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Studies on the anticancer effects of total alkaloid from Viscum coloratum

槲寄生碱抗肿瘤作用的研究



全 文 :Τηε ρενοπροτεχτ εφφεχτ οφ Σηενηυα ρεχιπε ον x/ y ρεναλ αβλατιον ρατσ
Œ¬¤±2­∏±o≤‹∞‘÷¬¤±ª2° ¬¨oŠ˜ ≠∏¨ o• ∞Œ •¬2¥¤²o≥‹Œ ≥∏²2½«∏o ≠Œ‘«²±ª
( ∆επαρτµεντ οφ νεπηρολογψ, Γενεραλ Ηοσπιταλ οφ ΠΛΑ, Βειϕινγ tss{xv , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ µ¨±² ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²© ≥«¨ ±«∏¤µ¨¦¬³¨ ²± ·«¨ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¤¯ °²§¨¯ ²©xry µ¨±¤¯ ¤¥¯¤·¬²±q
Μετηοδ : xry µ¨±¤¯ ¤¥¯¤·¬²±µ¤·¶º µ¨¨ ∏±§¨µ¯¼¬±ª·«¬¶ ¬¨³¨µ¬° ±¨·q׫¨ ¼ º µ¨¨ ¤§°¬±¬¶·¨µ¨§≥«¨ ±«∏¤o¬µ¥¨¶¤µ·¤±µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ ¥¼ ª¤√¤ª¨ §∏µ¬±ªtu
º¨¨ ®¶q…²§¼ º ¬¨ª«·o¶¼¶·²¯¬¦¥¯²²§³µ¨¶¶∏µ¨ o³µ²·¨¬±∏µ¬¤o≥¦µo…˜‘o·²·¤¯ ³µ²·¨¬±o¤¯¥∏°¬±o Š¯ ¼¦¨µ²¤±§¦«²¯ ¶¨·¨µ²¯ º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§q‹¬¶·²2
²¯ª¬¦ª¯²° µ¨∏¯¤µ¤±§·∏¥∏¯²¬±·¨µ¶·¬·¬¤¯ §¤°¤ª¨ ¶¦²µ¨¶º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§¤·tu º¨¨ ®¶qΡεσυλτ : ׫¨ ·µ¨¤·¨§ªµ²∏³¶¶«²º §¨¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼¯¨ ¶¶«¬¶·²¯²ª¬¦
ª¯²° µ¨∏¯¤µ¤±§·∏¥∏¯²¬±·¨µ¶·¬·¬¤¯ §¤°¤ª¨ ¶¦²µ¨¶¤·tu º¨¨ ®¶q ׫¨ ³¯¤¶°¤ ¤¯¥∏°¬± º µ¨¨ «¬ª«¨µk Π  s1sxl o ∏µ¬±¨ ³µ²·¨¬± ¬¨¦µ¨·¬²± µ¤·¨¶o
¶¨µ∏° ¦«²¯ ¶¨·¨µ²¯ ¤±§¦µ¨¤·¬±¬±¨ º µ¨¨ ²¯º µ¨·«¤± ¬± ±²±·µ¨¤·¨§ªµ²∏³o¥∏·¤µ·¨µ¬¤¯ ¥¯²²§³µ¨¶¶∏µ¨ º¤¶±²·¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ §¬©©¨µ¨±·¬±·«¨ ·«µ¨¨
≥«¨ ±«∏¤·µ¨¤·¨§ªµ²∏³¶¦²°³¤µ¨§º¬·«±²±·µ¨¤·¨§ªµ²∏³qΧονχλυσιον : ≥«¨ ±«∏¤¦¤±µ¨·¤µ§·«¨ ³µ²ªµ¨¶¶¬²±²©¦«µ²±¬¦µ¨±¤¯ ¬±­∏µ¼¬±·«¨ xry µ¨2
±¤¯ ¤¥¯¤·¬²± º¬·«²∏·¦«¤±ª¨¶¬± ¶¼¶·²¯¬¦¥¯²²§³µ¨¶¶∏µ¨ q
[ Κεψ ωορδσ] ≥«¨ ±«∏¤µ¨¦¬³¨ ~xry µ¨±¤¯ ¤¥¯¤·¬²±~µ¤·
