全 文 ：川芎嗪对大鼠腹腔巨噬细胞表达 ∂ ∞ƒ
和 ƒ2tΑ的影响
徐晓玉 t3 o叶 兰 u o陈 刚 v o丰俊东 u o陈伟海 u o胡益勇 w
kt1西南大学 药学与中医药学院 o重庆 wssztx~ u1重庆医科大学 药学院 o重庆 wsssty~
v1重庆工商大学 药物化学与化学生物学研究中心 o重庆 wsssyz~
w1西南科技大学 生命科学与工程学院 o四川 绵阳 yutsssl
≈摘要 目的 }探讨川芎嗪对脂多糖 k°≥l诱导的巨噬细胞分泌血管内皮生长因子 k∂ ∞ƒl和表达缺氧诱导
因子 2tΑk ƒ2tΑl的影响 ∀方法 }原代培养大鼠腹腔巨噬细胞 o给予脂多糖 k°≥l刺激并加入不同浓度的川芎嗪共
同培养 ∀ ∞≥方法检测细胞培养液中 ∂ ∞ƒ的含量 o ××法观察巨噬细胞增殖情况 ∀ º ¶¨·¨µ± ¥¯²·检测巨噬细胞
ƒ2tΑ的表达 ∀结果 } w{sow{ Λ°²¯# pt川芎嗪可抑制 °≥诱导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌 ∂ ∞ƒo并抑制巨噬细
胞表达 ƒ2tΑo但对巨噬细胞增殖没有影响 ∀结论 }川芎嗪可抑制大鼠腹腔巨噬细胞分泌血管内皮生长因子 o其机
制与抑制巨噬细胞表达 ƒ2tΑ密切相关 ∀这种作用不依赖于抑制巨噬细胞的增殖 ∀
≈关键词 缺氧诱导因子 ~血管内皮生长因子 ~川芎嗪
≈中图分类号 u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylt|2tys{2sw
≈收稿日期 ussy2st2s|
≈基金项目 国家自然科学基金资助项目 kvsszs|txl
≈通讯作者 3 徐晓玉 oר¯}ksuvly{w{xuzxo∞2°¤¬¯}¬¬¼syt{
¶¬±¤q¦²°
类风湿关节炎 kµ«¨ ∏°¤·²¬§¤µ·«µ¬·¬¶o l是一种
自身免疫性疾病 o滑膜慢性炎症及异常血管生成是
其主要病理特征 ∀血管内皮生长因子 k√¤¶¦∏¯¤µ ±¨2
§²·«¨ ¬¯¤¯ ªµ²º·« ©¤¦·²µo∂ ∞ƒl是强有力的促血管生
成因子 o可促进血管内皮细胞增殖 o提高血管通透
性 o还可激活单核细胞 !促进其迁移 o故 ∂ ∞ƒ在炎
症发展过程中起着重要的促进作用 ≈t ∀单核 2巨噬
细胞是重要的炎性细胞 o同时也是主要的 ∂ ∞ƒ来
源细胞 ≈u ∀在 滑膜中高表达 ∂ ∞ƒ的是巨噬细
胞和成纤维样滑膜细胞 ∀缺氧诱导因子 2tΑk«¼³²¬¬2
¤2¬±§∏¦¨§©¤¦·²µ2tΑo ƒ2tΑl是调节 ∂ ∞ƒ表达的
关键性核转录因子 o炎性刺激及缺氧均可诱导 ƒ2
tΑ表达增加 ≈v ∀川芎嗪 k·¨·µ¤° ·¨«¼¯³¼µ¤½¬± o¨× °l
具有抗炎作用 ≈w ∀作者曾经报道 o川芎嗪能抑制血
管内皮细胞的增殖 ≈x o抑制小鼠 ¨º¬¶肺癌血管生
长和 ∂ ∞ƒ表达 ≈y o抑制 动物模型滑膜血管生
成和表达 ∂ ∞ƒ≈z o还可抑制 ∂ ∞ƒ受体与其放射
性配体的结合 ≈{ ∀但是其抗 作用的深入机制仍
不清楚 ∀本实验旨在探讨川芎嗪对巨噬细胞分泌
∂ ∞ƒ的影响与核转录因子 ƒ2tΑ表达的关系 o以
