全 文 ：四物合剂对人红白血病细胞株
Žxyur„⁄ 多药耐药性的逆转作用研究
夏 蕾t o沈 朋u 3
kt q浙江大学 药学院 中药科学与工程学系 o浙江 杭州 vtssuz ~
u q浙江大学 医学院 附属第一医院 o浙江 杭州 vtsssvl
≈摘要  目的 }观察四物合剂对人红白血病细胞株 Žxyur„⁄ 多药耐药性的逆转作用 ∀方法 }以维拉帕米为阳性
对照 o××法观察耐药细胞株 Žxyur„⁄ 的耐药倍数及四物合剂的逆转倍数 ~采用反相高效液相色谱法k• °2‹°≤l检
测细胞内的 „⁄ 浓度 ~免疫荧光法测定细胞膜 °2糖蛋白k°ª³l表达 ∀结果 }四物合剂和 „⁄ 合用时 o对 Žxyur„⁄ 耐
药性的逆转倍数及细胞内的 „⁄ 含量比 „⁄ 单独使用时明显增高k Π s qstl ~但对 Žxyur„⁄ 细胞膜 °ª³表达的影
响差异不显著k Ё s qsxl ∀结论 }四物合剂在无毒性剂量时能逆转细胞株 Žxyur„⁄ 对 „⁄ 的耐药性 o但对细胞膜
°ª³表达影响不大 o其逆转作用可能与降低 °ª³药物外排作用 !增加细胞内药物浓度有关 ∀
≈关键词  人红白血病细胞株 Žxyur„⁄ ~多药耐药 ~四物合剂 ~⁄• 逆转
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswls{2sz|u2sw
多药耐药k°∏¯·¬§µ∏ªµ¨¶¬¶·¤±¦¨ o⁄• l是肿瘤细胞
抵制化疗药物攻击最重要的细胞防御机制 ∀ ⁄•
的肿瘤细胞在对一种抗肿瘤药物耐药的同时 o对其
他结构和作用机制不同的药物也产生耐药性 o这是
困扰肿瘤药物治疗的首要难题≈t ou  ∀目前经体外实
验证实的 ⁄• 逆转剂大多数具有剂量依赖性毒副
作用 o临床应用受到限制≈v  ∀临床研究显示 o中医药
对肿瘤的防治与康复具有重要作用≈w  o可协同化疗
药物发挥增效减毒的作用 ∀近年来 o部分活血化瘀
中药的活性成分被证实具有逆转肿瘤细胞 ⁄• 的
作用≈u  ∀因此 o从中药复方中寻找高效低毒的 ⁄•
逆转药物是提高化疗药物疗效的可行途径 o已有若
干相关研究报道≈x oy  ∀四物合剂由白芍 !川芎 !当归
和熟地黄 w味中药组成 o主治营血虚弱 ∀近年临床
观察表明 o它对肿瘤治疗具有增敏作用≈z  o而且能协
同阻断钙通道≈{  o这提示可能有逆转肿瘤细胞 ⁄•
的药效 ∀本实验证实 o四物合剂对人红白血病细胞
株 Žxyur„⁄ 多药耐药性具有逆转作用 o为进一步
发现其关键活性成分 o从中筛选出 ⁄• 逆转药物提
供了可能 ∀
≈收稿日期  ussv2tt2us
≈基金项目  浙江省中医药科研计划资助项目kussv≤szyl
≈通讯作者  3沈朋 oר¯ }ksxztl {zuvyxxz o ∞2°¤¬¯}¶«¨ ±³ƒ ½­∏q
§¨∏q¦±
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 细胞 人红白血病耐药细胞株 Žxyur„⁄
和敏感细胞株 Žxyu均由浙江大学药学院曾苏教授
惠赠 ∀
1 q1 q2 药物与试剂 四物合剂口服液k市购l }每支
ts °o含白芍 u qx ªo川芎 u qx ªo当归 u qx ªo熟地黄
u qx ªo四川新斯顿制药有限责任公司 o生产批号
sttxxx ~盐酸维拉帕米注射液k∂ • °l }x °ªr支 o上海
