全 文 ：Ρεσεαρχη ον τηε Ιδεντιφιχατιον
οφ Πενισετ Τεστισ Χερϖι ωιτη Μολεχυλαρ Ταξονοµ ψ
× ≥«∏¤±ª2¼¤±t oƒ • ±¨t o ≤ ∞ ≠²±ª2¬∏u o • ¬¤±2¼∏±t o
÷∏t o ≠¤2³¬±ªu
kt q ≠∏±±¤± °µ²√¬±¦¬¤¯ ±¶·¬·∏·¨ ©²µ⁄µ∏ª ≤²±·µ²¯ o∏±°¬±ªyxsstt o≠∏±±¤± o≤«¬±¤~
u q¤¥²µ¤·²µ¼ ²© ≤¨¯ ∏¯¯¤µ¤±§ ²¯ ¦¨∏¯¤µ∞√²¯∏·¬²± o∏±°¬±ª±¶·¬·∏·¨ ²© ²²¯²ª¼ o≤«¬±¨ ¶¨ ¦¤§¨ °¼ ²© ≥¦¬¨±¦¨¶o
∏±°¬±ªyxsuuv o≠∏±±¤± o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ °¤®¨ ·«¨ ®¬·º¬·« º¬·¦«·²¬§¨ ±·¬©¼ ° ±¨¬¶ ·¨× ¶¨·¬¶≤ µ¨√¬º¬·« °²¯ ¦¨∏¯¤µ·¤¬²±²°¼ q Μετηοδ : × «¨
°·⁄ ²©¶¬®¤¤±§µ¨§§¨ µ¨©µ²° §¬©©¨ µ¨±·¤µ¨¤¶ º¤¶¤°³¯¬©¬¨§¥¼ °≤ ¤±§¶¨ ∏´¨ ±¦¨§q ≤²°³¤µ¨§ º¬·«·«¨ °·⁄ ²© ¥²√¬±¨ ¤±§
«²µ¶¨ ©µ²° º¬·¦«·«¨ ©¤¯¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¶º µ¨¨ °¤§¨ o¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶¨ª° ±¨·¶²©§¨ µ¨º µ¨¨ ©²∏±§q • ¨¶¨¯¨ ¦·¨§²±¨ ¤¶·«¨ ¶³¨ ¦¬¨¶§¬¶·¬±¦·¬√¨
°≤ ³µ¬° µ¨²©§¨ µ¨qΡεσυλτ : × «¨ ®¬·°¤§¨ ∏³ º¬·«·«¬¶³µ¬° µ¨¤±§µ¨ ¤¯·¨§µ¨¤ª¨ ±·¶¦²∏¯§¥¨ ∏¶¨§·²§¬¶¦¨µ± ° ±¨¬¶ ·¨× ¶¨·¬¶≤ µ¨√¬©µ²°
·«¨ ©¤¯¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ qΧονχλυσιον : ·¬¶¤¶¦¬¨±·¬©¬¦o¶·¨¤§¼ o¤¦¦∏µ¤·¨ ¤±§¦²±√ ±¨¬¨±·º¤¼·²¬§¨ ±·¬©¼ ° ±¨¬¶ ·¨× ¶¨·¬¶≤ µ¨√¬º¬·« °²¯ ¦¨∏¯¤µ
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[ Κεψ ωορδσ] ° ±¨¬¶ ·¨× ¶¨·¬¶≤ µ¨√¬~ °²¯ ¦¨∏¯¤µ·¤¬²±²°¼ ~ °·⁄ ~·«¨ ¶³¨ ¦¬¨¶§¬¶·¬±¦·¬√¨°≤ ³µ¬° µ¨~°≤
≈责任编辑 袁桂京
黄芩清除自由基活性与黄芩苷含量的相关性研究
刘玉萍t o°∏µ∏¶²·¤°
¤¶±¨ ·u o小松 + ∆子u o曹 晖t
kt q中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszss ~
u q富山医科药科大学 和汉药研究所 o日本 富山 |vs2st|wl
≈摘要 目的 }开发简便 !可靠的评价黄芩品质新方法 ∀方法 }测定清除 ⁄°° 自由基活性 o并以 °≤ 法测
定黄芩苷 !黄芩素 !汉黄芩苷和汉黄芩素的含量 ∀结果 }黄芩提取物的清除 ⁄°° 自由基活性与黄芩苷含量呈相关
关系 ∀结论 }测定清除 ⁄°° 自由基活性可以作为评价黄芩品质的有效方法之一 ∀
≈关键词 黄芩 ~品质评价 ~⁄°° 自由基 ~清除 ⁄°° 自由基活性
≈中图分类号 u{x qx ~ u{y qs ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussuls{2sxzx2sy
黄芩为唇形科植物黄芩 Σχυτελλαρια βαιχαλενσισ
²¨µª¬q的干燥根 ∀性寒味苦 o主要用于肺热咳嗽 !
