全 文 ：云母对大鼠溃疡性结肠炎的肠黏膜保护作用
王良静１，陈淑洁２，姒健敏２
（１浙江大学 医学院 附属第二医院，浙江 杭州 ３１０００９；
２浙江大学 邵逸夫临床医学研究所，浙江 杭州 ３１００１６）
［摘要］ 目的：探讨云母对大鼠溃疡性结肠炎的药效和肠黏膜保护作用机制。方法：用７％醋酸２ｍＬ灌肠制
作大鼠溃疡性结肠炎模型。将实验大鼠随机分为生理盐水对照组，高、中和低剂量云母治疗组和 ＳＡＳＰ治疗组，灌
肠给药１周。剖腹暴露全结肠，肉眼观察肠黏膜的病变并按损伤程度积分，切片 ＨＥ染色镜下评价黏膜损伤指数。
取病变肠组织测定髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性。结果：大体形态学观察可见溃疡性结肠模型大鼠近端结肠有多发或
者＞１ｃｍ的溃疡，周围黏膜重度糜烂、充血和水肿；各剂量云母治疗组大鼠结肠黏膜无明显溃疡形成，仅有黏膜轻
度糜烂、充血和水肿；ＳＡＳＰ组大鼠黏膜面有小溃疡（＜１ｃｍ）存在，周围黏膜明显糜烂、充血和水肿。各剂量组云母
治疗后大鼠肠黏膜大体病变积分较生理盐水组明显降低（Ｐ＜００１）。模型组大鼠结肠黏膜发生溃疡和坏死，炎症
累及肠壁全层，大量中性粒细胞浸润，结肠黏膜毛细血管扩张、充血水肿，腺体囊状扩张。云母治疗组结肠黏膜无
明显溃疡形成，黏膜下方肉芽组织形成，黏膜充血和炎症细胞浸润减少。ＳＡＳＰ治疗组大鼠结肠黏膜充血，黏膜表面
缺损坏死，中性粒细胞达黏膜下层。各剂量云母和ＳＡＳＰ组病理损害级别较生理盐水组显著下降（Ｐ＜００５）。模型
组大鼠结肠黏膜ＭＰＯ水平较正常组明显增高（Ｐ＜０００１）。各云母治疗组和 ＳＡＳＰ组 ＭＰＯ水平均较生理盐水组明
显降低（Ｐ＜００１）。结论：云母可以减轻大鼠溃疡结肠炎肠黏膜损害和炎症指数，降低结肠组织ＭＰＯ活性，具有肠
黏膜保护作用。
［关键词］ 云母；溃疡性结肠炎；黏膜保护
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００５）２３１８４００５
［收稿日期］ ２００５０６０３
［基金项目］ 浙江省科技厅科技计划项目（０１１１０３１８）
［通讯作者］ 姒健敏，Ｔｅｌ（Ｆａｘ）：（０５７１）８６００６７８８，Ｅｍａｉｌ：ｓｉｊｍ＠
１６３．ｎｅｔ
溃疡性结肠炎（ＵＣ）是一种病因不明的的炎症
性肠病，以慢性过程、反复发作为其特征，被世界卫
生组织列为现代难治病之一［１］。由于其发病机制不
清，目前尚缺乏特异性的治疗措施。《中华药海》［２］
记载云母“截疟止痢、止血敛疮和温虚补肾”。《中
国矿物药图鉴》记录 “主下痢肠癖，补肾冷”［３］。本
实验通过建立大鼠溃疡性结肠炎模型，研究云母对
ＵＣ的疗效和黏膜保护机制，初步确定云母治疗 ＵＣ
的药效剂量关系。
１ 材料和方法
１１ 动物 ＳＤ雄性大鼠，清洁级，体重（２６２４±
３９０）ｇ，共５７只。购于浙江省医学科学院实验动物
中心（动物质量合格证号医动字第２２９６０１０１８）。饲
养条件符合标准实验条件：室温（２４±２）℃；相对湿
度（５５±５）％；每１２ｈ１次亮暗循环；混合饲料饲养。
１２ 试剂和药物 冰醋酸购自杭州市北大桥化工
区，配成 ７％溶液；ＯＤｉａｎｉｓｉｄｉｎｅ购自 Ｓｉｇｍａ公司（德
国），用蒸馏水配成 ０１６７‰的溶液；十六烷基三甲
基溴化铵（ＨＴＡＢ）购自中国医药（集团）上海化学试
剂公司，用 ＰＢＳ液配成 ０５％的溶液；云母：由浙江
大学邵逸夫临床医学研究所和杭州赛利药物研究所
有限公司研制提供（批号 ０１１００６）；柳氮磺胺吡啶
（ＳＡＳＰ）片剂购自上海三维制药有限公司（批号
２００１０７１２）。
１３ 方法 根据文献报道方法，略加改动，制作溃
疡性结肠炎大鼠模型［４，５］。大鼠禁食不禁水 ２４ｈ
