全 文 ：金雀异黄素壳聚糖微球的制备方法
吴婉莹 o李云谷
k北京中医药大学 药学院 o北京 tsstsu l
≈摘要  目的 }采用星点设计实验 o优化金雀异黄素壳聚糖微球的制备工艺 o提高预测性 ∀方法 }壳聚糖微球
用复乳法制备 o利用 ¶·¤·¬¶·¬¦¤软件进行多元线性回归和二项式拟合 o求得方程 o用效应面法选取较佳工艺条件 ∀结
果 }投药量最佳为 tv h ∗ tx h o有机相浓度为 vs h ∗ ws h o油相浓度为 y{ h ∗ zu h ∀结论 }通过星点设计和效应面
优化法优化金雀异黄素壳聚糖微球的制备工艺 o预测性较好 ∀
≈关键词  金雀异黄素 ~壳聚糖 ~微球 ~星点设计
≈中图分类号  • u{v qy ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsx2svxv2sv
金雀异黄素kª¨ ±¬¶·¨¬±owχ ox oz2三羟基异黄酮l
是从中药槐角 ƒµ¦·∏¶≥²³«²µ¤¨ 中分离得到的一种异
黄酮类化合物 o从 t|{z年 „®¬¼¤°¤的发现提示金雀
异黄素具有广泛的拮抗生长刺激因子的作用 o可以
抑制细胞的恶性增殖 o到现在研究已表明金雀异黄
素对恶性细胞有较广泛的生长抑制作用 o而且还能
诱导白血病细胞以及某些实体瘤细胞的分化 o抑制
促癌剂诱导的 ‹u’u 生成 ∀金雀异黄素是一难溶性
药物 o直接口服生物利用度低 ∀
本课题是将金雀异黄素制成壳聚糖微球口服胶
囊制剂 o壳聚糖微球可以改变膜转运机制 o增加药物
对生物膜的通透性 o有利于药物在细胞内发挥药效 o
可以提高疏水性药物通过上皮细胞膜的通透率 ∀因
此 o疏水性金雀异黄素选择以壳聚糖为载体材料制
备抗肿瘤药物微球 o增加其溶解度及生物利用度 o并
起到缓释长效的作用 ∀
国内在进行工艺优化和处方筛选时大多采用均
匀设计和正交设计 o国外药学者因其精度不够预测
性差很少采用 ∀星点设计k¦¨±·µ¤¯ ¦²°³²¶¬·¨ §¨¶¬ª±o
≤≤⁄l≈t 和效应面优化法kµ¨¶³²±¶¨ ¶∏µ©¤¦¨ ° ·¨«²§²¯2
²ª¼ o • ≥  l≈u 是近几年国外药学工作者常用的实验
设计和优化方法 o使用方便 o优选条件预测性好≈v  ∀
本文实验对于金雀异黄素壳聚糖微球即采用星点设
计 o并用集数学和统计学于一体的效应面优化法进
行优化 ∀
1 药品与仪器
≈收稿日期  ussu2sv2tt
≈通讯作者  电话 }kstsl{tzxuy{|
金雀异黄素有效部位k协和药物所植化室l o壳
聚糖k福建石狮华宝集团华宝海洋生物化工厂l o蓖
麻油k化学纯 o北京益利精细化学品有限公司l o硬
脂酸镁 !亚硫酸氢钠 !ux h 戊二醛 !石油醚 !异丙醇
k分析纯 o北京化工厂l ∀
数显示直流调速搅拌器k河南郑州长城仪器
厂l o扫描电镜 ≥ 2×vss o˜ ∂2usss ∀
2 微球的制备
采用复乳法≈w  o≠ 称取壳聚糖细粉 o溶于 x h醋
酸溶液中配成壳聚糖溶液 o静止除去气泡后待用 o为
初乳的外相 ∀  取正己烷与甲醇溶液ktΒtl做内
相 o并将药物溶于此有机相 ∀ ≈ 将  滴入 ≠ 中得
’r • 初乳 ∀ … 将 ≈ 加入植物油中 o同时加入乳化
剂 o乳化 vs °¬±∀   加入交联固化剂 o固化 u «∀ ¡
固化完成后 o石油醚洗涤 u次 o然后加 u h亚硫酸氢
钠洗去残余的戊二醛 o最后再用异丙醇洗涤 u ∗ v
次 o抽滤后 oys ε 干燥 w{ «∀
3 载药量及包封率的测定
壳聚糖微球中金雀异黄素的含量用紫外分光光
度法测定≈x  ∀含药微球用稀硝酸ktΒxl{s ε 水浴消
解 us °¬±o即得澄明黄色溶液 o用甲醇定容 ∀紫外分
光光度检测 o每批样品测定 v 次 o平均值即载药量 o
包封率由载药量与理论载药量的比值求得 ∀
4 微球大小及分布的测定方法
扫描电镜下观察微球的形态并拍照 o于放大
