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石牌广藿香试管苗的研制



全 文 :能与孢子囊的成熟度 !采集标本的季节和当时的气
候条件对孢子囊形成的影响以及寄主品种等因素有
关 o有待于进一步研究 ∀
≈参考文献 
≈t  方中达 q植病研究方法 q第 v 版 q北京 }中国农业出版社 ot||{ q
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≈责任编辑 王康正 
石牌广藿香试管苗的研制
杜 勤 o王振华 o徐鸿华 o蔡 洁 o江小间 o吴小萍
k广州中医药大学 o广东 广州 xtswszl
≈摘要  目的 }研制石牌广藿香试管苗 ∀方法 }以叶为外植体 o考察消毒剂 !光照条件 !激素浓度 !生根培养基
对试管苗生成的影响 ∀结果 }s qu h升汞浸泡 tx °¬±效果最好 o先黑暗培养后光照培养效果优于一直光照培养 oy2
…„ u °ª#p t对愈伤组织及丛生芽的形成效果较好 o生根培养基为 tru  ≥ ∀结论 }石牌广藿香叶以 s qu h升汞消毒
tx °¬±o接种于  ≥ n y2…„ u °ª#p t培养基上 o先置黑暗下培养 u §后置于光照下培养 o能生成较多愈伤组织 o继续
培养生成丛生芽 o丛生芽置于 tru  ≥培养基上能生成较多根 o试管苗移栽到大田后成活率达 |x h以上 ∀
≈关键词  石牌广藿香 ~试管苗 ~组织培养
≈中图分类号  ≥ xyz ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsv2stz|2sv
≈收稿日期  usst2s|2ts
≈基金项目  国家科技部重点科技项目计划k||2|u|2st2uvl
≈通讯作者  电话 }ks|vtlv|sxxts
广藿香为唇形科植物广藿香 Πογοστε µ ον χαβλιν
k…¯¤±¦²l …¨ ±·«o以全草入药 ∀具有芳香化浊 o开胃
止呕 o发表解暑的功效 ∀广藿香是广东道地药材 o
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第 uz卷第 v期
ussu年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤µ¦«qoussu
/十大广药0之一 ∀广藿香原产于菲律宾 !马来西亚 !
印度等国 o引种到我国后由于广东栽培药用历史长 o
故名/广藿香0 ∀广藿香由于产地不同而有不同的商
品名称 o其中广州近郊石牌 !宝岗等地原是广藿香的
主要产区 o商品称/石牌广藿香0 o品质最优 o在国内
外市场享有盛誉 o但随着广州市的发展 o原来的种植
区已无广藿香种植 ∀由于国家倡导中药材的规范化
种植 o目前在广州市萝岗镇已开始种植一定规模的
广藿香 ∀广藿香引种到我国南亚热带地区种植后 o
由于气温低 o很少见到开花 o既使开花也多不孕 o因
此广藿香的繁殖方法主要采取无性扦插繁殖 o但又
存在繁殖速度慢 !易带病菌 !受环境条件影响大 !需
消耗大量原植物材料等缺点 o对种苗的供应极为不
利 o组织培养技术为这一问题的迅速解决提供了思
路 ∀目前关于广藿香的研究多集中在化学成分 !药
理等方面 o组织培养方面仅有肖省娥等报道用广藿
香的根尖等进行组织培养研究≈t  o至于石牌广藿香
组织培养的研究 o尚未见报道 ∀为此我们进行了石
牌广藿香试管苗的研制 o目前已研制出大批量的试
管苗并开始在广藿香规范化种植基地种植 ∀
1 材料与方法
本实验所用石牌广藿香幼嫩叶片取自广州市石
牌广藿香留种基地 o原植物经作者鉴定为广藿香
Πογοστε µ ον χαβλιν k…¯¤±¦²l …¨ ±·«∀自来水冲洗干
净 o滤纸吸干表面水分 ozx h酒精漂洗 s qx °¬±o消毒
剂浸泡 o无菌滤纸吸干表面水分 o叶片切半接种 ∀基
本培养基为  ≥ o经tut ε 灭菌tx °¬± ∀光照强度
u xss ¬¯o每日光照 { ∗ ts «o培养温度kus ? ul ε ∀
2 实验结果
2 q1 消毒剂的种类 !浓度 !作用时间对外植体污染
率和成活率的影响 由于石牌广藿香叶片绒毛较
多 o消毒十分困难 o为此我们考察了 ts h次氯酸钠 !