后，用直径５～６ｍｍ经消毒灭菌的塑料管轻柔进肛
门７ｃｍ，缓慢灌注７％醋酸２ｍＬ，保留１５ｓ后，即用
生理盐水５ｍＬ冲洗１次。模型建立后，取重量相近
的大鼠５０只，随机分为５组，每组１０只。即生理盐
水对照组，高、中和低剂量云母治疗组和 ＳＡＳＰ治疗
组。设正常大鼠７只作为正常对照组。云母治疗剂
量分别为 ２４０，１２０，４０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１。ＳＡＳＰ剂量为
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３００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，临用时用 ０９％ 生理盐水配制，
对照治疗组用０９％生理盐水。大鼠灌肠给药容量
为１ｍＬ·１００ｇ－１，共１周。
１３１ 标本制备 给药结束后，禁食不禁水 ２４ｈ。
剖腹暴露全结肠。取出全结肠沿纵轴切开，并用生
理盐水冲洗干净后，将结肠黏膜平铺于泡沫板上，用
大头针固定，肉眼观察肠黏膜的病变并按损伤程度
积分，数码相机摄片。然后立即用１０％的中性甲醛
溶液固定，送浙江大学医学院病理室，石蜡包埋，每
份蜡块制成厚度５μｍ的切片 ＨＥ染色，镜下评价黏
膜损伤指数。
１３２ 观察和检测指标
１３２１ 一般情况 观察大鼠在饲养过程中有无
死亡（对死亡大鼠尸体解剖），精神状态，活动情况，
毛发光泽度，食欲，大便情况（血便、腹泻、大便次数
增多等）和体重改变等。
１３２２ 肠标本大体观 肉眼观察大鼠结肠黏膜
的色泽、溃疡、糜烂、出血点、充血等情况，其评分标
准如下。０分：无损害；１分：黏膜充血、水肿，未出现
溃疡；２分：黏膜充血、水肿，轻度糜烂，无溃疡；３分：
黏膜充血、水肿，中度糜烂，有单个溃疡；４分：黏膜
充血、水肿，重度糜烂，有多处溃疡；５分：黏膜充血、
水肿，重度糜烂，有＞１ｃｍ溃疡。
１３２３ 病理组织学检测 以病变肠段的病理组
织学检查作为依据，病变按以下标准进行分级。Ⅰ
级：基本正常；Ⅱ级：中性粒细胞浸润，达黏膜层及黏
膜固有层；Ⅲ级：中性粒细胞浸润达黏膜下层；Ⅳ级：
隐窝脓肿，黏膜全层明显细胞浸润；Ⅴ级：糜烂、溃
疡、黏膜坏死，黏膜全层明显细胞浸润。
１３２４ 髓过氧化物酶（ＭＰＯ）测定 根据文献报
道方法［６，７］，取病变肠组织 ３５０ｍｇ，剪刀剪碎后，移
至组织匀浆器中，加 ００１ｍｏｌ·Ｌ－１ＰＢＳ缓冲液（ｐＨ
６０）２ｍＬ，充分匀浆，４℃冷冻离心３５００ｒ·ｍｉｎ－１１５
ｍｉｎ，加入０５％ＨＴＡＢ液３ｍＬ组织匀浆器匀浆，振荡
３０ｓ，上述条件离心１５ｍｉｎ。取上清液０１ｍＬ加２９
ｍＬＯＤｉａｎｉｓｉｄｉｎｅ（含 ００００５％Ｈ２Ｏ２），吸光度用
ＨｅｗｌｅｔＰａｃｋａｒｄ自动紫外分光光度仪检测。在 ４６０
ｎｍ处测定３ｍｉｎ，计算每分钟吸光度的变化 （ΔＡ４６０·
ｍｉｎ－１）。２５℃每分钟分解 １μｍｏｌ过氧化物的量定
义为一个酶活性单位。
１３３ 统计分析 应用 ＳＰＳＳ１００统计软件协助分
析。对多组资料运用完全随机设计资料的方差分
析；溃疡形成级别用 Ｒａｄｉｔ等级统计分析检验。以
Ｐ＜００５为有统计学意义。
２ 结果
２１ 一般情况 模型组大鼠在灌肠后１２～２４ｈ起
出现血性稀便，精神萎靡，体重增长较慢。生理盐水
对照组灌肠后大鼠一直有稀血便，情况类似于造模
组。第１，３，５天各有１只大鼠死亡。不同剂量云母
灌肠给药 ３ｄ后，大便形状恢复正常，精神状况好
转，体重增加，以中、高剂量组云母为明显。低剂量
和高剂量云母组各死亡 ３只，中剂量组死亡 １只。
死亡时间第１，２天。ＳＡＳＰ灌肠给药 ５ｄ后，大便形
状恢复正常，精神状况好转，体重增加。第１，２天死