黄疸 !泻 痢 !痈 肿 疮 毒 等 疾 病 ∀ 含 有 黄 芩 苷
k¥¤¬¦¤¯¬±l o黄芩素k¥¤¬¦¤¯ ¬¨±l o汉黄芩苷kº²ª²±¬±2z2
Ο2ª¯∏¦∏µ²±¬§¨l o汉黄芩素kº²ª²±¬±l等黄酮类成分 ∀
≈收稿日期 ussu2sw2vs
≈通讯作者 电话 }kstslywstwwtt2u|xu
药理学研究证明其有抑制炎症≈t ∗ v o抗菌≈w o抗过
敏≈x ∗ z o改善脂质代谢≈{ ∗ tu o抑制血栓形成≈tv o抑
制流感病毒 o
≈tw o抑制 ∞
病毒活化≈tx o抗致癌
促进作用≈ty o抗过氧化≈tz ot{ o抑制 tuts细胞毒≈t|
等作用 ∀鉴于自由基与多种常见疾病有关 o尤其是
在炎症反应中 o巨噬细胞呼吸爆发释放大量氧自由
基 o而自由基在杀伤细菌等入侵者的同时对正常机
体组织也会产生损伤 o笔者认为测定黄芩抗自由基
活性可从另一个侧面评价黄芩品质 ∀以往多以黄芩
#xzx#
第 uz卷第 {期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²q{
∏ªqoussu
苷等黄酮类成分含量高低评价黄芩品质 o测定方法
很多 o如 }薄 层 扫 描 法≈us o高 效 液 相 色 谱 法
k°≤l≈ut o离子对 °≤ 法≈uu o °2°≤ 法≈uv
等 o5中国药典6≈uw 采用高效液相色谱法测定黄芩中
黄芩苷的含量以评价其品质 o但是程序繁杂 ∀本实
验证明黄芩清除 ⁄°° 自由基活性与其黄芩苷含
量成线性关系 o测定方法稳定可靠 o操作简单 o可作
为评价黄芩品质的补充手段 ∀
1 材料
1 q1 材料 tu个黄芩样品如表 t所示 ∀笔者参照
文献≈ux 并进行鉴定 o除 t个样品来源于滇黄芩 Σ .
αµοενα ≤ q q• µ¬ª«·外 o其余均来源于黄芩 Σ .
