全 文 ：栽培条叶龙胆各形态类型龙胆苦苷含量的测定
王 臣t ou 3 o邢秀芳v o马立祥t o关 t o戴绍军t o刘鸣远t
kt q哈尔滨师范大学 生物系 o黑龙江 哈尔滨 txss{s ~
u q东北农业大学 o黑龙江 哈尔滨 txssvs ~
v q黑龙江省中药研究所 o黑龙江 哈尔滨 txsswsl
≈摘要  目的 }研究条叶龙胆栽培种群中形态变异与根中龙胆苦苷含量之间的相关性 o探讨条叶龙胆有效成
分高含量育种的可行性 ∀方法 }自条叶龙胆栽培种群中选出 x个形态类型 o即正常k野生l型 !白花型 !粗根型 !宽叶
´型和宽叶 µ型 o采用高效液相色谱法测定根中龙胆苦苷含量 ∀结果 }不同类型之间的龙胆苦苷含量差异较大 o以
粗根型为最高 o其他依次为正常k野生l型 !宽叶 ´型 !白花型 !宽叶 µ型 ~而同一类型的根系中龙胆苦苷含量与根龄
呈正相关 o即 v 龄根  u 龄根  t 龄根 ∀结论 }栽培条叶龙胆在形态上发生明显变异的同时有效成分含量亦发生显
著变化 o进行高含量育种是可行的 o可以以某一形态性状作为高含量育种的选择指标 ∀
≈关键词  条叶龙胆 ~龙胆苦苷 ~高效液相色谱法
≈中图分类号  ≥ xyz ~• u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswls|2s{wt2sw
龙胆草为龙胆科龙胆属 Γεντιανα多年生草本植
物 o以根及根茎入药 o有清热燥湿 o泻肝胆火之功 ∀
主治湿热黄疸 o阴肿阴痒 o带下 o强中 o湿疹瘙痒 o目
赤 o耳聋 o肋痛 o口苦 o惊风抽搐等症≈t  ∀东北产龙胆
草 o因商品外观形态好 !有效成分含量高 !临床疗效
显著而被特称为/关龙胆0 o其原植物为主要分布于
松嫩平原西部的条叶龙胆 Γ . µανσηυριχα Ž¬·¤ªq和产
于东部山区的粗糙龙胆k龙胆l Γ . σχαβρα …∏±ª¨ 及三
花龙胆 Γ . τριφλορα °¤¯¯q∀ /关龙胆0是黑龙江省优质
地道中药材 o由于连年过度采挖 !开荒种田 !牧区在
龙胆花期收割牧草以及其自然更新周期长等原因 o
致使野生资源已濒临枯竭 ov个物种均处于濒危状
态≈u  o市场价格持续攀升 ∀为满足医药市场的需求 o
自 us世纪 {s年代起人们开始了引种驯化研究 o目
前 o通过有性繁殖和无性繁殖 o已将条叶龙胆和粗糙
龙胆驯化栽培成功 o并开始了规模化生产≈v2{  ∀
条叶龙胆是/关龙胆0的主导品种 o在驯化栽培
和规模化生产过程中 o产生了一些明显的形态变异 o
它们分别为白花型 !粗根型 !宽叶 ´型 !宽叶 µ型 o检
索特征见表 t ∀根据形态变异落后于生理生化变异
的一般规律 o推测各形态类型可能在次生代谢产物
上也会有所反映 ∀本研究采用高效液相色谱法测定
野生型及各变异型根中龙胆苦苷含量 o探讨形态变
异与有效成分含量之间的关系 o评价上述变异型的
选育价值 o从而为选育优良的条叶龙胆新品种积累
宝贵的育种资料 ∀
表 t 实验材料检索表
t q花白色 o蕾期外表有紫色 o开花后紫色渐褪去 白花型, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,
t q花蓝色或蓝紫色
u q叶线形 !条形披针形 o宽约 s qx ∗ t qx ¦° o长约 y ∗ |kttl ¦° o不定根淡黄色
v q不定根直径 t ∗ x °° 野生型, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,
v q不定根直径 w ∗ { °° 粗根型, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,
u q叶披针形 !宽披针形至卵形 ) 卵状披针形 o不定根白色
w q叶披针形至宽披针形 o宽约 t qx ∗ u ¦° o长约 y ∗ z ¦° o有光泽 宽叶 ´型, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,
w q叶卵形至卵状披针形 o宽约 u ∗ u qx ¦° o长约 y ∗ z ¦° o无光泽 宽叶 µ型, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,
≈收稿日期  ussv2ts2tu
