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Effects of Qufengshi Prescription on Release of Hydrogen Peroxide and Interleukin-1 from Peritoneal Macrophage in Adjuvant Arthritis Rat

祛风湿方剂对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞释放过氧化氢及白细胞介素1的影响



全 文 :≈参考文献 
≈t  杜贵友 o刘淑之 o王跃生 o等 1 益脑灵对大 !小鼠记忆损害的改善
作用 1 中国中西医结合杂志 okt||x年基础理论研究集ltx }vvt1
≈u   ²µµ¬¶ • q ⁄¨ √¨¯²³° ±¨·¶²© „ • ¤·¨µ2°¤½¨ °µ²¦¨§∏µ¨ ©²µ≥·∏§¼¬±ª
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≈v  中国医学科学院药物研究所药理室神经组 1 樟柳碱的药理作用
及东莨菪碱等的作用比较 1 中华医学杂志 ot|zx oxxkttl }z|x1
≈w  卞春甫 o邢淑华 o金淑静 o等 1 东莨菪碱对痛和镇痛的影响 1 药学
学报 ot|{z ouukzl }v|z1
≈x  梅镇彤 1 几种不同类型的动物行为模型 1 学习和记忆的神经生
物学 1 上海 }科学教育出版社 ot||z1uy1
Προτεχτιϖε Εφφεχτ οφ ΞινΞιν Χαπσυλε
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[ Κεψ ωορδσ] ÷¬±¬¬± ≤¤³¶∏¯¨~ °²µµ¬¶º¤·¨µ2°¤½¨ ~¶¦²³²¯¤°¬±¨ ~°¨°²µ¼
≈责任编辑 方文贤 
祛风湿方剂对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞
释放过氧化氢及白细胞介素 t的影响
张文怡 o翁福海 o张才丽
k天津医科大学 药理教研室 o天津 vssszsl
≈摘要  目的 }探讨祛风湿方剂抗风湿作用的机制 ∀方法 }采用大鼠佐剂性关节炎k„„l作为类风湿性关节炎
的病理模型 o强的松作为阳性对照药 ∀结果 }方剂大 !中剂量能使 „„ 大鼠腹腔巨噬细胞释放升高的过氧化氢
k‹u ’ul o白细胞介素2tkŒ2tl水平显著降低k Π s qsxl o作用强度与强的松相近 ∀结论 }该方剂使 „„ 大鼠升高的
Œ2t及 ‹u ’u的水平下降可能是其抗风湿的作用机制之一 ∀
≈关键词  祛风湿方剂 ~佐剂性关节炎 ~过氧化氢 ~白细胞介素2t
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusssls|2sxw{2sw
≈收稿日期  t|||2ts2u|
类风湿性关节炎中医称之为痹症 o一般认为其
病因系脏腑气血营卫虚弱 o外因责之以风寒湿热之
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第 ux卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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邪 ∀病机主要为风湿痰瘀 !痹阻经络所致 ∀该方剂
主要由桑寄生 !羌活 !独活 !生黄芪等组成k天津医科
大学药理研究室中药药理实验室研究组方l o具有祛
风散寒清热除湿 !化瘀通络 !祛痰散结 !益气血 !补肝
肾的功效 ∀动物实验研究发现 o该方剂可明显改善
佐剂性关节炎k„„l大鼠关节炎的症状和体征≈t  ∀
本文探讨了该方剂祛风湿作用的机制 o以期为该方
剂在临床上推广使用提供理论依据 ∀
1 材料
1 1 1 动物 雄性 • ¬¶·¤µ大鼠 o体重为kt|| q{ ?
