全 文 ：素的含量 q南京中医药大学学报 ot||{ otwkwl }ut| q
≈v  钱士辉 o朱玲英 !袁丽红 q柑橘不同入药部位的成分比较与评
价 q中药材 ousst ouwk|l }yvu q
≈w  钱士辉 o杨念云 o植 飞 o等 q不同产地陈皮药材的质量初步分
析 q基层中药杂志k中药材 Š„°研究与实践版l oussu oukul }
wx q
Στυδψ ον τηε Αντιχανχερ Αχτιϖιτιεσ (Ιν ςιϖο) οφ τηε Εξτραχτ φροµ
Χιτρυσρετιχυλατα Βλανχο ανδ ΙτσΙνφλυενχε ον Σαρχοµ α2t{s Χελλσ Χψχλε
±Œ„‘≥«¬2«∏¬t o • „‘Š ≠¬2¬¬¤±u o≠ „‘Š ‘¬¤±2¼∏±t o ≠ ˜„‘¬2«²±ªv
kt q¬¤±ª¶∏°µ²√¬±¦¬¤¯ „¦¤§¨ °¼ ²© ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨  §¨¬¦¬±¨ o ‘¤±­¬±ªutssu{ o¬¤±ª¶∏ o≤«¬±¤~
u q¬¤±ª¶∏Œ±¶·¬·∏·¨ ²© ≤¤±¦¨µ• ¶¨¨¤µ¦«o‘¤±­¬±ªutsss| o¬¤±ª¶∏ o≤«¬±¤~
v q ‘¤±­¬±ªŒ±§∏¶·µ¼ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o ‘¤±­¬±ªutsss| o¬¤±ª¶∏o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτσ] Οβϕεχτιϖε:ײ¶·∏§¼·«¨ ¤±·¬¦¤±¦¨µ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·©µ²° Χιτρυσρετιχυλατα ιν ϖιϖο q Μετηοδ : „±·¬¦¤±¦¨µ¤¦2
·¬√¬·¬¨¶º µ¨¨ ·¨¶·¨§ º¬·«·∏°²µ°²§¨¯ ιν ϖιϖοk≥¤µ¦²°¤2t{s ¦¨¯¯¶o‹ ³¨¶¦¨¯¯¶o∞„≤ ¦¨¯¯¶¬°³¯¤±·¨§¬± °¬¦¨l q Ρεσυλτ : × «¨ ¬¨·µ¤¦·©µ²°
Χιτρυσρετιχυλατᶫ²º §¨ °¤µ®¨ §¤±·¬¦¤±¦¨µ¤¦·¬√¬·¬¨¶²± ≥¤µ¦²°¤2t{s ¦¨¯¯¶¤±§ ‹ ³¨¶¦¨¯¯¶¬°³¯¤±·¨§¬± °¬¦¨ o«¤§±² °¤µ®¨ §¤±·¬2
¦¤±¦¨µ¤¦·¬√¬·¬¨¶²± ∞„≤ ¦¨¯¯¶¬°³¯¤±·¨§¬± °¬¦¨ ¤±§¬±§∏¦¨§¤³²³·²¶¬¶²© ≥¤µ¦²°¤2t{s ¦¨¯¯ q Χονχλυσιον : × «¨ ¬¨·µ¤¦·©µ²° Χιτρυσ
ρετιχυλατα º¬¯¯ «¤√¨³µ²°¬¶¬±ª³µ²¶³¨¦·¶¤¶¤± ¤±·¬¦¤±¦¨µ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ o¥∏·©∏µ·«¨µ¶·∏§¬¨¶º¬¯¯ ¥¨ ±¨ §¨¨ §q
[ Κεψ ωορδσ] Χιτρυσ ρετιχυλατα …¯ ¤±¦²~ ¬¨·µ¤¦·~¤±·¬¦¤±¦¨µ¤¦·¬√¬·¼ ιν ϖιϖο ~¦¨¯¯¶¦¼¦¯¨~¤³²³·²¶¬
≈责任编辑 方文贤 
榄仁叶氯仿提取物的
