提取物各剂量
组在不同时间段内 o分别有抑制肿胀作用 o提示该药
对此种炎症模型有一定的对抗作用k表 vl ∀
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表 v 马蹄金提取物对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响 k ξ ? σ, ν {l °°
组别
剂量
rª#®ªp t
致炎后不同时间足跖肿胀净值
t« u« v« w« y«
≥组 u qsu ? s qww v qv{ ? s qyz v q{w ? s qyz v q|v ? s qz| v qxz ? s qzw
马蹄金 vu qx u qt{ ? s qv| u qzu ? s qxwtl u q|z ? s q|xtl v qvy ? s qx{ u q|v ? s qzt
ty qv u qvz ? s qww v qvu ? s qzy v q|t ? s q{z v q{x ? s qzt v qyw ? s q{y
{ qu u qv{ ? s qyz v qtw ? s qyu v qx{ ? s qxt v qvz ? s qzu u q{y ? s qxwtl
阿斯匹林 s qu u qvx ? s q{v u qyt ? t qs{tl u qzw ? s qz|tl u qzw ? s qyytl u qzz ? s qxztl
注 }与 ≥对照组比较 tl Π s qsx
2 q3 马蹄金的抗菌作用
马蹄金提取物对金黄色葡萄球菌 !乙型溶血性
链球菌 !大肠杆菌 !伤寒杆菌 !变形杆菌 !产气杆菌 o
有一定的抗菌作用 ∀以上各抑菌圈直径分别为 us q
s out qs o{ qs otu qs o| qs o{ qs °° ∀同时测定出药液
对金黄色葡萄球菌的 ≤ 及
≤ 分别为 s qtsu及
s qwsz ~对乙型溶血性链球菌的 ≤ 及
≤ 分别为
s qtsu及 s q{tv ∀微生物试验表明 o马蹄金提取物对
金黄色葡萄球菌 !乙型溶血性链球菌等革兰氏阳性
致病球菌的抗菌作用较强 ~而对大肠杆菌 !伤寒杆
菌 !变形杆菌 !产气杆菌等革兰氏阴性杆菌作用较
弱 o主要为抑制作用 ∀对福氏痢疾杆菌无效 ∀
3 讨论
以上药理实验表明 o马蹄金提取物具有较明显
的镇痛 !抗炎及抗菌作用 o对不同的致痛 o致炎模型
显示了对抗作用 o实验结果与资料所载该药的相关
主治功效相符 ∀同时亦观察到 o其镇痛作用以中剂
量较好 o而抗炎作用以大剂量为优 o但未见明显量效
关系 o值得关注 ∀马蹄金是我省资源丰富的民族民
间药 o中医临床应用广泛且疗效较好 ∀据资料报
道≈t2v o该药既可内服又可外用治疗多种病症 o毒性
较小 ∀植化研究其提取物k正丁醇萃取物部分l的主
要成分为带有支链的五碳糖衍生物 o对之相关作用
正在研究之中 ∀初步分析马蹄金的镇痛抗炎作用 o
可能涉及中枢及外周系统 ∀而对该药有效成分及作
用机制的探讨 o则有待于进一步的深入研究 ∀
≈参考文献
≈t 谢宗万 q全国中草药汇编 q上册 q第 u版 q北京 }人民卫生出版
社 ot||y q{y q
≈u 贵州省中药资源普查办公室 o贵州省中药研究所 q贵州中药资
源 q北京 }中国医药科技出版社 ot||u q{sy q
≈v 雷雨田 q马蹄金 q四川中医 ot|{y okyl }xv q
≈w 李仪奎 q中药药理实验方法学 q上海 }科学技术出版社 ot||t q
vxs q
≈x 陈 奇 q中药药理研究方法学 q北京 }人民卫生出版社 ot||v q
vsx q
≈责任编辑 古云霞
会议征文
药物溶出度专题学术研讨会会议通知为适应现代药物分析事业的发展 o中国药典需要进行溶出度及释放度测定的品种约 t{s个左右 o
ussx年版药典中将增 !修订难溶制剂 tuy个品种 ∀溶出度和释放度试验已经成为药品制剂质量评价 !控制及生产工艺监测的重要方法和手
段 ∀而随着新剂型k缓释 !控释 !透皮贴剂等l的不断增加 o广大药品检测人员需要对该方法进行广泛的总结与交流 o为此药物分析杂志编委会
定于 ussv年三季度在宁波召开全国药物分析溶出度法学术研讨会 ∀会上拟请有关专家就下列问题做专题报告 }t qussx年版药典药品溶出度
新增品种情况介绍 ~u q药物溶出度法在缓释 !控释制剂中的应用 ~v q溶出度适用性实验 ∀会上还将开展有关方面专题讨论 ∀现将会议征文及有
关事宜通知如下 }
一 !征文内容 }药物分析溶出度法应用进展 }药物溶出度法在药物检验中的应用 ~药物溶出度法在缓释 !控释制剂中的应用 ~药物溶出度法
在传统中药制剂 !生化药物制剂及基因工程药物制剂中的应用 ~药物溶出度仪发展近况 ∀
二 !论文撰稿要求 }t q论文应是未公开发表的 ∀综述文章一般不超过 xsss字 ~研究论文一般不超过 vsss字 ~每篇文章需附 {ss字摘要 ∀
投稿时请一并附软盘或发 ∞p °¤¬¯至本刊信箱 ∀u q论文格式请按药物分析杂志 ussv年第一期稿约要求书写 ~稿件应打印在稿纸上 ∀ v q每篇
稿件需附单位介绍信及 xs元稿件处理费 ∀w q征文截止日期 ussv年 |月 vs日k以邮戳为准l ∀ x q论文将在 ussv年药物溶出度专题学术研讨
会上进行交流 o并在药物分析论坛k正式出版物l中发表 o且酌收版面费 ∀
三 !投稿方式及联系人 }t q邮寄 }邮编 tsssxs o地址 }北京天坛西里 u 号中国药品生物制品检定所内药物分析杂志编辑部 ~u q∞ p °¤¬¯}
¼º©¬½½ ³¨µ¬²§¬¦¤¯¶q±¨ ·q¦±o¼º©¬ ±¬¦³¥³q²µªq¦±~v q电话 }kstslyzsx{wuz传真 }kstslyzstu{t|联系人 }刘小帅 ~w q来稿应注明 / 会议征文0字
样 o以便与其他投稿区别 o谢谢合作 d本刊欢迎无论文人员参加会议 o欲参会者可填写参会报名表k见刊内插页l寄至本刊编辑部 ∀
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第 u{卷第 w期
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