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Effect of danshensu, protocatechualdehyde and Danshen injection on calciumion concentration in cytoplasm of human erythrocytes

丹参注射液及其活性成分丹参素、原儿茶醛对人红细胞胞浆Ca2+浓度影响的实验研究



全 文 :¶°²²·« °∏¶¦¯ 1¨ Ηψπερτενσιον ot||u ouskul }tu|1
≈z  …¨ ¤± o… °1 ≤¯ ¤¶¶¨¶²©¦¤¯¦¬∏°¦«¤±±¨ ¶¯1 Αννυ ΡεϖΠηψσιολot|{| oxt }
vyz1
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±¨ ¶¯¬± ¤µ·¨µ¬¤¯ ¶°²²·« °∏¶¦¯ 1¨ Αµ ϑ Πηψσιολot||x ouy{ }≤z||1
≈|  • ¬¯¯¬¤° oƒ 1 Œ²±¦«¤±±¨ ¶¯¤±§√¤¶¦∏¯¤µ·²±¨ 1 Ηψπερτενσιον ousss ovx
kul }tzv1
≈ts  苗维纳 o沈映君 o曾晓荣 o等 1 葛根素对豚鼠心室肌细胞钾离
子通道的影响 1 中国应用生理学杂志 oussu ot{kul }txx1
≈tt  张广钦 o郝雪梅 o周培爱 o等 1 葛根素抑制小鼠海马 ≤„t区神
经元瞬间外向钾电流和延迟整流钾电流 1 中国药理学报 o
usst ouu kvl }uxv1
Ενδοτηελιυµ2ινδεπενδεντ ϖασορελαξαντ εφφεχτ οφ πυεραριν ον ρατ τηοραχιχ αορτα
⁄’‘Š Ž¤±t oׄ’ ±¬¤±2°¬±t o ÷Œ„ ±¬¤±ªu o≥‹„‘±¬2¬¬¤±u o°„‘Š∏²2¥¬¤²t
(t1 ∆επαρτµεντ οφ Χαρδιοϖασχυλαρ, Τηε Φιρστ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ Σχηοολ οφ Μεδιχινε , Ηανγζηου vtsssv , Χηινα ;
u1 ∆επαρτµεντ οφ Πηψσιολογψ, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ Σχηοολ οφ Μεδιχινε , Ηανγζηου vtsssv , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ √¤¶²µ¨ ¤¯¬¤±·¨©©¨¦·²©³∏¨µ¤µ¬±¬±µ¤·¤²µ·¬¦µ¬±ª¶¤±§·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶°1 Μετηοδ : ׫¨ ¬¶²¯¤·¨§
·«²µ¤¦¬¦¤²µ·¬¦µ¬±ª¶²©°¤¯¨≥³µ¤ª∏¨2⁄¤º¯ ¼¨µ¤·¶º µ¨¨ °²∏±·¨§²±·«¨ ²µª¤± ¥¤·«¤±§·«¨ ¦²±·µ¤¦·¬¯¨ µ¨¶³²±¶¨¶²©·«¨ √ ¶¨¶¨¯ º µ¨¨ µ¨¦²µ§¨§1 Ρε2
συλτ : °∏¨µ¤µ¬±¦²°³¯ ·¨¯¨ ¼ µ¨ ¤¯¬¨ §·«¨ ¦²±·µ¤¦·¬²±¶¬±§∏¦¨§¥¼ ³«¨ ±¼¯ ³¨«µ¬±¨ ¬±¤¦²±¦¨±·µ¤·¬²±2§¨ ³¨ ±§¨ ±·°¤±±¨ µ¬± ±¨§²·«¨ ¬¯∏°2¬±·¤¦·¤±§ ±¨2