护肝作用及其对肝脏 Œ2y表达的抑制作用
汤新慧t o高 静t o王燕萍t o徐力致t o赵晓宁t o徐 强u
kt q南京大学 医学院 药物开发研究所 o江苏 南京 utss|v ~
u q南京大学 生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 o江苏 南京 utss|vl
≈摘要  目的 }研究榄仁树叶氯仿提取物k× ≤≤∞l对 ≤≤ w¯诱导的小鼠肝损伤的防护作用及其机制 ∀方法 }以不
同剂量 × ≤≤∞kus oxs otss °ª#®ªp tl给小鼠连续灌胃 x §后 o腹腔注射 ≤≤ w¯ ouw «后测定小鼠血清 „× 活力变化 ∀
同时 o运用 • ×2°≤ • 半定量分析肝脏 Œ2y °• ‘„量的变化并观察肝组织形态学改变 ∀结果 }小鼠腹腔注射 ≤≤ w¯ uw
«后 o¶„× 水平显著升高 o为对照组的 x qy倍k Π s qstl ∀而各剂量 × ≤≤∞均可显著抑制 ≤≤ w¯ 诱导的小鼠 ¶„×
水平的上升 o其中 otss °ª#®ªp t × ≤≤∞组小鼠 ¶„× 水平恢复至对照组水平 ∀形态学观察表明 o× ≤≤∞明显减轻
≤≤ w¯引起的小鼠肝细胞索排列紊乱 !肝细胞肿胀及嗜酸性变等 o且能对抗甚至逆转 ≤≤ w¯引起的急性肝损伤小鼠肝
脏 Œ2y °• ‘„含量的升高 ∀结论 }× ≤ ≤∞具有很好的护肝作用 o且其机理可能与抑制 Œ2y基因的过度表达有关 ∀
≈关键词  肝损伤 ~Œ2y ~ × ≤ ≤∞ ~≤≤ w¯ ~小鼠
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvltu2tty|2sx
榄仁树 Τερµιναλια χαταππα q系诃子属植物 o
≈收稿日期  ussv2sz2ts
≈基金项目  江苏省自然科学基金资助项目k…Ž||sxtl
≈通讯作者  高静 ר¯ }ksuxl vx|vvzw ƒ¤¬}ksuxl vx|vvys
∞2°¤¬¯}­¬±ªª¤²ƒ ±­∏q¨§∏q¦±
广泛分布于东南亚一带 o当地民间常用榄仁叶防治
肝炎 !肝腹水 !肝癌等各种肝病 o效果显著 ∀事实上 o
该地区肝病发病率甚低 ∀已有报道指出 o榄仁叶水
提物具护肝作用≈t2v  o但其有效部位及药理机制的
研究未见系统报道 ∀
#sztt#
第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
本实验室工作表明 o榄仁叶氯仿提取物k Τ .
χαταππα Λ . χηλοροφορµ εξτραχτ , ΤΧΧΕ)中三萜类化
合物含量最高 ,达 23 .8 % ∀而三萜类物质能有效对
抗多种急慢性肝损伤≈w2y  ∀本实验采用 ≤≤ w¯诱导的
急性肝损伤模型 o结合形态学观察和生化指标的测
定 o检测 × ≤≤∞的护肝作用 o并采用 • ×2°≤ • 半定
量分析法研究 × ≤≤∞对急性肝损伤小鼠肝脏 Œ2y
°• ‘„水平的影响 o探讨 × ≤≤∞的药理机制 ∀
1 材料与方法
1 q1 实验动物
Œ≤ • 雄性小鼠 oyv只 o体重kus qs ? u qsl ªo购于
东南大学医学院动物中心 ∀动物质检号 }|zssv ∀
1 q2 实验材料
× ≤≤∞的提取制备 }榄仁叶收集于中国云南 o由
中国科学院江苏植物所姚淦教授鉴定 ∀取干燥榄仁
叶 t qt ®ªo加乙醇回流提取 o提取液浓缩后用氯仿萃
