全 文 ：川芎赤芍配伍比例对芍药苷药代动力学的影响
张 壮u o闫彦芳u o陈可冀t
kt q中国中医研究院 西苑医院 o北京 tsss|t ~u q北京中医药大学 东直门医院 o北京 tsszssl
≈摘要  目的 }探索中药配伍比例对中药复方药效成分药动学的影响 ∀方法 }采用反相高效液相色谱法 o紫外
检测 ∀v°{z药代动力学软件拟合药动学模型 o统计学处理采用 τ检验法 ∀结果 }川芎Β赤芍 tΒu和 uΒt芎芍制剂给
药组芍药苷的药代动力学模型均为一室开放模型 o川芎Β赤芍 tΒu 和 uΒt 组的药代学参数分别为 Ž¤ € s qss{u ?
s qssts和 s qss{{ ? s qsstt k°¬±p tl o Ž¨ € s qssys ? s qsstx和 s qsszt ? s qsss{ k°¬±p tl o τtruŽ¤€ {y qts ? tu qv{和
z| qtt ? t{ qy| k°¬±l o τtruŽ¨ € tt| q|x ? uz quv和 |{ qtw ? ts q{u k °¬±l o τ³¨¤® € ty| qty ? ut q{t 和 tw| qv| ? u| qxt
k°¬±l o Χ°¤¬ € v{wx q{| ? zty qzs 和 tyvx q{t ? uvs q|x k Λª#p tl ∀两组药动学参数差异无显著统计学意义k Ё
s qsxl ∀结论 }川芎赤芍配伍对芍药苷的药动学特征无显著影响 o提示中药配伍并不是必然地导致其中某一种成分
的药代动力学特征的变化 ∀
≈关键词  芍药苷 ~药代动力学 ~反相高效液相色谱
≈中图分类号 • u{x qx ~• |y| qt ≈文献标识码 … ≈文章编号 tsst2xvsukusssltt2sy{{2sw
芍药苷 ³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± k°ƒl为活血化瘀中药复方
芎芍制剂的主要成分 o本研究应用反相高效液相色
谱法k• °2‹°≤l测定芍药苷的血清药物浓度 o对犬
一次灌胃川芎赤芍不同比例配伍的芎芍制剂中芍药
苷的复方药代动力学进行比较研究 o初步探索中药
配伍比例对复方中药有效成分的药动学特征的影
响 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 仪器 岛津 ≤2y„ 高效液相色谱仪 o≤2• v„
数据处理仪 o≥°⁄2y„ ∂ 可变波长紫外可见检测器组
成系统 ∀
1 q1 q2 药品与试剂 川芎 !赤芍原药材购自四川省
药材公司 o经西北大学植物解剖学专家胡正海教授
鉴定 o川芎为伞形科植物川芎 Λιγυστιχυ µ Χηυανξ2
ιονγ ‹²µ·q的干燥根 o赤芍为川赤芍 Παεονια ϖειτχηιι
¼±¦«q的干燥根 ∀芎芍制剂由中国中医研究院西苑
医院制剂室制备 o相当于生药 t ª# °¯ p t溶液 o经
‹°≤测定川芎Β赤芍 tΒu和 uΒt芎芍制剂中芍药
苷含量分别为 ty qtv °ª# °¯ p t和 z qy| °ª# °¯ p t ∀芍
药苷标准品购自中国药品生物制品检定所k批号
szvy2|ys{ l o经 ‹°≤ 检 测 为 单 一 色 谱 峰
≈收稿日期  usss2sv2tu
≈基金项目  国家科委/九五0攻关课题k|y2|sy2sy2stl
k归一化法测定纯度为 || qt h l ∀戊巴比妥钠 o上海
化学试剂采购供应站分装厂 o˜‘Œ’‘进口分装 o批
号 {ystuu ∀高效液相色谱流动相所用甲醇及无水
乙醇 !乙酸乙酯等其它试剂均为国产分析纯 o水为三
蒸水 ∀
1 q1 q3 实验动物 杂种犬 tu只 o均为雄性 o第四军
医大学西京医院实验动物中心提供 ∀以体重分层随
机分为两组 o即 „组川芎Β赤芍 uΒt芎芍制剂灌胃 x
ª#®ªp t和 …组川芎Β赤芍 tΒu制剂灌胃 x ª#®ªp t o两
组体重分别为ktz qv{ ? t qyyl oktz qxz ? u qsyl®ªo差
异无显著统计学意义k Ё s qsxl ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 色谱条件 固定相 }‹¼³¨µ¶¬¯ ’⁄≥u ≤t{柱
ktxs °° ≅ w qy °° ox Λ°l o流动相 }甲醇2水kzuΒ
u{l o抽滤后超声波脱气 ts °¬±使用 ∀流速 }t qs °¯ #
°¬±p t o柱温 uu ε o检测波长 }uvs ±° o灵敏度 }s qst
„ ˜ƒ≥ ∀在此条件下 o°ƒ保留值 τ• € kts qss ?