禾丰制药有限公司 o生产批号 stssx{ ~注射用盐酸阿
霉素k„⁄l }ts °ªr支 o浙江海正药业股份有限公
司 o生产批号 tvxxst ~注射用盐酸柔红霉素k⁄„˜l }
us °ªr瓶 o生产批号 ÷usstsutv ~以上药物均为临床
用药 ∀ • °Œ  §¨¬∏° tywsk• °Œ2tywsl }美国 ŠŒ…≤’2
…•公司 ~精制小牛血清k⁄¨©¬±¨ §…²√¬±¨ ≤¤¯©≥¨ µ∏°l }
uxs °r瓶 o׬¤±­¬±q ‹i≠ …¬²q ≤²o·§oׅ⁄ sstt
‹≠…~二甲基亚砜k⁄≥’l }xss °r瓶 o苏州工业园
区正兴化工研究院 ~噻唑蓝k ××l }t ªr瓶 o„≤• ’≥
’• Š„‘Œ≤≥~鼠抗人 °ª³单抗及羊抗鼠荧光标记二
抗 }≤‹∞Œ≤’‘~化学试剂均为分析纯 ∀
1 q1 q3 仪器 ≤’u培养箱 }’⁄∞vtttk׫¨µ°² ƒ²µ2
°¤l ~酶标仪 }⁄≠‘∞÷ • ∞∂∞„׌’‘ v qsw o • ÷ µ
⁄≠‘∞÷ ×∞≤‹‘’’ŠŒ∞≥ ~„±®¨ ÷p µ…低速平板离
心机 ~„±®¨ ׊p tyŠ高速台式离心机k上海安亭科
#u|z#
第 u|卷第 {期
ussw年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussw
学仪器厂l ~÷ • p {s„型旋涡混合器k上海仪器厂l ~
汉邦 ¬¦«µ²¶³«¨µ≤t{色谱柱 ~uy|x型 • ¤·¨µ¶高效液相
色谱仪 ~uwzx 型 ∏¯·¬Κ ƒ¯ ∏²µ¨¶¦¨±¦¨ ⁄¨ ·¨¦·²µk • ¤·¨µ¶
≤²°³¤±¼l ~∞×׏∞• „∞uws电子天平 ~’¯ ¼°³∏¶倒置
相差荧光显微镜 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 细胞培养 将 Žxyur„⁄ 细胞和 Žxyu细胞
常规置于 • °Œ2tyws培养液中k含 ts h灭活小牛血
清 o青霉素 ts万 ˜#pt o链霉素 tss °ª#ptl o在 vz
ε otss h湿度 o含 x h ≤’u的培养箱内悬浮培养 ∀
1 q2 q2 药物的细胞毒性测定及细胞耐药性实验 %
××法≈x  }取对数生长期的 Žxyur„⁄ 和 Žxyu细胞
kt ≅ tsz#ptl接种于 |y孔板内 o由低到高浓度k设 y
个浓度梯度l分别加入四物合剂ks qz ot qw ou q{ ox qy o
tt qu ouu qw °ª#ptl o∂ • °kt qux ou qx ox ots ous ows °ª#
ptl和 „⁄ kŽxyur„⁄ }s qyux ot qux ou qx ox ots ous
°ª#pt ~Žxyu }s qssyux os qstux os qsux os qsx os qt o
s qu °ª#ptl o每个浓度设 v个平行复孔 o并设空白
组k只加培养液 o不含细胞l及阴性对照组 o共同孵育
w{ «后 o更换新鲜培养液 o每孔加入 ××kx °ª#ptl
us ˏo继续培养 w «o平板离心机离心 kt uss µ#
°¬±pt ots °¬±l o弃上清液 o可见 ©²µ°¤½¤±蓝紫色结
晶 o加入 ⁄≥’ tss ˏo摇匀 o振荡 ts °¬±o在酶标仪
测定 xzs ±°处的吸光度kΑl ∀实验重复 v次 ∀按公
