全 文 ：姜油体外抗氧化活性
和对细胞 ⁄‘„损伤防护作用的实验研究
路 萍t o赖炳森t o梁 萍u o陈镇童t o孙树秦t
kt q解放军北京军医学院 o北京 tssszt ~ u q北京市丰台区医院 o北京 tsssztl
≈摘要  目的 }探讨姜油的体外抗氧化活性和对 ⁄‘„损伤的防护作用 ∀方法 }采用化学发光法测定姜油对氧
自由基的清除能力 ~用比色法检测对人红细胞溶血和兔肝匀浆丙二醛k  ⁄„l生成的影响 ~采用单细胞凝胶电泳法
检测对淋巴细胞 ⁄‘„损伤的影响 ∀结果 }与对照组比较 o姜油可明显抑制本底的发光强度 ~对 ‹u ’u诱导的红细胞
溶血和 ⁄‘„损伤有明显的抑制作用 ~且能抑制兔肝匀浆  ⁄„的生成 o抑制率为 w{ qty h ∀结论 }姜油具有较强的
氧自由基清除能力和防护 ⁄‘„损伤的作用 o是天然的抗氧化剂 o具有很大的开发应用价值 ∀
≈关键词  姜油 ~⁄‘„损伤 ~抗氧化
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls|2s{zv2sv
生姜具有驱风散寒 !健胃止吐 !抑菌等药用 ∀实
验研究表明 o生姜具有很强的抗氧化活性 ~姜油具有
抗过敏 !抗炎作用 o对肝损害也具有保护作用≈t2v  ∀
本文采用化学发光法 !溶血试验 !单细胞凝胶电泳
法 !丙二醛法分别检测了姜油的体外抗氧化活性 o为
该药进一步的开发提供依据 ∀
1 材料与方法
1 q1 试剂和仪器
姜油 }本实验室制备 ∀生姜 Ζινγιβερ οφφιχιναλε
• ²¶¦晾干后用超临界 ≤ ’u 流体从干姜中萃取出姜
油 ∀琼脂糖 !低熔点琼脂糖为 ≥¬ª°¤公司产品 ~丙二
醛测定试剂盒为南京建成生物工程公司产品 ~其余
试剂均为分析纯 ∀
uut2ws2w{≥ƒ∞萃取装置 o中国华安公司 ~’2
°˜≥ …÷2ys 型荧光显微镜 o日本 ’ °˜≥ 公司 ~
ƒ×2yvu型生物2化学光度计 o北京市核仪器厂 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 化学发光法检测姜油对氧自由基的清除能
力≈w  碱性条件下二甲基亚砜自氧化产生氧自由基
使鲁米诺发光 o加入不同浓度的姜油ks qyux ot qux o
u qx ox ots °ª#ptl检测其发光强度 ∀通过计算对
本底发光强度抑制率 o观察姜油对氧自由基的清除
≈收稿日期  ussu2s{2sy
≈通讯作者  ר¯ }kstslyy|wzy|v ∞2°¤¬¯}∏³¬±ª|wzy|v ƒ
≥¬±¤q¦²°
能力 ∀
抑制本底发光率k h l € k本底管发光值 p 姜油管发光
值lr本底管发光值 ≅ tss h
1 q2 q2 ‹u’u诱导人红细胞溶血试验观察姜油对人
红细胞氧化溶血的影响≈x  分离人红细胞 o生理盐
水制成 s qx h红细胞悬液 o在每管 s qx °的红细胞
悬液中加入不同浓度的姜油ks qux os qx ot qs ot qx ou
°ª#ptl或维生素 ∞ks qux ou °ª#ptl o生理盐水补
充至总体积为 t °o充分混匀后 vz ε 水浴 ts °¬±∀
取出后加入 tss °°²¯#p t ‹u ’u o混匀 ovz ε 振荡温
浴 t «o用生理盐水稀释 y倍 ov sss µq°¬±p t离心 x
°¬±o取上清液于 wtx ±°比色测定 o计算溶血率及抑
制率 ∀
溶血率k h l € 姜油组吸光度值r ‹u ’u 组吸光度值 ≅
tss h
抑制率k h l € k‹u ’u 组吸光度值 p姜油组吸光度值lr
k‹u ’u组吸光度值 p正常组吸光度值l ≅ tss h