取 o干燥 o得 vu qs ª × ≤≤∞∀ ≤≤ w¯为上海长江化学试
剂厂产品 o用植物油配成 s qtx h ~联苯双酯 o购自北
京协和制药厂 o用生理盐水配成 ts ª#pt ~„× 试
剂盒购自南京建成生物工程研究所 ~×µ¬³∏µ¨ 为
• ²¦«¨ 产品 ~• ×2°≤ • 所用试剂均为 °µ²° ª¨¤产品 ~
°≤ • 引物由上海申友生物工程公司合成 ∀
1 q3 实验方法
1 q3 q1 ≤≤ w¯诱导的肝损伤模型
小鼠 tx 只分 x 组 o分别于腹腔注射 s qtx h
≤≤ w¯ s qt °#ts ªp t ∀s otu ot{ ouw ovy «后处死动
物 o取肝组织做组织学切片 o运用 • ×2°≤ • 方法测
定肝脏 Œ2y °• ‘„ 的表达量 ∀
小鼠 w{只分 y组 o对照组以生理盐水灌胃 s qw
°#§p t o腹腔注射植物油每只 s qt °#ts ªp t ~
≤≤ w¯组及给药组kus oxs otss °ª#®ªp tl分别以等量
生理盐水及不同浓度 × ≤≤∞ s qw °#§p t连续灌胃 x
§o第 y天腹腔注射 s qtx h ≤≤ w¯ s qt °#ts ªp t o联
苯双酯组以 uss °ª#®ªp t联苯双酯灌胃 s qw °#
§p t o于第 y 天腹腔注射 s qtx h ≤≤ w¯ s qt °#ts
ªp t ∀uw «后处死动物 o取血清测 ¶„× o取肝组织
制作组织学切片 o并测定肝脏中 Œ2y °• ‘„的表达
量 ∀
1 q3 q2 酶活力的测定 按 „× 试剂盒说明测
¶„× 活性 ∀
1 q3 q3 形态学观察 取肝组织 w h甲醛固定 o‹2∞
染色 o观察肝组织形态学变化 ∀
1 q3 q4 • ×2°≤ • 方法测定 Œ2y °• ‘„ 表达量 总
• ‘„提取 }取新鲜肝组织 ws °ªo剪碎 o加 t °
×µ¬³∏µ¨ o按常规方法提取总 • ‘„ o加适量的 ⁄∞°≤
处理水溶解 ∀琼脂糖凝胶电泳观察 t{ ≥ 和 u{ ≥
带 o在紫外分光光度计上测 ’⁄uys和 ’⁄u{s值 o计算
• ‘„浓度和纯度 ∀
逆转录 }细胞总 • ‘„ k相当于 t Λªl o ²¯¬ª²
k§×ltx s qx Λªo„  ∂ x ≅ ¥∏©©¨µw ˏo• ±¤¶¬± ws ˜ o
加 ⁄∞°≤ 水至 tx ˏ∀zs ε ox °¬±变性 o在冰上加
w ≅ §‘×° ku qx °°²¯#p tl w ˏo„  ∂ • × t qx ˏ
ktsy ˜#ptl共 us ˏ∀wu ε ys °¬±o|x ε x °¬±o
w ε 温育 op us ε 保存 ∀
°≤ • 扩增 }以看家基因 Β2¤¦·¬± kvw{ ¥³l为内
参 o其 x.端引物为 }× ŠŠ „„× ≤≤ × Š× Š Š≤ „ × ≤≤
„× Š „„„ ≤ ov. 端引物为 }× „„ „„≤ Š≤ „ Š≤ ×
≤ „Š × „„ ≤ „Š × ≤≤ Š ~目的基因 Œ2ykyss ¥³l的
x. 端引物为 ≤ × Š Š× Š „≤ „ „≤≤ „≤ Š Š≤≤ × × ≤
≤≤ × „ ~v. 端引物为 } „× Š ≤ × × „ŠŠ ≤ „× „„≤
Š≤ „ ≤ × „ ŠŠ× × ∀反应体系为 }ts ≅ ¥∏©©¨µu qx
ˏo ª≤ u¯kux °°²¯ #ptl u ˏow ≅ §‘×° ku qx
°°²¯ # ptl u ˏo °µ¬° µ¨t ts ³°²¯ o °µ¬° µ¨u ts