亡３只。对上述死亡大鼠行尸体解剖，发现大鼠距
肛４～１０ｃｍ间腹腔脏器粘连，考虑为模型制作时结
肠溃疡过深导致肠穿孔，与给药无关。
２２ 结肠黏膜大体观察 模型组和生理盐水对照
组大鼠均出现典型的溃疡性结肠炎表现，近端结肠
有多发或＞１ｃｍ的溃疡，周围黏膜重度糜烂、充血
和水肿。各剂量云母组治疗后，大鼠结肠黏膜无明
显溃疡形成，仅有黏膜轻度糜烂、充血、水肿。ＳＡＳＰ
治疗后大鼠黏膜面有小溃疡 （＜１ｃｍ）存在，周围黏
膜明显糜烂、充血和水肿，但较生理盐水对照组明显
好转。高、中和低剂量云母治疗后大鼠肠黏膜大体
病变积分较生理盐水对照组明显降低（Ｐ＜００１），
高、低剂量云母治疗组肠黏膜病变积分较 ＳＡＳＰ治
疗组显著降低 （Ｐ＜００５），３种剂量云母治疗组比
较病变积分无统计学差异（Ｐ＞００５）。见图１，２，表
１。
图１ 正常大鼠肠黏膜肉眼观
结肠黏膜完整，无溃疡和充血改变
２３ 病理观察结果 模型组大鼠结肠黏膜不同程
度溃疡和坏死，大量中性粒细胞浸润累及肠壁全层，
黏膜充血水肿，腺体增生，囊状扩张。云母治疗结肠
黏膜无明显溃疡形成，黏膜下方肉芽组织形成，黏膜
充血和炎症细胞浸润减少。ＳＡＳＰ组大鼠结肠黏膜
充血，黏膜表面缺损坏死，中性粒细胞进入达黏膜下
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表１ 各组大鼠结肠黏膜大体形态积分（珋ｘ±ｓ）
组别 动物数 组织损伤评分
正常组 ７ ０．００±０．００１）
模型组 ７ ３．２９±１．６０
ＳＡＳＰ组 ６ ２．１７±１．６０
云低组 ７ １．１４±１．７７１，２）
云中组 ９ １．２２±１．０９１）
云高组 ７ ０．４３±０．７９１，２）
注：与模型组比较１）Ｐ＜００１；与ＳＡＳＰ组比较２）Ｐ＜００５
图２ 溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜肉眼观
结肠黏膜＞１ｃｍ溃疡，周围黏膜糜烂充血
层。经Ｒａｄｉｔ统计分析，各剂量云母治疗组和 ＳＡＳＰ
治疗组病理损害级别较对照组显著下降（Ｐ＜
００５）。云母和ＳＡＳＰ治疗组病理损害级别无统计学
差异（Ｐ＞００５）。见图 ３～６，表２。
图３ 大鼠溃疡性结肠炎模型病理（×４００）
结肠黏膜表面脱落坏死，腺体排列稀疏、破坏
图４ 大鼠溃疡性结肠炎模型病理（×４００）
结肠腺体囊状扩张，间质炎症细胞浸润，血管充血
２４ ＭＰＯ测定结果 模型组结肠黏膜 ＭＰＯ水平
（２１５８７±０４０９８）Ｕ·ｍｇ－１，较正常组（０７７５４±
０１５８７）Ｕ·ｍｇ－１明显增高（Ｐ＜０００１）。ＳＡＳＰ组
ＭＰＯ水平为（１４３３７±０３４２４）Ｕ·ｍｇ－１，低、中和高
剂量云母组 ＭＰＯ分别为 （０９０２９±０３１０８），
（１０００２±０５２９４），（０８５５２±０２２２１）Ｕ·ｍｇ－１，
均较模型组明显降低（Ｐ＜００１）。
图５ 高剂量云母治疗组结肠病理（×２００）
结肠黏膜上皮排列整齐，腺体完整，少量炎症细胞浸润
图６ 正常大鼠结肠病理（×２００）
结肠黏膜上皮排列整齐，无炎症细胞浸润和溃疡形成
表２ ＵＣ大鼠结肠组织病理损害积分结果
组别 ｎ
病理损害分级
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
Ｒ
正常组 ７ ０ ０ ０ ０ ０ ０．０００２）
模型组 ７ ０ ０ ３ １ ３ ０．７６２
ＳＡＳＰ组 ６ ０ １ ２ ２ １ ０．６５３
云低组 ７ ２ ３ ０ ２ ０ ０．３４１２）
云中组 ９ ０ ６ ２ １ ０ ０．３８１２）
云高组 ７ ０ ４ ２ １ ０ ０．４９１１）
注：与模型组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１