βαιχαλενσισ∀凭证标本保存于富山医科药科大学和
汉药研究所民族药物资料馆 ∀
表 t 实验材料
样品号 × ° • ²qtl 生药名 产地 习性 基原ul 收集日期
≥÷ q• t{v|v 黄芩 山西省侯马地区 野生 Σ . βαιχαλενσισ t||{2tu2st
q• t t{v|x 黄芩 内蒙古霍林郭勒 野生 Σ . βαιχαλενσισ t||{2tu2st
q• u t|tv| 黄芩 内蒙古包头市 野生 Σ . βαιχαλενσισ t|||2sy2st
q• v t{us| 黄芩 内蒙古 野生 Σ . βαιχαλενσισ t||{2s|2ux
q• w t{xsv 黄芩 内蒙古 野生 Σ . βαιχαλενσισ t||{2sy2t{
q• t t{w|x 黄芩k尖l 河北省阜平 野生 Σ . βαιχαλενσισ t||{2sy2sv
q• u t{v|u 黄芩 河北省承德地区 野生 Σ . βαιχαλενσισ t||{2tu2st
≥⁄q• t|tv{ 黄芩 山东省烟台市 野生 Σ . βαιχαλενσισ t|||2sy2st
q≤t t{v|y 黄芩 河北省安国市 栽培 Σ . βαιχαλενσισ t||{2tu2st
q≤u t{xsw 黄芩 河北省邢台市 栽培 Σ . βαιχαλενσισ t||{2sy2t{
≥⁄q≤ t{v|w 黄芩 山东省 县 栽培 Σ . βαιχαλενσισ t||{2tu2st
≠ q• t|zux 黄芩 云南省蒙自县 野生 Σ . αµ οενα t|||2s{2sw
注 }tl× ° • ²q为富山医科药科大学和汉药研究所民族药物资料馆药材标本编号 ul系作者鉴定
1 q2 标准品 黄芩苷 !黄芩素和汉黄芩素购自日本
和光纯药工业株式会社k大阪l ∀汉黄芩苷由日本北
陆大学药学部富森毅教授提供 ∀
1 q3 试剂 磷酸k特级试剂l o醋酸k精密分析用l o
甲醇k高压液相用l o四氢呋喃k高压液相用l o二 烷
k高压液相用l o蒸馏水k高压液相用l o咖啡因酸
k¦¤©©¨¬¦¤¦¬§l o维生素 ∞o维生素 ≤ 购自和光纯药工
业株式会社 ot ot2§¬³«¨ ±¼¯2u2³¬¦µ¼¯ «¼§µ¤½¼¯ k⁄°°l
购自日本东京化成工业株式会社k东京l ∀
1 q4 仪器 紫外光谱仪 } ·¯µ²¶³¨¦wsss型紫外2可
见分光光度计k英国 °«¤µ°¤¦¬¤
¬²·¨¦«公司l ∀岛津
高效液相色谱仪 }≥2ts÷自动进样器 o≥≤2ts
系统控制器 o≤2ts≥ 二元梯度泵 o≥°⁄2ts 紫外2
可见检测器 o≤ × 2ts≤ 柱温箱 o2 y 色谱数据处
理机 ∀
1 q5 色谱条件 参照文献≈ut o并略有改动 ∀±2
·¨µ¶¬¯ ⁄≥2w oy °° ≅ uxs °° 色谱柱k日本 ≥¦¬2
±¨¦¨¶公司l ~柱温 xs ε ~检测波长 uzw ±° ~流速 t
°# °¬±p t ~流动相四氢呋喃 2二 烷2甲醇2醋酸2
x h磷酸2水ktwxΒtuxΒxsΒusΒuΒyx{l ~灵敏度 s qsw
ƒ≥ ~纸速 v °°#°¬±p t ∀
2 方法
2 q1 提取 各样品分别称取 xs ªo用 xss °水和
vxs °水分别回流 v «和 u «∀提取液过滤后 o冷
冻干燥 o得提取物干燥粉末 ∀各样品得率如表 u 所
示 ∀
表 u 样品水提物得率 h
样品号 水提物得率 样品号 水提物得率
≥÷ q• ux qx q• u vt qt