tw q|l ªou ∗ v月龄 ~昆明种小鼠 o雌性 okus ? ul ªoy
∗ {周 o均购自天津药物研究院 ∀
112 仪器  ’⁄∞uvss型 ≤ ’u 孵育箱k美国l ~
˜ ∂2uws紫外分光光度计k日本岛津l ~• ƒ2xts型荧
光分光光度计k日本岛津l ~Š‹{su2v型超净台k天津
净化仪器厂l ~xtt酶标仪k上海第三仪器厂l ~|y孔
培训板kŠŒ…≤ ’产品l ~显微镜k’≠  °˜≥l ∀
113 试剂 卡介苗冻干粉 o卫生部兰州生物制品研
究所 o批号 |xstsu ~莨菪亭k≥¦²³²¯ ·¨¬±o≥¦²l o辣根过
氧化物酶k‹ • °l o酵母多糖均 ≥¬ª°¤公司产品 ~• °2
Œtyws oŠŒ…≤ ’产品 ~tx qy °°²¯#p t Ž• °Š磷酸
缓冲液 ³‹z qwk内含 tus °°²¯ # p t的 ‘¤≤¯ow q{
°°²¯ # pt的 Ž≤¯os qxw °°²¯ # pt的 ≤¤≤ u¯ ot q
u°°²¯#p t o ª≤ u¯ ott °°²¯ #pt葡萄糖l ~Œ2t标
准品由天津医科大学检验系免疫教研室姚智教授惠
赠 ~小牛血清 o购自天津血液病研究所 ~刀豆蛋白 „
k≤²±„l o四甲基偶氮唑盐k  × ×l均为 ≥¬ª°¤公司产
品 ~盐酸和异丙醇均为分析纯 ∀
2 方法
211 祛风湿方剂煎剂的制备 按王北婴≈u 等人的
方法 o制备方剂的浓缩液kv ª# °¯ p tl o高压灭菌后 ow
ε 保存 ∀
212 佐剂性关节炎病理模型的制备及实验分组
病理模型参照徐叔云等人≈v 的方法 o将福氏完全佐
剂足跖皮内注入 s qt °¯ 造模 o以造模当天为第 s
天 ∀实验按随机数字表将 v|只大鼠分为 y组 }ktl
正常组 okul模型组 okvl强的松组 okwl中药大剂量
组 okxl中剂量组 okyl小剂量组 ∀造模后 tw §o前两
组给予生理盐水 o后四组给药剂量按人与大鼠体表
面积折算分别给予强的松 x °ª#®ªp t o中药 uu ott o
u qu ª#®ªp t o每日灌胃给药 t次 o连续 tw §o第 vs天
处死动物取腹腔巨噬细胞 ∀
213 酵母多糖的调理 酵母多糖用无菌的生理盐
水洗两遍后 o用大鼠自体血清制成 x ª#pt的酵母多
糖悬液 o置 vz ε 水浴中调理 vs °¬±o再用 Ž• °Š洗
两遍 o最后用 Ž• °Š配成 us ª#p t的酵母多糖悬液
备用 ∀
214 大鼠腹腔巨噬细胞的收集≈w  将大鼠乙醚麻
醉致死 o用 • ° Œ tyws反复冲洗腹腔获得腹腔巨噬
细胞k°  Υl o离心洗涤 v次ktzss µ#°¬±p t ots °¬±l o
弃上清 ∀用 • ° Œ tyws培养液将腹腔巨噬细胞调
整为 tsy# °¯ p t分装成 u个试管 ot个用于 ‹u ’u的测
定 ot个用于 Œ2t的测定 ∀
215 ‹u ’u 的测定≈x  用紫外分光光度计标定
‹u’u浓度 o制得 ‹u ’u的标准液 ∀在反应液k每毫升
含 ts ±°²¯#pt ≥¦²ous Λª ‹ • °的 Ž• °Š溶液l中
加入 ‹u’u的标准液 o使终浓度为 t ∗ ts ±°²¯#pt o
vz ε 温育 ts °¬±后检测荧光强度 ∀以荧光强度百
分率为纵坐标 o标准的 ‹u’u 浓度为横坐标 o制得标
准曲线 o求得荧光强度百分率和 ‹u ’u 直线回归方
程 ∀将获得的大鼠腹腔巨噬细胞消毒封口后 vz ε
x h ≤ ’u培养 u«o取出试管弃培养液及未贴壁的细
胞 o用温暖的 vz ε Ž• °Š洗两遍 o每管依次加入预
温到 vz ε 的反应液 u °¯ 及酵母多糖悬液 s qt °¯ o置
vz ε 水浴中反应 vs °¬±后 o离心kt sss µ#°¬±p t ox
°¬±l o取上清液测定荧光强度kΚ∞¬€ vxs ±° oΚ∞° €
wys ±°l o代入方程得出样品中 ‹u’u的含量 ∀
216 Œ2t的测定 小鼠胸腺细胞增殖法≈z  ∀Œ2t
的待测品的收集参照文献≈{ o|  ∀测定的主要过程
如下 ≠于 |y孔平底培养板内稀释标准 Œ2tktss ˜#
°¯ p tl原液 ∀tru otrw otr{ otrty otrvu otryw ∀每孔
tss Λ¯ ∀每稀释孔设 v个复孔 ∀ 于 |y孔平底培养
板内加含有 Œ2t的待测样品 tss Λ¯r孔 ∀ ≈ 加入 {
Λª# °¯ p t≤²±„ xs Λ¯r孔 ∀ …将制备好的胸腺细胞加
入已稀释好的标准及等测 Œ2t样品的 |y孔板中 o
xs Λ¯r孔 ∀  培养板放 vz ε ox h ≤ ’u 孵育箱中培
养 w{ «后 o加入  × × s qx °ª# °¯ p t xs Λ¯r孔 o培养 w
«o加入盐酸异丙醇ktΒvssl o震荡混匀 o用酶标仪测
定 „值 ∀波长为 xzs ±° ∀绘出标准曲线 o求出样本
中 Œ2t的含量 ∀
217 统计与处理 采用美国 ≥„≥统计软件进行方