及其作用机制是否与影响巨噬细胞增殖相关 ∀
1 材料
111 动物
• ¬¶·¤µ大鼠 o雄性 o体重 t{s ∗ uus ªo购自重庆
医科大学实验动物中心 ∀
112 试药
盐酸川芎嗪注射液 k广东南国药业有限公司 o
批号 svs{vtlo°≥k≥¬ª°¤公司 lo地塞米松 k⁄∞÷ o
°µ¨¶¦²公司 lo⁄ ∞培养基 k¼¦¯²± 公¨司 lo胎牛
血清 k杭州四季青生物公司 lo∂ ∞ƒ ∞≥试剂盒
k深圳晶美生物工程公司 lo抗 ∂ ∞ƒ抗体 k≥¤±·¤
≤µ∏½公司 loº ¶¨·¨µ± ¥¯²·显色试剂盒 k博士德生物技
术公司 lo其余试剂为进口分装或市售分析纯 ∀
113 仪器
生物倒置显微镜 k重庆光学仪器厂 lo酶标仪
k׫¨ µ°² ¤¥¶¼¶·¨°¶公司 lo垂直电泳槽及电泳仪
k
¬²2 ¤§公司 lo电泳仪 !电泳槽 k北京六一仪器
厂 lo高速冷冻离心机 k µ¨¤¨ ∏¶公司 l∀
2 方法
211 大鼠腹腔巨噬细胞的分离 !培养
无菌条件下打开大鼠腹腔 ox °⁄2¤±®¶缓冲
液冲洗腹腔 o回收缓冲液 ot sss µ# °¬±pt离心 ts
°¬±o弃上清 o缓冲液洗 u次 o离心 o用含 tsh胎牛血
清的 ⁄ ∞ ktsh ƒ≤≥ ⁄ ∞ l培养液重悬细胞 o用
#{syt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy
于后续的细胞试验 ∀
212 ∞≥ 方法检测大鼠腹腔巨噬细胞分泌
∂ ∞ƒ
21211 分组 调巨噬细胞为 t ≅ tsy个 r°o接种细
胞于 uw孔板 o每孔 t °ovz ε oxh ≤u条件下孵育
u «后 o°
≥洗去未贴壁细胞 ∀ th ƒ≤≥ ⁄ ∞ 培养
uw «o弃上清 o每孔加入 tsh ƒ≤≥ ⁄ ∞培养液 |{s
Λo然后将细胞分为 y组 }正常组 k加培养液 l~ °≥
组 kts Λª# °pt °≥l~⁄∞÷组 kts Λª# °pt °≥
n u1x Λ°²¯ # pt ⁄∞÷ l~× °t组 kts Λª# °pt
°≥ n w{s Λ°²¯ # pt × °l~× °u组 kts Λª#
°pt °≥ n w{ Λ°²¯ # pt × °l~× °v组 kts Λª
# °pt °≥ n w1{ Λ°²¯# pt × °l∀每组每孔溶
液总体积均为 t °∀继续培养 w{ «收集上清 o离
心 o取上清 o p{s ε 保存备用 ∀
21212 ∞≥检测 实验步骤按照 ∂ ∞ƒ ∞≥
试剂盒说明书操作 o酶标仪检测 wxs ±°的吸光度
Α∀
213 ××法检测大鼠腹腔巨噬细胞增殖
21311 分组 调巨噬细胞为 x ≅ tsw个 r°o接种细
胞于 |y孔板 o每孔 uss Λ∀ th ƒ≤≥ ⁄ ∞ 培养
uw «o弃上清 o每孔加入 tsh ƒ≤≥ ⁄ ∞培养液 t|s
Λo然后将细胞分为 x组 } °≥组 kts Λª# °pt
°≥l~⁄∞÷组 kts Λª# °pt °≥ n u1x Λ°²¯# pt
⁄∞÷ l~× °t组 kts Λª# °pt °≥ n w{s Λ°²¯ #
pt × °l~× °u组 kts Λª# °pt °≥ n w{ Λ°²¯