q• t v| qz ≥⁄q• vx q|
q• u vz qv q≤t v| qx
q• v u{ qz q≤u w{ q|
q• w wt qt ≥⁄q≤ v{ q{
q• t v| qx ≠ q• v| qv
2 q2 清除自由基活性的测定方法 测定方法参考
文献≈uy ∀精密称取样品水提物冷冻干燥粉末 t
°ªo加水至 t °溶解 ∀然后取一定量稀释至所需
浓度ku ots ous Λ#°p tl备用 ∀配制 y ≅ tsp x °²¯#
pt ⁄°° 乙醇溶液备用 ∀取 xss Λ样品溶液置
于微量管中 o加入 y ≅ tsp x °²¯ #pt ⁄°° 乙醇溶
液 xss Λo混匀并于室温下放置 vs °¬±o于 xus ±°
波长处测定紫外吸收度 o同样的条件下 o以水代替样
#yzx#
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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品作为空白对照 ∀每个样品测定 w次 o取其平均值 ∀
计算样品对 ⁄°° 自由基的抑制率k h l作为清除
自由基活性的指标 ∀同法测定 w种标准品及咖啡因
酸 o维生素 ≤ 和维生素 ∞对 ⁄°° 自由基的清除活
性 ∀
2 q3 标准曲线的制备 精密称取 w 种黄酮成分各
t °ªo分别置于 vs °容量瓶中 o用甲醇溶解至刻
度 o分别取 u ow oy o{ ots Λ进样 o每个样品各进 v
次 o测得吸收峰面积 o并取平均值 ∀以峰面积为纵坐
标 o进样体积为横坐标绘制标准曲线 o并计算线性回
归方程及相关系数 ∀其线性回归方程分别为 }
黄芩苷 Ψ v .vxz Ξ n s .tx{ , ρ s .||w ;
黄芩素 Ψ y .x|s Ξ n s .s{w , ρ s .||s ;
汉黄芩苷 Ψ w .{tt Ξ p s .{u| , ρ s .||| ;
汉黄芩素 Ψ z .u|y Ξ n s .t{t , ρ s q||y ∀
2 q4 重现性试验 将 w个对照品分别进样 ts Λo
各进样 v次 o其变异系数分别为 }黄芩苷 u qvw h ~黄
芩素 u qwv h ~汉黄芩苷 t qws h ~汉黄芩素 u qzt h ∀
2 q5 定量 精密称取黄芩水提物冷冻干燥粉末 t
°ªo定容为 t °o作为试液 ∀每个样品测定 v 次 o
并求其平均值 ∀用相对保留时间法鉴定各峰 o测定
吸收峰面积 o并根据标准曲线进行含量计算 ∀
3 结果与讨论
3 q1 应用 °≤ 对各样品的水提取物中黄芩苷 o
黄芩素 o汉黄芩苷 o汉黄芩素 w种主要黄酮成分的含
量进行了分析k表 vl o并与各样品的清除 ⁄°° 自
由基活性k表 wl对照比较 o两者成相关关系k图 tl ∀
3 q2 分析了黄芩苷 !黄芩素 !汉黄芩苷和汉黄芩素
的清除 ⁄°° 自由基活性 ∀黄芩苷和黄芩素有强
的活性 o而汉黄芩苷和汉黄芩素未见活性k图 ul ∀
3 q3 虽然黄芩素也有清除 ⁄°° 自由基活性 o但
其含量与黄芩苷相比几乎可以忽略 o测定清除
⁄°° 自由基活性又远比测定黄芩苷含量要操作简
单 o因此今后可考虑将测定清除 ⁄°° 自由基活性
作为控制黄芩品质的手段之一 ∀
3 q4 黄芩清除 ⁄°° 自由基活性与黄酮环上取代
基 t 有关 ∀ t 为羟基时具有活性 o为 时无活性
k图 vl ∀
表 v 黄芩水提物中黄芩苷 !黄芩素 !