³°²¯ o¦⁄‘„ 模板 u ˏo פ´ 酶 u qx ˜ o加 §§‹u’
至 ux ˏo加 xs ˏ石蜡油 ∀反应程序为 }|x ε ou
°¬±变性 o|w ε oxs ¶~x{ ε oxs ¶~zu ε ot °¬±~
反应时 o先加 Œ2y的引物 ots个循环后再加 Β2¤¦·¬±
的引物 o再持续反应 vs 个循环 ∀ zu ε ow °¬±延
伸 ow ε 保存 ∀
1 q4 统计方法
进行单因素方差分析k„‘’ ∂ „l o组间采用 θ
检验进行比较 ∀
2 结果
2 q1 × ≤≤∞对 ≤≤ w¯肝损伤小鼠体内 ¶„× 活力的
影响
由表 t可看出 o小鼠腹腔注射 s qtx h ≤≤ w¯ 后 o
¶„× 水平显著增高 o为对照组的 x qy倍 o有显著差
异k Π s qstl ∀预先灌胃 × ≤≤∞后 o各剂量 × ≤≤∞
均可完全对抗上述¶„× 活性的升高 o且在本实验
× ≤≤∞浓度范围内 o随着 × ≤≤∞浓度的增加对¶„×
水平的抑制率随之增加 o即呈剂量依赖关系 o至 tss
°ª#®ªp t × ≤≤∞则可对抗 ≤≤ w¯ 诱发的 ¶„× 的显
著增高 o且抑酶强度高于联苯双酯 ∀
2 q2 × ≤≤∞显著改善 ≤≤ w¯损伤的小鼠肝组织结构
#tztt#
第 u{卷第 tu期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
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表 t × ≤≤∞对 ≤≤ w¯诱导
的肝损伤小鼠 ¶„× 活力的影响k ξ ? σl
组别 剂量r°ª#®ªp t 动物数 ¶„× 活性r˜#p t
对照组 y uus ? xt
≤≤ w¯组 y tuxu ? tzvtl
≤ ≤ w¯ n × ≤ ≤∞ us z x{w ? yxul
≤ ≤ w¯ n × ≤ ≤∞ xs z vv| ? xuu ovl
≤ ≤ w¯ n × ≤ ≤∞ tss z uu{ ? vyu ov owl
≤ ≤ w¯ n联苯双酯 uss y uws ? xvu ov owl
注 }与对照组比较 tl Π s qst 与 ≤≤ w¯组比较 ul Π s qst
与 us °ª#®ªp t × ≤ ≤∞组比较 vl Π s qst 与 xs °ª#®ªp t × ≤ ≤∞组
比较 wl Π s qst
肝切片观察 ≤≤ w¯ 作用 uw «后肝细胞索紊乱 o
细胞界限不清 o肝细胞肿胀 o出现气球样变细胞 o并
出现大量嗜酸小体和炎症细胞浸润 ∀
预先用 × ≤≤∞灌胃的小鼠损伤后肝组织结构
比损伤组有明显改善 ∀低剂量组小鼠肝细胞已排列
成索 o只有少量嗜酸性变细胞 o肝细胞轻度肿胀 o偶
见炎症细胞 o中剂量和高剂量组细胞界限清楚 o肝细
胞排列规则 o与联苯双酯保护的小鼠肝组织无差异
k图 tl ∀
2 q3 × ≤≤∞对 ≤≤ w¯肝损伤小鼠肝脏 Œ2y °• ‘„
图 t小鼠肝脏组织学切片图 k‹∞ ≅ tssl
„ q正常对照组 …qs qtx h ≤ ≤ w¯ s qt°#tsªp t ≤ ≤ w¯损伤组 ≤ qtss °ª#®ªp t × ≤ ≤∞组 ⁄quss °ª#®ªp t联苯双酯组
水平的影响
2 q3 q1 ≤≤ w¯损伤后不同时间小鼠肝脏 Œ2y °• ‘„
的表达量的变化 ≤≤ w¯损伤后 s otu ot{ ouw ovy «小