≈责任编辑 古云侠 
≈收稿日期  ussv2ts2uv
≈通讯作者  3彭海燕 oר¯ }ksuxlxt||zvuv
槲寄生碱抗肿瘤作用的研究
彭海燕t 3 o章永红t o韩 英u o王 梦u
kt1 南京中医药大学 第一临床医学院 o江苏 南京 utssu| ~
u1 江苏省药物研究所 o江苏 南京 utsss|l
≈摘要  目的 }通过体内 !体外实验研究槲寄生碱的抗肿瘤作用 ∀方法 }体外实验采用 ×× 法测定槲寄生碱
对食管癌细胞株k∞¦¤2ts|l生长的抑制作用 ∀取对数生长期的肿瘤细胞培养 uw «后加入含不同浓度槲寄生碱培养
液 ~作用 uw «后倾去上清液 o加入 ×× ~w «后吸去上清液 o加入二甲亚砜k⁄≥’l ~vs °¬±后测吸光度k Αl并计算抑
制率 ~体内实验将制备的肿瘤细胞悬液 o以 s1u °r只的量接种于小鼠右前肢腋部皮下 ouw «后将已接种的小鼠随
机分组 ∀各组均连续给药 z §o停药后 t ∗ v §将小鼠拉颈处死 o剥取瘤块称重 o计算抑瘤率 ∀结果 }体外实验证实槲
寄生碱对肿瘤细胞生长有显著的抑制作用 ~体内实验证实槲寄生碱可抑制肿瘤生长 !延长荷瘤动物的生存期 ∀结
论 }槲寄生碱具有抗肿瘤作用 ∀
≈关键词  槲寄生碱 ~抗肿瘤 ~食管癌细胞株
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlsx2sv{t2sv
中医药在抗肿瘤方面具有效果广泛持久而无多
药耐药等弊端 o因此逐渐成为抗肿瘤药物研究的热
点 ∀近年来 o槲寄生的抗癌作用受到国内外医药学
界的重视 o已从多种槲寄生植物中提取到具有抗癌
活性的植物糖蛋白和生物碱 ∀本研究从槲寄生植物
中提取到具有抗癌活性的生物碱 o通过实验发现其
对数种癌细胞均有显著的抑制作用 ∀现报告如下 ∀
1 材料
111 动物
昆明种小鼠 o雌性 o体重 t{ ∗ uu ªo南京中医药
大学实验动物中心提供 ∀
112 药物与试剂
槲寄生碱 o由江苏省药物研究所植化室提供 ~对
#t{v#
第 vs卷第 x期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ x
¤µ¦«oussx
照药 }肝癌组以 x2氟尿嘧啶kx2ƒ˜ o批号 ststsw o上海
旭东海普药业有限公司出品l为对照 ~胃癌组以环磷
酰胺k上海华联制药有限公司生产 o批号 stsvswl为
对照 ∀
113 瘤株
食管癌细胞株k∞¦¤2ts|l由南京中医药大学微
生物教研室提供 o人乳腺癌 ≤ƒ2z细胞株购自省肿
瘤医院肿瘤研究所 o胃癌 …Š≤2{uv细胞株购自江苏
省肿瘤医院肿瘤研究所 o肝癌 ‹uu由上海药物研究
所提供 ∀
114 仪器
• °Œ2tyws培养液 !胎牛血清 !胰蛋白酶由美国
Š¬¥¦²公司提供 o××及其他常用试剂购自四季青公
司 o二氧化碳培养箱购自德国 ‹ µ¨¨∏¶o全自动酶标仪
购自台湾 ∞µ°¤¬±¦公司 ∀
2 方法
211 体外实验
食管癌细胞株 ∞¦¤2ts|培养于 t||培养液中 o人
乳腺癌细胞株 ≤ƒ2z培养于 • °Œ2tyws培养液中 o
培育在 vz ε ox h ≤’u培养箱内 ∀取对数生长期的细
胞调整至 t ≅ tsx#°pt os1u °接种于 |y孔板上 o
置 vz ε ox h ≤’u培养 uw «后弃原培养液 o分别加入
含 tus o|s oys °ª#®ªpt的槲寄生碱培养液各 s1u °o
每个浓度设 |个复孔k分 v次重复l o并设无药物k含
配制药物的乙醇l培养液和空白对照孔k同时作 v个
板l ∀作用 uw «后倾去上清液 o各孔加入 ×× s1t
°ovz ε ow «后吸去上清液 o加入二甲亚砜k⁄≥’l
s1t °于各孔 ovs °¬±后上酶标仪 xzs ±°处测 Α
值 o并计算抑制率 ∀
