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Anti-mutagenesis Effects of Total Flavonoids of Astragalus

黄芪总黄酮抗突变作用实验研究



全 文 :发油及姜酮等 ∀进一步的研究正在进行中 ∀
缩宫素是产科分娩时的常规用药 o起到催产 !减
少产后出血 o促进产后子宫复位的作用 ∀生化汤提
取物具有与缩宫素相似的药理作用 o但两者作用特
点不同 o生化汤提取物引起的宫缩富有节律性而非
强直性 o药效温和持久 o未观察到对心血管系统的副
作用 ∀由于生化汤提取物系口服药 o药效发挥时间
比静脉给药的缩宫素明显延迟 o因此给药时间应比
缩宫素适当提前 o在第二产程开始时为宜 ∀
≈参考文献 
≈t  史淑兰 q药物流产后加服生化汤缩短阴道出血时间观察 q现
代中西医结合杂志 oussu ottkttl }tsvw q
≈u  闵庆华 o郑红 o石玉发 q生化汤对药物流产的作用 q实用临床
医学 oussu okwl }封二 q
≈v  邱杏琴 q生化汤治疗产后恶露不止 vy例 q现代中西医结合杂
志 ousss o|ktwl }yvvt q
≈w  ≤¶¤³² „ Œoפ®¨ §¤o • ²²§≤ q ∂ ²¯∏°¨¤±§„¦·¬√¬·¼ ²©·«¨ °¤µ·∏µ¬2
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≈x  蒋长松 o周幼幼 o熊承良 o等 q国产米非司酮对早孕家兔收缩和
电活动的影响 q同济大学学报 ot||t ous kvl }tzw q
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Εφφεχτ οφ Εξτραχτ φροµ Σηενγηυα ∆εχοχτιον ον Μψοελεχτριχ Αχτιϖιτψ
οφ Ραββιτ Υτερινε Μυσχλειν τηε Λατεστ Περιοδ οφ Πρεγνανχψ
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¨¯∏¦¬§¤·¨ ·«¨ §¬©©¨ µ¨±¦¨ ¥¨·º¨¨ ± ∏·¨µ∏¶¥²§¼ ¤±§¦¨µ√¬¬ ∏±§¨µ·«¨ ¬±·¨µ√ ±¨·¬²± ²© ≥«¨ ±ª«∏¤ §¨¦²¦2
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k Π s qsxl qΧονχλυσιον :  ¼²¨ ¯¨ ¦·µ¬¦¤¦·¬√¬·¬¨¶²©µ¤¥¥¬·∏·¨µ¬±¨ °∏¶¦¯¨¬±·«¨ ¤¯·¨¶·³¨µ¬²§²©³µ¨ª±¤±¦¼ ¤µ¨ ±¨«¤±¦¨§¥¼ ¥¨¬±ª·µ¨¤·2
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[ Κεψ ωορδσ] °¼²¨ ¯¨ ¦·µ¬¦¤¦·¬√¬·¼ ~≥«¨ ±ª«∏¤§¨¦²¦·¬²±
≈责任编辑 方文贤 
黄芪总黄酮抗突变作用实验研究
汪德清 o田亚平 o宋淑珍 o王 玲
k解放军总医院 生化科 o北京 tss{xvl
≈摘要  目的 }探讨黄芪总黄酮k× ƒ„l是否具有抗突变作用 ∀方法 }设 v个浓度的药物组和突变物对照组 o采
用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验 !小鼠睾丸精子畸变实验和体外哺乳类动物细胞 ∂ z|r‹ Š°• × 基因突变试验 ∀