式ktl计算抑制率 o并推算药物的半数抑制率kŒ≤xsl o
依公式kul计算耐药倍数k• ¶¨¬¶·¤±·ƒ¤¦·²µo• ƒl }
抑制率k h l € 药物组 Α值 p空白组 Α值阴性对照组 Α值 p空白组 Α值 ≅ tss h ktl
• ƒ € Œ≤xsk耐药细胞株lr Œ≤xsk敏感细胞株l kul
1 q2 q3 细胞耐药性逆转实验 ××法 }取对数生长
期的 Žxyur„⁄ 和 Žxyu细胞kt ≅ tsz#ptl接种于
|y孔板内 o先加入无毒性剂量的四物合剂和 ∂ • ° otx
°¬±后由低到高浓度加入 „⁄ ky 个浓度梯度 o同
上l o每个浓度设 v个平行复孔 o并设空白及阴性对
照组 o其余方法同细胞耐药性实验 ∀实验重复 v次 ∀
按公式kvl计算逆转倍数k• √¨¨ µ¶¤¯ Œ±§¨¬o•Œl }
•Œ€ Œ≤xsk„⁄ 组lrŒ≤xsk逆转剂 n „⁄ 组l kvl
1 q2 q4 • °2‹°≤法测定细胞内的 „⁄ 含量 调整
Žxyur„⁄ 细胞浓度为 { ≅ ts{#pt o将细胞分成 w
组 }空白组k不加任何药物l ~加入终浓度为 ts °ª#
pt„⁄ ~加入终浓度为 u q{ °ª#pt的四物合剂k无
毒性剂量l otx °¬±后加入终浓度为 ts °ª#pt„⁄ ~
加入终浓度为 x °ª#pt ∂ • ° otx °¬±后加入终浓度
为 ts °ª#pt„⁄ ∀vz ε 摇床温育 v «o离心kw sss µ
#°¬±pt ox °¬±l后各组细胞以冷 °…≥液洗涤 v次 o加
入盐酸浓度为 s qv °²¯ #pt的 xs h乙醇溶液k消化
液lt °o置于 vz ε ox h ≤’u培养箱中消化过夜 o再
加入 s qt ª#pt柔红霉素 xs ˏ作为内标 o空白组另
加入 s qt ª#pt„⁄ xs ˏo离心kts sss µ#°¬±pt ots
°¬±l后取上清液用 ‹°≤ 测定细胞内 „⁄ 的含量 ∀
以空白组 „⁄ 峰面积为标准 o通过峰面积比值计算
„⁄ 相对含量 ∀色谱条件 }汉邦 ¬¦«µ²¶³«¨µ≤t{色谱
柱kw qy °° ≅ uxs °° ox Λ°l o流动相为甲醇2s qst h
醋酸水溶液kxsΒxsl o流速 t qs °# °¬±pt o柱温 vx
ε ouwzx型 • ¤·¨µ¶多波长荧光检测器k激发波长 w|x
±° o发射波长 xys ±°l ∀同法处理 Žxyu细胞 ∀
1 q2 q5 细胞膜 °ª³表达的检测≈| ots  取对数生长
期的 Žxyur„⁄ 和 Žxyu细胞kx ≅ tsz#ptl分别加
入无毒性剂量的四物合剂和 ∂ • °培养 w{ «o各设空
白组 ∀取各组细胞 us ˏkt ≅ tsts#ptl加入 t qs °ª#
pt的鼠抗人 °ª³单抗 us ˏo孵育 t «ks ∗ w ε l o°…≥
液洗涤 v次 o再加入 tΒus羊抗鼠荧光二抗 xs ˏo孵
育 t «ks ∗ w ε l o°…≥液洗涤 v次 o制成细胞悬液 o滴
片 o在荧光显微镜下观察 ∀实验重复 v次 ∀
1 q2 q6 实验数值以 ξ ? σ表示 o均数比较用 τ检验 ∀
2 结果
2 q1 Žxyur„⁄ 和 Žxyu细胞的耐药性测定
四物合剂的 Œ≤xs为 x qy °ª#pt左右 o∂ • °的 Œ≤xs
为 ts °ª#pt左右 o无耐药性 ∀ „⁄ 对 Žxyur„⁄