1 q2 q3 单细胞凝胶电泳法检测姜油对 ‹u’u诱导的
淋巴细胞 ⁄‘„损伤的防护作用 按参考文献≈y oz 
方法简述如下 }分离人淋巴细胞 otyws液制成淋巴
细胞悬液 u ∗ w qs ≅ ts| 个#pt ∀在 s qx °细胞悬
液中加入不同浓度的姜油kux oxs otss ouss owss °ª#
ptl o用 tyws液补足体积至 t °ovz ε 作用 t «后
取出 o加入 tss Λ°²¯#pt ‹u ’u 混匀 ovz ε 作用 t «
后取出 o离心弃上清 o用 °…≥洗两次 o终止反应 ∀取
{s ˏt h正常熔点琼脂糖凝胶铺第 t层凝胶 o取 {s
#vz{#
第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv
ˏ含 tsw ∗ tsx 个细胞的 s qx h低熔点琼脂糖凝胶
铺第 u层凝胶 ∀³‹ ts的裂解液k含 u qx °²¯#pt氯
化钠 !tss °°²¯ #p t乙二酸四乙酸二钠 !ts °°²¯ #
pt ×µ¬¶o临用前加 ts h的二甲基亚砜 ot h ×µ¬·²± p
tssl中裂解 t «∀在碱性电泳液ks qv °²¯#pt氢氧
化钠 ot °°²¯#p t ∞⁄× „l中放置 ws °¬±使 ⁄‘„解
旋 ovss °„ 电泳 t «∀在 ³‹ z qx os qw °²¯ #pt的
×µ¬¶2‹≤缓冲液中浸泡 v次 o每次 x °¬±∀碘化吡
啶 x qs °ª#pt染色 tx °¬±o避光 ∀以上操作均在 w
ε 下进行 ∀在荧光显微镜下测量总彗星长度k放大
倍数为目镜 ts ≅ o物镜 us ≅ l o计算 ⁄‘„ 的损伤程
度和防护度 ∀
⁄‘„的损伤程度k h l € k姜油组的平均总彗星长度 p
正常组的平均总彗星长度lr姜油组的平均总彗星长度 ≅
tss h
⁄‘„损伤的防护度k h l € k‹u ’u 组的平均总彗星长度
p姜油组的平均总彗星长度lr‹u ’u 组的平均总彗星长度 ≅
tss h
1 q2 q4 丙二醛法测定姜油对兔肝匀浆  ⁄„ 的影
响≈{  取正常家兔肝脏 o制成肝匀浆 o用冷生理盐水
制成 ts h的肝匀浆生理盐水液 ∀采用双缩脲法测
定肝匀浆中的蛋白含量 ∀肝匀浆  ⁄„ 的测定 }取
ts h新鲜肝匀浆 t qx °o分别加入 xss °ª#pt姜
油 s qt °oxss °ª#pt维生素 ∞ s qt °!无水乙醇
s qt °!生理盐水 s qt °ovz ε 振荡温浴 t qx «o按
丙二醛测定试剂盒操作 ∀xvu ±°处比色测定各管
吸光度值 o计算  ⁄„值及抑制率 ∀
抑制率k h l € k自氧化组  ⁄„ 值 p姜油组  ⁄„ 值lr
自氧化组  ⁄„值 ≅ tss h
2 结果
2 q1 化学发光法检测姜油对氧自由基的清除能力
测得本底发光值kvwt qux ? tx qu|l °∂ o与姜油
组相比 o随着姜油的加入量增加 o发光值逐渐降低 o
且呈一定的量效关系k表 tl ∀
表 t 姜油对氧自由基的清除作用k ξ ? σ, ν € yl
组别 剂量r°ª#p t 发光值r°∂ 抑制率r h
本底组 vwt qux ? tx qu|
姜油组 s qyux tyz qtz ? tu qx|tl xt qst
t qux tws qu| ? tu qvwtl x{ q{|
u qx |z qyz ? y q{ytl zt qv{
x qs z{ qxs ? x q{utl zy q||
ts xt qyz ? v q|{tl {w q{y
注 }与本底组比较 tl Π s qsst
2 q2 对人红细胞氧化性溶血的影响 与 ‹u’u组比