# pt × °l~× °v组 kts Λª# °pt °≥ n w1{
Λ°²¯# pt × °l∀每组每孔的溶液总体积均为 uss
Λo继续培养 w{ «∀
21312 ××检测 弃培养液 o每孔换为无血清的
⁄ ∞培养液 uss Λo再加入 x °ª# °pt ×× us
Λo继续培养 w «∀弃培养液 o每孔加入 tss Λ⁄ 2
≥o振荡 ts °¬±∀ x|s ±°酶标仪读数 o以空白组吸
光度 Αx|s调零 o得到各孔吸光度值 ∀
214 • ¶¨·¨µ±
²¯·法检测大鼠腹腔巨噬细胞表达
ƒ2tΑ
21411 分组 细胞试验方法同上 o根据 ∞≥试
验结果将细胞分为 v组 } °≥组 kts Λª# °pt
°≥l~× °t组 kts Λª# °pt °≥ n w{s Λ°²¯ #
pt × °l~× °u组 kts Λª# °pt °≥ n w{ Λ°²¯
# pt × °l∀
21412 • ¶¨·¨µ±
²¯·检测 °缓冲液溶解细胞
kxs °°²¯ # 2t ×µ¬¶2≤ o¯³ z1yloth °2wsos1xh
去氧胆酸钠 os1th ≥⁄≥ot °°²¯ # pt ° ≥ƒout Λª
# °pt ³µ²·¬±¬±os1x Λª# °pt ¨∏³¨ ³·¬±low ε o
tx sss µ# °¬±pt离心 tx °¬±o取上清 o²ºµ¼法检测
蛋白浓度 ∀加入等体积 u ≅ ≥⁄≥加样缓冲液 ktux
°°²¯# pt ×µ¬¶2≤ o¯ush 甘油 os1sth 溴酚蓝 owh
≥⁄≥ouss °°²¯# pt ⁄××lo沸水浴中加热 x °¬±o行
≥⁄≥2聚丙烯酰胺凝胶电泳 o转膜 k°∂ ⁄ƒ膜 lo含 xh
脱脂奶粉的 ×
≥×缓冲液封闭 o抗 ∂ ∞ƒ抗体 oµ抗
分别与膜孵育 o显色 o分析条带吸光值 ∀
215 统计学分析
资料数据分析以 cξ ? σ表示 o进行单因素方差分
析 o以 Π s1sx表示有显著性差异 o以上数据资料
分析均由统计软件包 ≥°≥≥ts1s完成 ∀
3 结果
311 × °对大鼠腹腔巨噬细胞分泌 ∂ ∞ƒ的影响
正常状态下 o大鼠腹腔巨噬细胞分泌的 ∂ ∞ƒ
很低 ∀在加入 °≥刺激后 o巨噬细胞分泌 ∂ ∞ƒ显
著增加 kΠ s1stl∀同时加入 ⁄∞÷或 w{sow{ Λ°²¯
# pt的 × °o巨噬细胞分泌的 ∂ ∞ƒ均显著减少
kΠ s1sx或者 Π s1stl∀而 w1{ Λ°²¯ # pt的
× °作用于巨噬细胞后 o∂ ∞ƒ分泌量与仅仅受到
°≥刺激后的分泌量相比 o没有显著性差异 k表 tl∀
表 t × °对大鼠腹腔巨噬细胞分泌 ∂ ∞ƒ
的影响 kcξ ? σ, ν yl
组别 剂量 rΛ°²¯# pt ∂ ∞ƒ r ³ª# °pt
正常 p vxs ? zx
°≥ p t {|x ? tsxtl
⁄∞÷ uqx z{z ? |zvl
× ° w{s t tuv ? ts{ul
w{ t uzu ? ttsul
wq{ t {xs ? ttz
注 }与正常组比较 tl Π sqst~与 °≥组比较 ul Π sqsxo
vl Π sqst
312 × °对大鼠腹腔巨噬细胞增殖的影响