细胞的 Œ≤xs为 x qu{ °ª#pt左右 o但对 Žxyu细胞的
Œ≤xs为 s qsx{ °ª#pt左右 o耐药性为 |t qvx倍k表 tl ∀
因此本实验中四物合剂和 ∂ • °的浓度选择无毒性
剂量 o分别为 u q{ °ª#pt和 x °ª#pt ∀
表 t Žxyur„⁄ 和 Žxyu细胞的耐药性k ξ ? σ, ν € |l
药物
Œ≤xsr°ª#pt
Žxyu Žxyur„⁄
• ƒr倍数
„⁄ s qsxz { ? s qssx t x quz| | ? s qtxv u |t qvx
四物合剂 x qx|{ | ? s quxu u x q{sy | ? s qtvt | t qsw
∂ • ° ts qyy{ | ? s qtu{ v ts qtxu { ? s qttz | s q|x
2 q2 四物合剂和 ∂ • °对 Žxyur„⁄ 细胞耐药性的
逆转作用
四物合剂和 ∂ • °分别在 u q{ °ª#pt和 x °ª#
ptk无毒性剂量l时 o„⁄ 对 Žxyu细胞的 Œ≤xs影响
不明显k Ё s qsxl o但对 Žxyur„⁄ 细胞的耐药性有
明显逆转 o其 Œ≤xs分别为 s qyxu z °ª#pt和 s qyv{ w
#v|z#
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussw
°ª#pt o逆转倍数分别为 { qs|倍和 { quz倍k表 ul o
与无逆转剂的对照组相比 o差异显著k Π s qstl ∀四
物合剂和 ∂ • °逆转效果差异不显著k Ё s qsxl ∀
2 q3 细胞内阿霉素含量测定
表 u 四物合剂和 ∂ • °对 Žxyur„⁄ 细胞耐药性的逆转作用 k ξ ? σ, ν € |l
实验药物组成
Œ≤xsr°ª#pt
Žxyu Žxyur„⁄
•Œr倍数
Žxyu Žxyur„⁄
„⁄ k无逆转剂l s qsxz { ? s qssx t x quz| | ? s qtxv u p p
„⁄ n四物合剂ru q{ °ª#pt s qsxz t ? s qssz vtl s qyxu z ? s qstx xul t qst { qs|
„⁄ n ∂ • °rx °ª#pt s qsx| | ? s qssx ttl s qyv{ w ? s qss{ vul s q|y { quz
注 }与无逆转剂的对照组相比tl Ё s qsx oul Π s qstk表 v ow同l
在四物合剂 u q{ °ª#pt和 ∂ • ° x °ª#pt浓度
下 o对Žxyu细胞内的 „⁄浓度影响不大 k Π 
s qsxl ∀而 Žxyur„⁄ 细胞内 „⁄ 含量明显增加
k表vl o与无逆转剂的对照组相比 o差异显著k Π
s qstl ∀四物合剂和 ∂ • °的逆转效果无明显差异
k Ё s qsxl ∀
2 q4 细胞膜 °ª³表达的测定
蓝光下观察细胞膜荧光反应呈黄色环状 o按荧
表 v 细胞内阿霉素含量测定k ξ ? σ, ν € |l
实验药物组成
„⁄rΛª
Žxyu Žxyur„⁄
„⁄rts °ª#ptk无逆转剂l u qxxx v ? s qs{w w s qvwv | ? s qsux w
„⁄rts °ª#pt n四物合剂ru q{ °ª#pt u qxvz | ? s qsxz {tl u quuz | ? s qsww xul