≈收稿日期  ussv2sz2ts
≈基金项目  国家教委回国人员科研启动基金
≈通讯作者  汪德清 ר¯ }kstsl yy|vyutw ƒ¤¬}kstsl{{utzv{x ∞2°¤¬¯}§¨ ¬´±ªº ƒ √¬³q¶¬±¤q¦²°
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第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
结果 }与突变物对照组比较 o× ƒ„不影响小鼠体重增长 ~高剂量组的 × ƒ„ 可明显抑制环磷酰胺诱发的小鼠骨髓嗜
多染红细胞微核发生和体外培养的哺乳类动物细胞 ∂ z|r‹ Š°• × 基因突变 o但对丝裂酶素 ≤ 诱发的小鼠睾丸染
色体畸变无统计学抑制作用 ∀结论 }× ƒ„具有一定的抗突变作用 ∀
≈关键词  黄芪总黄酮 ~突变 ~微核实验 ~精子畸变实验 ~基因突变
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvltu2ttyw2sw
黄芪是一种常用的补气要药 o现代药理学研究
表明它有调节免疫 !抗病毒 !降低肝损伤及抗突变等
多种作用≈t2v  o研究显示它之所以有如此多的功效
是由于它含有多种活性成分如多糖 !黄酮 !皂苷及微
量元素≈t  ∀黄芪总黄酮k׃„l是从黄芪中分离出的
天然抗氧化物质 o它具有清除自由基和抗肝损伤等
作用≈u ow  ∀但 × ƒ„ 是否具有抗突变作用目前未见
报道 o今用 v种体系对 × ƒ„ 的抗突变作用进行研
究 ∀
1 材料和方法
1 q1 材料
1 q1 q1 × ƒ„ 的制备 本室分离纯化 o军事医学科
学院放射医学研究所鉴定 ∀ × ƒ„ 先用山梨醇甲酯
溶解 o再用蒸馏水稀释至所需浓度 ∀
1 q1 q2 实验动物 昆明种二级雄性小鼠 {s只 o购
自中国医学科学院实验动物研究所 o体重 ux ∗ u{ ªo
合格证号为 ≥’ ÷ Žtt2ss2sssy ∀
1 q1 q3 细胞株 中国仓鼠肺 ∂ z|细胞株 o购自中
国医学科学院肿瘤研究所 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 体外哺乳类动物细胞 ∂ z|r‹Š°• × 基因突
变试验 取对数生长期 ∂ z|细胞 o按文献≈x 方法
进行 ∀实验分 v个浓度的 ׃„kus oy ou °ª#ptl组 !
阳性对照k丝裂霉素 ≤ o  ≤ ~终浓度为 t qs °ª#
ptl组和阴性对照k⁄ ∞ 培养基l ∀将 x ≅ tsx个
细胞接种于直径为 tss °° 平皿中 o于 vz ε ox h
≤ ’u培养箱中放置 uw «∀吸去培养液上清 o°…≥洗
u次 o加入无血清培养液及一定浓度的 × ƒ„ o置于培
养箱中 u «o结束后吸去培养液 o换入含 ts h血清的
培养液 o继续培养 t| ∗ us «∀消化计数 o以 x ≅ tsx
个细胞接种于直径 tss °° 的平皿 ov §后传代 t
次 o每皿仍接种 x ≅ tsx 个细胞培养 v §∀共表达 y
§∀
突变体的选择及集落形成率的测定 }表达结束
后 o消化细胞 o每组 x个皿 o每皿种 u ≅ tsx 个细胞 o
放培养箱中 o待细胞贴壁后加入 y2硫鸟嘌呤 o终浓
度为 x °ª#p t ∀培养 { ∗ ts §后弃上清液 o甲醇固
定 oŠ¬¨ °¶¤染色计数每皿集落数并计算突变率 ∀同
时另做集落形成率测定 o计算集落形成率 ∀