鼠肝脏 Œ2y °• ‘„ 的表达量见图 u ∀对 °≤ • 产物
凝胶电泳结果进行扫描分析 o用 Œ2y和 Β2¤¦·¬±条带
扫描值之比分析 Œ2y °• ‘„ 含量的变化 ∀实验发
现 o在 s ∗ uw «范围内 o随着 ≤≤ w¯ 损伤时间的延长 o
小鼠肝脏 Œ2y °• ‘„ 含量上升 ~uw «后又开始下
降 o因此损伤后 uw «为 Œ2y基因表达的最高峰 ∀故
本实验选取损伤后 uw «作为本实验的检测时间 ∀
2 q3 q2 × ≤≤∞对 ≤≤ w¯损伤小鼠肝脏 Œ2y °• ‘„水
平的影响 由图 v可看出 o≤≤ w¯损伤 uw «后小鼠肝
脏 Œ2y °• ‘„含量急剧上升 o而不同剂量 × ≤≤∞能
对抗 ≤≤ w¯引起的 Œ2y °• ‘„ 的增加k Π  s qstl o
us oxs °ª#®ªp t剂量组均可明显降低 ≤≤ w¯引起的Œ2
y °• ‘„的增加 o至 tss °ª#®ªp t剂量组即可完全对
抗 ≤≤ w¯引起的 Œ2y °• ‘„的增加 o使之降低至损伤
前水平 o与 uss °ª#®ªp t联苯双酯效果一致 ∀
图 u ≤≤ w¯损伤后不同时间小鼠肝脏
Œ2y °• ‘„表达量的变化
 q⁄‘„ 分子量标记
3 讨论
本实验表明 us oxs otss °ª#®ªp t × ≤≤∞均能有
效抑制 ≤≤ w¯ 诱导的小鼠急性肝损伤 ¶„× 水平上
升 o且呈明显剂量依赖关系 ∀形态学观察发现 × ≤2
#uztt#
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
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≤∞能明显改善 ≤≤ w¯ 引起的肝细胞气球样变 o减轻
中央静脉周围淋巴细胞 !枯否氏细胞浸润 o减轻甚至
完全消除 ≤≤ w¯引起的嗜酸性变 o且效价强度高于联
苯双酯 ∀上述结果提示 o榄仁叶氯仿提取物 × ≤≤∞
可能是榄仁叶护肝作用的有效部位 ∀
图 v × ≤≤∞对 ≤ ≤ w¯诱导的小鼠肝脏
Œ2y °• ‘„水平增高的抑制作用
 q ⁄‘„ 分子量标记 ‘q对照组 ≤ q ≤ ≤ w¯组
ׯ qus °ª#®ªp t × ≤ ≤∞组 × ° qxs °ª#®ªp t × ≤ ≤∞组
׫qtss °ª#®ªp t × ≤ ≤∞组 quss °ª#®ªp t联苯双酯组
急性肝损伤时枯否氏细胞和窦周细胞大量增
殖 o从而产生 Œ2y等多种细胞因子 o这些因子调节
着炎症和修复过程≈z o{  ∀Œ2y具有增强自然杀伤细
胞杀伤靶细胞的能力 o促进吞噬细胞发挥其细胞毒
效应 ∀中性粒细胞集中在中央静脉周围肝小叶内 o
Œ2y进一步诱导其发生形变 !脱颗粒和溶酶体酶释
放 o其释放的蛋白酶能直接损害肝细胞 o同时也使脂
质代谢产物增多 o氧自由基产生过多 o从而形成逐级
放大的连级反应 o介导肝细胞损害 o引起血清转氨酶
上升 ∀本实验首次报道了 × ≤≤∞对 ≤≤ w¯ 急性肝损
伤小鼠肝脏 Œ2y °• ‘„ 表达量的影响 ∀即在 ≤≤ w¯
诱导的肝细胞损伤过程中 o随着Œ2y表达量的增加 o
肝细胞损伤加重 ∀而一定剂量的 × ≤≤∞能抑制甚至
完全抑制 ≤≤ w¯引起的小鼠肝脏中 Œ2y °• ‘„ 表达
量的升高 ∀提示 × ≤≤∞抗肝损伤作用可能与抑制
Œ2y过量表达有关 ∀
≈参考文献 
