全 文 ：干姜超临界 ≤ u提取物质量控制的研究
孟 青t 3 o冯毅凡t o郭晓玲t o陈耕夫t o蔡健聪u
kt q广东药学院 药物研究所 o广东 广州 xtsuuw ~
u q深圳东方泰格生物医药有限公司 o广东 深圳 xt{swsl
≈摘要 目的 }建立干姜超临界 ≤ u 提取物的有效部位质量控制的方法 ∀方法Β 采用薄层色谱法 o以石油醚
kys ∗ |s ε l2醋酸乙酯2冰醋酸k{ΒvΒs1ul为展开剂 ox h香草醛硫酸溶液为显色剂 o对本品进行鉴别 ~并采用紫外双
波长分光光度法和高效液相色谱法对本品进行总酚及有效成分 y2姜酚的含量测定 ∀结果Β 总酚在 |1yy{ ∗ v{1yz
Λª#°p t呈良好线性关系kρ s1||| |l o平均回收率为 |z1z h o ≥⁄ t1|y h ~y2姜酚在 s1us ∗ u1ss Λª呈良好线性
关系kρ s1||| |l o平均回收率为 |z1| h o ≥⁄ s1vv h ∀结论Β方法准确 o灵敏 !专属性强 o可作为该原料的全面质
量控制标准 ∀
≈关键词 干姜提取物 ~总酚 ~y2姜酚
≈中图分类号 u{v ~ u{w1u ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussxlts2szxs2sv
≈收稿日期 ussw2sw2ux
≈通 讯 作者 3 孟 青 o ר¯ Β ksusl vwszwtwy oƒ¤¬}ksusl
vwszwtwy ~∞2°¤¬¯Β°tstsyv ut¦±1¦²°
干姜超临界 ≤ u提取物为姜科植物姜 Ζινγιβερ
οφφιχιναλε ²¶¦1 的干燥根茎经超临界 ≤ u 萃取所
得到的油状液体 ∀它主要含姜辣素类化合物及少量
的挥发油 o姜辣素主要成分为 y2姜酚≈t ou ky2ª¬±2
ª¨µ²¯l 及其分解产物姜烯酚 k¶«²ª¤²¯ l !姜酮
k½¬±ª¨µ²±¨ l和姜萜酮k½¬±ª¬¥¨µ²±¨ l等 o经药理学研究
表明其具有抗氧化 !抑制胃粘膜损伤 !增加胆汁分泌
等作用 ∀作为中药新药行气利胆的主要原料之一 o
其辣味物质含量高低对药用功效有重要影响 ∀本试
验通过利用紫外双波长分光光度法 !°≤ 测定总
酚 !y2姜酚的含量 o同时结合薄层色谱鉴别对干姜超
临界 ≤ u提取物进行全面的质量控制研究 o结果令
人满意 o是一个可行的质量控制方法 ∀
1 仪器和材料
岛津 ∂ p uust紫外分光光度计 ~• ¤·¨µ¶xtx
p uw{z 高效液相色谱仪 ~y2姜酚对照品k自制 o含量
为 ||1u h l ∀干姜提取物 v 批 ok批号 sututu o
sututv osvstuzl ∀
2 方法与结果
211 鉴别
取干姜提取物 us °ª于 t °量瓶中 o用醋酸
乙酯溶解并定容至刻度为供试液 ~另取 y2姜酚对照
品 w °ª于 t °量瓶中 o用醋酸乙酯溶解并定容至
刻度作为对照液 ~再取干姜对照药材 u1s ª加 ux °
石油醚kys ∗ |s ε l超声提取 ts °¬±o过滤 o水浴蒸干 o
残渣加 t °醋酸乙酯溶解作为对照药材液 ∀吸取上
述 v种溶液各 u Λo分别点于同一块以 s1x h ≤ ≤2
¤为粘合剂的硅胶 薄层板上 o以石油醚kys ∗ |s
ε l2醋酸乙酯2冰醋酸k{ΒvΒs1ul为展开剂 o预饱和 us
°¬±o展开 o取出 o晾干 o喷以 x h香草醛硫酸溶液 o加热
至斑点显色清晰 ∀供试品色谱中 o在与对照品及对照
药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点 ∀
212 总酚的含量测定