××检测结果显示 o⁄∞÷与各个剂量组的 × °
的吸光度与 °≥组比较 o差异没有显著性意义 k表
ul∀
313 × °对大鼠腹腔巨噬细胞表达 ƒ2tΑ的影
响
• ¶¨·¨µ±
²¯·检测发现 o经过 kw{sow{ Λ°²¯ #
pt l× °作用后 o受 °≥刺激的巨噬细胞表达 ƒ2
t与 °≥组比较明显减少 o差异有显著性意义 kΠ
s1sxlk表 v!图 tl∀
#|syt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy
表 u × °对大鼠腹腔巨噬细胞增殖的影响 kcξ ? σ, ν wl
组别 剂量 rΛ°²¯# pt Α
°≥ p sqy| ? sqtw
⁄∞÷ uqx sqyy ? sqs|
× ° w{s sqyy ? sqtu
w{ sqy{ ? sqs|
wq{ sqyz ? sqtu
表 v × °对 °≥刺激后巨噬细胞表达 ƒ2tΑ
的影响 kcξ ? σ, ν vl
组别 剂量 r Λ°²¯# pt Α
°≥ uqx sqy| ? sqtx
× ° w{s sqws ? sqtttl
w{ sqw| ? sqtztl
注 }与 °≥组比较 tl Π sqsx
图 t × °对 °≥刺激的大鼠腹腔巨噬
细胞表达 ƒ2tΑ的影响
4 讨论
以血管生成作为靶点成为近年类风湿关节炎治
疗研究的的热点 ∀抑制 ∂ ∞ƒ的生物效应 o可抑制
动物模型滑膜血管生成 o延缓关节炎的发展 ≈| ∀
单核 2巨噬细胞 !中性粒细胞 !滑膜成纤维样细胞是
滑膜组织和血清中 ∂ ∞ƒ的主要来源细胞 ∀本
实验首次报道川芎嗪可以抑制巨噬细胞分泌
∂ ∞ƒo并且呈现一定的剂量依赖性 ∀而实验用 v个
剂量的川芎嗪对巨噬细胞增殖均无显著影响 o表明
这种抑制作用并非通过抑制巨噬细胞增殖而产生 ∀
从调节表达 ƒ2tΑ的途径探讨了川芎嗪抑制
巨噬细胞分泌 ∂ ∞ƒ的机制 ∀ ƒ2t是缺氧条件下
广泛存在于哺乳动物与人体内的一类转录因子 o通
过对缺氧诱导基因 o如 ∂ ∞ƒ表达的调控 o在维持机
体对缺氧的适应能力中发挥重要作用 ∀ ƒ2¯是一
个由 Α和 Β亚基组成的异源二聚体 ∀ ƒ2tΑ是具
有转录活性的亚基 o正常氧分压状态下细胞内 ƒ2
tΑ经泛素 2蛋白酶途径不断发生水解 o故表达量很
低 ≈ts ∀受缺氧或炎症诱导后 o细胞内的 ƒ2tΑ稳
定表达量显著增高 ∀受到炎症信号 °≥刺激后 o巨
噬细胞表达 ƒ2tΑ明显增高 o本实验发现 o川芎
嗪可以抑制 °≥诱导的巨噬细胞表达 ƒ2tΑ∀这
一结果提示 o× °抑制 °≥诱导的巨噬细胞分泌
∂ ∞ƒ的机制 o很可能是通过抑制调控 ∂ ∞ƒ基因
的关键转录因子 ƒ2tΑ的表达而实现 ∀
ƒ2t对 ∂ ∞ƒ基因表达的调控是一个复杂的
过程 o涉及到 Α与 Β亚基的解离 !ƒ2tΑ从胞质向
胞核的转位 !ƒ2tΑ与 ∂ ∞ƒ基因启动子的特异序
列结合等步骤 ∀本实验还仅仅证实 × °可以通过
抑制 ƒ2tΑ的表达从而抑制 ∂ ∞ƒ的产生 o× °
是否对 ƒ2tΑ调控的 ∂ ∞ƒ基因表达的复杂过程
有作用 o仍有待于进一步研究 ∀
≈参考文献
≈t • ¤¯¶«⁄ o ¤¼º²²§q ±ª¬²ª¨ ± ¶¨¬¶}¤·«¨ µ¤³¨ ∏·¬¦·¤µª¨·¬± ¤µ2