„⁄rts °ª#pt n ∂ • °rx °ª#pt u qxst t ? s qsw| vtl u qvtx z ? s qtu{ uul
光的有无及强弱程度分为 w个等级 }s级k无荧光l o
´级k弱荧光l oµ级k中等荧光l o¶级k强荧光l ∀与
无逆转剂的对照组相比 o四物合剂和 ∂ • °对 Žxyur
„⁄ 细胞膜 °ª³表达的影响无显著差异k Ё s qsxl o
对 Žxyu细胞膜 °ª³表达的影响亦无显著差异k Ё
s qsx o表 wl ∀
3 讨论
阿霉素是常用于血液系统恶性肿瘤的化疗药
表 w 四物合剂和 ∂ • °对 Žxyur„⁄ 细胞膜 °ª³表达的影响k ξ ? σ, ν € |l h
实验药物
Žxyu
s级 ´级 µ级 ¶级
Žxyur„⁄
s级 ´级 µ级 ¶级
无逆转剂 y{ ? v uz ? u v ? t u ? t tt ? u tw ? t yv ? u tu ? u
四物合剂 yz ? vtl uz ? vtl w ? utl u ? ttl ts ? utl tw ? utl yw ? vtl tu ? utl
∂ • ° y| ? vtl uz ? utl u ? ttl u ? ttl tt ? utl tv ? utl yv ? utl tv ? utl
物 o肿瘤细胞的 ⁄• 会使其临床治疗失败 ∀ ⁄• 的
发生机制很复杂 o目前研究较多的是细胞膜上 °ª³
的过度表达≈v  ∀本实验结果显示 o在无毒性剂量
ku q{ °ª#ptl下 o尽管四物合剂只是部分逆转 Žxyur
„⁄ 细胞的耐药性k作用后 „⁄ 对 Žxyur„⁄ 细胞
的Œ≤xs高于 Žxyu细胞 oŽxyur„⁄ 细胞内的化疗药
物浓度低于敏感细胞 Žxyul o但仍可明显降低化疗药
物 „⁄ 对 Žxyur„⁄ 细胞的 Œ≤xs o同时明显提高
Žxyur „⁄细胞内的化疗药物 „⁄浓度 k Π 
s qstl o与阳性对照 ∂ • °kx °ª#ptl作用相比 o差异
不显著k Ё s qsxl ∀
这表明从中药复方中寻找有效的逆转药物是可
行的 ∀本实验结果同时表明 o四物合剂对 Žxyur„⁄
细胞膜 °ª³的表达无明显影响 o与无逆转剂的对照
相比差异不显著k Ё s qsxl o这提示四物合剂并不是
通过抑制细胞膜 °ª³的表达来实现逆转作用 ∀其逆
转机制可能是竞争细胞膜 °ª³的药物结合位点 o降
低药物外排作用 o从而增加细胞内化疗药物浓度 o实
现对肿瘤化疗的增效作用 ∀但具体逆转机制有待于
进一步从单细胞水平 o甚至分子水平展开探索和研
究 ∀
本实验采用 • °2‹°≤法测定细胞内化疗药物浓
度 o较之常用的荧光分光光度法和流式细胞仪法 o能
更好地消除内源性物质对测定的干扰 o定量更为准
确 ∀因为四物合剂为深棕色中药制剂 o故在实验中
采用离心 !洗涤及更换培养液等方法 o以避免对 ××
测定产生影响 ∀已有研究报道 o川芎嗪和丹皮酚在
体外实验均有逆转肿瘤细胞 ⁄• 的作用≈| ots  ∀但
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∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussw
是 o本实验室已完成的成分分析结果显示 o四物合剂
的主要成分为没食子酸 !糠醛 !芍药内酯苷 !芍药苷 !