突变率k个rtsy 存活细胞l € 突变集落数r接种细胞数
ktsyl ≅集落形成率
抑制率k h l € k阳性组突变率 p受试物组突变率lrk 阳
性组突变率 p阴性组突变率l
1 q2 q2 小鼠骨髓细胞微核试验 ws只昆明小鼠随
机分为高 !中 !低剂量 × ƒ„k{ oux o{s °ª#®ªp tl组
和阳性对照k环磷酰胺 o ≤° ~ws °ª#®ªp tl组 o每组
ts只 o按文献≈x 的方法进行试验 ∀每只小鼠计数
t sss个嗜多染红细胞中微核细胞发生数k ϕ l ∀
1 q2 q3 小鼠睾丸染色体畸变试验 昆明小鼠 ws只
随机分为 w组 o分别为致突变物k丝裂霉素 ≤l阳性
对照组和 v个剂量k{ oux o{s °ª#®ªp tl的 × ƒ„ 组 o
每组 ts只 ∀按文献≈x 的方法进行试验 ∀每只小鼠
经镜检分析 xs个中期相细胞 ∀计算性染色体单价
体 !常染色体单价体 !染色体断片 !染色体异位和畸
变细胞率 ∀
1 q3 统计方法 小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾
丸染色体畸变试验各组间小鼠体重比较采用方差分
析进行统计 o微核细胞率 !睾丸染色体畸变细胞率和
∂ z|细胞基因突变率比较采用泊松分布进行统计 ∀
2 结果
2 q1 ׃„对   ≤ 诱发 ∂ z|细胞基因突变的影响
从表 t可见 o各受试物剂量组的基因突变率均低
于阳性对照组 ous °ª#pt高剂量组对   ≤ 诱发
的基因突变率与阳性对照组比较有显著性差异
kΠ s qsxl ∀结果表明 o׃„ 对体外培养的哺乳类
动物细胞基因突变有抑制作用 ∀
2 q2 ׃„对 ≤°诱导小鼠骨髓细胞微核的影响
实验结果表明给 × ƒ„ vs §后各 × ƒ„剂量组小
鼠体重与对照组相比无显著性差异k Ё s qsxl ∀从
表 u可见 o给受试物高剂量组的微核细胞发生率明
显低于 ≤°阳性对照组 o且有显著性差异k Π 
s qsxl ∀结果表明 o当 × ƒ„ 剂量达 {s °ª#®ªp t时 o
有抗 ≤°诱发的小鼠体细胞突变作用 ∀
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第 u{卷第 tu期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
表 t × ƒ„对体外哺乳类动物细胞基因突变的影响
组别
剂量
r°ª#p t
集落形成率
r h
突变集落数
r个rtsy细胞
突变率
r个rtsy存活细胞
统计量
r Υ值 Π值
抑制率
r h
阴性对照组 {| q| w qs w qwt
阳性对照组 w| qv tsz qs utz qs
× ƒ„组 u xt qz |x qs {v qz t qzss s s qs{{ { tx qy
y wy qx{ { qs t{| qu t qv{| y s qtyw u tv qt
us ws qy y{ qs tyz qx u qxxt y s qsts z uv qv
注 }˜值及 Π值为各受试物组与阳性组比较 k表 u ov同l
表 u × ƒ„对 ≤°诱发的小鼠骨髓细胞微核的影响k ν € tsl
组别
r°ª#®ªp t
观察细胞数
r个
微核数
r个
发生率
r ϕ
统计量
r Υ值 Π值
≤° t ≅ tsw vut vu qt
× ƒ„r{ t ≅ tsw vuy vu qy
× ƒ„rux t ≅ tsw u|t u| qt t qutu z s quuw z