·«µ¬·¬¶≈ q ≤∏µµ³¬± ±√ ¶¨·¬ª⁄µ∏ªo usstouk{l}tsxwq
≈u ®¨ §¤ o ²¶²§¶≠ o ¬°¶¨ ≥q ∞¬³µ¨¶¶¬²± ²©√¤¶¦∏¯¤µ¨ ±§²·«¨ ¬¯¤¯
ªµ²º·« ©¤¦·²µ¬¶²©²µ°¶¤±§·«¨ ¬µµ¨¦¨³·²µ¶©¯·2to ⁄ o ¤±§ ± ∏¨2
µ²³«¬¯¬±2t ¬± ¶¼±²√¬¤¯ ·¬¶¶∏¨ ¶ ²© µ«¨ ∏°¤·²¬§ ¤µ·«µ¬·¬¶≈ q
°¤·«²¯o usssot|tkwl}wuyq
≈v ¬·¦«²± ≤o • ²±ªo ¨¨ §o ·¨¤¯q ¼³²¬¬¤2¬±§∏¦¨§³µ²§∏¦·¬²±
²©¶·µ²°¤¯ ¦¨¯¯ §¨ µ¬√ §¨ ©¤¦·²µk≤÷ ≤tul¤±§ √¤¶¦∏¯¤µ ±¨§²·«¨ ¬¯¤¯
ªµ²º·«©¤¦·²µ¥¼ ¶¼±²√¬¤¯ ©¬¥µ²¥¯¤¶·¶≈ q µ·«µ¬·¬¶ «¨ ∏°o ussuo
wyktsl}ux{zq
≈w 范治云 o刘玉兰 q合成川芎嗪的抗炎作用 ≈ q沈阳药科大
学学报 o usssotzkwl}u{|q
≈x 徐晓玉 o杨丽蓉 o陈 刚 q川芎嗪对人脐静脉内皮细胞系
∞≤∂ vsw增殖的影响 ≈ q中草药 o usswovxktsl}ttxsq
≈y 徐晓玉 o严鹏科 o陈 刚 o等 q川芎嗪对小鼠 ¨º¬¶肺癌血管
生长和 ∂ ∞ƒ表达的抑制 ≈ q中国药理学通报 o usswous
kul}txtq
≈z 陈 刚 o徐晓玉 o丰俊东 o等 q川芎嗪抑制 µ型胶原诱发关
节炎大鼠滑膜损伤作用机制的研究 ≈ q北京中医药大学学
报 o ussxou{kvl}wxq
≈{ 丰俊东 o徐晓玉 o胡益勇 o等 q川芎嗪含药血清对 ∂ ∞ƒ受体
与其放射性配体结合的抑制 ≈ q中国药理学通报 o ussxout
k{l}|v|q
≈| ≥²±¨ o ¤º¤®¤°¬≠ o ≥¤®¤∏¦«¬ o ·¨¤¯q ¨ ∏·µ¤¯¬½¤·¬²± ²©√¤¶2
¦∏¯¤µ ±¨§²·«¨ ¬¯¤¯ ªµ²º·«©¤¦·²µ³µ¨√ ±¨·¶¦²¯ ¤¯ª¨ ±2¬±§∏¦¨§¤µ·«µ¬·¬¶
¤±§¤°¨¯¬²µ¤·¨¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ § §¬¶¨¤¶¨ ¬± °¬¦¨ ≈ q
¬²¦«¨ °
¬²2
³«¼¶ ¶¨≤²°°∏±o usstou{tkul}xyuq
≈ts ∏¤¶o °²¨ ¯¯¬±ª¨ µq ¼³²¬¬¤2§¨ ³¨ ±§¨ ±·¤¦·¬√¤·¬²± ²©ƒ ¬±·²
¤·µ¤±¶¦µ¬³·¬²±¤¯ µ¨ª∏¯¤·²µ≈ q ≥ °¨¬± ≤¨¯¯⁄ √¨
¬²o ussxotykw2
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#styt#
第 vt卷第 t|期
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy
Εφφεχτσ οφ τετραµ ετηψλπψραζινε ον εξπρεσσιον οφ ϖασχυλαρ ενδοτηελιαλγροωτη
φαχτορ ανδ ηψποξια2ινδυχεδ φαχτορ2tΑ βψ ρατ περιτονεαλµ αχροπηαγεσ
÷ ÷¬¤²2¼∏t o ≠ ∞ ¤±u o ≤∞¤±ªv o ƒ∞ ∏±2§²±ªu o ≤∞ • ¬¨2«¤¬u o ≠¬2¼²±ªw
(t1 Χολλεγε οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινε ανδ Πηαρµ αχψ, Σουτηωεστ Υνιϖερσιτψ, Χηονγθινγ wssztx, Χηινα;
u1 ∆επαρτµ εντ οφ Πηαρµ αχψ, Χηονγθινγ ΜεδιχαλΥνιϖερσιτψ, Χηονγθινγ wsssty, Χηινα;
v1 Ρεσεαρχη Χεντεροφ Πηαρµ αχευτιχαλΧηεµ ιστρψ & Χηεµ οβιολογψ, Χηονγθινγ Τεχηνολογψ
ανδ ΒυσινεσσΥνιϖερσιτψ, Χηονγθινγ wsssyz, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ·«¨ ©¨©¨¦·¶²©·¨·µ¤° ·¨«¼¯ ³¼µ¤½¬±¨ ²± ¬¯³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¶k°≥l2¬±§∏¦¨§ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©
√¤¶¦∏¯¤µ ±¨§²·«¨ ¬¯¤¯ ªµ²º·«©¤¦·²µk∂ ∞ƒl ¤±§«¼³²¬¬¤2¬±§∏¦¨§©¤¦·²µ2tΑ k ƒ2tΑl ¬± °¤¦µ²³«¤ª¨ ¶1Μετηοδ : ¤·³¨ µ¬·²± ¤¨¯ °¤¦µ²2
³«¤ª¨ ¶º µ¨¨ ·µ¨¤·¨§º¬·«°≥o ¤±§¤··«¨ ¶¤°¨·¬°¨ª¬√ ±¨ §¬©©¨µ¨±·§²¶¨¶²©·¨·µ¤° ·¨«¼¯ ³¼µ¤½¬± 1¨×«¨ ¶¨¦µ¨¤·¬²± ²©∂ ∞ƒ º¤¶§¨ ·¨µ2
°¬± §¨¥¼ ∞≥ ·¨¶·o ¤±§ ×× ¤¶¶¤¼ º¤¶∏¶¨§·² ¬¨¤°¬±¨¦¨¯¯¶³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±1• ¶¨·¨µ± ¥¯²·¤¶¶¤¼ º¤¶∏¶¨§·² ¬¨¤°¬±¨·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©
ƒ2tΑ1Ρ εσυλτ: tss Λª# °pt ¤±§ts Λª# °pt ·¨·µ¤° ·¨«¼¯ ³¼µ¤½¬±¨§¨ ¦µ¨¤¶¨§·«¨ ¶¨¦µ¨·¬²± ²©∂ ∞ƒ ¤±§¤¯¶²¬±«¬¥¬·¨§·«¨ ¬¨³µ¨¶2
¶¬²± ²©ƒ2tΑ ¥¼ °≥2¬±§∏¦¨§°¤¦µ²³«¤ª¨ ¶1