≈基金项目  黑龙江省教育厅科学技术研究项目k|xxtstsl
≈通讯作者  3王臣 oר¯ }kswxtl{{sysxzy
1 材料 !仪器与试剂
1 q1 材料 实验药材均取自黑龙江杜蒙自治县江
湾乡龙胆栽培基地 o沙壤土 o³‹ 为 { qw ~于 ussu年 |
月 uu日挖取定植 v年的正常型及 w种变异型植株各
#tw{#
第 u|卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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x ∗ y株 o将每个类型各株根系的 t ou ov龄根分别合
并 o置室温下阴干 o粉碎过 ws目筛 o根粉备用 ∀
定植 v年植株的根系 t ou ov龄根在直径大小 !表
面结构及颜色 !数目等方面均有差异 ∀t龄根外皮完
整 o白色 o无木栓化 o直径小 o数目多 o一般有 ts条 ~u
龄根表面有不同程度的木栓化现象 o乳黄或棕黄色 o
直径较大 o数目为 t龄根的 tru ∗ urv ow ∗ ts条不等 ~
v龄根表面普遍木栓化 o栓化层明显且有脱落 o直径
一般大于前两者 o数目通常为 t ∗ v条 ∀
1 q2 仪器 „ª¬¯¨ ±·ttss高效液相色谱仪 ~大连依利
特公司 ∞¦«µ²° |{工作站 ∀
1 q3 试剂 龙胆苦苷对照品购自中国药品生物制
品检定所 ~甲醇为色谱纯 o乙醇为分析纯 o水为重蒸
水 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 钻石 ≤t{色谱柱k日本lkw qy °° ≅
uxs °° ox Λ° l ~流动相甲醇2水kvxΒyxl ~流速 t qs
°#°¬±pt ~紫外检测波长 uzw ±° ~理论塔板数按龙胆
苦苷峰计算应不低于 x sss ~柱温 ws ε ∀
2 q2 对照品溶液的制备 精密称取龙胆苦苷对照
品适量 o加甲醇制成每 t °含 y Λª的溶液 o作为对
照品溶液 ∀
2 q3 供试品溶液及阴性对照液的制备 精密称取
龙胆根粉约 s .sx ªo放入 tss °量瓶中 o加入 |s °
zs h乙醇超声提取 vs °¬±o冷却至室温 o加入 zs h乙
醇至刻度 o摇匀 o放置过夜 ∀取上清液 t °加入到
ts °容量瓶中 o用 zs h乙醇定容并摇匀 o用微孔滤
膜滤过 o取续滤液作为供试品溶液 ∀用 zs h乙醇作
阴性对照液 ∀
在上述色谱条件下 o分别精密吸取对照品溶液 !
阴性对照液与供试品溶液各 ts ˏ o注入液相色谱
仪 o测定 o得到龙胆苦苷对照品溶液 !阴性对照液与
供试品溶液的色谱图k见图 tl ∀
图 t 对照品 !空白对照和样品 ‹°≤ 图谱
„ q对照品 ~…q阴性对照 ~≤ q样品 ~¤q龙胆苦苷
2 q4 线性关系考察 精密称取龙胆苦苷对照品 o加
甲醇制成 s qsv °ª#°pt的对照品溶液 ∀精密吸取对
照品溶液 t ov ox oz o| ˏ注入高效液相色谱仪 o记录
色谱图 o以峰面积为纵坐标 o以浓度k°ª#°ptl为横
坐标 o绘制标准曲线 ∀回归方程 }Ψ € |{yws Ξ p
xs .vvz , ρ€ s q||| qu在 s qsu{ { ∗ s qux| u °ª#°pt具
有良好的线性关系 ∀
2 q5 精密度试验 精密吸取同一份样品溶液 ts
ˏo重复进样 y次 o测定龙胆苦苷峰面积积分值 o结
果 • ≥⁄€ t quy h ∀
2 q6 稳定性试验 按样品溶液制备及测定方法进
行试验 o从配制完毕开始放置 t ou ow o{ otu ouw «各进
样 t次 o进行含量测定 ∀结果表明本品供试溶液中
龙胆苦苷在至少 { «内稳定 ∀ • ≥⁄€ t qxu h ∀
2 q7 重现性试验 取同一批样品 y份 o按样品制备
项下方法制备 o测定龙胆苦苷含量 o结果 • ≥⁄ €
t qzv h ∀
2 q8 加样回收率试验 精密称取已知含量的同一
批样品 y份 o分别精密加入龙胆苦苷对照品溶液 o按
供试品溶液的制备方法处理 o并适当稀释 o计算加样
回收率 o结果见表 u ∀
方法学研究表明 o采用上述实验体系进行龙胆
苦苷含量测定 o重现性好 o准确可靠 ∀
表 u 龙胆根中龙胆苦苷加样回收率测定结果
称样量
r°ª
含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