较 o姜油能明显抑制 ‹u ’u 诱导的人红细胞氧化溶
血 o使溶血率能够明显降低 o且呈量效关系k表 ul o
而相同剂量的维生素 ∞ks qux ou °ª#ptl对红细胞
氧化性溶血无明显抑制作用 ∀
表 u 姜油对 ‹u ’u诱导人
红细胞氧化性溶血的影响k ξ ? σ, ν € xl
组别
剂量
r°ª#p t
吸光度
溶血率
r h
抑制率
r h
正常组 s qsxu ? s qsu| v qvz
‹u’u组 s qyxs ? s qst|wl tss
姜油组 s qux s qx{z ? s qswuvl |s q|u ts qxw
s qx s qww{ ? s qsvsul y{ qyx vv qz{
t qs s quxu ? s qsuutl v{ qzz yy qxy
t qx s qtzv ? s qsswtl uy qyu z| qzz
u qs s qtuw ? s qswxtl t| qs{ {z q|y
维生素 ∞ s qux s qyyx ? s qsut tss s qss
u qs s qywx ? s qswv || quv s qss
注 }与正常组比较 wl Π s qsst 与 ‹u’u 组比较 vl Π s qsx
ul Π s qst tl Π s qsst
2 q3 对淋巴细胞 ⁄‘„损伤的影响 本实验结果表
明正常组彗星长度平均为k| qtw ? t qyxl Λ° o而被
‹u’u诱导损伤的氧化组平均彗星长度为kwv quu ?
{ q{|l Λ° o加姜油后各组的彗星长度与 ‹u ’u 组相
比均有不同程度的减小 o且呈量效关系k表 vl ∀
表 v 姜油对 ‹u ’u所致人淋巴
细胞 ⁄‘„损伤的影响k ξ ? σo计数 tss个细胞l
组别
剂量
r°ª#p t
彗星长度
rΛ°
损伤程度
r h
防护度
r h
正常组 | qtw ? t qyx
‹u’u组 wv quu ? { q{|wl z{ q{x
姜油组 ux uv qzz ? w qv|tl yt qxx wx qss
xs ut q{u ? x qw|tl x{ qtu w| qxt
tss t{ qtx ? w qtstl w| qyy x{ qst
uss tw quz ? t qyytl vx q|y yy q|{
wss tu quw ? w qyxtl ux qvv zt qy{
注 }与正常组比较 wl Π s qsst 与 ‹u’u组比较 tl Π s qsst
2 q4 对兔肝匀浆  ⁄„ 的影响 本实验观察到姜
油组  ⁄„ 含量较自氧化组有明显的降低 o而且明
显低于维生素 ∞组k Π s qsstl o见表 w ∀
表 w 姜油对兔肝匀浆
脂质过氧化产物  ⁄„的影响k ξ ? σ, ν € xl
组别 剂量r°ª#p t  ⁄„r±°²¯#ªp t 抑制率r h
自氧化组 uxs qv{ ? z qyu
姜油组 xss tu| qzz ? tu qywtl w{ qty
维生素 ∞组 xss t|| qyw ? tx qvyul us quz
注 }与自氧化组比较 ul Π s qst tl Π s qsst
#wz{#
第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv
3 讨论
实验结果显示姜油具有清除氧自由基的能力 o
这可能是姜油具有抗氧化作用的主要原因 ∀ ‹u’u
与红细胞作用 o血红蛋白受到氧化 o红细胞膜脂质发
生过氧化 o出现溶血现象 ∀实验结果表明姜油对
‹u’u氧化应激损伤有明显保护作用 o且作用明显强
于维生素 ∞∀ ‹u’u作为一种化学性 ⁄‘„损伤诱导