§²·«¨ ¬¯∏°2§¨ ±∏§¨§µ¤·¤²µ·¤o¥∏·¬·«¤§±² ©¨©¨¦·²±·«²¶¨ ³µ¨¦²±¶·µ¬¦·¨§¥¼ ¤«¬ª«¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©³²·¤¶¶¬∏° ¦«¯²µ¬§¨ kŽ≤¯ oys °°²¯#ptl1
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·µ¤¨·«¼¯¤°°²±¬∏° ow2¤°¬±²³¼µ¬§¬±¨ ¥∏·±²·ª¯¬¥¨ ±¦¯¤°¬§¨ 1 Χονχλυσιον : °∏¨µ¤µ¬±¬±§∏¦¨¶¤± ±¨§²·«¨ ¬¯∏°2¬±§¨ ³¨ ±§¨ ±·µ¨ ¤¯¬¤·¬²±¬± µ¤·¤²µ·¬¦
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·¬²± ²©·«¨ ³²·¤¶¶¬∏° ¦«¤±±¨ ¶¯kŽ∂ ¤±§…Ž¦¤o¥∏·±²·Ž„×°l1
[ Κεψ ωορδσ] ³∏¨µ¤µ¬±~¤²µ·¬¦µ¬±ª~Α2¤§µ¨±¨ µª¬¦µ¨¦¨³·²µ~³²·¤¶¶¬∏° ¦«¤±±¨ ¯
≈责任编辑 方文贤 
≈收稿日期  ussv2s|2t{
≈通讯作者  3沈玲红 oר¯ }ksutlyvuys|vs2uvuw o∞2°¤¬¯}¶«¨ ±¯¬±ª«²±ªƒ ° §¨°¤¬¯1¦²°1¦±
丹参注射液及其活性成分丹参素 !原儿茶醛
对人红细胞胞浆 ≤¤u n浓度影响的实验研究
沈玲红t 3 o王彬尧t o王长谦t o谢秀兰t o
俞国瑞u o姚中一u o朱元龙u o杨葆津u
kt1上海第二医科大学 附属仁济医院 心内科 o上海 usssst ~
u1上海本草生物医学工程研究所 o上海 ussswsl
≈摘要  目的 }探讨丹参水溶性部位钙拮抗作用的主要有效成分 ∀方法 }采用荧光探针 ƒ∏µ¤2u定量分析法 o分
别测定丹参注射液及其活性成分丹参素 !原儿茶醛对离体健康成人红细胞胞浆 ≤¤un浓度的影响 ∀结果 }丹参素和
原儿茶醛均有降低成人红细胞胞浆 ≤¤un浓度的作用 o并表现出剂量依赖性 o二者合并用药 o药效相加 o作用与丹参
注射液相似 ∀结论 }丹参素和原儿茶醛可能是丹参注射液钙拮抗作用的主要有效成分 ∀
≈关键词  丹参注射液 ~丹参素 ~原儿茶醛 ~钙离子 ~红细胞
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlts2s|{w2sx
#w{|#
第 u|卷第 ts期
ussw年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ ts
’¦·²¥¨µoussw
丹参注射液是活血化瘀中药丹参 Σαλϖια µιλτιορ2
ρηιζα …ª¨ 1的水溶性成分提取物 o增强红细胞的变形
能力 !改善微循环是其重要药理机制之一 ∀红细胞
的变形性与其胞浆 ≤¤u n浓度密切相关 o笔者已经报
道丹参注射液能够降低健康成人红细胞胞浆 ≤¤u n
浓度≈t  o本研究旨在进一步探讨丹参注射液的 u种
活性成分丹参素和原儿茶醛的钙拮抗作用及其相互
关系 ∀
1 材料与方法
111 材料
健康成人红细胞 o随机选择门诊体检人员 o男性
ux ∗ wx岁 o女性 us ∗ ws岁 o排除心 !脑 !肝 !肾等疾
病 o查血液流变学指标k全血黏度 !血浆黏度 !红细胞