• ≥⁄
r h
ux qvu u qyw w q{t |z qv
ux q{u u qy| w q|s || qt
uw qzt u qx{ w qzu |y qs |{ qv t q|
ux qzs u qy{ w q{z |{ qu
uv qwy u qwx w qyv |z q{
uv qzx u qw{ w qzw tst qw
注 }加入量均为 u quv °ª
2 q9 样品测定结果 取试验用样品 o按上述供试品
溶液制备方法制备样品溶液 o进样分析 o所得结果见
表 v ∀从表中可以看出 o同一根系不同根龄的根中龙
胆苦苷含量存在明显差异 o在 t ∗ v龄根中含量与根
龄呈正相关 o即龙胆苦苷含量 v龄根  u 龄根  t 龄
根 ~另外 o所选出的 w种形态变异型在龙胆苦苷含量
上亦表现出明显差异 o粗根型的龙胆苦苷含量比正
常型k野生型l显著提高 o特别是u龄根提高达到
uu qsy h ~另 v种变异型的龙胆苦苷含量明显降低 o
其中宽叶 µ型降低幅度最大 o而以 v龄根最甚 o降低
了 uu qzy h ∀
#uw{#
第 u|卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 v 不同变异型龙胆苦苷含量测定结果 h
材料
t龄根
含量 变异幅度
u龄根
含量 变异幅度
v龄根
含量 变异幅度
野生型 | qty s | qyt s tt qy| s
粗根型 ts qwv tv q{y tt qzv uu qsy tu qzt { qzv
宽叶 ´型 | qsx p t qus | qxt p t qsw ts qvw p tt qxx
宽叶 µ型 z q|s p tv qzy { qz| p { qxv | qsv p uu qzy
白花型 { qyw p x qy{ { q{t p { qvu | qtz p ut qxy
3 讨论
3 q1 条叶龙胆的多年生特点表现在根系上 o其根系
为须根系 o构成根系的不定根是不同龄的 ∀试验结
果表明 o同一根系不同根龄的根中龙胆苦苷含量与
根龄呈正相关 o这可以具体地解释前人报道龙胆苦
苷含量随生长年限增加而增加的原因≈| ots  ∀由此可
以认为 o在保证栽培效益的前提下 o适度延长栽培年
限可以有效提高栽培龙胆的药材质量 ∀
3 q2 条叶龙胆在驯化栽培过程中产生了明显的形
态性状变异 o这说明野生条叶龙胆的遗传结构处于
杂合状态 o在栽培条件下 o由于排除了野生群落中其
它伴生种的竞争 o这种杂合性在后代中分离并得以
表现和保存 ∀中药材育种更应注重内在质量的变
异 o本研究表明 o栽培条叶龙胆在形态上发生明显变
异的同时有效成分含量亦发生显著变化 o进行高含
量育种是可行的 ∀探讨含量的变化与形态变异的相
关性 o一者可以评价形态变异的育种价值 o另一方面
可以以某一形态性状作为高含量育种的选择指标 o
使选择工作高效 !迅捷 !经济 ∀
3 q3 根条粗的根系采收时容易挖得更长 o加工出率
高 o药材外观质量因根条粗长而更好 o本研究中粗根
型的龙胆苦苷含量比正常型k野生型l显著提高 o其
意义不言而喻 o结合产量性状进行选育将会有实质
性的成效 ∀
3 q4 栽培条叶龙胆的叶形在叶长和叶宽上的变异
是连续的 o本研究中 u个宽叶类型的龙胆苦苷含量
均有所降低 o特别是宽叶 µ型尤甚 o进一步研究叶形
变异与龙胆苦苷含量之间的关系可以从形态上判明
含量的变异趋势 o有利于简化选择程序 ∀
3 q5 在花色变异方面 o除白花变异外 o还发现了粉
花类型 o白花型的 t ou ov龄根龙胆苦苷含量均明显
低于正常型值 o而粉花型龙胆苦苷含量如何以及花
色素的合成与次生代谢产物之间的关系尚待进一步
研究 ∀
3 q6 前人报道条叶龙胆主要进行异花授粉≈x o{  o因
而 o可以肯定个体间在遗传上存在差异 o后代在表型
上会有一定幅度的变异 o但在育种工作条件下 o通过
控制传粉和定向选择 o可以使栽培群体达到基因型
的纯合 o进而在表型及成分含量上趋于一致 ∀几种
形态类型的稳定性有待进一步研究 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qusss qzv q
≈u  张恩迪 o郑汉臣 q中国濒危野生药用动植物资源保护 q上海 }第
二军医大学出版社 oussu qu{ q