抑制率k h l € k对照孔 Α值 p 实验组 Α值)/对照孔 Α
值 ≅ tss h
212 体内实验
21211 对小鼠肝癌 ‹uu瘤体生长的影响 肝癌组
取接种 z §后的肝癌 ‹uu腹水 o用生理盐水稀释成 tΒ
v的悬液备用 ∀将肝癌 ‹uu悬液以 s1u °r只的量接
种于小鼠右前肢腋部皮下 ouw «后将已接种的小鼠
随机分为 x组 o每组 ts只 o设对照组 !x2ƒ˜组 !槲寄
生碱大 !中 !小ktus o|s oys °ª#®ªptl剂量组 ∀槲寄
生碱组 o每天给小鼠灌胃给药 t次 ~x2ƒ˜组为腹腔
注射给药 o每天 t次 o每次 s1u °#kus ªlp t ~对照组
每天灌胃等量 t h ≤≤2‘¤液 ∀各组均连续给药 z
§∀小鼠停药后 t ∗ v §拉颈处死 o剥取瘤块称重 o按
下列公式计算抑瘤率 ∀
抑瘤率k h l € kt p 治疗组平均瘤重r对照组平均瘤重l
≅ tss h
21212 对小鼠移植胃癌的抑制作用 胃癌组在无
菌条件下 o取荷瘤传代鼠 o消毒腹部皮肤 o用无菌空
注射器抽吸腹水 o以无菌生理盐水作 tΒu倍的稀释 ∀
取雌性小鼠 xs只 o每只鼠接种 s1u °o接种后次日
随机分为 x组 o每组 ts只 o槲寄生碱组按 tus o|s oys
°ª#®ªptv个剂量灌胃给药 ∀对照组给生理盐水 ∀
阳性药对照组给环磷酰胺 xs °ª#®ªpt灌胃给药 ∀每
日 t次 o连续 ts §o记录小鼠生存时间 ∀实验重复 v
次 ∀
生命延长率k h l € k治疗组平均生存时间 p对照组平均
生存时间lr对照组平均生存时间 ≅ tss h
213 统计方法
数据采用 ≥°≥≥ts1s 统计分析软件分析系统处
理 ∀所有数据均以 cξ ? σ表示 ∀进行 τ检验及方差
分析 o以 Π s1sx作为显著性差异 ∀
3 结果
311 体外实验
结果表明 o槲寄生碱对肿瘤细胞生长有显著的
抑制作用 o见表 t ∀
表 t 槲寄生碱对食管癌及乳腺癌细胞
生长抑制作用kcξ ? σoν € |l
药物
剂量
r°ª#®ªpt
Α
食管癌 乳腺癌
抑制率r h
食管癌 乳腺癌
空白对照 s s1vw| ? s1sty s1vwy ? s1sut s1s s1s
槲寄生碱 tus s1ttx ? s1st|ul s1tsv ? s1stzul yz1sx zs1uv
|s s1t{z ? s1stuul s1txu ? s1stxul wy1wu xy1sz
ys s1uts ? s1stttl s1t|{ ? s1sustl v|1{v wu1zz
注 }与对照组比较tl Π s1sx oul Π s1stk表 u ov同l
312 体内实验
结果表明 o槲寄生碱可抑制肿瘤生长 !延长荷瘤
动物的生存期 o见表 u o表 v ∀
表 u 槲寄生碱对小鼠肝癌 ‹uu瘤体生长的影响kcξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªpt
ν 体重rªk开始r结束l
瘤重

抑瘤率
r h
对照组 ts t|1yruy1t t1u| ? s1vv
x2ƒ˜ us | t|1|rut1z s1v{ ? s1u|ul zs1xw
槲寄生碱 tus ts us1srut1y s1vx ? s1wuul zu1{z
|s ts us1wruy1{ s1w| ? s1vtul yu1su
ys ts us1zruy1u s1zv ? s1vyul wv1wt
注 }实验中 x2ƒ˜组死亡 t只 o可能与药物毒性有关
4 讨论
k下转第 v{z页l
#u{v#
第 vs卷第 x期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ x
¤µ¦«oussx
笔者在使用抗生素进行治疗的基础上 o选用以新鲜
益母草入药的鲜药制剂益母草胶囊和历代沿用并流