× ƒ„r{s t ≅ tsw uzs uz qs u qs|z | s qsvx {
2 q3 × ƒ„对   ≤ 诱发小鼠睾丸染色体畸变的影
响 数据表明在试验期间 ׃„ 各剂量组小鼠体重
与对照组相比无差异k Ё s qsxl ∀各剂量 ׃„组的
睾丸染色体畸变细胞率虽低于阳性对照组 o但无统
计学意义k Ё s qsxl ∀
3 讨论
突变是肿瘤发生的重要基本机制之一 ∀体外培
养的哺乳类动物细胞k∂ z|r‹ Š°• ×l基因突变 !小鼠
骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变
试验是反映细胞和机体接触致突变物和致癌物的敏
感指标 o也是公认的筛选抗突变剂的经典方法 ∀本
实验结果显示在外体 ׃„ 可显著降低   ≤ 诱导
的 ∂ z|细胞基因突变 o提示 × ƒ„对化学物质诱导的
细胞基因损伤有拮抗作用 ~其体内试验表明 × ƒ„ 对
≤°诱导的小鼠骨髓细胞微核发生率有明显抑制 o而
微核发生的频率在一定程度上反映了细胞 ⁄‘„ 受
损情况 o因此 o这项结果进一步证实 ׃„ 对化学物
诱导的 ⁄‘„损伤具有保护作用 ∀
表 v × ƒ„对   ≤ 诱发的小鼠睾丸细胞染色体畸变的影响k ν € tsl
组别r°ª#®ªp t
细胞数
r个
单价体
性分k h l 常分k h l
染色体畸变
断片 易位
变细胞率
r h
统计量
r Υ值 Π值
≤° xss uxkx qsl tuku qwl ws u { qw
× ƒ„r{ xss t|kv q{l tsku qsl vy s z qu s qyz| w s qw|y u
× ƒ„rux xss tuku qwl |kt q{l vs t y qu t qu{z x s qt|z w
× ƒ„r{s xss t{kv qyl ykt qul u{ s x qy t qyzv v s qs|w s
有研究显示自由基是导致 ⁄‘„ 损伤的重要机制之
一≈y  ∀致突变物 !致癌物在造成机体损害或诱导细
胞突变与癌变过程中 o可能与自由基的生成有关 ∀
≤ ¤¯µ®¨ 等研究提示   ≤ 诱导细胞凋亡是由于氧自
由基所致≈z  ~李双连等报告认为猕猴桃果汁抗 ≤°诱
导突变的作用机制归功于它的抗氧化清除自由基特
性≈{  ∀ ׃„可清除多种自由基 o升高血清中 ≥’⁄活
性 o减轻自由基诱导的脂质过氧化反应 o降低 ‹u ’u
诱导的 ∂ z|细胞 ⁄‘„链断裂≈v o| ots  ∀根据5保健食
品功能学评价程序和检验方法6中抗突变判定标准 o
认为 × ƒ„有抗突变作用 ∀然而 o׃„抗化学物质诱
发突变的作用机理是否是由于它清除化学物质如
≤°或   ≤ 在与机体或细胞发生反应过程中产生
的自由基而出现作用 o尚需深入研究 ∀
≈参考文献 
≈t  王红梅 o姚小曼 q黄芪的免疫调节作用研究进展 q中国食品卫
生杂志 ousss otukvl }ux q
≈u  汪德清 o丁保国 o马艳青 o等 q黄芪总黄酮对扑热息痛所致小鼠
肝损伤防护作用的研究 q中国中药杂志 ousst ouykzl }w{v q
≈v  汪德清 o沈文梅 o田亚平 o等 q黄芪有效成分对氧自由基清除作
用的 ∞≥• 研究 q生物化学与生物物理进展 ot||y ouvkvl }uys q
≈w  赵泽贞 o温登瑰 o魏丽珍 o等 qtt种天然药材及植物的抗突变和
致突变同步试验报告 q癌变#畸变#突变 ot||w oykul }u{ q
≈x  崔文明 o刘泽钦 o王 伟 o等 q灵芝水提液抗突变作用实验研究 q
中国食品卫生杂志 oussu otwkxl }tt q
≈y  ‹∏¶¶¤¬± ≥ ° o‹²©¶¨·«o‹¤µµ¬¶≤ ≤ q• ¤§¬¦¤¯ ≤¤∏¶¨¶²© ≤¤±¦¨µq
‘¤·• √¨ ≤¤±¦¨µ oussv ovkwl }uzy q
≈z  ≤ ¤¯µ®¨ „ „ o°«¬¯¬³²··‘oŠ²µ§²±2≥°¬·« ∞ ≤ o ·¨¤¯ q ׫¨ ≥ ±¨¶¬2
·¬√¬·¼ ²© ƒ¤±¦²±¬„±¤¨ °¬¤ Šµ²∏³ ≤ ≤¨¯ ¶¯·² „³²³·²¶¬¶Œ±§∏¦¨§¥¼
¬·²°¼¦¬± ≤ Œ¶ ⁄∏¨ ·² ’¬¼ª¨ ± • ¤§¬¦¤¯ Š ±¨¨ µ¤·¬²±o ‘²·⁄‘„
≤µ²¶¶¯¬±®¬±ªq…µ ‹¤¨ °¤·²¯ ot||z o|ykul }uws q
≈{  李双莲 o徐厚恩 o尚兰琴 o等 q猕猴桃果汁抗环磷酰胺致突变作
用及其机制 q北京医科大学学报 ot||{ ovskvl }uzs q
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
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≈|  汪德清 o沈文梅 o田亚平 o等 q黄芪提取成分对细胞脂质过氧化
损伤的预防作用 q中国中药杂志 ot||y outktul }zwy q
≈ts  汪德清 o沈文梅 o田亚平 o等 q黄芪总黄酮对羟自由基所致 ∂ z|
细胞 ⁄‘„链断裂损伤作用的应用研究 q中国药理学通报 o
t||x ottkwl }vtt q
Αντι2µ υταγενεσισ Εφφεχτσ οφ Τοταλ Φλαϖονοιδσ οφ Αστραγαλυσ
• „‘Š ⁄¨ 2 ¬´±ª o ׌„‘ ≠¤2³¬±ªo≥’‘Š ≥«∏2½«¨ ± o • „‘Š ¬±ª
k⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²© …¬²¦«¨ °¬¶·µ¼ o°„ Š ±¨¨ µ¤¯ ‹²¶³¬·¤¯ o …¨ ¬­¬±ªtss{xv o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ·«¨ ¤±·¬2°∏·¤ª¨ ±¬¦¤¦·¬²± ²©·«¨ ·²·¤¯ ©¯¤√²±²¬§¶²© „¶·µ¤ª¤¯∏¶k× ƒ„l q Μετηοδ : ׫µ¨¨
ªµ²∏³¶²©¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶²© × ƒ„ ¤±§²±¨ ¬±§∏¦¨µªµ²∏³ º µ¨¨ ∏¶¨§q׫¨ ¤±·¬2°∏·¤ª¨ ±¬¦¤¦·¬²± ²© × ƒ„ º¤¶¶·∏§¬¨§¥¼ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¶ιν
ϖιτρο ¤±§ ιν ϖιϖבּ¦¯∏§¬±ª °¬¦²±∏¦¯ ²¨¯∏¶¤¶¶¤¼ o¶¨ ° ±¨ ·¨µ¤²ª¨ ±¨ ¶¬¶·¨¶·¤±§ ª¨ ±¨ °∏·¤ª¨ ±¨ ¶¬¶²© ∂ z|r‹Š°• × q Ρεσυλτ : × ƒ „ §¬§
±²·¤©©¨ ¦··«¨ º ¬¨ª«·²©·«¨ °¬¦¨ §∏µ¬±ª·«¨ ¬¨³¨µ¬° ±¨·³¨µ¬²§q ׫¨ «¬ª« ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© × ƒ„ ¦²∏¯§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ µ¨§∏¦¨ ¦¼¦¯²2