≈t  ≤«¨ ± ° ≥ o¬ ‹ o¬∏ × ≠ o ·¨¤¯ q ƒ²¯®  §¨¬¦¬±¨ Τερµιναλια
χαταππα q¤±§¬·¶ ¤­²µ×¤±±¬± ≤²°³²±¨ ±·°∏±¬¦¤¯¤ª¬± o¤µ¨ ∞©2
©¨ ¦·¬√¨ „ª¤¬±¶·…¯¨°¼¦¬±2¬±§∏¦¨§Š ±¨²·²¬¬¦¬·¼¬± ≤«¬±¨ ¶¨ ‹¤°¶·¨µ
’√¤µ¼ ≤¨¯ ¶¯q ≤¤±¦¨µ¨··ousss otxu kul }ttx q
≈u  ¬± ≤ ≤ o ≤«¨ ± ≠ o¬±   o ·¨¤¯ q ∞√¤¯∏¤·¬²± ²©·«¨ „±·¬²¬¬2
§¤±·¤±§ ‹ ³¨¤·²³µ²·¨¦·¬√¨ „¦·¬√¬·¼ ²© Τερµιναλια χαταππα q
„°  ≤«¬±  §¨ot||z oux kul }txv q
≈v  徐力致 o高 静 o朱 俐 o等 q榄仁树叶提取物k•2|{l对实验性肝
损伤的防护作用 q南京大学学报 k自然科学l ousss ovy kul }
t|z q
≈w  ¬∏o¬∏≠ o ¤² ± o ·¨¤¯ q׫¨ ∞©©¨ ¦·²©ts ×µ¬·¨µ³¨ ±²¬§≤²°2
³²∏±§¶²± ∞¬³¨µ¬° ±¨·¤¯ ¬√ µ¨Œ±­∏µ¼¬± ¬¦¨ qƒ∏±§¤° „³³¯ ײ¬2
¬¦²¯ ot||w ktl ouu }vw q
≈x  ¬∏µ¤ ‘o ¤·¶∏°²·² ≠ o ¬¼¤¬µ¬≥ o ·¨¤¯ q °µ²·¨¦·¬√¨ ∞©©¨ ¦·¶²©
×µ¬·¨µ³¨ ±¨ ≤²°³²∏±§¶ „ª¤¬±¶··«¨ ≤¼·²·²¬¬¦¬·¼ ²© ≤¤§°¬∏° ¬±
‹ ³¨Šu ≤¨¯ ¶¯q  ²¯ °«¤µ° ot||| oxy kyl }tvuw q
≈y  ¬∏o¬∏ ≠ o Ž¯¤¤¶¶¨± ≤ ⁄q°²µ·¨¦·¬√¨ ∞©©¨ ¦·²© ’¯¨ ¤±²¯¬¦„¦¬§
„ª¤¬±¶·≤«¨ °¬¦¤¯2¬±§∏¦¨§ „¦∏·¨ ‘¨¦µ²·¬¦¬√ µ¨Œ±­∏µ¼ ¬± ¬¦¨ q
„¦·¤ °«¤µ°¤¦²¯ ≥¬± o||x oty kul }|z q
≈z  „§µ¬¤±¤≥  o„±¤ • • o„µ·∏µ² ° o ·¨¤¯ q≤«°¬¦¤¯ ¼¯ Œ±§∏¦¨§¬√2
µ¨• ª¨¨ ±¨ µ¤·¬²± ¬¶ ≤«¤µ¤¦·¨µ¬½¨ § ¥¼ ≥³¨ ¦¬©¬¦Œ2y Š ±¨¨ ∞¬³µ¨¶2
¶¬²±q ‹ ³¨¤·²¯²ª¼ • ¶¨ot||| otx ktl }ts q
≈{  „§µ¬¤±¤≥  o∏¤± „ …q ⁄¬©©¨ µ¨±·¬¤¯ Š ±¨¨ ∞¬³µ¨¶¶¬²± ²© °µ²2¬±2
©¯¤°°¤·²µ¼ ≤¼·²®¬±¨ ¶¬± „¦∏·¨ ¤±§ ≤«µ²±¬¦¬√ µ¨Œ±­∏µ¼ q ‹ ³¨¤2
·²¯²ª¼ • ¶¨ousss oty kvl }t{t q
Ηεπατοπροτεχτιϖε Εφφεχτσ οφ Χηλοροφορµ Εξτραχτ φροµ Λεαφ οφ
Τερµιναλια χαταππα ιν Ρελατιον το τηε Ινηιβιτιον οφ Λιϖερ ΙΛ2y Εξπρεσσιον
× „‘Š ÷¬±2«∏¬t o Š„’ ¬±ªt o • „‘Š ≠¤±2°¬±ªt o ÷ ˜ ¬2½«¬t o ‹ „’ ÷¬¤²2±¬±ªt o ÷ ˜ ±¬¤±ªu