差分析及线性回归 ∀
3 结果
311 对 °  Υ释放 ‹u’u的影响
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31111 ‹u ’u的标准曲线 见图 t ∀
图 t ‹u ’u的标准曲线
ψ€ p { .zyt ξ n z{ qvuv • u € s q|w|u
31112 对 °  Υ释放 ‹u’u 的影响 酵母多糖诱导
的 „„大鼠腹腔巨噬细胞释放的 ‹u ’u 显著高于正
常对照组k Π s qsxl ∀中药大 !中剂量组及强的松
组可抑制 „„ 大鼠腹腔巨噬细胞 ‹u ’u 的释放 ∀中
药小剂量组抑制作用不明显k表 tl ∀
表 t 不同剂量的方剂对 „„大鼠
腹腔巨噬细胞释放的 ‹u ’u的影响
组别 剂量rª#®ªp t 例数 ‹u’u浓度r±°²¯#p t
正常对照组 z t qz ? s qu
模型组 z v qy ? s q|tl
强的松组 s qssx y t q{ ? s qxul
祛风湿方 uu y u qs ? s qzul
tt y t q| ? t qsul
u qu z v qt ? t qttl
注 }≠ ξ ? σ t)与正常对照组比较 Π s .sx u)与模型组比较
Π s qsx
312 对 °  Υ释放 Œ2t的影响
31211 Œ2t标准曲线 见图 u ∀
图 u Œ2t的标准曲线图
31212 对 „„大鼠 °  Υ释放 Œ2t的影响 实验结
果表明 o模型组 Œ2t的水平显著高于正常组 ∀强的
松组 !中药大 !中剂量组可使 „„ 大鼠腹腔巨噬细胞
释放升高的 Œ2t降低 o基本恢复到正常水平 o且三
者之间无显著差异 ∀中药小剂量组 Œ2t的水平与
模型组无差异k表 ul ∀
4 讨论
大鼠 „„是一种免疫性炎症模型 o׶细胞功能
表 u 不同剂量的方剂对 „„
大鼠腹腔巨噬细胞释放的 Œ2t的影响
组别 剂量rª#®ªp t 例数 Œ2t浓度r˜# °¯ p t
正常对照组 z t| qs ? v q{
模型组 z vy q{ ? x qutl
强的松组 s qssx y u{ qt ? y q|ul
祛风湿方 uu y ux qs ? v qtul
tt y uv qt ? z q{ul
u qu z vw qu ? w q|tl
注 }≠ ξ ? σ t)与正常对照组比较 Π s .sx u)与模型组比较
Π s qsx
缺陷和单核巨噬细胞异常活化在发病中起重要作
用≈ts  ∀大鼠 „„ 的原发病变主要表现为致炎局部
的炎症 o多发性关节炎一般于 ts §以后出现 o病理
学特点包括滑膜增生 !单核巨噬细胞浸润 !纤维素沉
着 !关节软骨及骨组织破坏 ∀ „„大鼠的关节炎症组
织病理及血中生化指标变化与人类 • „ 相似 o故普
遍用于抗关节炎药物的研究 ∀
本研究表明 o„„ 大鼠 °  Υ释放大量 ‹u’u 及
Œ2t说明  Υ处于高度活化的状态 ∀祛风湿方剂
大 !中剂量同强的松作用相似 o可显著地使这种升高
的 ‹u’u及 Œ2t降到正常水平 ∀Œ2t是促使 • „病
理发展的重要因子≈tt  o其在 • „ 中作用首先表现在
• „病变早期可协助其它细胞迁徙和刺激内皮细胞
的各种反应 ~Œ2t还能促进滑膜纤维母细胞和软骨
细胞产生胶原酶和前列腺素 ∞k°Š∞ul o从而使病情
向中 !晚期发展 ∀有报道指出 Œ2t能通过直接或间
接刺激纤维母细胞增殖或者通过介导血小板衍生的
生长因子产生而介导关节瘢痕的产生和纤维化 ∀
‹u’u可引起许多生物大分子如核酸 !蛋白质 !膜多
聚不饱和脂肪酸的超氧化反应 o导致细胞结构和功
能的破坏 o致使膜孔隙增大 o通透性增强 o毛细血管
内皮损伤 o从而加重了炎症反应和组织退行性变 ∀
另外 o可使细胞间的透明质酸分解而导致炎症反应
以及组织退行性变≈tu  ∀祛风湿方剂抑制  Υ产生
Œ2t及 ‹u ’u o从而缓解由 Œ2t及 ‹u ’u所引起的关
节组织损伤可能是其抗风湿作用的机制所在 ∀
≈参考文献 
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≈w  • ²²·• Žo  ·¨¦¤¯©o’¶«¬±² ‘o ·¨¤¯ q ‹u’u • ¨¯ ¤¨¶¨§©µ²° ‹∏2
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≈x  郑亦文 o马东来 o陈敏珠 1 木犀草素对大鼠腹腔巨噬细胞释放
‹u’u影响 1 中国药理学通报 ot||s oyktl }xy1
≈y  ∞§ª¤µ°¬¦®¤±§ ≠²±¤ Ž¨¬¶¤µ¬q „ ≥¬°³¯¨ ≤²¯²µ¬° ·¨µ¬¦  ·¨«²§©²µ
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≈z  李会强 o姚 智 o赵瑾莹 o等 1Œ2t oŒ2y及 × ‘ƒΑ  × × 检测方