v xss倍的显微照片上测量粒径 o计数 uss个 o经统
计学处理求得平均粒径 ∀粒径的分散度用跨距≈y 来
表示 o计算公式为 }
#vxv#
第 uz卷第 x期
ussu年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qx
¤¼ qoussu
跨距 € k ∆|s p ∆ts)∆xs
其中 ∆|s , ∆ts , ∆xs分别为有 |s h ots h oxs h的
粒子数小于该值的粒径 ∀
5 实验设计
在预实验的基础上 o选取对微球性质影响较显
著的 v个因素作为考察对象 o即投药比k Ξt) !有机
相浓度( Ξu)和油相浓度( Ξvl o根据星点设计的原
理 o每个因素设 x水平 o各因素的极大极小水平根据
预实验的结果和制备的实际需要而定 ∀因素及水平
见表 t o实验安排及结果见表 u ∀
表 t 因素水平表
水平
Ξt
投药比
r h
Ξu
有机相浓度
r h
Ξv
油相浓度
r h
p t qzvu s qt s qu s qyyz
p t s qtutt s qsuyw s qzszu
s s qtx s qvx s qzyu
t s qtz{| s qwvyy s q{ty{
t qzvu s qu s qx s q{xz
表 u 星点实验设计与结果表
‘²q 载药量r h
包封率
r h
平均半径
rΛ°
跨距
t x q|s w{ qzu z qwv ? u qtu t quv
u w qz| uy qz{ | q|z ? v qsz t qxt
v w qvv vx qzy y qxz ? t quv s q|w
w x qsz u{ qvw { qyu ? t qtz t quz
x v q|| vu q|x tt quu ? s q{w u qu|
y x qtw u{ qzv tv qvw ? u qst t qzy
z w q{| ws qv{ ts qsz ? t qzv t q{t
{ w qvt uw qs| tu qv| ? s q|u u qsv
| v q{z v{ qzs { qyw ? u qxv t qvw
ts w q|x uw qzx | q{y ? t qt| s q|y
tt x qzz v{ qwz | qtt ? t q{x t qxx
tu x q{w v{ q|v { qxv ? u q{v t qzs
tv x q{z v| qtv z qtu ? s qyy u qst
tw y quz wt q{s tx qt| ? t qs{ u qvy
tx x q{u v{ q{u | qvz ? t qzy t qwv
ty x qvx vx qyz | qzx ? t qu{ t qvy
tz x qt{ vw qxv | qut ? t qx| t qwu
t{ x qxx vz qss | qwy ? t qxu t qww
t| x qzw v{ quz | qsu ? u qtv t qvs
us x qxv vy qz{ | quw ? t qvw t qvz
6 结果与讨论
所得 us个处方的微球在光学显微镜下均光滑
圆整 o呈良好的分散状态 ∀以上数据以载药量 !包封
率 !平均粒径和跨距作为因变量 o分别对各因素各水
平进行多元线性回归和二项式拟合 o所得方程如下 ∀
多元线性回归方程 }
载药量k h l € y qu|{x n x qttzw Ξt p u .vvwt Ξu
p t .v{|u Ξv , Ρ € s .vsxs , Φ€ { .sx ;
包 封率( %) € zy .zszt p t{v .s{xs Ξt p
tw .zx{| Ξu p tt .w{|w Ξv , Ρ € s .zxvt , Φ€ vty .x| ;
半径( % ) € p ut . uy{{ n uz . vtwv Ξt p