kt q≥¦«²²¯ ²©  §¨¬¦¬±¨ oŒ±¶·¬·∏·¨ ²© ¤·¨µ¬¤  §¨¬¦¤o ‘¤±­¬±ª ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o ‘¤±­¬±ªutss|v o¬¤±ª¶∏o≤«¬±¤~
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#§p tl©²µx §¤¼¶o¤±§·«¨ ¶„× ¤¦·¬√¬·¼ ²© °¬¦¨ º¤¶§¨·¨¦·¨§uw «²∏µ¶¤©·¨µ·«¨ ¬±·µ¤³¨µ¬·²±¨ ¤¯ ¬±­¨¦·¬²± ²© ≤≤ w¯ ²± ·«¨ x ·« §¤¼ q
 ¤¨±º«¬¯¨ oŒ2y °• ‘„ ¯¨ √¨¯ º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ ∏¶¬±ª·«¨ ° ·¨«²§²© • ×2°≤ • q „±§·«¨ ¬¯√ µ¨°²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ ¦«¤±ª¨¶º µ¨¨ ¤¯¶² ²¥2
¶¨µ√ §¨q Ρεσυλτ : ¶„× ¤¦·¬√¬·¼ º¤¶µ¨ °¤µ®¤¥¯¼¬±¦µ¨¤¶¨§kx qy ©²¯§l ¤©·¨µ·«¨ ¬±­¨¦·¬²± ²© ≤≤ w¯ q ‹²º √¨ µ¨o º¬·«²µ¤¯ ³µ¨·µ¨¤·° ±¨·²©
× ≤≤∞o¦«¤±ª¨¶¬± ¶„× º µ¨¨ §²¶¨2§¨ ³¨ ±§¨ ±·¯¼ µ¨√ µ¨¶¨§q ’± ·«¨ ²·«¨µ«¤±§o¶¬ª±¬©¬¦¤±·¬±¦µ¨¤¶¨ ¬± Œ2y °• ‘„ ¯¨ √¨¯ ¬±§∏¦¨§¥¼
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第 u{卷第 tu期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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§¬·¬²± o«¬¶·²¯²ª¬¦¤¯ ¦«¤±ª¨¶¶∏¦«¤¶·«¨ ¬±©¬¯·µ¤·¬²± ²©±∏° µ¨²∏¶¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ¦¨¯¯¶¤±§«¨ ³¤·²¦¼·¨ ¶º¨¯ ¬¯±ª¬±¬±­∏µ¨§ °¬¦¨ º µ¨¨ ©¨©¨ ¦2
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≈责任编辑 方文贤 
黄芪对新生鼠乏氧缺血脑损伤
海马区神经保护作用的研究
贾瑞 t o蒋 犁t o乔立兴t o陈平圣u
kt q东南大学 临床医学院 o江苏 南京 utsss| ~ u q东南大学 基础医学院 病理科 o江苏 南京 utsss|l
≈摘要  目的 }探讨新生儿乏氧缺血脑损伤k‹Œ…⁄l后 o脑细胞损伤的机制和黄芪对海马区的神经保护作用 ∀
方法 }用新生大鼠建立新生儿 ‹Œ…⁄的模型 o于缺氧后不同时间点取脑 o分别行组织病理学检查并计数海马 ≤ „t区
神经细胞死亡率 !半定量逆转录2聚合酶反应k• ×2°≤ • l检测 ¦¤¶³¤¶¨2vk天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶2vl°• ‘„ 表达 !三