东川芎内酯 Œo‹和苯甲酰芍药苷等 o并不含上述两
种活性成分≈tt  ∀这表明四物合剂对 ⁄• 的逆转作
用可能是由其他活性成分或活性成分配伍实现的 o
其关键活性成分的发现和协同作用规律还有待于进
一步研究 ∀
≈致谢  浙江大学医学院附属第一医院周琳和吴丽花
在 ××测定上给予帮助 ∀
≈参考文献 
≈t  …¬¨§¯ µ¨o•¬¨«° ‹ q≤¨¯ ∏¯¯¤µµ¨¶¬¶·¤±¦¨ ·²¤¦·¬±²°¼¦¬± ⁄¬± ≤«¬±¨ ¶¨
«¤°¶·¨µ¦¨¯¯ ιν ϖιτρο }¦µ²¶¶µ¨¶¬¶·¤±¦¨ µ¤§¬²¤∏·²ªµ¤³«¬¦¶·∏§¬¨¶q Χανχερ
Ρεσot|zs ovs kyl }ttzw q
≈u  胡凯文 o左明焕 q中药逆转肿瘤细胞多药耐药研究述评 q北京
中医药大学学报 ousss ouv kvl }vv q
≈v  戴 辉 o罗绍凯 q与逆转肿瘤多药耐药相关的研究进展 q国外
医学#输血及血液学分册 ot||| ouu kyl }vzt q
≈w  林洪生 q中医防治肿瘤的成绩与思考 q中国肿瘤 oussu ott
ktl }ty q
≈x  郭 勇 o谢长生 o冯正权 q复方藤梨根制剂体外对 ⁄• 细胞
株 Žxyur„⁄• 和 Žxyur∂ ≤• 细胞积聚和外排阿霉素k„⁄• l的影
响研究 q中国现代应用药学杂志 oussu ot| kwl }uy{ q
≈y  罗文纪 o虞荣喜 q中医药逆转白血病细胞多药耐药的研究近
况 q湖南中医杂志 ot||| otx kxl }xu q
≈z  张代钊 o于尔辛 o余桂清 o等 q中医药对肿瘤放化疗的增敏减
毒作用 q中国中西医结合杂志 ot||u ov kul }tvx q
≈{  陈泽涛 o董 倩 q肿瘤细胞多药耐药及其中医药研究 q山东中
医药大学学报 ot||| ouv kxl }vvu q
≈|  李建华 o杨佩满 q川芎嗪逆转 Žxyur„⁄ 细胞多药耐药性的研
究 q现代中西医结合杂志 ousst ots ktxl }twsx q
≈ts  孙慧君 o王晓琦 o于丽敏 o等 q丹皮酚对 ⁄• 逆转作用的研
究 q解剖科学进展 ousss oy ktl }x| q
≈tt  «¤±ª ‹ o¶«¨ ± ° o ≤«¨ ±ª ≠ ≠ qŒ§¨ ±·¬©¬¦¤·¬²± ¤±§§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©
·«¨ °¤­²µ¦²±¶·¬·∏¨±·¶¬±·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ °¨ §¬¦¬±¨ ≥¬2 • ∏2פ±ª¥¼
‹°≤ ¦²∏³¯ §¨ º¬·« ⁄„⁄ ¤±§ ∞≥Œ2≥ q ϑ Πηαρµαχευτ Βιοµεδ Αναλψ2
σισoussw ovwkvl }zsx q
Στυδιεσ ον τηε εφφεχτσ οφ Σιωυ Μιξτυρε ον ρεϖερσινγ
µ υλτιδρυγ ρεσιστανχε οφ ηυµαν ερψτηροχψτελευκεµιχ χελλλινε Κxyu/ Α∆ Μ
÷Œ„ ¨¬t o≥‹∞‘°¨ ±ªu
(t . ∆επαρτµεντ οφ Χηινεσε Μεδιχινε Σχιενχε ανδ Ενγινεερινγ , Χολλεγε οφ Πηαρµαχευτιχαλ Σχιενχεσ , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ,
Ηανγζηου vtssuz , Χηινα ;