s qt h升汞 !s qu h 升汞分别消毒 ts otx ous oux °¬±
对叶片外植体污染率和成活率的影响 o叶片接种 v
周后进行统计 ∀实验结果见表 t ∀
表 t 消毒剂的种类 !浓度 !作用时间
对外植体污染率和成活率影响 h
τ
r°¬±
ts h次氯酸钠
污染率 成活率
s qt h升汞
污染率 成活率
s qu h升汞
污染率 成活率
ts tss s tss s tss s
tx tss s tss s zs u| qu
us tss s |t qy { qw zs us q{
ux tss s {z qx tu qx s s
注 }每组接种 uw瓶 o每瓶接种 t块
2 q2 光照条件对愈伤组织形成的影响 将石牌广
藿香叶片以 s .u h升汞消毒 tx °¬±o接种后等分成
两组 o一组先置于黑暗条件下培养 u §o然后置于光
照条件下培养 ~一组置于光照条件下培养 o考察其愈
伤组织诱导率的不同 ∀结果显示 }叶片接种后先于
黑暗条件下培养 u §o后置于光照条件下培养 o其愈
伤组织诱导率为 vv qv h k图 tl o高于接种后一直处
于光照条件下的诱导率 u| qu h ∀
图 t 石牌广藿香叶片诱导的愈伤组织
2 q3 激素对愈伤组织形成的影响 将叶片接种于
 ≥ n y2…„ s qx °ª#p t o ≥ n y2…„ t °ª#pt和
 ≥ n y2…„ u °ª#p t的培养基上 o考察不同浓度的
y2…„对石牌广藿香愈伤组织形成的影响 ∀结果显
示 }y2…„ u °ª#p t的愈伤组织诱导率为 vx qw h 
y2…„ t °ª#pt的诱导率 vt qv h  y2…„ s qx °ª#
pt的诱导率 us q{ h ∀
2 q4 不同生根培养基对丛生芽生根的影响 愈伤
组织在  ≥ n y2…„ u °ª#pt的培养基上继续培养
即可分化形成大量丛生芽 o以不同生根培养基对丛
生芽培养 w周 o考察对生根的影响 ∀结果为 tru  ≥
生根数量 x条以上 o根的长度 v ¦°以上 o综合评价
最好k图 ul ~ ≥生根数量 v条以下 o根的长度 v ¦°
以下 o综合评价次好 ~ ≥ n ‘„„ s qx °ª#p t生根数
量为 s o综合评价最差 ∀
3 小结
3 q1 石牌广藿香种苗奇缺 o为了节约材料 o选择叶
片进行研究 ∀由于叶片绒毛较多 o消毒困难 o为此我
们选用次氯酸钠 !升汞两种消毒剂的 tu种组合进行
处理 o结果表明 ts h次氯酸钠kts otx ous oux °¬±l !
s qt h升汞kts otx °¬±l !s qu h升汞浸泡 ts °¬±o叶
片全部污染 ov 周后全部死亡 ~s qu h 升汞浸泡 ux
°¬±o叶片无污染 o但全部被消毒剂杀死 ~剩余 w组叶
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第 uz卷第 v期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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片能成活 o其中以 s qu h升汞浸泡 tx °¬±的污染率
最低 !叶片成活率最高 o效果最好 ∀成活的外植体接
种 v周后从叶片切面和叶缘锯齿凹陷处长出大量绿
色颗粒状胚性愈伤组织 o长势良好 ∀
图 u 石牌广藿香试管苗
3 q2 光照条件与激素浓度的实验表明 o外植体接种
后先在黑暗条件下培养 u §o而后进行光照培养效果
较好 oy2…„ u °ª#p t对愈伤组织及丛生芽的形成效
果较好 ∀
3 q3 将丛生芽置于无激素的 tru  ≥k大量元素减
半l培养基上 o能够生根 o根的数量多 o长度长 ∀将已
经生根的试管苗炼苗 t §后 o植入添加了  ≥营养液
的砂土中能够成活 o移栽到大田中 o成活率可达
|x h以上 o植株长势良好k图 vl ∀
图 v 在大田移栽成活的试管苗
综上 o我们将石牌广藿香叶片以 s qu h升汞浸
泡 tx °¬±o接种于  ≥ n y2…„ u °ª#pt培养基上 o
先于黑暗下培养 u §o再进行光照培养 o能够产生大
量愈伤组织及丛生芽 o丛生芽转移到 tru  ≥培养基
上 o能够生出较多根 o已生根的试管苗经炼苗后 o移
栽在大田能成活 ∀
≈参考文献 
≈t  肖省娥 o贺 红 o徐鸿华 q广藿香组织培养与植株再生研究 q中
药材 ousst ouwkyl }v|t q
≈责任编辑 王康正 
征文启事
为了弘扬中华医药 o传播现代医学理念 o展示最新医药技术和学术成果 o5中国医药发展论坛6特向广大医药工作者征集
中西医药研究 !中西医结合 !西医 !临床医术 !临床用药 !临床检验 !临床护理 !预防医学 !妇幼保健等方面论文 !病例报告与病案
分析等k来稿同时参加优秀论文评选l ∀
5中国医药发展论坛6是由世界中医药学会和世界医药出版社联合主办 o为国内外公开发行的大型双月国际期刊 ∀统一
刊号为 }≤ ‘ut2wyusr‹Ž~国际标准刊号 }Œ≥≥‘ty{t2xz|vst ∀
欢迎广大作者踊跃投稿 ∀
来稿请寄石家庄市红军大街 vy号5中国医药发展论坛6杂志社k石家庄联络处l ∀
联系人 }赵云山 张莉 邮编 }sxsszt 电话 }svtt2zsx{w|v
药材销售信息
今有甘草 !枸杞子 !党参等中药材大货 o有需要者请直接与河南省禹州市中药行金石康药行陈女士 !魏先生联系 ∀
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第 uz卷第 v期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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