汉黄芩苷和汉黄芩素的含量 h
样品号 黄芩苷 黄芩素 汉黄芩苷 汉黄芩素
≥÷ q• vz qyt u qux tt qyu s qu|
q• t vw q{v t qvx tt qtt p
q• u ux qs{ s quv { q|y p
q• v vs q{| s q{w ts qw| p
q• w vv qw| t qtx | qwx s qt{
q• t vy qxz t qyv ts q|| s qu{
q• u uz q|y t quv ts qu| s quy
≥⁄q• wx q|v t qyz tw quu s qvt
q≤t us qws t qsw y qxy p
q≤u vs qsx t qt{ ts qsu s quz
≥⁄q≤ vs qx| t qwx | q|w s qvs
≠ q• vt q{w t qxs tu qvz p
注 }/ p 0表示未测出
表 w 黄芩水提物清除 ⁄°° 自由基的活性
样品号
⁄°° 自由基抑制率r h
t Λª#°p t x Λª#°p t ts Λª#°p t
≥÷ q• w qxs wv qvv z| qv|
q• t s qxt vw qv{ yx qus
q• u s ts qs{ ws qs{
q• v y qss ux qtz xu qvy
q• w z q|w vw qut yx q{{
q• t z qys vx qyw zv qxz
q• u w qyx uw qzz xw qw{
≥⁄q• s vw qwt {v qsz
q≤t u qus us qty wy qzv
q≤u { qsv vt qzy xu qvz
≥⁄q≤ z qvx t| qzt xw qxt
≠ q• s tz qts xt qvz
维生素 ≤ uy qy| {| qt| tss
咖啡因酸 vt q{w |y qvz |z qsx
维生素 ∞ tv qt{ {u qxu {x qxy
黄芩苷 ty qyz zw q{{ {| qsw
黄芩素 vv qvv zx q{y {v qvv
汉黄芩苷 t qvu v q|w w qv|
汉黄芩素 s w qwv z qwy
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图 t 黄芩的 ⁄°° 自由基抑制率与黄芩苷含量的相关图
图 u 黄芩主要黄酮成分的 ⁄°° 自由基抑制率
qts Λª#°p t
qx Λª#°p t ≤ qt Λª#°p t
图 v 高效液相色谱图及相关成分的结构式
t q黄芩苷 t o u ¯ ∏q o v
u q汉黄芩苷 t o u ¯ ∏q o v ¨
v q黄芩素 t o u o v
w q汉黄芩素 t o u o v ¨
k¯ ∏q ¯ ∏¦∏µ²±¬¦¤¦¬§l
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≈致谢 日本北陆大学药学部富森毅教授提供汉黄芩
苷标准品 ∀
≈参考文献
≈t 平井裕子 o高濑英树 o古林浩子 o等 q肥满细胞 + ι Ν | ¢
¶游离抑制作用 ρ 指标 Η 7 ? 抗炎症生药 Ν | r 2¶ s q
生 学 ot|{v ovzkwl }vzw q
≈u ∏¥²o ¤·¶∏§¤o פ±¤®¤o¨ ·¤¯ q≥·∏§¬¨¶²± ≥¦∏·¨¯ ¤¯µ¬¤¨
¤§¬¬k ∂l ±·¬2¤µ·«µ¬·¬¦¤±§ ±·¬2¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ¦·¬²±¶²©
·¨«¤±²¯¬¦∞¬·µ¤¦·¤±§ ƒ¯ ¤√²±²¬§ ≤²°³²±¨ ±·¶©µ²° ≥¦∏·¨¯ ¤¯µ¬¤¨
¤§¬¬q≤«¨ ° °«¤µ°
∏¯¯ot|{w ovukzl }uzuw q
≈v 山原条二 o山田敏雄 o中西裕子 o他 q生药 Ν ρ2ª¯²¥∏¯¬±Κ对
9 κ 热 ∗ η Σ ≤∏uk Κ η κ 变性抑制效果 q生 学 ot|{t o
vxkul }tsv q