等分迷宫测试成熟大鼠学习记忆能力 ∀分 ≥«¤°组 !模型组 !黄芪治疗组观察并对比上述指标 ∀结果 }模型组结扎
侧海马 ¦¤¶³¤¶¨2v °• ‘„表达于 ‹Œ后 y «轻度升高 ouw «达高峰 ow{ «后下降 ox §和 z §时恢复至基础水平 ∀黄芪
组 ‹Œ后结扎侧海马神经细胞死亡率明显降低 !¦¤¶³¤¶¨2v °• ‘„的表达峰值降低了 ww h ∗ wy h k°• ‘„l o成熟大鼠
的学习记忆能力明显提高 ∀结论 }黄芪对未成熟脑 ‹Œ…⁄后海马部位有明显的神经保护功能 o此功能与抑制 ¦¤¶2
³¤¶¨2v的表达有关 ∀
≈关键词  脑缺氧 ~脑缺血 ~半胱氨酸蛋白酶 ~凋亡 ~黄芪
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvltu2ttzv2sw
围产期缺氧缺血脑损伤k‹Œ…⁄l是造成新生儿
死亡 !智力低下及长期神经系统功能紊乱的一个重
要因素 ∀大脑边缘系统特别海马部位既是缺氧缺血
的易损区≈t  o又是学习记忆的关键部位≈u  ∀最新的
研究显示 }凋亡在未成熟脑 ‹Œ…⁄的病理进程中起
着重要作用≈t ov  o而 ¦¤¶³¤¶¨2vk天冬氨酸特异酶切的
半胱氨酸蛋白酶2vl是凋亡级链反应中的关键效应
子 o应用 ¦¤¶³¤¶¨ 抑制剂对 ‹Œ…⁄具有神经保护功
能≈w  ∀本研究将黄芪用于未成熟脑 ‹Œ…⁄的治疗 o
一方面检测其对海马 ‹Œ后¦¤¶³¤¶¨2v °• ‘„表达水
平的影响 o另一方面通过迷宫观察黄芪对 ‹Œ…⁄的
成熟鼠学习记忆能力的影响 ∀此两方面将同时探讨
黄芪对未成熟脑 ‹Œ…⁄近期 !远期的神经保护功能
≈收稿日期  ussv2sz2sz
≈基金项目  江苏省科委社会发展基金资助项目k…≥2|{sx{l
≈通讯作者  ר¯ }ksuxlvwtzs|y ∞2°¤¬¯}µ½­¬¤|x|| ƒ ¼¤«²²q
¦²° q¦±
及保护机制 o为临床探索新生儿 ‹Œ…⁄的治疗提供
实验依据 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
出生 z §的同窝 ≥ ⁄大鼠 o雌雄不限 o体重 tu ∗
tw ªo由复旦大学提供鼠种 o东南大学医学院实验动
物中心繁殖 ∀共 tu|只k造模过程中死亡 tx只l o随
机分成 v组 }假手术k≥«¤°l组 t{只 o模型组 w{只 o
黄芪治疗组 w{只 ∀按照 •¬¦¨≈x 方法制备 ‹Œ…⁄模
型 }将新生鼠乙醚吸入麻醉后仰卧位固定 ∀颈正中
切口 o游离左侧颈总动脉 ow2s号线结扎 o恢复 u ∗ v
«后置于 u sss °密闭容器中 ovz ε 恒温 ∀以 u 
#°¬±p t的速度输入 { h ’u o|u h ‘u 混合气体 u «o
取出后置于原饲养环境中 ∀ ≥«¤°组仅游离左颈总
动脉但不结扎 ∀所有新生鼠均由母鼠代养 ∀
黄芪注射液由成都地奥九泓制药厂生产k批号
susvs|zl o规格为每支 ts °o含生药 us ª∀治疗组
幼鼠于造模后即刻及每日同一时间腹腔注射此药
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第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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