压积l正常 ∀
112 试剂 !药物和仪器
ƒ∏µ¤2ur„ o⁄≥’ 和异博定k∂ µ¨¤³¤°¬¯l购自美
国 ≥¬ª°¤公司 o其余试剂均为国产分析纯 ~丹参注射
液k上海第一制药厂 o每 t °相当于生药含量 t1x
ªo批号 sssvsul ~丹参素k复旦大学上海医学院天然
药化教研组 o归一化法测定含量  || h l ~原儿茶醛
k中国药品生物制品检定所l ~高效液相色谱仪
k°¤µ®¬± ∞¯ °¨ µŒ±·¨µªµ¤µ≤ ≥¼¶·¨° tss o≤2tu ≤²°³∏·¬±ª
Œ±·¨µªµ¤·²µl ~• ƒxws型荧光分光光度计k日本岛津公
司生产l ∀
113 方法≈u ov 
11311 药物和试剂的配制 应用高效液相色谱法
测定丹参注射液中丹参素和原儿茶醛的含量 o根据
测定结果分别用双蒸水配制丹参素k⁄≥t{ul }w1|u
°ª#°ptk相当于丹参素钠盐 x1zu °ª#°ptl ~原儿
茶醛k°≤„⁄l }s1{s °ª# °pt ~⁄≥t{ur°≤„⁄混合物
k⁄r°l }⁄≥t{u w1|u °ª#°pt o°≤„⁄ s1{s °ª#°pt o
备用 ∀丹参注射液 }用双蒸水按实验所需浓度稀释 ~
异博定k∂ µ¨¤³¤°¬¯l }用双蒸水配成 t °°²¯ #pt o备
用 ∀缓冲液 }‘¤≤¯ tuv °°²¯ #pt oŽ≤¯ x °°²¯ #pt o
ª≤¯ u t °°²¯#pt o≤¤≤¯ u t1v °°²¯#pt oŠ≥ ts °°²¯#
pt o‹ ³¨¨¶ux °°²¯#pt o³‹ z1w ~ƒ∏µ¤2ur„ 贮备液 }
t °°²¯ #ptk用 ⁄≥’ 溶解后分装 o置于 p us ε 备
用l ∀
11312 红细胞悬液制备 新鲜抗凝全血k抗凝剂Β
血液为 tΒ| o抗凝剂成分 ) ) ) 柠檬酸 u1zv h o柠檬酸
钠 w1w{ h o葡萄糖 u h l ous ε 下离心kzxs µ#°¬±pt ox
°¬±l o弃上层血浆及白细胞层 o吸出沉积红细胞 o用
缓冲液稀释ktrtsl后洗涤k离心 oxvsµ#°¬±pt ox °¬±o
us ε lv次 o最后配成 t h比容的红细胞悬液 ∀
11313 ƒ∏µ¤2ur„ 负载和荧光测定 取 u份红细胞
悬液各 xss ˏot份k„管l加药k对照组加入等量双
蒸水l o另 t份k…管l加入等量双蒸水 o均在 vz ε 下
孵育 ts °¬±o然后进行荧光剂负载 o„管加入 ƒ∏µ¤2ur
„ks1x Λ°²¯#ptl o…管加入等量 ⁄≥’溶液 o均在
vz ε 下孵育 wx °¬±o最后用缓冲液稀释至 s1t h比
容 o再加入 ±≤¯ ukt °°²¯#ptl o充分混匀后检测荧
光强度k Ε¬Κt }vvx ±° oΕ¬Κu }v{x ±° oΕ°Κt }xsv ±° oΕ¬
和 ∞°光路带宽分别为 x ±°和 ts ±° o扫描速度选择
/ √¨ µ¼©¤¶·0 o精度选择/ «¬ª«0 ∀
11314 以 Φvvxr Φv{x比值k Ρl反映红细胞胞浆 ≤¤u n
浓度 o计算公式如下 }
Ρ € Φvvx/ Φv{x € „
管 Φvvx p …管 Φvvx
„管 Φv{x p …管 Φv{x
114 统计学处理 数据用 ≥°≥≥统计软件包处理 o
所有结果用 cξ ? σ表示 o采用独立样本 τ检验和单因
素方差分析k均数间比较用 ⁄∏±±¨ ·检验l o相关分析
采用 °¨ ¤µ¶²±检验 ∀
2 结果
211 健康成人红细胞胞浆 ≤¤un浓度k Ρ值l为 t1sx ?