«²³«¤°¬§¨2¬±§∏¦¨§ °¬¦²±∏¦¯ ²¨¯∏¶±∏°¥¨µ¤±§ª¨ ±¨ °∏·¤ª¨ ±¨ ¶¬¶²© ∂z|r‹Š°• × ¦²°³¤µ¨§ º¬·«¬±§∏¦¨µªµ²∏³q ‹²º √¨ µ¨o × ƒ„ §¬§
±²·°¤®¨ ¶·¤·¬¶·¬¦¦«¤±ª¨ ¬±·«¨ ¶¨ ° ±¨ ·¨µ¤²ª¨ ±¨ ¶¬¶¬±§∏¦¨§¥¼ °¬·²°¼¦¬± ≤ qΧονχλυσιον : × ƒ„ «¤¶¤±·¬°∏·¤ª¨ ±¨ ¶¬¶ ©¨©¨ ¦·q
[ Κεψ ωορδσ] ·²·¤¯ ©¯¤√²±²¬§¶²© „¶·µ¤ª¤¯∏¶~ °∏·¤ª¨ ±¨ ¶¬¶~ °¬¦µ²±∏¦¯²¯∏¶¤¶¶¤¼ ~¶¨ ° ±¨ ·¨µ¤²ª¨ ±¨ ¶¬¶·¨¶·~ª¨ ±¨ °∏·¤ª¨ ±¨ ¶¬¶
≈责任编辑 方文贤 
陈皮提取物体内抗肿瘤
作用及其对癌细胞增殖周期的影响
钱士辉t o王佾先u o亢寿海u o杨念云t o袁丽红v
kt q江苏省中医药研究院 中药化学研究室 o江苏 南京 utssu{ ~
u q江苏省肿瘤防治研究所 o江苏 南京 utsss| ~ v q南京工业大学 o江苏 南京 utsss|l
≈摘要  目的 }进行陈皮提取物体内抗肿瘤作用的研究 ∀方法 }采用肉瘤 t{sk≥t{sl !肝癌k‹ ³¨¶l !艾氏腹水癌
k∞„≤l移植性肿瘤模型 o进行了抑制肿瘤的试验 ∀结果 }陈皮提取物对小鼠移植性肿瘤 ≥t{s o‹ ³¨¶具有明显的抑
制作用 o与空白对照相比 o具有显著性差异k Π s qsxl ~对艾氏腹水癌k∞„≤l的延长生命作用无显著性差异k Ё
s qsxl ~对癌细胞增殖周期 ≥期细胞作用不大 o但能使 Šu2  细胞减少 o使 Šs2Št 期细胞增多 o同时具有促使癌细胞
凋亡的作用 ∀结论 }陈皮提取物是一种有开发前景的抗肿瘤中药活性成分 ∀
≈关键词  陈皮 ~提取物 ~抗肿瘤 ~细胞周期 ~凋亡
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvltu2ttyy2sw
陈皮为常用传统中药 o为芸香科植物柑橘 Χιτ2
ρυσ ρετιχυλατα …¯ ¤±¦²及其栽培变种的干燥成熟果
皮 o具有理气健脾 o燥湿化痰作用 ∀ 5日华子本草6记
载 }消痰止咳 o破 瘕痃癖 ∀ 5本草经疏6记载 }主
≈收稿日期  ussv2sx2tu
≈基金项目  江苏省科技厅应用基础项目k…||szxl
≈通讯作者  钱士辉 ר¯ }ksuxlxyv|yww ƒ¤¬}ksuxlxxsu{u|
∞2°¤¬¯}´ ¶«¬«∏¬ƒ­¯²±¯¬±¨ q¦²°
胸中瘕热逆气 ∀ 5中国医药大辞典6记载 }破 瘕痃
癖 o风痰麻木 ∀ 瘕痃癖 o泛指腹腔内肿物 o包括胃 !
肝 !胆 !胰 !脾 !盆腔与腹膜后之肿物 o与现代医学的
胃肠道 !肝 !胆 !胰腺 !网膜及淋巴结等良性 !恶性肿
瘤极为相似 ∀首先从不同产地 !不同品种陈皮药材
的质量评价入手 o应用中药资源学 !天然药物化学 !
中药分析 !药理药效学等多学科的研究方法 o对陈皮
提取物抗肿瘤作用和活性成分进行了较为系统的研
#zytt#
第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
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