21211 测定波长的选定 分别将 y2姜酚对照液和
干姜提取物样品溶液于 uss ∗ yss ±°波长进行扫
描 o结果干姜提取物与对照品在 uss ∗ vss ±°波长
具有相同形状的吸收曲线 o为扣除样品溶液的背景
吸收 o本实验选用 uuv1s ±°k峰l及 uxz1x ±°k谷l
为测定波长 o测定 ϖ Α( ϖ Α Αuuv1s p Αuxz1xl ∀
21212 供试品的制备 对照品溶液的制备 }精密称
取 y2姜酚对照品适量 o加无水乙醇溶解制成每 t °
含 us Λª的溶液 o作为对照品溶液 ∀
供试品溶液的制备 }精密称取本品 ux °ªo置 xs
°量瓶中 o加无水乙醇溶解并定容 o摇匀 ∀精密吸
取 v1s °o置 xs °量瓶中 o加无水乙醇至刻度 o
摇匀 o即得 ∀
21213 精密度试验 取上述供试品液 o于波长
#sxz#
第 vs卷第 ts期
ussx年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vs o¶¶∏¨ ts
¤¼ oussx
uuv1s ouxz1x ±°处连续测定 y次 o测得 ϖ Α的 ≥⁄
s1x h ∀
21214 稳定性试验 取供试品液 o每隔 ts °¬±o于
波长 uuv1s ouxz1x ±°处测定并计算 ϖ Α o结果显示
在 {s °¬±内 o其 ≥⁄小于 s1y h o样品溶液具有良
好的稳定性 ∀
21215 标准曲线的制备 精密吸取 |y1y{ Λª#°pt
y2姜酚对照品溶液 t1s ot1x ou1s ou1x ov1s ov1x ow1s
°o分别置 ts °量瓶中 o各加无水乙醇至刻度 o摇
匀 ∀在 uuv1s ouxz1x ±°波长处分别测定吸收度 o以
ϖ Α为纵坐标 o含量为横坐标 o绘制标准曲线 o得回
归方程为 ϖ Α s1stt yw n s1sus vuΧoρ s1||| |∀
表明总酚在 |1yy{ ∗ v{1yzu Λª#°pt呈线性关系 ∀
21216 重复性试验 精密称取干姜提取物 y份约
ux °ªo按/供试品溶液0项下制备 ∀在 uuv1s ouxz1x
±°波长处测定并计算 o测得总酚的平均含量为
zz1u h o ≥⁄ u1u h ∀
21217 加样回收率 精密称取 x份的干姜提取物
样品各约 us °ªo分别准确加入 y2姜酚对照品 tu1s|
°ªo置 ux °量瓶中 o加无水乙醇至刻度 o摇匀 ∀精
密吸取 t1s °o置 xs °量瓶中 o加无水乙醇至刻
度 o摇匀 o依法测定 ∀测定结果见表 t ∀
表 t 干姜提取物中总酚加样回收率
称样量
r°ª
样品含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
≥⁄
r h
t| qvs tw q|t uz qsz tss qy
t| quy tw q{{ uy qxv |y qw
t{ qy{ tw qwv ux q|| |x qy |z qz u qs
t{ q{w tw qxx uy qvx |z qy
t| qsz tw qzv uy qx| |{ qt
注 }加入量均为 tu1s| °ª
21218 v批样品总酚含量测定 精密称取各批号
干姜提取物约 ux °ªo按/供试品溶液0 项下制备 o
依法测定 o结果见表 u ∀
表 u 干姜提取物总酚含量 h
批号 含量
sututu zz qv
sututv zz qt
svstuz zz qs
213 y2姜酚的含量测定
21311 色谱条件 ⁄¬¤°²±¶¬¯× ° ≤t{柱kw1y °° ≅
uss °° ox Λ°l o流动相甲醇2水ky{Βvul o检测波长