s1syk ν € vul ∀
212 ⁄≥t{u与 °≤„⁄合并用药效果与丹参注射液的
比较
统计结果显示 o丹参注射液能够降低健康成人
红细胞胞浆 ≤¤u n浓度k Π s1sst oν € yl o并呈剂量
依赖性 o药效与剂量显著相关kρ € p s1{ut oΠ 
s1sstl ~⁄≥t{ur°≤„⁄有相似作用k Π  s1sst oν €
yl o也表现剂量依赖性 o药效与剂量显著相关kρ€ p
s1{ux oΠ s1sstlk见表 tl ∀在各相应的浓度水平 o
丹参注射液和 ⁄≥t{ur°≤„⁄的作用效果无显著差别
k Ё s1sxl ∀图 t显示 o丹参注射液和 ⁄≥t{ur°≤„⁄
对红细胞胞浆 ≤¤u n浓度抑制率曲线基本重合 ∀横
坐标取对数后对抑制率曲线进行线性回归 o丹参注
射液的回归方程是 Ψ € p w1vu n us1zx Ξk Π 
s1sstl o⁄≥t{ur°≤„⁄的回归方程是 Ψ € p u1s{ n
t|1tz Ξk Π  s1sstl o两条直线无显著差别k Π 
s1sxl ∀以上各种比较说明 o丹参注射液和 ⁄≥t{ur
°≤„⁄降低红细胞胞浆 ≤¤u n浓度的药理作用机制基
本相同 o作用效果无明显差别 ∀
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 t 丹参素和原儿茶醛合并用药与丹参注射液对健康成人红细胞胞浆 ≤¤un浓度的影响比较kcξ ? σ, ν € yl
分组
丹参注射液
剂量rª#pt ≤¤u n浓度k Ρ值l
⁄≥t{u r °≤„⁄
剂量r°ª#pt ≤¤u n浓度k Ρ值l
空白对照组 s1ss t1stu ? s1syvtl s1ssrs1ss t1stu ? s1sxwtl
给药组 s1zs s1{y{ ? s1syutl u1vtrs1v{ s1{xt ? s1svztl
t1wt s1{t{ ? s1szxtl w1ytrs1zx s1{sw ? s1swxtl
u1{t s1zxt ? s1sxttl |1uvrt1xs s1zxz ? s1swztl
x1yv s1zs{ ? s1swutl t{1wxrv1ss s1zs| ? s1swwtl
tt1ux s1yvs ? s1suwtl vy1|sry1ss s1ywt ? s1svytl
uu1xs s1xwu ? s1swytl zv1{srtu1ss s1xxv ? s1su|tl
注 }与空白对照组比较tl Π s1st oul Π s1sxk表 u同l
图 t ⁄≥t{ur°≤„⁄和丹参注射液降低健康成人红
细胞胞浆 ≤¤un浓度作用效果比较
213 ⁄≥t{u与 °≤„⁄单独用药与合并用药效果比较
统计结果显示 o单独应用 ⁄≥t{u能够降低健康
成人红细胞胞浆 ≤¤un浓度kΠ s1sst oν € yl o并呈剂
量依赖性 o药效与剂量显著相关kρ€ p s1zwt oΠ 
s1sstl ~单独应用 °≤„⁄也有相似作用 k Π s1sst o
ν € yl o也表现剂量依赖性 o药效与剂量显著相关kρ€
p s1ztw oΠ s1sstlk见表 ul ∀ ⁄≥t{u和 °≤„⁄单独
用药与混合给药对红细胞胞浆 ≤¤u n浓度抑制率曲
线显示 o混合给药效果明显优于单独给药k见图 ul ∀
横坐标取对数后对抑制率曲线进行线性回归 o⁄≥t{u
的回归方程是 Ψ € p z1tt n tw1u{ Ξk Π  s1sstl o