∏··«¨ ¶¨ §²¶¨¶²©·¨·µ¤° ·¨«¼¯ ³¼µ¤½¬±¨«¤§±² ©¨©¨¦·²± ·«¨ ¦¨¯¯¶³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±1 Χονχλυ2
σιον: × ·¨µ¤° ·¨«¼¯ ³¼µ¤½¬±¨¦²∏¯§¬±«¬¥¬··«¨ ¶¨¦µ¨·¬²± ²©∂ ∞ƒ ¥¼ °≥2¬±§∏¦¨§°¤¦µ²³«¤ª¨ ¶o ¤±§·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° °∏¶·¥¨ ¤¶¶²¦¬¤·¨§
º¬·«¬±«¬¥¬·¬±ª·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©ƒ2tΑ1׫¨ ¬±«¬¥¬·¬²± ©¨©¨¦·º¤¶±²·§∏¨ ·²¬±«¬¥¬·¬²± ²©·«¨ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ²©°¤¦µ²³«¤ª¨ ¶1
[ Κεψ ωορδσ] «¼³²¬¬¤2¬±§∏¦¨§©¤¦·²µ~ √¤¶¦∏¯¤µ ±¨§²·«¨ ¬¯¤¯ ªµ²º·«©¤¦·²µ~ ·¨·µ¤° ·¨«¼¯ ³¼µ¤½¬±¨
≈责任编辑 刘
氧化槐定碱对大鼠皮层及海马谷氨酸及
Χ2氨基丁酸免疫阳性细胞的影响
余建强 o蒋袁絮 3
k宁夏医学院 基础学院 o宁夏 银川 zxssswl
≈摘要 目的 }探讨氧化槐定碱 k²¬¼¶²³«²µ¬§¬± o¨ ≥ l对大鼠皮层和海马谷氨酸 k ∏¯l和 Χ2氨基丁酸 k
l
免疫阳性神经细胞的影响 ∀方法 }采用免疫组织化学方法 k≥
≤l和显微图像分析技术 o检测 ≥ 对大鼠皮层 !海
马谷氨酸和 Χ2氨基丁酸免疫阳性神经细胞的变化 ∀结果 }侧脑室注射氧化槐定碱 ts °ªo大鼠皮层 !海马
免
疫阳性神经细胞数明显增加 o ∏¯免疫反应阳性细胞数显著下降 kΠ s1sxl∀结论 }≥ 引起中枢神经系统 ∏¯及
的平衡变化可能是导致中枢抑制作用机制之一 ∀
≈关键词 氧化槐定碱 ~谷氨酸 ~Χ2氨基丁酸 ~中枢神经系统 ~大鼠
≈中图分类号 u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylt|2tytt2sw
≈收稿日期 ussy2st2sy
≈基金项目 宁夏回族自治区自然科学基金项目资助项目
k≤tsvl ~宁夏回族自治区教育厅科研项目 kussx2txvl
≈通讯作者 3 蒋袁絮 o ר¯} ks|xtl wszysyvo ∞2°¤¬¯} ¬¤±2
ª¼∏¤±¬∏vv «²·°¤¬¯1¦²°
氧化槐定碱是从豆科植物苦豆子 Σοπηορα αλοπε2
χυροιδλεσ1中提得的主要生物碱之一 ≈t ∀有关氧化
槐定碱 k≥ l药理作用的研究显示其具有抗心律失
常 !保护心肌 !抗病毒等作用 ≈u2w ∀以往的研究表明 o
≥具有明显的中枢抑制作用 ≈x o但其作用机制尚不
清楚 ∀本实验应用免疫组织化学方法 k≥
≤l和显微
#ttyt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy