全 文 ：胶束电动毛细管色谱法
测定西洋参中人参皂苷 ¥t o ¨的含量
杨伟峰 o赵维良
k浙江省药品检验所 o浙江 杭州 vtssswl
≈摘要 目的 }建立西洋参中人参皂苷 ¨o ¥t的胶束电动毛细管色谱测定方法 o考察影响分离的各因素 o确
定最佳色谱条件 ∀方法 }测定缓冲液为含 us ° °²¯#p t硼酸 !us ° °²¯#p t硼砂 !ys ° °²¯#p t胆酸钠和 us h乙
腈的混合溶液 ∀电压 us ®∂ o柱温 ux ε o检测波长 usv ±° o压力进样 x ¶∀结果 }线性范围 ¨为 s qv{ ∗ t qyx °°²¯#
p t o ¥t为 s qwu ∗ t qzy ° °²¯#p t ∀加样回收率 ¨为 |z qu h o ≥⁄ t qy h ~ ¥t 为 |z qz h o ≥⁄ t q| h k ν
xl ∀结论 }该方法具有样品前处理简单 o重现性好 o所得色谱图信息丰富等特点 ∀
≈关键词 高效毛细管电泳 ~西洋参 ~人参皂苷
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvltu2ttvw2sv
西洋参 Παναξ θυινθυεφολιυσ q为五加科人参
属植物 o原产北美洲加拿大的蒙特利尔 !魁北克和美
国东部 ∀t|zx年 o西洋参在我国引种成功 o目前在
东北 !华北及华东地区均有栽培 ∀
西洋参中人参皂苷的含量测定方法有薄层扫描
法 !高效液相色谱法 ∀高效毛细管电泳k°≤∞l是一
种迅速发展起来的新技术 o具有分离效率高 o分析时
间短等特点 ∀作者在岩上正藏报道≈t 的基础上 o对
色谱条件作了研究 o取得了满意的色谱分离效果 ∀
1 仪器与试药
¨ ¦®°¤± °r≤∞ ≥¼¶·¨° xxss 毛细管电泳仪
k美国
¨ ¦®°¤±公司l⁄色谱工作站 o毛细管柱
为 xs Λ° ≅ xz ¦°k有效长度为 xs ¦°l o⁄⁄检测
器 o检测波长 usv ±° ∀
硼酸 !硼砂 !胆酸钠均为分析纯 ~乙腈为色谱纯 ~
≈≥∞ ∂ kƒ ¬¨¥¬²¦«¨ °¬¦¤ °¥ i ≤²q ~水为 u次重
蒸水 ∀
人参皂苷 ¨k批号 szsw2usstul o ¥t k批号
szxw2usst{l从中国药品生物制品检定所购买 o均为
含量测定用对照品 ∀
进口西洋参药材k产地美国 !加拿大l购于杭州
华东医药股份有限公司 o国产西洋参药材k产地吉林
通化l委托吉林省药品检验所购买 ∀由本所中药室
≈收稿日期 ussu2sz2s{
≈通讯作者 杨伟峰 ר¯ }ksxztl {ywx|wtv ƒ¤¬}ksxztl
{ywxvtzt ∞2°¤¬¯}¼º©«½ tyv q¦²°
林泉主任药师鉴定为 Π. θυινθυεφολιυσ∀
2 色谱条件的优化
2 q1 对照品溶液和供试品溶液的制备
对照品溶液 }取人参皂苷 ¨o ¥t 各约 ts °ªo
精密称定 o置 ts °量瓶中 o加 xs h甲醇溶解并稀
释至刻度 o摇匀 o即得 ∀
供试品溶液 }将样品粉碎过ws目筛 o取约t qx
ªo精密称定 o加甲醇 xs °o置水浴中加热回流 t qx
«o放冷 o滤过 o精密吸取续滤液 ux °o水浴上蒸干 o
残渣用 xs h甲醇溶解并稀释至 ts °o放置过夜 o然
后用 s qwx Λ°微孔滤膜过滤 o取续滤液作为供试品
溶液 ∀
2 q2 缓冲盐的种类及浓度
根据文献报道 o选用 us °°²¯#p t磷酸盐缓冲
液k³z qsl o内含 ux h乙腈和 zx °°²¯ #pt胆酸钠
的溶液作为运行缓冲液 ∀结果人参皂苷 ¨o ¥t 未
能达到基线分离 o且 ¥t的柱效不高 ∀