u{s ±° o理论塔板数按 y2姜酚峰计应不低于 t xss ∀
21312 对照品溶液的制备 精密称取 y2姜酚对照品
ux1sy °ªo置 ux °量瓶中 o加甲醇溶解并定容 o即得
含量为 t1ssu w °ª#°pt o摇匀 ∀精密吸取上述溶液
t °o置 ts °量瓶中 o加甲醇溶解并定容 o摇匀 o制
成含量为 s1tss u °ª#°pt的对照品液 ∀
21313 供试品溶液的制备 精密称取本品 ux °ªo
用甲醇溶解并定容至 xs °o摇匀 o过滤 o即得 ∀
21314 线性关系考察 精密吸取含量为 s1tss u
°ª#°p t的 y2姜酚对照品溶液 u oy ots otu oty ous
Λ进样 o以进样量kΛªl为横坐标 o峰面积为纵坐标 o
得 y2姜酚的回归方程 }Α t1zww ≅ tsz Χn v1w{z ≅
tsx oρ s1||| | ∀表明 y2姜酚在 s1us ∗ u1s Λª呈
良好线性关系 ∀
21315 精密度试验 精密吸取含量为 s1tss u °ª#
°pt对照品溶液 ts Λo连续进样 y次 o ≥⁄s1|x h ∀
21316 重复性试验 取同一批号本品 y份 o精确称
定 o照/供试品溶液0 项下制备试验 o ≥⁄ s1ww h ∀
21317 稳定性试验 取样品溶液 o在 s ou ow oy o{ o
tu «分别进行测定 o测得 ≥⁄ s1zu h o表明样品在
配制 tu «内测定 o稳定性良好 ∀
21318 回收率测定 精密称取本品 x 份约 tu1x
°ªo分别加入 y2姜酚对照品 u1yw| °ªkt1vuw x °ª#
°p t ou °l o置 xs °量瓶中 o加甲醇溶解并定
容 o摇匀 ∀依法测定 ∀测定结果见表 v ∀
表 v 干姜提取物中 y2姜酚加样回收率
称样量
r°ª
样品含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
≥⁄
r h
tu qts u qy|u x qu{x |z q|
tt q|v u qyxw x quxw |{ qt
tt qss u qww{ x qsv| |z q{ |z q| s qvv
tt q|w u qyxz x quyt |{ qv
tu qut u qztz x qu|{ |z qx
注 }加入量均为 u1yw| °ª
21319 样品含量测定 分别精密称取 v个批号的
干姜提取物适量 o照/供试品溶液0制备项下试验 o测
定结果见表 w o色谱图见图 t ∀
表 w 样品中 y2姜酚含量 h
批号 含量
sututu uu qu
sututv uu qw
svstuz uu qv
3 讨论
311 超临界 ≤ u 萃取是一种不同于传统中药提
#txz#
第 vs卷第 ts期
ussx年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vs o¶¶∏¨ ts
¤¼ oussx
图 t y2姜酚及干姜提取物 °≤ 图
1y p姜酚对照品 ~
1 干姜提取物 ~t1y2姜酚
取的新技术 o它具有无毒 !无污染 o能够有效地从干
姜中提取有效成分 o所得提取物总酚超过 zs h o其
中 y2姜酚的含量达到 us h以上 ∀
312 姜的酚性成分非常复杂 o难以通过测定每一种
成分来达到控制提取物的质量 ∀通过测定总酚及其
中 y2姜酚的含量 o结合薄层鉴别的方式 o建立了可
靠 !灵敏 !专属性强的控制该提取物质量的方法 ∀
313 文献报道≈w 用紫外分光光度法直接测定干姜
浸膏中总酚的方法 o由于干姜超临界 ≤ u 提取物成