≈v  李春荣 o崔雅娟 o刘鸣远 q条叶龙胆k Γεντιανα µανσηυριχα Ž¬·¤ªql
试管苗的无性繁殖 q哈尔滨师范大学自然科学学报 ot|{t o
kul }ww q
≈w  刘鸣远 q关龙胆繁殖方法的研究 q中草药 ot|{w otxktl }vw q
≈x  刘鸣远 q东北特产药用植物 ) ) ) 东北龙胆的研究 q哈尔滨师范
大学自然科学学报 ot|{{ owkvl }{s q
≈y  麻俊宝 o李润霞 o肖淑梅 o等 q野生龙胆草直播育苗技术的初步
研究 q吉林农业大学学报 ot||t otvkvl }{z q
≈z  魏云洁 o孔祥义 o张连学 o等 q龙胆草播种技术研究 q特产研究 o
t||w okvl }vs q
≈{  刘鸣远 o王 栋 o都晓伟 q根类药材植物生物学 q北京 }中国农
业科技出版社 ot||x qts q
≈|  陆蕴如 o杨小江 o邵爱新 q不同生长年限采收期龙胆根 !龙胆炮
炙品及植物各部位中龙胆苦苷含量比较 q中药通报 ot|{y ott
kxl }u{| q
≈ts  魏云洁 o孔祥义 o赵景辉 o等 q粗糙龙胆和东北龙胆化学成分比
较 q特产研究 ot||{ oktl }uz q
∆ετερµινατιον οφ γεντιοπιχροσιδειν διφφερεντ µ ορπηολογιχαλτψπεσ
οφ χυλτιϖατεδ Γεντιανα µανσηυριχα ποπυλατιον
• „‘Š ≤«¨ ±t ou o ÷Œ‘Š ÷¬∏2©¤±ªv o  „ ¬2¬¬¤±ªt oŠ˜„‘¼¤±ªt o⁄„Œ ≥«¤²2­∏±t oŒ˜ ¬±ª2¼∏¤±t
(t . ∆επαρτµεντ οφ Βιολογψ Ηαρβιν Νορµαλ Υνιϖερσιτψ, Ηαρβιν txss{s , Χηινα ;
#vw{#
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ |
≥¨ ³·¨°¥¨µoussw
u . Νορτηεαστ Αγιχυλτυραλ Υνιϖερσιτψ, Ηαρβιν txssvs , Χηινα ;
v . Ηειλονγϕιανγ Αχαδεµψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Ηαρβιν txssws , Χηινα )
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¦²µµ¨ ¤¯·¬²± ¥¨·º¨¨ ± °²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ √¤µ¬¤·¬²± ¤±§ ª¨ ±·¬²³¬¦µ²¶¬§¨ ¦²±·¨±·¬± ¦∏¯·¬√¤·¨§ Γεντιανα
µανσηυριχαµ²²·¶¤±§·²¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨ ¤¶¬¥¬¯¬·¼ ²©¥µ¨ §¨¬±ª±¨ º √¤µ¬¨·¬¨¶²©«¬ª« ©¨©¨¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨±·¦²±·¨±·q Μετηοδ : Š¨ ±·¬²³¬¦µ²¶¬§¨ º¤¶
§¨·¨µ°¬±¨ §¬± x °²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ ·¼³¨¶²©¦∏¯·¬√¤·¨§ Γ . µανσηυριχα µ²²·¶¥¼ ‹°≤ o º«¬¦« ¤µ¨ ±²µ°¤¯ k²µº¬¯§l ·¼³¨ o º«¬·¨2©¯²º µ¨¨§·¼³¨ o
·«¬¦®2µ²²·¨§·¼³¨ o¥µ²¤§2¯ ¤¨√ §¨·¼³¨ Œ¤±§¥µ²¤§2¯ ¤¨√ §¨·¼³¨ µ q Ρεσυλτ : „°²±ª§¬©©¨µ¨±··¼³¨¶ª¨ ±·¬²³¬¦µ²¶¬§¨ ¦²±·¨±·¬¶·«¨ «¬ª«¨¶·¬±·«¨
µ²²·¶²©·«¬¦®2µ²²·¨§·¼³¨ o·«¨ ¦²±·¨±·¶§¨¦µ¨¤¶¨ ¤¶©²¯ ²¯º¬±ª²µ§¨µ}±²µ°¤¯ ·¼³¨ o¥µ²¤§2¯ ¤¨√ §¨·¼³¨ Œ º«¬·¨2©¯²º µ¨¨§·¼³¨ ¤±§¥µ²¤§2¯ ¤¨√ §¨