法的建立 q天津第二医学院学报 ot||v o|kvl }w1
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对其产生的影响 1 中国药理学通报 ot|{| oxkyl }vxw1
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≈tu  ⁄¬¦® • ≤ o  ²¯¯  ‹ q• ¦¨¨±·„§√¤±¦¨ ¬± • «¨ ∏°¤·²¯²ª¼ q ‘¨ º
≠²µ®}°¬·°¤± ot|{v qzv q
Εφφεχτσ οφ Θυφενγσηι Πρεσχριπτιον ον Ρελεασε οφ Ηψδρογεν Περοξιδε
ανδ Ιντερλευκιν2t φροµ Περιτονεαλ Μαχροπηαγειν Αδϕυϖαντ Αρτηριτισ Ρατ
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k⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²© °«¤µ°¤¦²¯²ª¼ o ׬¤±­¬±  §¨¬¦¤¯ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o׬¤±­¬± vssszs o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ ·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²©¤±·¬¤µ·«µ¬·¬¶ ©¨©¨ ¦·¶²© ±∏©¨ ±ª¶«¬°µ¨¶¦µ¬³·¬²±q Μετη2
οδσ: „§­∏√¤±·¤µ·«µ¬·¬¶k„„lº¤¶¤³³¯¬¨§¤¶³¤·«²¯²ª¬¦¤¯ °²§¨¯²©µ«¨ ∏°¤·²¬§¤µ·«µ¬·¬¶¤±§³µ¨§±¬¶²±¨ º¤¶∏¶¨§
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²©«¼§µ²ª¨ ± ³¨µ²¬¬§¨ ¤±§¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t¬± „„ µ¤·¶k Π s qsxl o·«¨ ³²·¨±¦¼ ¥¨¬±ª¶¬°¬¯¤µ·²³µ¨§±¬¶²±¨ qΧονχλυ2
σιον : ±∏©¨ ±ª¶«¬°µ¨¶¦µ¬³·¬²± ≤²∏¯§µ¨§∏¦¨ ·«¨ µ¬¶¬±ª¯¨ √¨¯ ²©¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t ¤±§«¼§µ²ª¨ ± ³¨µ²¬¬§¨ ¬± „„ µ¤·¶o
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[ Κεψ ωορδσ] ±∏©¨ ±ª¶«¬°µ¨¶¦µ¬³·¬²±~¤§­∏√¤±·¤µ·«µ¬·¬¶~«¼§µ²ª¨ ± ³¨µ²¬¬§¨ ~¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t
≈责任编辑 方文贤 
巴戟天寡糖对皮质酮损伤的 °≤tu细胞的保护作用
李云峰 o杨 明 o赵毅民 o罗质璞
k军事医学科学院 毒物药物研究所 o北京 tss{xsl
≈摘要  目的 }探讨巴戟天寡糖k  • 2|zl抗抑郁作用的可能机制 ∀方法与结果 } • 2|z或 ‘Šƒ与皮质酮 u ≅
ts p w °²¯#p t共孵 °≤tu细胞 w{ «o可防止皮质酮所致的 °≤tu神经细胞损伤 ∀进一步运用 • ×2°≤ • 方法研究表
明 o • 2|zktss °ª#®ªp tl及去甲丙米嗪kts °ª#®ªp tl慢性¬³ut§o可使大鼠前脑皮层 ‘Šƒ !脑源性神经营养因子
k…⁄‘ƒl及海马 …⁄‘ƒ °• ‘„表达升高 ∀结论 } • 2|z抗抑郁作用机理可能与神经细胞营养因子表达升高 o从而
对皮质酮诱导的神经元损伤产生保护作用有关 ∀
≈关键词  巴戟天寡糖 ~皮质酮 ~°≤tu细胞 ~神经营养因子
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusssls|2sxxt2sw
≈收稿日期 t|||2tu2sz
开发新型 !高效 !低毒副作用的抗抑郁剂始
终是精神药理学的一个重要研究课题 o因此从植物
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第 ux卷第 |期
usss年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²q|
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