３ 讨论
醋酸模型主要用来研究人类溃疡性结肠炎致病
机制及药物疗效评价，目前作为标准模型在国内外
使用。Ｆａｂｉａ等［１］报道 ４％，６％，８％醋酸灌肠保留
１５ｓ，在第４天均可出现一致的结肠炎表现，１周后
开始出现结肠黏膜再生和愈合表现，２周后黏膜恢
复正常。这与人类ＵＣ发病过程一致。醋酸灌肠导
致大鼠ＵＣ的主要原因是化学刺激剂直接接触造成
结肠黏膜屏障功能破坏，引起系统炎症反应，中性粒
细胞大量浸润。鼠ＵＣ有短暂的结肠血管缺血和毛
细血管血流量下降，继发氧自由基的大量产生，加重
结肠炎发生［８，９］。醋酸诱导结肠炎的机制还与增加
激活激肽等炎症介质、增加溶解纤维蛋白活性以及
干扰凝血机制等有关。本实验中大鼠经７％醋酸灌
肠后，均出现血便、腹泻大便性状的改变，结肠黏膜
充血水肿，黏膜表面溃疡、糜烂形成，且黏膜病变呈
连续性，炎症可累及肠壁全层，主要表现为大量中性
粒细胞浸润，腺体增生，囊状扩张，类似人类 ＵＣ的
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病理改变。
ＳＡＳＰ作为ＵＣ治疗的经典药物早在２０世纪３０
年代就用于临床。ＳＡＳＰ在结肠内被细菌分解为 ５
氨基水杨酸与磺胺吡啶，５氨基水杨酸可以抑制前
列腺素及氧自由基合成，减少肠道炎症反应而发挥
药理作用；而磺胺吡啶可能产生包括过敏、皮疹、白
细胞减少和恶心呕吐等不良反应。ＳＡＳＰ的不良反
应限制其临床广泛应用。文献记载云母具有“截疟
止痢”、“主下痢肠癖，补肾冷”的药理功效。实验发
现云母灌肠治疗 １周后，病理检查发现大鼠结肠黏
膜溃疡明显愈合，黏膜下方肉芽组织形成，中性粒细
胞细胞浸润明显减少。云母治疗组溃疡和炎症级别
积分较对照组明显下降，疗效优于 ＳＡＳＰ；随着云母
治疗剂量的增加，溃疡和炎症级别也相应降低，存在
一定的量效关系。周亨德等［１０］制作大鼠“脾虚泄泻
证”模型，用主含云母的“胃肠德”治疗，发现云母可
以改善大鼠慢性腹泻、大便潜血等症状，认为云母具
有增强肠黏膜保护作用，调节肠道菌群的药理作用。
实验还发现云母可以显著减少结肠组织中
ＭＰＯ的活性。ＭＰＯ水平和结肠炎症组织的中性粒
细胞浸润程度呈正比关系，ＭＰＯ活性是急性结肠炎
敏感的定量分析指标，它是除病理分析以外的另一
种公认的更为简捷的 ＵＣ评价方法［６，７］。ＭＰＯ是中
性粒细胞嗜天青颗粒中的一种酶，在单核和巨噬细
胞中也有少量存在，故其含量的增高可以反映中性
粒细胞在某一组织中的增高，间接反映炎症在组织
中的存在。在 ＵＣ炎症发生的过程中，一般都伴随
着中性粒细胞的浸润，受到炎症刺激的中性粒细胞
释放溶酶体，产生超氧化物及其他过氧化物，造成细
胞的损伤。云母对 ＭＰＯ活性的抑制作用也是其治
疗ＵＣ的重要机制。
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ＷＡＮＧＬｉａｎｇｊｉｎｇ１，ＣＨＥＮＳｈｕｊｉｅ２，ＳＩＪｉａｎｍｉｎ２
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，ＳｅｃｏｎｄＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｌｅｇｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１０００７，Ｃｈｉｎａ；
２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ，ＳｉｒＲｕｎＲｕｎＳｈａｗＨｏｓｐｉｔａｌ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００１６，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｘａｍｉｎｅｔｈｅｅｆｉｃａｃｙｏｆＭｕｓｃｏｖｉｔｅｏｎａｃｅｔｉｃａｃｉｄｉｎｄｕｃｅｄｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓｉｎｒａｔｓ，ａｎｄｔｏｒｅｓｅａｒｃｈｔｈｅ
ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｕｃｏｓａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｉｎｒａｔｓｂｙｉｎｔｒａｃｏｌｏｎｉｃｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆ２ｍＬｏｆ７％ ａｃｅｔｉｃ
ａｃｉｄ．ＲａｔｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｒｅｅｄｉｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆｔｈｅＭｕｓｃｏｖｉｔｅａｎｄＳＡＳＰａｔｒａｎｄｏｍｂｙｉｎｔｒａｃｏｌｏｎｉｃｉｎｊｅｃｉｏｎ，ｔｈｅｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅｗａｓｃｏｎｓｉｄ
ｅｒｅｄａｓｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｒａｔｓｗｅｒｅｓａｃｒｉｆｉｃｅｄａｎｄｔｈｅｃｏｌｏｎｓｗｅｒｅｅｘｃｉｓｅｄａｎｄｏｐｅｎｅｄｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌｙ．Ｕｎｄｅｒａｄｉｓｓｅｃｔｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ｇｒｏｓｓ
ｆｉｎｄｉｎｇｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄａｎｄｓｃｏｒｅｄ．ＭＰＯａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓａｓｓａｙｅｄｂｙｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙｉｎｃｏｌｏｎｉｃｍｕｃｏｓａ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｇｒｏｓｓｆｉｎｄｉｎｇｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｍｕｌ
ｔｉｐｌｅｕｌｃｅｒｗｉｔｈｄｉａｍｅｔｅｒｍｏｒｅｔｈａｎ１ｃｍ，ｓｕｒｏｕｎｄｅｄｗｉｔｈｅｒｏｓｉｏｎ，ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｕｓａｎｄｅｄｅｍａｉｎｔｈｅｐｒｏｘｉｍａｌｃｏｌｏｎｉｎｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｔｉｓ．Ｔｈｅ
ｃｏｌｏｎｆｒｏｍＭｕｓｃｏｖｉｔｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｗｅｒｅｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｇｉｃａｌｙｎｏｒｍａｌ，ｗｉｔｈｓｌｉｇｈｔｅｒｏｓｉｏｎ，ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｕｓａｎｄｅｄｅｍａ．ＴｈｅｃｏｌｏｎｉｎＳＡＳＰｇｒｏｕｐ
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ｈａｄｓｍａｌｕｌｃｅｒａｔｉｏｎａｎｄｓｅｖｅｒｅｅｒｏｓｉｏｎａｎｄｅｄｅｍａ．ＴｈｅｓｃｏｒｅｏｆｇｌｏｓｓｃｈａｎｇｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｏｗｅｒｉｎＭｕｓｃｏｖｉｔｅｇｒｏｕｐｓｔｈａｎｔｈａｔｉｎｎｏｒｍａｌ
ｓａｌｉｎｅｇｒｏｕｐ（Ｐ＜００１）．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｎｅｃｒｏｓｉｓａｎｄｅｘｆｏｌｉａｔｉｏｎｏｆｍｕｃｏｓａ，ｍｕｌｔｉｐｌｅｃｙｓｔｉｃｄｉｌａｔｉｏｎｏｆｍｕｃｏｓａｇｌａｎｄ，ａｎｄｌａｒｇｅｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｎｅｒｕｔｒｏｐｈｉｌｓａｎｄｖｅｓｓｅｌｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｉｎｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓ．ＴｈｅｕｌｃｅｒａｔｉｏｎｄｉｓａｐｐｅａｒｅｄａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｔｅｎｕａｔｅｄｉｎＭｕｓｃｏｖｉｔｅｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅｒｅ
ｗｅｒｅｅｒｏｓｉｏｎｉｎｍｕｃｏｓａａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｅｌｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇｉｎｔｏｓｕｂｍｕｃｏｓａｉｎＳＡＳＰｇｒｏｕｐ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ
ｓｃａｌｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｄｉｎＭｕｓｃｏｖｉｔｅａｎｄＳＡＳＰｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜００５）．ＴｈｅＭＰＯａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｃｏｌｉｔｉｓｔｉｓｓｕｅｃｏｍ
ｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０００１）．ＡｆｔｅｒａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｎｇｗｉｔｈＭｕｓｃｏｖｉｔｅｏｒＳＡＳＰ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＭＰＯｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜００１）．
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｍｕｓｃｏｖｉｔｅｈａｓｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｍｕｃｏｓａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｂｙａｔｅｎｕａｔｉｎｇｔｈｅｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｏｎｉｃｍｕｃｏｓａａｎｄｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ
ＭＰＯ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｍｕｓｃｏｖｉｔｅ；ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓ；ｍｕｃｏｓａｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ
［责任编辑 方文贤］
［收稿日期］ ２００５０６２８
［基金项目］ 山东省自然基金资助项目（Ｙ２００２Ｃ３７）
［通讯作者］  李贵海，Ｔｅｌ：（０５３１）８２９４９８４８，Ｆａｘ：（０５３１）
８２９６８４７３，Ｅｍａｉｌ：９９５８００ｇｈｌｉ＠１６３ｃｏｍ
中药生物碱逆转小鼠 Ｓ１８０肉瘤细胞获得性多药
耐药相关生物因子的过度表达
李贵海１，潘成业２，孙付军１，尹格平３，王学荣１
（１山东省中医药研究院，山东 济南 ２５００１４；
２山东烟台市毓璜顶医院，山东 烟台 ２５６００１；
３济南军区总医院，山东 济南 ２５００３１）
［摘要］ 目的：探讨中药生物碱口服给药逆转化疗诱导的肿瘤细胞 ＭＤＲ的分子生物学基础，以指导临床应用
中药逆转肿瘤多药耐药，提高化疗疗效。方法：给予亚于治疗剂量的联合化疗诱导腹水型 Ｓ１８０小鼠，苦参碱、粉防
己碱、氧化苦参碱和盐酸小檗碱４周，流式细胞仪免疫荧光检测Ｓ１８０肿瘤细胞Ｐ１７０，ＬＲＰ，ＴＯＰＯＩ，Ｆａｓ和细胞凋亡率。
结果：苦参碱、粉防己碱明显降低化疗诱导后耐药细胞 Ｐ１７０，ＬＲＰ的表达率和 ＴＯＰＯＩ活性，增加凋亡基因 Ｆａｓ表达
率，促进耐药肿瘤细胞的凋亡；盐酸小檗碱明显降低化疗诱导后耐药细胞 ＬＲＰ，ＴＯＰＯＩ的表达率；氧化苦参碱明显
降低化疗诱导后耐药细胞ＬＲＰ的表达率。结论：苦参碱、粉防己碱可通过对 ＭＤＲ相关生物活性物质的调节，干预
化疗诱发的ＭＤＲ的产生，并且其作用程度与生物碱的结构相关。
［关键词］ 生物碱；获得性多药耐药；小鼠；Ｐ１７０；ＬＲＰ；ＴＯＰＯＩ；Ｆａｓ
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００５）２３１８４４０５
生物碱是一类有广泛生物效应的中药成分，近
年来体外实验显示粉防己碱（汉防己甲素）对人白血
病耐药株Ｋ５６２细胞多药耐药相关蛋白表达有一定
的逆转或抑制作用。但体外细胞培养难以客观反应
临床化疗诱导的获得性多药耐药（ＭＤＲ）的状况，故
模拟临床常用联合化疗 ＰＦＣ方案诱导小鼠 Ｓ１８０肉
瘤细胞 ＭＤＲ相关因子过度表达，观察了苦参碱、粉
防己碱、氧化苦参碱和盐酸小檗碱对小鼠 Ｓ１８０肉瘤
细胞ＭＤＲ相关生物因子表达或活性的影响，以探讨
上述４种中药生物碱干预化疗所致 ＭＤＲ的作用和
作用机制，为临床应用中药预防肿瘤化疗抗性的产
生提供依据。
１ 材料
１１ 药品 ９８％的粉防己碱、苦参碱、氧化苦参碱
均由西安山川生物制品有限公司提供；盐酸小檗碱
由四川什邡鸿运生物制品有限公司提供；注射用顺
铂：山东齐鲁制药厂产品，批号０１１１１６１１；环磷酰胺：
上海华联制药有限公司产品，批号０３０７０３；５氟尿嘧
啶（５ＦＵ）：天津金耀氨基酸有限公司产品，批号
·４４８１·
第３０卷第２３期
２００５年１２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ３０，Ｉｓｓｕｅ ２３
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００５