v .ysw{ Ξu n vy .{{xx Ξv , Ρ € s .|t|u , Φ€ tu .vu ;
跨距( %) € p t .t|{y p t .xzy| Ξt p t .syvw Ξu
n w .wtts Ξv , Ρ € s .xzuu , Φ€ t .|s ∀
经多元线性回归 ,半径与各因素呈较好的线性
关系 ,各相关系数拟合均 Π s .x ∀
二项式拟合 :
载药量( %) € w| .wvt| p y .zy Ξt p y .xvx Ξu p
tss .v{w Ξv p uy .zy Ξtu p vy .vs|v Ξuu p w| .wuz| Ξvu
nx .||vw Ξt Ξu n zw .t|uw Ξt Ξv n vx .{uu Ξu Ξv ,
Ρ € s .w|u{ , Φ€ y .zu ;
包 封率( %) € wuv .tyyw p vz| .s| Ξt p tzz .|t|
Ξu p zu{ .wvw Ξv p vz| .s| Ξtu p utu .ss| Ξuu n
vtx .{wzv Ξvu n tuu .vyy Ξt Ξu n y|{ .xtv{ Ξt Ξv n
vzv .zys| Ξu Ξv , Ρ € s .{txv , Φ€ uwx .ut ;
半径( %) € wt .|vxzy n zs .tsxz Ξt p tv .xzzs
Ξu p ttz .{yy Ξv n tsz .{vz Ξtu p s .|{xt Ξuu n {w .{s
Ξvu n vy .|x| Ξt Ξu p yz .{z{u Ξt Ξv n ts .ss|
Ξu Ξv , Ρ € s .|ttw , Φ€ s .xs ;
跨距( %) € tts .ttv n uw .ytxw Ξt n tx .tz Ξu p
vty .vyt Ξv n {t .{w Ξtu p ux .x|u| Ξuu n uvv .yzs|
Ξvu p t| . wz{y Ξt Ξu p t| . zvu Ξt Ξv n s . uyvw
Ξu Ξv , Ρ € s .|zuu , Φ€ w qvy ∀
载药量 !包封率和跨距的二项式拟合均比线性
模型相关系数更高 ∀
7 工艺优化
固定 v个自变量中影响较弱者 o设为中值 o代入
原 方程 o再描绘三维图 ∀本实验将 Ξu选取中值
s qvx ∀三维图上选择跨距较小 o载药量与包封率较
高的区域求出其相对应的自变量 Ξt , Ξu , Ξv 的范
围 o即得出最佳处方工艺条件范围 tv h ∗ tx h o
vs h ∗ ws h oy{ h ∗ zu h ∀
根据较佳工艺处方制备新微球 o与预测值比较
见表 v ∀
#wxv#
第 uz卷第 x期
ussu年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qx
¤¼ qoussu
表 v 预测值与实验值的比较
k Ξt € tw % , Ξu € vx % , Ξv € zs h l
因变量 预测值 实验值 变异系数r h
载药量k h l x qtt x qzu tt q|v
包封率k h l vz qtv v{ qsw u qwx
平均粒径kΛ°l y q|v y qyu p w qwz
跨距 s qy{ s qyu p { q{u
≈参考文献 
≈t  ‹¤¶¶¤± ∞ ∞o°¤µ¬¶« • ≤ oŠ¤¯ ²¯   q ’³·¬°¬½¨ § ƒ²µ°∏¯¤·¬²± ²©
¤ª±¨ ·¬¦ ≤«¬·²¶¤± ¬¦µ²¶³«¨ µ¨¶ ≤²±·¤¬±¬±ª ·«¨ „±·¬¦¤±¦¨µ
„ª¨ ±·o’¬¤±·µ¤½²¯¨q°«¤µ° • ¶¨ot||u o|kvl }v|s q
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∞√¤¯∏¤·¬²± ²© ¬§²√∏§¬±¨ 2¯ ²¤§¨ § ≥∏¶·¤¬±¨ §2µ¨¯¨ ¤¶¨ ¬¦µ²¶³«¨ µ¨¶q