°≤„⁄的回归方程为 Ψ € p t1uw n {1v| Ξ k Π 
s1sstl o二者不平行k Π s1sxl o说明它们的药理作
用机制不同 ∀
计算 ⁄≥t{u和 °≤„⁄单独加药和混合给药对红
细胞胞浆 ≤¤u n浓度的抑制百分率 o用以表示药物的
实际效应k Εl ∀另通过回归方程计算在各浓度水平
⁄≥t{u和 °≤„⁄单独加药与混合给药对红细胞胞浆
≤¤u n浓度的抑制百分率 o用以表示药物效应的理论
计算值k Εjl ∀根据合并用药中的相加原理≈w  }
图 u ⁄≥t{u和 °≤„⁄单独作用与共同作用效应比较
θ € Ε„ n …Ε„ n ∞… p Ε„ ≅ Ε…
k Ε„表示 „药的效应 oΕ…表示 …药的效应 o分母表示两
药合并使用的/期望合并效应0 o分子 Ε„ n …表示/实测合并效
应0 oθ是两者之比 ∀ θ值在 s1{ ∗ t1u之间为相加 oθ值  s1{
为拮抗 oθ值  t1u为协同 ∀l
设 Ε„为 ⁄≥t{u的实际效应 oΕ„χ为 ⁄≥t{u效应
的理论计算值 ~Ε… 为 °≤„⁄的实际效应 oΕ…χ为
°≤„⁄效应的理论计算值 ~Ε„ n …为 ⁄r°的实际效应 o
Ε„ n …χ为 ⁄r°效应的理论计算值 ∀分别计算各浓度
水平的实际 θ 值和理论 θ 值k见表 vl o结果表明
⁄≥t{u和 °≤„⁄之间基本为相加作用 ∀
3 讨论
以往药理研究发现 o丹参注射液改善微循环的
重要机制之一是增强红细胞变形能力 o而后者与红
细胞胞浆 ≤¤u n浓度密切相关 ∀近年来大量临床和
动物实验证实 o丹参水溶性成分实现细胞保护功能
的机制之一是减轻胞浆 ≤¤u n的积聚 ∀人红细胞较
体内其他细胞易于获取和相对稳定 o胞浆内缺乏细
胞器和膜性结构 o无 ‘¤n2≤¤n交换 o离体后细胞膜的
功能特性能够维持相当长时间 o长期以来被用作研
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表 u 丹参素和原儿茶醛对健康成人红细胞胞浆 ≤¤un浓度的影响kcξ ? σ, ν € yl
分组
⁄≥t{u
剂量r°ª#pt ≤¤u n浓度k Ρ值l
°≤„⁄
剂量r°ª#pt ≤¤u n浓度k Ρ值l
空白对照组 s1ss t1sut ? s1szttl s1ss t1suu ? s1sx|tl
给药组 u1vt s1|xv ? s1syutl s1v{ s1|xx ? s1swtul
w1yt s1|u| ? s1s{{tl s1zx s1|vw ? s1swytl
|1vu s1{|y ? s1s|tul t1xs s1|tw ? s1sxstl
t{1wx s1{xw ? s1sz{tl v1ss s1{|t ? s1swztl
vy1|s s1{ss ? s1sz{tl y1ss s1{ys ? s1sv|tl
zv1{s s1zvs ? s1swutl tu1ss s1{uv ? s1suwtl
表 v ⁄≥t{u和 °≤„⁄合并用药效果值计算表
⁄≥t{ur°≤„⁄
r°ª#pt
Ε
Ε„ n … Ε„ Ε… θ
Εχ
Ε„ n …χ Ε„χ Ε…χ θχ
u1vtrs1v{ tx1wx y1yv y1ws t1uv tw1ty w1|{ x1{z t1vw
w1ytrs1zx t|1|{ |1s{ {1wz t1t| t|1|v |1u{ {1v| t1t{