传至今的产后圣方生化汤 o替代宫缩药物 o对改善产
后子宫复旧进行观察比较 o结果显示 }益母草胶囊组
在改善产后宫底高度和子宫三径方面的疗效明显优
于生化组k Π s1sxl o而对恶露量和阴道流血时间
方面 ou组作用相似 ∀
益母草是传统的缩宫调经药 o其宫缩作用的有
效成分为生物碱≈t  ∀已有研究表明鲜益母草对大鼠
子宫的收缩作用比同批次晒干草强 o鲜益母草胶囊
的药理活性比同样剂量的流浸膏强≈u ov  ∀从本研究
的观察结果显示 }以新鲜益母草入药的益母草胶囊 o
其对促进产后子宫复旧有较好的作用 o且临床使用
方便 o服用量少 o又无不良反应 o其作为一种新型的
安全有效的妇产科用药 o值得推广应用 ∀
≈参考文献 
≈t  刘广省 q益母草的药理研究进展 q中药材 oussu ouxktl }zt q
≈u  杜双有 o杨明华 q从鲜益母草胶囊的研制谈中药鲜品的开发 q
中国中药杂志 oussu ouz ktsl }{sv q
≈v  杨明华 o王万青 o金祖汉 o等 q新鲜益母草缩宫作用的研究 q
基层中药杂志 ousst otxkvl }yt q ≈责任编辑 古云侠 
k上接第 v{u页l
表 v 槲寄生碱对小鼠移植胃癌的抑制作用kcξ ? σoν € tsl
组别 剂量r°ª#®ªpt 生存时间r§ 生命延长率r h
荷瘤对照组 p tt1u ? u1|s
环磷酰胺 xs tx1| ? v1stul wt1|y
槲寄生碱 tus t{1| ? u1xzul y{1zx
|s tz1s ? u1uvul xt1z|
ys tx1w ? u1tytl vz1xs
槲寄生为桑寄生科槲寄生属植物 o我国槲寄生属分
布 tt种及 t变种 o药用部分为干燥带叶茎枝 ∀槲寄
生是一味传统中药 o其味苦 !甘 o性平 o具有/补肝肾 !
强筋骨 !祛风湿 !安胎0的功能≈t  ∀目前 o已有文献报
道欧洲槲寄生和朝鲜槲寄生的提取物具有抗肿瘤活
性≈u  ∀国内报道采用稀醋酸浸提法或稀盐酸浸提法
从槲寄生 ςισχυµ χολορατυµ kŽ²°1l ‘¤®¤¬中提取的总
生物碱在 xs ozx °ª#®ªpt时对小鼠移植性肿瘤 ≥t{s o
≥vz o∞„≤ o„• ≥及 tuts白血病均有明显抑制作用≈v  o
在 xs ozx °ª#®ªpt时对 ¨º¬¶肺癌的抑瘤率为 x|1s h
和 yx1u h o并对 ¨º¬¶肺癌肺转移有抑制作用≈w  ∀
尽管如此 o还没有文献报道槲寄生碱用于抗肝
癌 !胃癌 !食管癌 !乳腺癌等癌症的治疗 ∀本研究从
体内 !体外两方面实验结果证实槲寄生碱具有较显
著的抗癌作用 o其抗癌的有效单体化学成分及其结
构修饰 !作用的分子机理 o有待于进一步深入研究 ∀
≈参考文献 
≈t  国家中医药管理局中华本草编委会 q中华本草 q第 u册 q上
海 }上海科学技术出版社 ot||| qytv q
≈u  王庆端 o刘梅筠 o王东阳 o等 q槲寄生总生物碱的抗肿瘤作用 q
中国中药杂志 ot||w ot|ktl }wx q
≈v  胡家会 o张永忠 o郭善利 o等 q槲寄生总碱抗肿瘤及抗炎作用
研究 q聊城师院学报 ousst otwkul }yw q
≈w  陈世伟 o李俊峰 o胡家会 o等 q槲寄生碱的提取纯化及抗肿瘤
研究 q山东中医药大学学报 ousst ouxkxl }vzv q
Στυδιεσ ον τηε αντιχανχερ εφφεχτσ οφ τοταλ αλκαλοιδ φροµ ςισχυµ χολορατυµ
°∞‘Š ‹¤¬2¼¤±t o‹„‘Š ≠²±ª2«²±ªt o ‹„‘≠¬±ªu o • „‘Š  ±¨ªu
(t . Τηε Φιρστ Μεδιχαλ Χολλεγε , Νανϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Νανϕινγ utssu| , Χηινα ;