剂 o‹u’u 能很容易地穿透细胞膜自由进入细胞 o在
细胞核内的 ‹u ’u可转变成具有高活性羟自由基
k#’ ‹l o从而造成 ⁄‘„ 链断裂 ∀姜油对 ‹u’u 诱导
的 ⁄‘„的损伤有一定的保护作用 o说明姜油具有清
除羟自由基的能力 ∀正常组织匀浆在体外自氧化或
受 ‹u’u等激发的氧化后 o均可产生丙二醛 o使  ⁄„
生成量增加 o而  ⁄„ 是脂质过氧化反应的终产物 o
作为评价脂质过氧化反应强弱的指标 ∀实验结果显
示姜油可抑制正常肝组织自氧化  ⁄„ 的产生 o说
明姜油能抑制细胞脂质过氧化反应 ∀
本试验从 w个方面探讨了姜油的抗氧化活性 o
结果表明姜油具有清除氧自由基和羟自由基的能
力 o显示出极强的抗氧化活性 o是一类具有广泛开发
前景的天然抗氧化剂 ∀
≈参考文献 
≈t  张竹心 q生姜油的抗过敏作用 q中成药 ot||u okttl }vs q
≈u  张竹心 q生姜油的抗炎作用研究 q中草药 ot|{| oktul }tz q
≈v  张竹心 o刘连生 o王贵林 q生姜油对肝损害的保护作用 o中成
药 ot|{| ottk{l }ux q
≈w  赵琢道 o黎 鳌 o杨宗城 o等 q一种测定 ≥’⁄活力的新方法 ) ) )
碱性二甲基亚砜2鲁米诺化学发光法 q生物化学与物理进展 o
t|{z okyl }xx q
≈x  田京伟 o杨建雄 q白藜芦醇苷的体外抗氧化活性 q中草药 o
usst ovu ktsl }|t{ q
≈y  王小红 o江 洪 q单细胞凝胶电泳技术的研究进展及其应用 q
国外医学#临床生物化学与检验学分册 ousst ouuktl }x
≈z  陈玮琳 o何继亮 q快速敏感检测 ⁄‘„ 断裂的方法 ) ) ) 彗星试
验 q国外医学#卫生学分册 ot||{ oxkul }tst q
≈{  杨东梅 o唐孝礼 o张奕强 o等 q穿心草 酮抗氧化作用初探 q中
草药 ousss ovtkxl }vx{ q
Αντιοξιδατιον Αχτιϖιτψ
ανδ Προτεχτιϖε Εφφεχτον οφ Γινγερ οιλ ον ∆ΝΑ ∆αµ αγειν ςιτρο
˜ °¬±ªt o„Œ …¬±ª2¶¨±t oŒ„‘Š °¬±ªu o ≤ ‹∞‘«¨ ±2·²±ªt o≥‹ ˜‘≥«∏2 ¬´±ªt
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¥¼ ‹u ’u q × «¨ ©¨©¨ ¦·²©ª¬±ª¨µ²¬¯ ²± ²¬¬§¤·¬√¨ µ¨¼·«µ²¦¼·¨ º¤¶²¥¶¨µ√ §¨¥¼·«¨ ¦²¯²µ¬° ·¨µ¬¦¤±¤¯¼¶¬¶¤¶¶¤¼ o¤±§·«¨ ¦²±·¨±·²© °¤¯²±2
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°¬ª«·§¨¦µ¨¤¶¨ ·«¨ ¦²±·¨±·²©  ⁄„ µ¨ °¤µ®¤¥¯¼ ¤±§¬±«¬·¬¥¬·¬²±µ¤·¨ º¤¶w{ qty h qΧονχλυσιον : Š¬±ª¨µ²¬¯ «¤¶§²°¬±¤±·¬√¨³µ²·¨¦·¬√¨
©¨©¨ ¦·²± ⁄‘„ §¤°¤ª¨ ¬±§∏¦¨§¥¼ ‹u ’u q Š¬±ª¨µ²¬¯ °¬ª«·¤¦·¤¶¤¶¦¤√ ±¨ª¨µ²©²¬¼ª¨ ± µ¤§¬¦¤¯ ¤±§ °¬ª«·¥¨ ∏¶¨§¤¶¤± ¤±·¬²¬¬§¤±·q
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≈责任编辑 古云霞 
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