|1uvrt1xs ux1sz tu1u{ ts1xu t1tz ux1zt tv1x{ ts1|u t1tu
t{1wxrv1ss u|1yz ty1vv tu1zs t1ts vt1w{ tz1{z tv1ww t1s|
vy1|sry1ss vy1tx ut1yx tx1y{ t1sz vz1ux uu1tz tx1|z t1s{
zv1{srtu1ss wx1uv u{1vz t|1vu t1sz wv1su uy1wz t{1xs t1sz
均值 t1tw t1tx
究细胞内钙代谢的良好模型 ∀笔者以往的实验已经
证实 o丹参注射液能够降低离体红细胞胞浆 ≤¤u n浓
度 o本研究再次应用这一模型 o发现丹参注射液 u种
活性成分丹参素和原儿茶醛均具有钙拮抗作用 ∀
文献报道 o应用膜片钳技术记录大鼠心室肌单
细胞跨膜电位 o发现丹参素能够使 Λ2型钙内向电流
的峰值明显下降 o而红细胞膜也存在类似的钙通
道≈x  ∀另有研究发现 o丹参注射液能够缩短离体豚
鼠心室乳头肌的动作电位时程k主要与 Λ2型慢钙通
道开放 o≤¤un内流有关l o作用曲线呈钟形≈y  o即在一
定的药物浓度范围药效随浓度增加而增强 o直至药
效达峰值 o以后药物浓度增加而药效反而下降 ∀异
博定是已知的钙通道阻滞剂 o∂¤µ¨¦®¤和 ≥²º¨ °¬°²2
≤²®¨µ²等在研究异博定对红细胞胞膜 ≤¤u n内流和
红细胞变形能力的影响实验中也发现类似钟形曲线
现象≈z o{  ∀本实验采用荧光检测方法 o由于丹参注
射液含有棕色的鞣质等其他物质 o药物浓度过高影
响检测结果 o因此无法观测其在降低红细胞胞浆
≤¤u n浓度时是否存在钟形曲线的特点 o但笔者在预
实验中发现高于 zv1{s °ª#pt浓度水平的丹参素降
低红细胞胞浆 ≤¤u n浓度的作用反而下降 ∀综合以
上实验结果 o笔者推测 o丹参注射液中阻滞 Λ2型钙
通道的主要成分很可能就是丹参素 ∀
另外 o迄今尚无有关原儿茶醛的钙拮抗作用报
道 o笔者曾用相同的实验方法单独研究其作用k拟于
近期发表l o发现原儿茶醛的钙拮抗作用强于丹参素 o
红细胞胞浆 ≤¤un浓度最大抑制率可达 {s h以上 o且
无钟形曲线特点 o具体作用机制有待进一步研究 ∀
本实验还首次探讨了丹参素和原儿茶醛在钙拮
抗作用方面的相互关系 o发现二者作用相加 o合并用
药效果与丹参注射液无显著差别 o证明二者可能是
丹参水溶性部位钙拮抗作用的主要有效成分 ∀
≈参考文献 
≈t  沈玲红 o王彬尧 o王长谦 1 丹参注射液对人红细胞胞浆 ≤¤u n浓
度的影响 1 中国微循环 ousst oxkvl }t{v1
≈u  盛景芬 1高效液相色谱法测定丹参注射液中的原儿茶醛和丹
参素 1 中成药研究 ot|{z okzl }tw1
≈v  ⁄¤√¬§ ⁄  o ²±·¨±¤¼ Š × o ⁄¨ √¼±¦®  „1 ƒ¯ ∏²µ¨¶¦¨±¦¨ ° ¤¨¶∏µ¨2
°¨ ±·¶²©©µ¨¨≤¤u n ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬± «∏°¤± µ¨¼·«µ²¦¼·¨¶∏¶¬±ª·«¨ ≤¤un2
¬±§¬¦¤·²µ©∏µ¤2u1 Χελλ Χαλχιυµ ot|{{ o| }tyz1
≈w  ¬± ½«²±ª2­∏¨±1 „§§¬·¬²± ¬± §µ∏ª¦²°¥¬±¤·¬²±1 Αχτα Πηαρµαχολογιχα