分非常复杂 o除了酚性成分有紫外吸收还有其共存
物的干扰 o难以直接测定 o为了尽量排除其他非酚类
成分的干扰 o选择了双波长法来进行总酚的测定 ∀
≈参考文献
≈t 江苏新医学院 q中药大辞典 1 上册 q上海 }上海科学技术出版
社 ot|{y qzt q
≈u 中国医学科学院药物研究所 q中药志 q第二册 q北京 }人民卫
生出版社 ot||v quu{ q
≈v 陈耕夫 o郭晓玲 o孟 青 q干姜化学成分分析 q氨基酸和生物
资源 oussu ouwkul }x q
≈w 张 勤 o周学敏 q干姜浸膏中总酚的含量测定方法 q天然产物
研究与开发 ot||{ otsktlΒ wx q
Στυδψ ον θυαλιτψστανδαρδ οφ εξτραχτσφροµ Ρηιζοµ α Ζινγιβερισ
βψσυπερχριτιχαλφλυιδ εξτραχτιον
∞ ±¬±ªt oƒ∞ ≠¬2©¤±t o ÷¬¤²2¯¬±ªt o ≤ ∞ ±¨ª2©∏t o ≤ ¬¤±2¦²±ªu
(t . Ινστιτυτε οφ ∆ρυγ Ρεσεαρχη , Γυανγδονγ Χολλεγε οφ Πηαρµ αχψ, Γυανγζηου xtsuuw , Χηινα ;
u . Σηενζηεν Εαστ Τιγερ Βιολογιχαλ Μεδιχινε Χο . Λτδ1 , Σηενζηενγ xt{sws , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¶·¤±§¤µ§²© ¬¨·µ¤¦·¶©µ²° «¬½²°¤ ¬±ª¬¥¨µ¬¶¥¼ ¶∏³¨µ¦µ¬·¬¦¤¯ ≤ u ©¯∏¬§ ¬¨·µ¤¦2
·¬²±q Μετηοδ : × «¨ ¬¨·µ¤¦·¶º µ¨¨ ¬§¨ ±·¬©¬¨§¥¼ ×≤ q ׫¨ ·²·¤¯ ³«¨ ±²¯¶¤±§·«¨ y2ª¬±ª¨µ²¯ º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ §∏¤¯2º¤√¨¯ ±¨ª·« ∂
¶³¨ ¦·µ²³«²·²° ·¨µ¼ ¤±§ °≤ ¶¨³¤µ¤·¨¯ ¼ q Ρεσυλτ : × «¨ µ¨¦²√ µ¨¼ ²©·²·¤¯ ³«¨ ±²¯¶ º¤¶|z1z h k ≥⁄ u1s h l q × «¨ ¬¯±¨ ¤µµ¤±ª¨ ²© y2
ª¬±ª¨µ²¯ ¬¶s1us2u1s Λªo·«¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶|z1z h k ≥⁄ u1s h l qΧονχλυσιον } × «¨ ° ·¨«²§¬¶¦²±√ ±¨¬¨±·©²µ¤ª²²§µ¨¶²¯∏2
·¬²± ¤±§¦¤± ¥¨ ∏¶¨§©²µ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²© ¬¨·µ¤¦·¶©µ²° «¬½²°¤ ¬±ª¬¥¨µ¬¶q
[ Κεψ ωορδσ] ¬¨·µ¤¦·¶©µ²° «¬½²°¤ ¬±ª¬¥¨µ¬¶~·²·¤¯ ³«¨ ±²¯¶~y2ª¬±ª¨µ²¯
≈责任编辑 刘
作者更正
本刊 ussx年第 vs卷第 z期 xv|页表 t中 o¶³zs灰度值 o单纯缺血实验组应为 tww1st ? u1uytl o葛根素干预实验组应为
tu|1wu ? z1sxu ovl ∀
#uxz#
第 vs卷第 ts期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤¼ oussx