全 文 ：³µ²§∏¦·¬√¨¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²© Π1 ηετεροπηψλλα √¤µ1 µαχροπηψλλαo Π1 ηετεροπηψλλα √¤µ1 Φολιολυµ o¤±§ Π1 ηετεροπηψλλα √¤µ1 αρϖενσε º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬2
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[ Κεψ ωορδσ] Πσευδοστελλαρια ηετεροπηψλλα~¶·µ¤¬± µ¨¶²∏µ¦¨ ~¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶
≈责任编辑 张宁宁 
缬草属药用植物极性成分的 ‹°≤指纹图谱研究
石晋丽t 3 o刘 勇t o肖培根u
kt1北京中医药大学 中药学院 o北京 tsstsu ~
u1中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|wl
≈摘要  目的 }研究缬草属药用植物中极性成分 ‹°≤ 指纹图谱及测定方法 ∀方法 }采用 ‹°≤r˜∂ 测定缬草
属药用植物甲醇提取液的指纹图谱 ∀结果 }建立了缬草属药用植物极性成分的 ‹°≤ 指纹图谱 o发现了 tu个色谱
峰为共有峰 o确定了其相对保留时间和峰面积比值的范围 ∀结论 }利用缬草属药用植物极性成分的指纹图谱可以
对不同种缬草属植物进行鉴别 o并可在一定程度上进行质量控制 ∀
≈关键词  缬草属 ~‹°≤ 指纹图谱 ~绿原酸 ~橙皮苷
≈中图分类号  • u{w1t ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlsx2swuy2sw
≈收稿日期  ussv2sv2st
≈通讯作者  3石晋丽 o∞2°¤¬¯}¶«¬­¯ ƒ √¬³q¶¬±¤q¦²°
缬草属 ςαλεριανα 植物药用历史久远 o蜘蛛香
ς. ϕαταµανσι ²±¨ ¶早在我国明代的5本草纲目6中就
有记载 o主治脘腹胀痛 !消化不良 !腹泻 !痢疾等疾
病 ot|zz年版5中国药典6一部曾加以收载≈t  ∀缬草
ς. οφφιχιναλισq根和根茎入药 o性平味辛 o具有镇静
安神 o解痉止痛之功 o主治心神不安 o心悸失眠 o癫
狂 o脏躁 o风湿痹痛 o脘腹胀痛 o痛经 o经闭 o跌打损
伤≈u  ∀一直以来 o作为温和的镇静 !安神 !催眠药 o其
药用价值在世界上受到高度重视≈v  o且作为高档烟
用香精原料 o不少国家已经对其进行开发 o产值不
菲 ∀目前关于缬草属药用植物的质量控制和分析方
法报道不多 o对其极性成分指纹图谱的研究未见报
道 ∀为了深入了解我国缬草属药用植物资源 o从中
寻找疗效确切的具有镇静作用的国产新资源 o使其
得到充分合理的利用 o同时也为了更有效地控制缬
草类药材的品质 o作者采用 ‹°≤r˜∂ 对其极性成分
指纹图谱进行了研究 ∀
1 仪器及试药
‹°tsxs型高效液相色谱仪 o二极管阵列检测
器 ∀乙腈为色谱纯k美国 ƒ¬¶«¨µ公司l ~水为娃哈哈
纯净水 o并经 s qwx Λ°水系滤膜过滤 ~绿原酸购于中
国药品生物制品检定所 ~橙皮苷自行提取精制 o经
˜∂ oŒ• o‘ • 等鉴定结构 o纯度大于 ||1x h k归一化
法计算l ∀实验中所用缬草属药用植物均经笔者鉴
定 o见表 t ∀
2 方法
211 色谱条件 默克 ≤t{色谱柱kw °° ≅ tux °° ox
Λ°l o预柱为 ≤t{柱k{ °° ≅ ts °° ox Λ°l ∀柱温 ws
ε o流速 s1|x °#°¬±pt o检测波长 u{s ±°∀乙腈和
水每 tss °分别加 s1t °²#pt的磷酸 t °∀梯度
洗脱条件见表 u ∀
212 供试品溶液的制备 精密称取各样品粉末k经
us目筛lts ªo包在滤纸筒中 o置索氏提取器内 o用
正己烷水浴回流提取至无色 ∀将提取后的药材粉末
干燥 o再用二氯甲烷 !甲醇依次同上法提取至无色 ∀
甲醇提取液浓缩至 ux °o放冷 o过滤 o取滤液再过
s1wx Λ°微孔滤膜为供试品溶液 ∀
213 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸 !橙皮
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第 vs卷第 y期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 t 缬草属药用植物样品及鉴定
实验编号 购入 !采集地点 时间 名称
t 河北安国 ussu p sz 蜘蛛香 ςαλεριαναϕαταµανσι
u 四川成都 ussu p sz 蜘蛛香 ς. ϕαταµανσι
v 贵州贵阳 ussu p sz 蜘蛛香 ς. ϕαταµανσι
w 四川雅安 ussu p sz 蜘蛛香 ς. ϕαταµανσι
x 陕西 ussu p sz 蜘蛛香 ς. ϕαταµανσι
y 云南昆明 ussu p sz 蜘蛛香 ς. ϕαταµανσι
z 四川峨眉山k自采l ussu p sz 蜘蛛香 ς. ϕαταµανσι
{ 北京松山k自采l ussv p sz 缬草 ς. οφφιχιναλισ
| 内蒙古赤峰k自采l ussu p sz 缬草 ς. οφφιχιναλισ
ts 中国植物园k产于欧洲lk自采l ussv p s{ 缬草 ς. οφφιχιναλισ
tt 湖北巴东县k自采l ussu p s{ 宽叶缬草 ς. οφφιχιναλισ √¤µqλατιφαλια
tu 贵州贵阳k自采l ussu p s{ 宽叶缬草 ς. οφφιχιναλισ √¤µqλατιφαλια
tv 黑龙江塔河林场k自采l ussu p s| 黑水缬草 ς. αµυρενσισ
tw 云南昆明西山k自采l ussu p ts 长序缬草 ς. ηαρδωιχκιι
tx 云南大理苍山k自采l ussu p ts 长序缬草 ς. ηαρδωιχκιι
ty 云南丽江玉湖乡雪松村k自采l ussu p ts 长序缬草 ς. ηαρδωιχκιι
表 u 梯度洗脱条件
时间
r°¬±
流动相
乙腈r h 水r h
u w |y
y x |x
| { |u
us { qz |t qv
uw tu qx {z qx
vs tv {z
xs tw {y
ys tx {x
苷 o加甲醇制成每 t °甲醇含绿原酸 v1u °ªo橙皮
苷 v1u °ª的溶液作为对照品溶液 ∀
214 精密度及稳定性考察 取同一份缬草属药用
植物k实验编号 wl的供试液重复进样 x次 o比较不
同色谱峰的绝对保留时间 !相对保留时间及峰面积
比值 ∀因进样间隔时间为 |s °¬±o故同时对该方法
进行了稳定性考察 ∀结果表明所标定色谱峰的绝对
保留时间 !相对保留时间及峰面积比值基本一致
k• ≥⁄分别为 s1su h ∗ u1v h os ∗ t1| h os ∗ u1z h l o
符合指纹图谱检测要求≈w  ∀
215 重复性实验 取缬草属药用植物k样品编号
wl样品 x份 o分别精密称定 o按 212 项方法制备供试
品溶液 o并分别按上述液相色谱条件测定 o计算不同
指纹峰的相对保留时间及峰面积比值 ∀结果表明所
标定色谱峰的绝对保留时间 !相对保留时间及峰面
积比值基本一致k• ≥⁄分别为 s1st h ∗ s1vy h os ∗
s1zx h os ∗ u1y h l o符合指纹图谱检测要求≈w  ∀
3 缬草属药用植物极性成分的 ‹°≤ 指纹图谱及
技术参数
311 缬草属药用植物极性成分的 ‹°≤ 指纹图谱
及共有峰的标定 按上述液相色谱条件对 z份缬草
属药用植物样品k表 t中的 t ∗ z号样品l进行了测
定 o样品中所有成分的色谱峰在 ys °¬±之内出完 o
比较各样品的色谱图 o其中 tu个峰是共有的 o确定
为指纹峰k见图 tl ∀各共有峰的紫外吸收k共有峰
峰号l为 }usu ouxy ±°kvl out{k¶«l ovuw ±°kw o| ots o
tul ~usu ouzy ±°kx oy o{l ~usuk¶«l ~u{u ±°kz ottl ∀
图 t 缬草属药用植物极性成分的指纹图谱
t ∗ tu1共有峰 ~w 1 绿原酸峰 ~tt1 橙皮苷峰
312 共有峰保留时间及峰面积的比值确定 以绿
原酸为参照 o把各色谱峰保留时间与同一图谱中绿
原酸保留时间的比值作为各色谱峰的相对保留时
间 ∀结果各共有峰峰号 k相对保留时间l为 }t
ks1ttl ouks1zs ∗ s1zvl ovks1{x ∗ s1{yl owkt1ssl ox
kt1tu ∗ t1twl oykt1uv ∗ t1uyl ozkt1y{ ∗ t1zsl o{
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kt1|y ∗ t1||l o|ku1xu ∗ u1x{l otsku1zx ∗ u1{sl ott
ku1{x ∗ u1|sl otukv1vt ∗ v1v|l ∀精密吸取对照品溶
液 ts ˏo按上述色谱条件测定 o以所得的绿原酸峰
面积作为 t o计算各样品图谱中色谱峰的峰面积比
值 o结果各共有峰的峰号k峰面积比值l为 }tks1sv ∗
s1tsl ouks1sx ∗ s1tsl ovks1sy ∗ s1s|l owks1z| ∗
t1wsl oxks1sz ∗ s1ttl oyks1sy ∗ s1s{l ozks1uv ∗
s1v{l o{ks1ty ∗ s1t{l o|ks1s| ∗ s1uzl otsks1vt ∗
s1|tl ottks1uz ∗ t1xul otuks1ux ∗ s1|zl ∀
z号峰和 tu号峰有时出现肩峰 ∀
313 不同来源的样品 ‹°≤ 图谱的比较 笔者同
时采用上述液相色谱条件测定了几种不同植物来源
的缬草属植物样品k表 t中的 { ∗ ty号样品l o见图
u ∀各样品极性成分的 ‹°≤ 图谱与所建立的缬草
属药用植物极性成分的指纹图谱比较结果见表 v ∀
结果表明 o其他植物来源的各缬草属药用植物的样
品的极性成分 ‹°≤图谱与来源于蜘蛛香的样品差
别明显 o对缬草属药用植物的真伪鉴别有重要意义 ∀
图 u x种不同植物来源的缬草属植物样品极性成分的 ‹°≤ 图谱
„1 蜘蛛香 ~…1 缬草 ~≤1宽叶缬草 ~⁄1黑水缬草 ~∞1 长序缬草
表 v 不同来源样品极性成分的 ‹°≤ 图谱与所建立的缬草属药用植物极性成分指纹图谱的比较
样品
缬草属药用植物指纹图谱共有峰编号
t u v w x y z { | ts tt tu
ςαλεριαναϕαταµανσι n n n n n n n n n n n n
ς. οφφιχιναλισ n p p n n n n n p n p p
ς. οφφιχιναλισ √¤µqλατιφολια n p p n n n n n n n p p
ς. αµυρενσισ n p n n n n n n p n p p
ς. ηαρδωιχκιι n p n n n n p n n n n n
注 }/ n 0表示具有该色谱峰 o/ p 0表示不具有该色谱峰
4 讨论
411 笔者建立了缬草属药用植物极性成分的 ‹°≤
测定方法 o该方法能使缬草属药用植物甲醇提取物
中的大部分化学成分得到较好分离 o具有很好的稳
定性 !重复性和可行性 ∀
412 在液相色谱条件建立的过程中 o笔者比较了波
长 t|s ∗ wss ±°所测得的 ‹°≤图谱k⁄„⁄检测器检
测l o结果表明 o波长 u{s ±°检测时 o其 ‹°≤图谱中
可见比较多的色谱峰 o同时各色谱峰分离较好 ~并且
该波长接近所选用对照品绿原酸的最大吸收波长 ~
故确定波长 u{s ±°为检测波长 ∀
413 本实验所应用的峰面积比值计算方法不同于
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文献≈x  ∀由于缬草属药用植物不同样品 ‹°≤ 指
纹图谱中 o各共有峰的峰面积均有一定的波动 o故笔
者认为不宜把各样品色谱图中某一共有峰峰面积均
作为 t来计算峰面积比值 ∀因此 o本实验以已知浓
度的绿原酸参照物溶液 o固定体积进样后 o同样色谱
条件所得峰面积作为 t o计算峰面积比值 ∀这样既
消除了一定的系统误差 o又能客观地反映不同样品
中各共有峰所代表的化学成分的含量高低 ∀通过缬
草属药用植物指纹图谱主要特征峰的面积比例的制
定 o亦能有效地控制中药缬草的质量 o确保缬草样品
质量的相对稳定 ∀
414 利用所建立的缬草属药用植物极性成分的
‹°≤指纹图谱的特征性k如其稳定的共有峰相对保
留时间l o有效地区分了所收集的来源于蜘蛛香的样
品和其他植物来源的样品 o对缬草类药材的鉴别具
有重要意义 ∀
蜘蛛香 !缬草 !宽叶缬草 !黑水缬草 !长序缬草 o
这 x种植物药材极性成分的 ‹°≤ 图谱相互之间存
在较大差别 ~而同一植物来源的不同样品极性成分
的 ‹°≤图谱基本一致 o其差别明显小于不同植物
的样品 ‹°≤图谱 ~鉴于几种缬草样品性状 !显微特
征及原植物形态较相近 o故可以认为从化学成分的
角度进行区分应该是有效的途径 o可以从化学分类
上为缬草属这几种植物的分类提供佐证 ∀
另外 o本研究结果也提示 o在制定指纹图谱的过
程中 o对于多来源的中药材 o应把不同植物分别进行
研究 ∀
415 从结构和性质上说 o由于缬草属药用植物的脂
溶性成分中含有倍半萜 !环烯醚萜等不稳定组分 o化
学结构复杂易变 o化学性质极其活泼 o在制备过程中
受酸 !碱 !热等较剧烈条件影响 o易发生断键 !开环 !
异构化作用 o难以获得稳定的标准物质 ∀因此 o对缬
草属药用植物而言 o其脂溶性成分可能不适宜做
‹°≤指纹图谱 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qt|z{ qyvv
≈u  国家中医药管理局中华本草编委会 q中华本草 q第 z册 q第 tu
卷 q上海 }上海科技出版社 ot||| qxzw q
≈v  张振学 o姚新生 q药用植物缬草的化学研究进展 q中国药物化
学杂志 ousss otskvl }uuy q
≈w  关于印发5中药注射剂指纹图谱研究的技术要求k暂行l的通
知6 q中国药品标准 ousss otkwl }v q
≈x  屠鹏飞 q中药材指纹图谱的建立及技术要求实例解说 q中国
药品标准 ousss otkwl }uu q
Σδυδιεσ ον ΗΠΛΧ φινγερπριντ οφ τηε ηψδροπηιλιχ χονστιτυεντσ
οφ ς αλεριανα µεδιχιναλ πλαντσ
≥‹Œ¬±2¯¬oŒ˜ ≠²±ªo ÷Œ„’ °¨ ¬2ª¨ ±
( Σχηοολ οφ Χηινεσε Πηαρµαχολογψ, Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsstsu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·²©·«¨ «¼§µ²³«¬¯¬¦¦²±¶·¬·∏¨±·¶²© ςαλεριανα ° §¨¬¦¬±¤¯ ³¯¤±·¶q Μετηοδ : ׫¨ ‹°≤2
˜∂ ¤¶¶¤¼ º¤¶∏¶¨§·² ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·²©·«¨ «¼§µ²³«¬¯¬¦¦²±¶·¬·∏¨±·¶²© ςαλεριανα ° §¨¬¦¬±¤¯ ³¯¤±·¶qΡεσυλτ : ׫¨ ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·³µ²2
©¬¯¨ ¶²©·«¨ «¼§µ²³«¬¯¬¦¦²±¶·¬·∏¨±·¶²© ςαλεριανα ° §¨¬¦¬±¤¯ ³¯¤±·¶¦²±·¤¬±¶tu ¦²°°²± ³¨ ¤®¶q׫¨ µ¨ ¤¯·¬√¨µ¨·¨±·¬²±·¬°¨¤±§·«¨ µ¤±ª¨¶²©µ¨ ¤¯2
·¬√¨¤µ¨¤²©·«¨ ¦²°°²± ³¨ ¤®¶º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §q Χονχλυσιον : ׫¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·³µ²©¬¯¨ ¦¤± ¥¨ ∏¶¨§©²µ·«¨ ¬§¨±·¬©¬¦¤·¬²± ¤±§ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©
ςαλεριανα ° §¨¬¦¬±¤¯ ³¯¤±·¶q
[ Κεψ ωορδσ] ςαλεριανα ° §¨¬¦¬±¤¯ ³¯¤±·¶~ ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·~¦«¯²µ²ª¨ ±¬¦¤¦¬§~«¨¶³¨µ¬§¬±
≈责任编辑 王康正 
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