在其他色谱条件保持不变的情况下 o用 ³ | qs
us °°²¯#pt硼酸2硼砂盐缓冲液 o进行分离 o取得了
较为满意的分离 ∀
缓冲盐浓度以 us °°²¯#pt为佳 o此时电流强
度小于 tss ° o浓度过高电流过大 o影响分离和重
现性 ∀
2 q3 缓冲液 ³ 值对分离的影响
取硼酸 !硼砂分别配制成浓度为 ws ° °²¯#p t
的甲 !乙 u种溶液 ∀取甲 !乙溶液按不同比例混合 o
#xvtt#
第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
测定 ³ 值 o再加入胆酸钠和有机改性剂乙腈 o结果
表明溶液 ³ 在 | qs左右变动时 o对分离影响不大 o
但当溶液 ³ 为 { qs时 ou组分峰形较差 ∀
2 q4 表面活性剂种类及浓度对分离的影响
在胶束电动毛细管色谱中 o十二烷基硫酸钠
k≥⁄≥l是用得最多的一种阴离子表面活性剂 o因此
也曾选用 ≥⁄≥作胶束 o进行试验 o结果基线波动很
大 o分离较差 ∀可能由于 ≥⁄≥在 usv ±°左右波长
处吸收较大造成 ∀比较了几种不同的表面活性剂 o
以胆酸钠为佳 ∀试验考察了不同浓度对迁移时间的
影响 o结果表明 o在相同条件下随着胶束浓度的增
加 o迁移时间增加 ∀
2 q5 有机改性剂对分离的影响
常用的有机添加剂有乙腈 !甲醇 !异丙醇 ∀实验
表明乙腈作为添加剂使用效果最佳 o有机溶剂添加
剂还能显著延长迁移时间 ∀
图 t 有机添加剂对分离的影响
通过对以上影响色谱分离诸因素的考察 o确定
最佳色谱条件如下 }运行缓冲液为 us °°²¯ #p t硼
酸2硼砂缓冲溶液k³ | qsl o内含 ys °°²¯#pt胆酸
钠 ous h乙腈 o操作电压 us ®∂ o温度 ux ε o检测波
长 usv ±° o压力进样 x ¶∀所得对照品溶液 !供试品
溶液色谱图见图 u !图 v ∀
3 含量测定方法的论证
3 q1 线性关系考察
精密称取 ¨o ¥t 对照品各适量 o加 xs h甲醇
溶解并稀释制成每t °分别含 s¨ qv{ os qz{ o
s q|{ ot quu ot qyx °ª和含 ¥ts qwu os q{v os q|{ o
t qvw ot qzx °ª的系列混合对照品溶液 o在上述色谱
条件下进样 x¶¨¦q后 o加压分离 o测得峰面积积分值 ∀
¨}Ψ s .ysz v Ξ n s .ssv s , ρ s q||| v ~ ¥t }
Ψ s .zuv u Ξ p s .ss| { , ρ s q||| z ∀结果表明 ¨
在 s qv{ ∗ t qyx ª#p t o ¥t在 s qwu ∗ t qzy ª#pt呈
良好的线性关系 ∀
图 u 对照品溶液色谱图
图 v 供试品溶液色谱图
t q人参皂苷 ¨ u q人参皂苷 ¥t
3 q2 精密度试验
取混合对照品溶液 o上机测定 x次 o每次压力进
样 x¶∀测得峰面积积分值 o计算 ≥⁄ ∀ ¨为
t qw h o ¥t为 t qy h ∀
3 q3 重复性试验
取同一批样品 x份 o按供试品溶液制备项下方
法进行操作 o即得同一产地的 x份供试品溶液 o上机
测定峰面积积分值 o按外标法计算含量 ¨o平均含
量为 { qzx °ª#ªp t ≥⁄为 u qw h o ¥t 平均含量为
ut qwt °ª#ªp t o ≥⁄为 t qy h ∀
3 q4 稳定性试验
取同一供试品溶液 o分别于配制后 s ot ov ox o{ o
uw «进样测定 o结果 ≥⁄k ν xl ¨为 u qt h o ¥t
为 u qv h ∀结果表明样品在 uw «内基本稳定 ∀