≈w ∏¥²o≠ ¬°∏µ¤o× §¤±¬o¨·¤¯ q≥·∏§¬¨¶²± ≥¦∏·¨¯ ¤¯µ¬¤¨ ¤§¬¬
kl × «¨ ±·¬¥¤¦·¨µ¬¤¯ ≥∏¥¶·¤±¦¨ q°¯ ¤±·¤ §¨¬¦¤ot|{t owvkul }
t|w q
≈x 江田昭英 o永井博贰 o和田 浩 q
¤¬¦¤¯¬± ∗ η Σ
¤¬¦¤¯ ¬¨±Ν药理
作用k第 t报l o日本 理学 ot|zs oyykul }t|w q
≈y 江田昭英 o永井博贰 o和田 浩 q
¤¬¦¤¯¬± ∗ η Σ
¤¬¦¤¯ ¬¨±Ν药理
作用k第 u报l o日本 理学 ot|zs oyykul }uvz q
≈z 江田昭英 o西依 健 o永井博贰 o他 q和汉药 Ν抗 e ¯ ® q 2作
用 ) ) ) 型 ∗ η Σ ∂ 型 e ¯ ® q 2反应 Κ对 9 κ 作用 q日本
理学 ot|{u o{sktl }vt q
≈{ ≠ ¬°∏µ¤o ∏¥²o× ×¤±¬o¨·¤¯ q≥·∏§¬¨¶²± ≥¦∏·¨¯ ¤¯µ¬¤¨ ¤§¬¬
kl ∞©©¨ ¦·¶²± ¬³¬§ ·¨¤¥²¯¬¶° ¬± ≥ µ¨∏° o¬√ µ¨¤±§ ƒ¤·
≤¨¯ ¶¯²© ¤·¶q≤«¨ ° °«¤µ°
∏¯¯ot|{t ou|k{l }uvs{ q
≈| ≠ ¬°∏µ¤o ∏¥²o × ×¤±¬o¨·¤¯ q≥·∏§¬¨¶²± ≥¦∏·¨¯ ¤¯µ¬¤¨ ¤§¬¬
k∂ l ∞©©¨ ¦·¶²± ¬³¬§° µ¨²¬¬§¤·¬²±¬± ¤·¬√ µ¨q≤«¨ ° °«¤µ°
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¤§¬¬k ∂ l ∞©©¨ ¦·¶ ²± ∞·«¤±²¯2¬±§∏¦¨§ ¼³¨ µ¯¬³¨ °¬¤ ¤±§
¬³²¯¼¶¬¶¬± ¶²¯¤·¨§ ƒ¤·≤¨¯ ¶¯q ≤«¨ ° °«¤µ°
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≈tt ≠ ¬°∏µ¤o ®∏§¤o× ×¤±¬o¨·¤¯ q≥·∏§¬¨¶²± ≥¦∏·¨¯ ¤¯µ¬¤¨ ¤§¬¬
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¤·¬√ µ¨q ≤«¨ ° °«¤µ°
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≈tu 青沼 繁 o三村 务 o樽谷正明 q黄连 o黄芩 o大黄及 Σ 柴胡浸
液 Ν家兔血清 ≤«²¯ ¶¨·¨µ²¯ 量并 Σ Κ磷脂质量 Κ及 ∴ 9 影响 Κ
∆ ∃ Φ q 学 ot|xz ozzktyl }tvsv q
≈tv ∏¥²o ¤·¶∏§¤o × ×¤±¬o ·¨¤¯ q≥·∏§¬¨¶²± ≥¦∏·¨¯ ¤¯µ¬¤¨
¤§¬¬k÷l ±·¬2·«µ²°¥¬¦¦·¬²±¶²© ∂¤·¬²∏¶ƒ¯ ¤√²±²¬§¶©µ²°
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≈tw × ¤ª¤¬o ≠ ≥∏½∏®¬o × ×²°¬°²µ¬o¨ ·¤¯ q±·¬√¬µ¤¯ ¦·¬√¬·¼ ²©
°¯ ¤±·ƒ¯ ¤√²±²¬§ox oz owχ2×µ¬«¼§µ²¬¼2{2° ·¨«²¬¼ ƒ¯ ¤√²±¨ o©µ²°
·«¨ ²²·¶²© Σχυτελλαρια βαιχαλενσι󤪤¬±¶·±©¯∏¨ ±½¤ kvul
¤±§
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¬²¯ °«¤µ°
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µ¨ ¤¯·¬²± ²© ƒ¯ ¤√²±²¬§¶©²µ±«¬¥¬·¬²± ²©
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§∏¦·¤¶¨ q≤«¨ ° °«¤µ°