Σινιχα ot|{s otkul }zs1
≈x  孙可青 o徐长庆 o王新一 o等 1 丹参素的抗心律失常作用及其电
生理机制的研究 1 中国中医药科技 ousss ozkvl }tzt1
≈y  徐长庆 o李哲泓 o王孝铭 o等 1 丹参对豚鼠心室乳头肌动作电位
的影响 1 哈尔滨医科大学学报 ot||t ouxkyl }wsy1
≈z  ∂¤µ¨¦®¤o≤¤µ¤©²¯¬∞1 ∂¤±¤§¤·¨2¬±§∏¦¨§°²√¨ °¨ ±·¶²© ≤¤un ¤±§Žn
¬± «∏°¤± µ¨§¥¯²²§¦¨¯¯¶1 ϑ Βιολ Χηεµ ot|{u ouxzktvl }zwtw1
≈{  ≥²º °¨¬°² ≤ ≥ ’ oŽ²√¤¦¶Œ …oŽ¬µ¥¼  ⁄ × o ετ αλ1 ∞©©¨¦·¶²© √¨ µ¤2
³¤°¬¯ ²± ¦¤¯¦¬∏°2¬±§∏¦¨§µ¬ª¬§¬·¼ ¤±§²±©¬¯·¨µ¤¥¬¯¬·¼ ²©µ¨§¥¯²²§¦¨¯¯¶
©µ²° «¨ ¤¯·«¼ √²¯∏±·¨ µ¨¶¤±§³¤·¬¨±·¶º¬·«³µ²ªµ¨¶¶¬√¨ ¶¼¶·¨°¬¦¶¦¯ µ¨²¶¬¶1
Βρϑ Χλιν Πηαρµαχολot|{x ot| }zvt1
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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Εφφεχτ οφ δανσηενσυ , προτοχατεχηυαλδεηψδε ανδ ∆ανσηεν ινϕεχτιον ον
χαλχιυµιον χονχεντρατιον ιν χψτοπλασµ οφ ηυµαν ερψτηροχψτεσ
≥‹∞‘¬±ª2«²±ªt o • „‘Š …¬±2¼¤²t o • „‘Š ≤«¤±ª2 ¬´¤±t o ÷Œ∞ ÷¬∏2¯ ¤±t o
≠˜ Š∏²2µ∏¬u o ≠„’ «²±ª2¼¬u o‹˜ ≠∏¤±2¯ ²±ªu o ≠„‘Š …¤²2­¬±u
(t1 ∆επαρτµεντ οφ Χαδιολογψ, Ρενϕι Ηοσπιταλ οφ Σηανγηαι Σεχονδ Μεδιχαλ Υνιϖερσιτψ, Σηανγηαι usssst , Χηινα ;
u1 Σηανγηαι Βεν2χαο Βιο2µεδιχινε Ινστιτυτε , Σηανγηαι usssws , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶·∏§¼·«¨ ³µ¨§²°¬±¤±·¦¤¯¦¬∏°2¤±·¤ª²±¬¶·¦²°³²±¨ ±·¶²© ⁄¤±¶«¨ ± ¬±­¨¦·¬²±1 Μετηοδ :׫¨ ©¨©¨ ¦·¶²©§¤±2
¶«¨ ±¶∏o³µ²·²¦¤·¨¦«∏¤¯§¨«¼§¨ ¤±§⁄¤±¶«¨ ±¬±­¨¦·¬²± ²± ¦¤¯¦¬∏° ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬± ¦¼·²³¯¤¶° ²© µ¨¼·«µ²¦¼·¨¶º µ¨¨ ¬¨¤°¬±¨ § ιν ϖιτρο ¥¼·«¨ ©¯∏²2