3 q5 加样回收率试验
取已测定含量的同一批西洋参粉末约 s qzx ªo
#yvtt#
第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
精密称定 o加入 ¨o ¥t对照品溶液kt qt{v ot qxuw ª
#p tl o置水浴上蒸干 o然后按供试品溶液制备项下
方法制成供试品液 o进样测定 o结果见表 t ou ∀
表 t 人参皂苷 ¨的加样回收率测定结果
样品量
rª
样品含量
r°ª
测得总量
r°ª
回收率
r h
平均回收
率r h
≥⁄
r h
s qzxw v y qyss t tu qwzz u || qv{
s qzwt u y qw{x x tu qusw t |y qzs
s qzvu w y qws{ x tu qtzv y |z qw| |z qu t qy
s qzyw x y qy{| w tu qwyu z |z qyv
s qzwy v y qxvs t tu qtwy v |w q|z
注 }对照品 ¨加入量均为 x q|tw °ª
表 u 人参皂苷 ¥t的加样回收率测定结果
样品量
rª
样品含量
r°ª
测得总量
r°ª
回收率
r h
平均回收
率r h
≥⁄
r h
s qzxw v ty qtvs v vs q{yx w |y qy{
s qzwt u tx q{y| t vs qz{t z |z q{x
s qzvu w tx qy{s z vs q|vw { tss qs| |z qz t q|
s qzyw x ty qvyz | vs q{zt v |x qty
s qzwy v tx q|z{ v vt qsvx z |{ q{s
注 }对照品 ¥t加入量均为 tx quwt °ª
3 q5 v批西洋参药材人参皂苷 ¨o ¥t含量的测定
取西洋参粉碎成细粉 o按供试液制备方法操作 o
在上述色谱条件下 o上机测定 ov批样品中人参皂苷
¨o ¥t的含量见表 v ∀
4 总结
溶解样品用溶剂 o经比较以 xs h甲醇为佳 o如
用甲醇溶解 o运行时易发生电流中断现象 o而用水作
溶剂时 o残渣中的挥发油不溶解 o溶液呈乳剂状 ∀本
表 v v批西洋参中人参皂苷 ¨o ¥t含量测定结果
编号 产地 r¨°ª#ªp t ¥t含量r°ª#ªp t
t 美国 { qzv ut qwv
u 加拿大 ts qtx t{ qsu
v 吉林通化 tu qt{ uu q{w
色谱条件取得成功分离的基础是选择了合适的缓冲
溶液及有机溶剂添加剂 o采用硼酸2硼砂缓冲溶液 o
可以调节分离选择性 ∀有机溶剂添加剂不仅能影响
电渗流和电泳速率 o更重要的是影响待测组分在胶
束和水相之间的分配系数 o实验证明乙腈是最为合
适的添加剂 ∀本法采用高达 us h量的乙腈来提高
分离度 ∀胶束电动毛细管色谱法测定西洋参中人参
皂苷 o具有样品前处理简单 o可以同时测定两种成
分 o所得色谱图信息丰富等优点 ∀可以用于西洋参
药材及其制剂的质量控制或品质评价 ∀
≈参考文献
≈t º¤ª¤°¬ ≥ o ≥º¤¥¨ ≠ o ¤®¤ª¤º¤ × q ¬¦¨¯¯¤µ ∞¯ ¦¨·µ²®¬±¨ ·¬¦
≤«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ ©²µ·«¨ ±¤¯¼¶¬¶²© ≤µ∏§¨ ⁄µ∏ª¶k ¶l ≥ ³¨¤µ¤2
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¶∏³³²µ· ±¤¯¼¶¬¶ ²© ¤ • ¬§¨ ¤±ª¨ ²© °«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯¶ ¤±§
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t||{ ot{ }{sz q
≈v 中国药典 q一部 qussst qt q
≈w 王 旭 o周富荣 q°≤ 法测定西洋参中人参皂苷的含量 q中国
中药杂志 ot||| ouwkwl }uuz q
≈x 孙文基 o郭耀武 o等 q国产西洋参中总皂苷及人参皂苷的含量考
察 q西北药学杂志 ot||z otuktl }tv q
∆ετερµινατιον οφ Γινσενοσιδεσ Ρε, Ρβt
ιν Παναξ θυινθυεφολιυσ βψ Μιχελλαρ Ελεχτροκινετιχ Χηροµ ατογραπηψ
≠ • ¬¨2©¨ ±ªo • ¬¨2¯¬¤±ª
k«¨¬¤±ª±¶·¬·∏¨ ©²µ⁄µ∏ª ≤²±·µ²¯ o ¤±ª½«²∏ vtsssw o«¨¬¤±ªo≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ¬¦¨¯¯¤µ¨¯ ¦¨·µ²®¬±¨ ·¬¦¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ k ∞≤l ·¨¦«±¬´∏¨ ©²µ·«¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©ª¬±¶¨±²¶¬§¨¶ ¨o
¥t¬± Παναξ θυινθυεφολιυσ º¤¶§¨ √¨¯²³¨ §¤±§√¤¯¬§¤·¨§q Μετηοδ : × «¨ ∞≤ º¤¶³¨µ©²µ° §¨¬± ¤ °¬¬¨ §¥∏©©¨µ¶²¯∏·¬²± ¦²±·¤¬±¬±ª
us °°²¯#p t ¥²µ¬¦¤¦¬§ous °°²¯#p t ¶²§¬∏° ·¨·µ¤¥²µ¤·¨ oys °°²¯#p t ¶²§¬∏° ¦«²¯¤·¨ k≤ l ¤±§us h ¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ ∏±§¨µ·«¨ ¤³2
³¯¬¨§√²¯·¤ª¨ ²©us ®∂ ¤·ux ε q׫¨ §¨·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨·« º¤¶usv ±° o·«¨ ¶¤°³¯¬±ª·¬°¨¬¶x ¶¨¦k«¼§µ²¶·¤·¬¦¬±¨¦·¬²±l qΡεσυλτ ανδ
Χονχλυσιον : × «¨ ¬¯±¨ µµ¤±ª¨ º¤¶s qv{ ∗ t qyx °ª# °¯ p t ©²µ ¨¤±§s qwu ∗ t qzy ª#p t©²µ ¥t q× «¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼©²µ ¨ º¤¶|z q
u h o ≥⁄ t qy h ¤±§·«¤·©²µ ¥t º¤¶|z qz h o ≥⁄ t q| h k ν xl q ׫¨ ³µ¨³¤µ¤·¬²± ²©¶¤°³¯¨¬¶ ¤¨¶¼ ¤±§·«¨ ¦«µ²°¤·²ªµ¤°
«¤¶°∏¦«¬±©²µ°¤·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] °≤∞~ª¬±¶¨±²¶¬§¨ ~ Παναξ θυινθυεφολιυσ ≈责任编辑 王康正
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