·¼³¨ ŒŒo¤±§·«¨ ª¨ ±·¬²³¬¦µ²¶¬§¨ ¦²±·¨±·¶¬±·«¨ ¶¤°¨·¼³¨ µ²²·¶¼¶·¨° ¤µ¨ ¤³²¶¬·¬√¨¦²µµ¨ ¤¯·¬²± º¬·«µ²²·¤ª¨¶o¤¶v2¼¨ ¤µ¶2¤ª¨ µ²²·¶ u2¼¨ ¤µ¶2
¤ª¨ µ²²·¶ t2¼¨ ¤µ2¤ª¨ √¤µ¬¨§º¬·«µ²²·¶qΧονχλυσιον : ׫¨ ¦²±·¨±·¶²© ©¨©¨¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨±·√¤µ¼ º¬·«·«¨ °²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ √¤µ¬¤·¬²±¬± ¦∏¯·¬√¤·¨§
Γ . µανσηυριχαqŒ·¬¶©¨¤¶¬¥¯¨·²¥µ¨ §¨¤ ±¨ º √¤µ¬¨·¼ º¬·««¬ª« ©¨©¨¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨±·º¬·«·«¨ °²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ ¦«¤µ¤¦·¨µ¤¶¤¶¨¯¨ ¦·¬±ª¬±§¨¬q
[ Κεψ ωορδσ] Γεντιανα µανσηυριχα ; ª¨ ±·¬²³¬¦µ²¶¬§¨ ~ ‹°≤
≈责任编辑 王康正 
不同产地丹参的无机元素含量及其
生长土壤的理化性质
赵杨景t 3 o陈四宝t o高光耀t o冯毓秀t o
杨世林t o徐丽珍t o杜力军u o林 佳t o李 敏t
kt q中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|w ~
u q清华大学 o北京 tsss|tl
≈摘要  目的 }为道地丹参提供土壤环境因子的依据 ∀方法 }应用实地考察和室内化学分析研究丹参生长土
壤的理化性质和药材的无机元素含量 ∀所得数据用 ≥°≥≥ ts qs软件进行分析比较 ∀结果 }主产区的丹参对铜和锌
元素的吸收具有富集作用 ~在丹参生长土壤的主成分分析中 o主成分不明显 o说明丹参对土壤生境适应性强 ∀结
论 }土壤生态环境不是形成道地丹参的主导因子 ∀
≈关键词  丹参 ~无机元素 ~土壤理化性质
≈中图分类号  ≥ xyz ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswls|2s{ww2sz
5中国药典6正品丹参为唇形科植物丹参 Σαλϖια
µιλτιορρηιζα …ª¨ q的干燥根及根茎 ∀是常用的重要中
药材 ∀由于其生态适应性强 o广布于我国华北 !华
东 !华中地区 o西南四川亦有分布 ∀因野生资源的减
少 o全国许多地区都引种栽培 o尤其 us世纪 zs年代
后栽培面积迅速扩大 o其中河南 !山东 !四川 !山西产
量较大 o其次是陕西 !湖北 !安徽 !上海等省市 ∀为了
避免盲目引种 o确保药材的质量 o作者就丹参的道地
性进行了系统的研究 o现报道如下 ∀
≈收稿日期  ussv2sv2tt
≈基金项目  国家自然科学基金重点项目kv|zvsxssl
≈通讯作者  3 赵杨景 oר¯ }kstslyu{|{ut| oƒ¤¬}kstslyu{|{wux
∞2°¤¬¯}½«¤²¼¤±ª­¬±ªƒ «²·°¤¬¯q¦²°
1 材料与方法
1 q1 材料 从 t||{ ∗ t|||年在丹参主产区k四川 !
河南 !山东l及山西 !河北采集栽培与野生丹参药材
及其生长的土壤样品k表 tl ∀每份样品为多点采
集 o土壤样品混合风干后备用 o药材样品由中国医学
科学院药用植物研究所冯毓秀研究员鉴定为正品丹
参 ∀
表 t 丹参药材及其生长的土壤样品来源
采样时间r年2月 地区 品种
t||{2s{ 四川k中江l 栽培
t|||2s| 山西k襄汾 !绛县 !垣曲l 栽培
t|||2ts 河南k灵宝 !卢氏 !洛宁 !嵩县l 栽培和野生
t|||2ts 山东k沂南 !沂水 !莱芜l 栽培和野生
t|||2ts 河北k承德l 栽培
#ww{#
第 u|卷第 |期
ussw年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ |
≥¨ ³·¨°¥¨µoussw