u . Τηε Φιρστ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ, Χολλεγε οφ Μεδιχινε , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtsssv , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ©¨©¨¦·¶²© ≥¬º∏ ¬¬·∏µ¨ ²± µ¨√ µ¨¶¬±ª·«¨ °∏¯·¬§µ∏ª µ¨¶¬¶·¤±¦¨ k ⁄• l ²© «∏°¤± µ¨¼·«µ²¦¼·¨
¯¨ ∏®¨ °¬¦¦¨¯¯ ¬¯±¨ Žxyur„⁄ q Μετηοδ : •¬·«√ µ¨¤³¤°¬¯ ¶¨·¤¶¤³²¶¬·¬√¨¦²±·µ²¯ o ×× ¤¶¶¤¼ º¤¶¤³³¯¬¨§·² √¨¤¯∏¤·¨·«¨ µ¨¶¬¶·¤±·©¤¦·²µ²©
¦¨¯¯ ¬¯±¨ Žxyur„⁄ ·²¤±·¬¦¤±¦¨µ§µ∏ª¶¤±§·«¨ µ¨√ µ¨¶¤¯ ¬±§¨¬²©≥¬º∏ ¬¬·∏µ¨ ²± ⁄• ²©·«¨ ¦¨¯¯¶q׫¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©¤§µ¬¤°¼¦¬±k„⁄l
¬±·«¨ ¦¨¯¯¶º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§¥¼µ¨√ µ¨¶2³«¤¶¨ «¬ª«³¨µ©²µ°¤±¦¨ ¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼q׫¨ ¬°°∏±²©¯∏²µ¨¶¦¨±¦¨ ° ·¨«²§º¤¶∏¶¨§·² §¨·¨µ°¬±¨ ·«¨
¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©°2ª¯∏¦²³µ²·¨¬±k°ª³l ²± ¦¨¯¯ ° °¨¥µ¤±¨ q Ρεσυλτ : • «¨ ± „⁄ º¤¶¦²°¥¬±¨ §º¬·«≥¬º∏ ¬¬·∏µ¨ o¬·¶¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬±·«¨ ¦¨¯¯¶¤±§
·«¨ µ¨√ µ¨¶¤¯ ¬±§¨¬²© ⁄• º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ «¬ª«¨µ·«¤±·«²¶¨ ²©¥¯¤±®¦²±·µ²¯k Π s qstl q‹²º √¨ µ¨o·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©°ª³²± ¦¨¯¯ ° °¨¥µ¤±¨
¶«²º §¨ ¬¯·¯¨§¬©©¨µ¨±¦¨ k Ё s qsxl q Χονχλυσιον : Œ± ¦¤¶¨ ²©±²±¦¼·²·²¬¬¦§²¶¨ o≥¬º∏ ¬¬·∏µ¨ ¶«²º §¨¶¬ª±¬©¬¦¤±·¨ ©©¨¦·²± µ¨√ µ¨¶¬±ª ⁄• ²©
¦¨¯¯ ¬¯±¨ Žxyur„⁄ q׫¨ ©¨©¨ ¦·°¬ª«·¥¨ µ¨ ¤¯·¨§·² §¨¦µ¨¤¶¬±ª ©¨©¯∏¬²©¤±·¬¦¤±¦¨µ§µ∏ª¶¬±·«¨ ¦¨¯¯¶¤±§¬±¦µ¨¤¶¬±ª·«¨¬µ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬±·«¨
¦¨¯¯¶q ‘¨√ µ¨·«¨¯¨ ¶¶o¬·«¤§±²¬±©¯∏¨ ±¦¨ ²±·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©°ª³²± ¦¨¯¯ ° °¨¥µ¤±¨ q
[ Κεψ ωορδσ] ¦¨¯¯ ¬¯±¨ Žxyur„⁄ ~ °∏¯·¬§µ∏ªµ¨¶¬¶·¤±¦¨ ~≥¬º∏ ¬¬·∏µ¨ ~µ¨√ µ¨¶¬²± ²© ⁄•
≈责任编辑 古云侠 
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