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«¬¥¬·²µ¼ ∞©©¨ ¦·¶²© ƒ¯ ¤√²±²¬§¶©µ²° Σχυτελλαρια βαιχαλενσεισ ²±
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¤µµ ∂¬µ∏¶ ¦·¬√¤·¬²± ¤±§ ׫¨¬µ±·¬2·∏°²µ2°µ²°²·¬±ª
¦·¬√¬·¬¨¶q≤«¨ ° °«¤µ°
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≈t| ≥ ¼∏o
«± o ≠ °¤¦®q׫¨ ≤¼·²·²¬¬¦°µ¬±¦¬³¯¨²©≥¦∏·¨¯ 2
¤¯µ¬¤¨ ¤§¬¬ ¤ª¤¬±¶·tuts ≤¨¯¯q °¯ ¤±·¤ §¨¬¦¤ot|{x oxtkwl }
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≈us 都晓伟 o李 丹 o衣 红 o等 q栽培与野生黄芩质量的比较研
究 q中医药信息 ot||x otukul }wv q
≈ut 富森 毅 o神久 德 o宫一谕起范 o他 qΣχυτελλαρια属植物 Ν成
份研究k第 y报l 黄芩 Ν ¬ …g 成分 Κ ∆ ∃ Φ = Ν x
高速液体 r ° ¡ s ¬ g p Κ η κ 定量 q 学 ot|{x o
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≈uu 相乐和彦 o伊藤裕二 o大岛俊幸 o他 q g m ¶ ≠ e p r ° ¡
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生 学 ot|{y owsktl }{w q
≈uv 柳文媛 o林力行 o张正行 q °2°≤ 法测定黄芩中黄芩素 !汉
黄芩素的含量 q中国药科大学学报 ot||z ou{kvl }tyu q
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≈ux 王 珂 o童玉懿 o宋万志 qz 种黄芩的鉴别研究 q药物分析杂
志 ot||v otvkul }z| q
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¤±§ ²± t ot2§¬³«¨ ±¼¯2u2³¬¦µ¼¯ «¼§µ¤½¼¯ ¤§¬¦¤¯ q ≤«¨ ° °«¤µ°
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Α Νοϖελ Αππροαχη το Θυαλιτψ Εϖαλυατιον οφ Ροοτ
οφ Σχυτελλαρια βαιχαλενσισ βψ ∆ΠΠΗ Φρεε Ραδιχαλ Σχαϖενγινγ
¬∏ ≠∏2³¬±ªt o°∏µ∏¶²·¤°
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中 国 中 药 杂 志
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∏ªqoussu
其 ≥⁄为 t qs h ∀
3 q5 稳定性试验 在室温条件下 o将普通鹿蹄草 t
份供试品溶液在 v §内每隔一定时间测定 t 次 o共
测定 x 次 o结果金丝桃苷平均峰面积积分值为
zyzsus o其 ≥⁄ t qz h k ν xl ∀表明溶液在 v §
内基本稳定 ∀
3 q6 加样回收率试验 取已知含量的普通鹿蹄草
样品 x份 o每份约 s qx ªo精密称定 o准确加入金丝桃
苷对照品溶液 u qx °o按/ 3 q20方法制备供试品溶
液 o分别进样 ts Λo分离测定 o外标法计算含量 o测
定结果见表 t ∀
表 t 金丝桃苷加样回收率试验
取样量
rª