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t||y o{xkyl }xzu q
≈v  吴 伟 o崔光华 q星点设计2效应面优化法及其在药学中的应
用 q国外医学药学分册 ousss ouzkxl }u|u q
≈w  ƒ °¤√¤±¨ ··²o° ° µ¨∏ª¬±¬q ∞√¤¯∏¤·¬²± ²© °µ²¦¨¶¶ °¤µ¤° ·¨¨µ¶Œ±2
√²¯√ §¨¬± ≤«¬·²¶¤± ¬¦µ²¶³«¨ µ¨ °µ¨³¤µ¤·¬²± ¥¼ ·«¨ ’r • r’  ∏¯2
·¬³¯¨ ∞°∏¯¶¬²±  ·¨«²§q ¬¦µ²¨ ±¦¤³¶∏¯¤·¬²±ot||y otvkyl oyz| q
≈x  王亚敏 o石庭森 q石墨炉原子吸收法测定靶向制剂顺铂壳聚糖
微球药物的含量 q中国药学杂志 ot||x ovsktsl }yt{ q
≈y  陆 彬 q药物新剂型与新技术 q北京 }人民卫生出版社 ot||{ q
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Πρεπαρατιον οφ Γενιστειν2λοαδεδ Χηιτοσαν Μιχροσπηερεσ
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¦²±§¬·¬²±¶q Ρεσυλτ : × «¨ ·«¨ ²µ¨·¬¦¤¯ §µ∏ª¦²±·¨±·º¤¶tv h ∗ tx h o·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©²µª¤±¬¦³«¤¶¨ º¤¶vs h ∗ ws h ¤±§·«¨ ¦²±2
¦¨±·µ¤·¬²± ²©²¬¯ ³«¤¶¨ º¤¶y{ h ∗ zu h qΧονχλυσιον : × «¨ ¥¨¶·¨ ¬³¨µ¬° ±¨·¦²±§¬·¬²±¶¦¤± ¥¨ ²¥·¤¬±¨ §¥¼ ¦¨±·µ¤¯ ¦²°³²¶¬·¨ §¨¶¬ª± ¤±§
µ¨¶³²±¶¨ ¶∏µ©¤¦¨ ° ·¨«²§²¯²ª¼ q× «¨ ²¥¶¨µ√ §¨√¤¯∏¨¶¤ªµ¨¨ º¨¯¯ º¬·« °²§¨¯³µ¨§¬¦·¨§√¤¯∏¨¶q
[ Κεψ ωορδσ] ª¨ ±¬¶·¨¬± ~¦«¬·²¶¤±~ °¬¦µ²¶³«¨ µ¨ ~¦¨±·µ¤¯ ¦²°³²¶¬·¨ §¨¶¬ª±
≈责任编辑 刘  
均匀设计法优选五味子的提取工艺
袁海龙t o谭 锐u o李仙逸t o肖小河t o蔡光明t o贺承山t
kt q解放军第 vsu医院 药学部 o北京 tsssv| ~u q西南交通大学 生物工程系 o四川 成都 ytssz{l
≈摘要  目的 }优选出五味子的提取工艺 ∀方法 }采用均匀设计安排实验 o以五味子甲素的含量作为考察指
标 o考察了乙醇浓度 !回流时间及溶媒用量对五味子甲素提取率的影响 o优选出合理的提取工艺 ∀结果 }乙醇浓度
|s h !回流时间 t «及溶媒用量 x倍为最佳提取工艺 ∀结论 }本工艺稳定可行 o可作为提取五味子生产工艺参考 ∀
≈关键词  五味子 ~提取工艺 ~均匀设计
≈中图分类号  • u{v ~• u{w qu ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsx2svxx2sv
≈收稿日期  usst2s|2ts
≈通讯作者  电话 }kstslyy|vvvuw
五味子为木兰科植物 Σχηισανδρα χηινενσισ
…¤¬¯¯ q的干燥果实 o具有收敛固涩 !益气生津 !补肾宁
#xxv#
第 uz卷第 x期
ussu年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qx
¤¼ qoussu