u . Ινστιτυτε οφ Ματερια Μεδιχα οφ ϑιανγσυ Προϖινχε , Νανϕινγ utsss| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ¤±·¬¦¤±¦¨µ ©¨©¨¦·¶²©·²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§©µ²° ςισχυµ χολορατυµ ιν ϖιϖο ¤±§ ϖιτρο q Μετηοδ : Ιν ϖιτρο o
×× ¤¶¶¤¼¶º µ¨¨ ∏¶¨§·² ° ¤¨¶∏µ¨ ·«¨ ¬±«¬¥¬·²µ¼ ©¨©¨¦·q≤¨¯ ¶¯¤·³¨µ¬²§²© ²¯ª¤µ¬·«°¬¦ªµ²º·«º µ¨¨ ¬±¦∏¥¤·¨§©²µuw «²∏µ¶q׫¨ ±·²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§²©
√¤µ¬²∏¶¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶º µ¨¨ ¤§§¨§quw «²∏µ¶ ¤¯·¨µo¶∏³¨µ±¤·¤±·º¤¶µ¨°²√ §¨¤±§ ×× º¤¶¤§§¨§qw «²∏µ¶¤©·¨µ·«¤·o⁄≥’ º¤¶¤§§¨§o·«¨ ±
vs °¬±∏·¨¶ ¤¯·¨µo Α √¤¯∏¨ º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§q Ιν ϖιϖο o¶∏¶³¨ ±¶¬²± ²©¦¤µ¦¬±²°¤¦¨¯¯¶º¤¶¬°³¯¤±·¨§¬±·«¨ °¬¦¨ . ¶ ¬¯°¥¶¶∏¥¦∏·¤±¨ ²∏¶¯¼ os1u °
¤¨¦«quw «²∏µ¶ ¤¯·¨µo·«¨ °¬¦¨ º µ¨¨ ªµ²∏³¨ §µ¤±§²°¯ ¼ qƒ §¨¥¼·²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§¦²±·¬±∏²∏¶¯¼ ©²µz §¤¼¶o·«¨ °¬¦¨ º µ¨¨ ¶¤¦µ¬©¬¦¨§q׫¨ ·∏°²µ¶
º µ¨¨ º ¬¨ª«¨ §¤±§¦¤¯¦∏¯¤·¨§·«¨ ¬±«¬¥¬·²µ¼µ¤·¨¶q Ρεσυλτ : Ιν ϖιτρο o¬·¶«²º¶·«¤··²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§«¤¶³µ²°¬±¨ ±·¬±«¬¥¬·²µ¼ ©¨©¨¦·²±·«¨ ªµ²º·«²©
¦¤µ¦¬±²°¤ ¦¨¯¯¶q Ιν ϖιϖο o¬·¶«²º¶·«¤··²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§¦¤±¬±«¬¥¬··«¨ ªµ²º·«²©·∏°²µ¶¤±§³µ²¯²±ª·«¨ ¶∏µ√¬√¤¯ §¤¼¶²©·«¨ °¬¦¨ ¥¨¤µ¬±ª·∏°²µ¶q
Χονχλυσιον : ײ·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§©µ²° ςισχυµ χολορατυµ «¤¶·«¨ ¤¦·¬√¬·¬¨¶²©¤±·¬¦¤±¦¨µq
[ Κεψ ωορδσ] ·²·¤¯ ¤¯®¤¯²¬§~ςισχυµ χολορατυµ ¤±·¬¦¤±¦¨µ~∞¦¤2ts| ¦¨¯¯ ¬¯±¨ ≈责任编辑 古云侠 
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∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ x
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