样品含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
≥⁄
r h
s qxs{w s qu|z| s qvsys s qysu{ || qz
s qxtsu s qu|{| s qvsys s qx|{w |z q|
s qxsus s qu|wt s qvsys s qx|yv |{ q{ |{ qy t qt
s qxsy| s qu|zs s qvsys s qx|ws |z qt
s qxtt| s qu||| s qvsys s qyswv || qx
3 q7 样品测定 分别取鹿蹄草 !普通鹿蹄草和紫
背鹿蹄草 s q{ ∗ t qs ªo按/ 3 q20方法制备供试品溶
液 o分别进样 ts Λo分离测定 o外标法计算含量 o结
果见表 u ∀
表 u 不同种鹿衔草中金丝桃苷含量测定 ν x
样品 金丝桃苷含量r h ≥⁄r h
鹿蹄草 s qstz t qv
普通鹿蹄草 s qsx| s qx
紫背鹿蹄草 s qs|s t qs
4 讨论
4 q1 采用 °≤ 法 o一次进样分离测定鹿蹄草中
金丝桃苷的含量 o方法简便 !快速 o结果可靠 o从测定
结果看 o紫背鹿蹄草 Π. ατροπυρπυρεα 中金丝桃苷
含量最高为 s qs|s h o普通鹿蹄草 Π. δεχορατα 次
之 o含量为 s qsx| h o鹿蹄草 Π. χαλλιαντηα含量最
低为 s qstz h ∀
4 q2 金丝桃苷属黄酮苷类 o在甲醇 !乙醇 !及醋酸乙
酯中均易溶解 o用醋酸乙酯提取的供试品溶液 o色谱
分离效果较好 o干扰少 o故选择醋酸乙酯作为提取溶
剂 ∀
4 q3 提取条件的选择 o分别采用索氏提取 o回流提
取及浸泡过夜提取方式对普通鹿蹄草进行提取 !测
定 o结果表明 }索氏提取效果最好 o故选择索氏提取
方式 ∀提取时间分别采用索氏提取 w ox oy «o测定结
果表明 }提取 x «已提取完全 o故采用索氏提取 x «∀
4 q4 流动相的选择 o考虑到金丝桃苷的柱效和分离
情况 o选择甲醇2水kwsΒysl为流动相比用甲醇2v h
醋酸水溶液kwvΒxzl为流动相得到的分离结果满意 o
故选择甲醇2水kwsΒysl为流动相 ∀
4 q5 测定波长的选择 o取对照品溶液 o用流动相稀
释后用 ∂2uys 型紫外分光光度计在紫外区扫描 o
测得金丝桃苷最大吸收波长为 uxy ±° 和 vx{ ±° o
本试验选用 vx{ ±°为测定波长 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss quyx q
≈u 王军宪 o陈新民 o李 宏 o等 q鹿衔草化学成分的研究k第 t报l q
天然产物研究与开发 ot||t ovkvl }t q
≈v 杨书斌 o谢鸿霞 o孙敬勇 o等 q °≤ 法测定山楂中金丝桃甙的
含量 q中成药 qt||| outk|l }wzx q
≈w 李星海 o王军宪 o徐文友 q秦岭三种金丝桃属植物药中金丝桃
甙的含量测定 q西北药学杂志 qt||w o|ktl }t{ q
≈x 徐礼 o刘爱茹 q罗布麻中金丝桃甙含量测定 q药物分析杂
志 ot||y oykul }{t q
≈责任编辑 袁桂京
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σισl q Μετηοδ : ײ §¨·¨µ°¬±¨ ·«¨ ⁄°° ©µ¨¨µ¤§¬¦¤¯ ¶¦¤√ ±¨ª¬±ª¤¦·¬√¬·¼ ¤±§¤¶¶¤¼ ²©©²∏µ¥¬²¤¦·¬√¨¦²°³²±¨ ±·¶}¥¤¬¦¤¯¬± o¥¤¬¦¤¯ ¬¨± o
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≈责任编辑 袁桂京
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第 uz卷第 {期
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