µ¨¶¦¨±·≤¤un2¦«¨ ¤¯·²µ©∏µ¤2u1 Ρεσυλτ : ∞¬·«¨µ⁄≥t{u ²µ°≤„⁄ ¦¤± §¨¦µ¨¤¶¨ ¬± §²¶¨2§¨ ³¨ ±§¨ ±·¦¼·²¶²¯¬¦©µ¨¨¦¤¯¦¬∏° ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬± «∏°¤±
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≈责任编辑 古云侠 
≈收稿日期  ussv2tt2tu
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv||vsutsl
≈通讯作者   3 刘平 o ר¯ }kswttl {uyzt{uw o∞2°¤¬¯}§§¥¦ƒ
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低氧条件下四逆汤及组方药提取物对大鼠血管内皮
细胞释放 °ŠŒu o×÷„u和 ‘’的影响
刘 平t 3 o葛迎春t o马天舒t o任慧君t o徐亚娟u o徐东铭u
kt1大连市中医研究所 o辽宁 大连 ttystv ~
u1吉林省中医中药研究院 o吉林 长春 tvssutl
≈摘要  目的 }观察四逆汤提取物k⁄• ∞l及其组方药提取物对低氧条件下大鼠血管内皮细胞释放血栓素 „u
k×÷„ul !前列环素k°ŠŒul和一氧化氮k‘’l的影响 ∀方法 }低氧处理的大鼠血管内皮细胞经四逆汤及其组方药提取
物作用后 o取条件培养液 o采用放射免疫法及 Šµ¬¨¶¶反应测定培养液中的 °ŠŒu o×÷„u和 ‘’的代谢产物 y2酮2前列腺
素 ƒtΑky2®¨·²2°ŠƒtΑl o血栓素 …uk×÷…ul及亚硝酸盐k‘’u p l含量 ∀结果 }与对照组比较 o⁄• ∞ !甘草提取物k∞l !干姜
提取物kŠ∞l !附子提取物k„∞l !甘草加附子提取物k„∞l !干姜加附子提取物k„Š∞l可以显著增加低氧处理的大鼠
血管内皮细胞培养液中 y2®¨·²2°ŠƒtΑ的含量及 y2®¨·²2°ŠƒtΑr×÷…u 的比值 o但对 ×÷…u 的含量没有显著影响 ∀ ⁄• ∞组
对 y2®¨·²2°ŠƒtΑ含量的影响显著高于 ∞oŠ∞o„∞o„∞o„Š∞组 ∀ ⁄• ∞组对 y2®¨·²2°ŠƒtΑr×÷…u 比值的影响显著高于
Š∞o„∞o„∞组 ∀与对照组比较 o⁄• ∞o∞oŠ∞o„∞o„Š∞o„∞组显著提高血管内皮细胞培养液中 ‘’u p的含量 ∀ ⁄• ∞
的药理作用显著高于 Š∞o„∞o„∞组 ∀结论 }四逆汤提取物增加低氧处理的大鼠血管内皮细胞培养液中 ‘’ o°ŠŒu
含量及 °ŠŒur×÷„u的比值 ∀四逆汤提取物的药理作用强于组方药提取物 ∀
≈关键词  四逆汤 ~内皮细胞 ~前列环素 ~血栓素 „u ~一氧化氮 ~低氧
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlts2s|{{2sx
四逆汤出自5伤寒论6 o由附子 !干姜 !甘草 v味
药组成 o功效为回阳救逆 o是用于治疗少阴虚寒证的
主方 ∀现代药理学和化学研究已经对四逆汤的药理
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第 u|卷第 ts期
ussw年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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