s qs{l °¬±∀采用外标法定量测定血清芍药苷浓度 ∀
1 q2 q2 标准液配制 精密称取芍药苷标准品 7 q{s
°ªo以甲醇溶解于 xs °¯ 容量瓶中 o成为 txy qss °ª
#pt的标准母液 o分装于玻璃试管中 op us ε 密封
保存待用 ∀
1 q2 q3 血清样品的预处理方法 微量加样器精取
待测犬血清 uss Λ¯ 加入尖底玻璃离心试管 o移液管
精取乙酸乙酯 t qw °¯ 加入试管旋混 tus ¶ov sss µ#
#{{y#
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∂ ²¯ qux o‘²qtt
‘²√ qousss
°¬±p t离心 tx °¬±o精取乙酸乙酯层 t qs °¯ o置于玻
璃试管中 oys ε 水浴 o氮气吹干 o密封待测 ∀txs Λ¯
流动相溶解定容 o进样 tss Λ¯ ∀
1 q2 q4 线性范围 芍药苷标准溶液用混合空白犬
血清配制血清芍药苷浓度分别为 |v qys ∗ wy{s qss
Λª#pt的 z个含药血清标准管 ∀按血清样品进行预
处理并进行 ‹°≤ 测定峰面积k Α°ƒl o共测定 x组
含药血清标准管 o经 Θ检验 o各浓度点 Α°ƒ无逸出
值 ∀计算 x组各浓度点平均值 o以 Α°ƒ做为纵坐标 o
以血清芍药苷浓度 Χ°ƒ为横坐标 o进行线性回归 o得
标准曲线方程 ∀
1 q2 q5 检测限 制备 °ƒ 浓度为 t ou ow ox o{ ots o
tx ous Λª#pt的含药犬血清 o预处理后进样 o以信噪
比k≥r‘l为 v时的 °ƒ 血清浓度判为本分析方法的
检测限 ∀
1 q2 q6 回收率测定法 制备血清 °ƒ浓度为
tuw q{s o|vy qss ov|ss qss Λª#p tv个 t组高中低浓
度系列含药血清 o在 ts §内分别做 x组 o按血清预
处理方法处理后 ‹°≤ 测定 o根据标准曲线计算 °ƒ
浓度实测值k Χχ°ƒl o回收率 € Χχ°ƒr Χƒ„ o本法所测
为日间回收率 ∀
1 q2 q7 日内 !日间精密度测定法 制备血清 °ƒ 浓度
为 tuw q{s o|vy qss ov|ss qss Λª#p tv个 t组高中低
浓度芍药苷血清 o在 t日内测定 y组 o计算 Α°ƒ的平
均值 ξ 和标准偏差 σo计算相对标准偏差 ΡΣ∆ € σ/
ξ o结果为日内精密度 ∀在 ts日内不同天内测定 x
次 o计算 ΡΣ∆ o结果为日间精密度 ∀
1 q2 q8 给药及采血方法 犬禁食 tu «ov h戊巴比
妥钠 vs °ª#®ªp t静脉麻醉 o插管灌胃给药 x °¯ #
®ªp t o给药前取空白血清 o给药后不同时点取血 o分
离血清 op us ε 保存待测 ∀
1 q2 q9 药动学研究与统计方法 ‹°≤ 测定芍药
苷经时血清浓度 o采用中国药理学会数学药理委员
会编制的 v°{z实用药代动力学软件 o拟合药代动力
学模型 o计算药代动力学参数 ∀数据采用组间对照
τ检验法进行统计学分析处理 ∀
2 实验结果
2 q1 色谱图 见图 t ∀
2 q2 专一性 芍药苷峰与犬血清内源性物质 !芎芍
制剂吸收入血的其他成分峰及其代谢产物峰均实现
基线分离 ∀犬灌胃芎芍制剂后的含芍药苷血清经过
预处理后流动相定容液中加入芍药苷标准液 o只有
芍药苷保留时间kts qss ? s qs{l °¬±处的色谱峰特
异性增高 o峰面积增加量与所加芍药苷量成正比 o表
明本法专一性良好 ∀
图 t ‹°≤ 色谱图
„ q芍药苷标准品 …q混合空白犬血清 ≤ q混合空白犬血清加入芍药苷
标准品 ⁄q犬灌胃芎芍胶囊 uws °¬±时点血清 ¤q°ƒ的色谱峰
2 q3 线性范围与标准曲线 血清芍药苷浓度在
|v qys ∗ wy{s qss Λª#pt的范围内 o°ƒ 峰面积与血
清 °ƒ浓度间线性关系良好 o标准曲线方程 Α°ƒ €
wt qwuxs Χ°ƒ n txzx qt|{{k ρ € s q||{wl ∀结果表
明 o可满足动物实验定量分析的要求 ∀
2 q4 检测限 检测限测定结果表明 °ƒ 浓度 x Λª#
pt的含药犬血清的 ‹°≤ 色谱图符合 ≥r‘€ v的
条件 o故确定本法的检测限为 °ƒ 血清浓度 x Λª#
pt ∀
2 q5 回收率与精密度 含 °ƒ浓度为tuw q{s o
v|y qss ov|ss qss Λª#p t犬血清样品预处理后 o测得
v种浓度样品的回收率分别为ktss q|z ? u qx|l h o
k|| qyu ? u qs|l h oktst qsy ? t qzwl h ∀这 v种浓度
样品的日内平均标准偏差 ΡΣ∆k h l分别为 t q{w h o
t q|t h ot qx{ h ~日间 ΡΣ∆k h l分别为u qx| h o
u qts h ot qzu h ∀
2 q6 犬 t次灌胃芎芍制剂芍药苷的药代动力学结
果 犬 t次灌胃川芎Β赤芍 tΒu和 uΒt芎芍制剂芍
药苷的药代动力学模型均符合一室开放模型 o两组
主要药代动力学参数见表 t ∀
3 讨论
芍药苷血清浓度 ‹°≤ 测定方法文献报道较
少 o我们主要根据芍药苷的理化性质≈t  o选择血清预
处理方法 o曾选用乙醇 !甲醇 !乙腈去蛋白法和氯仿
萃取等方法 o但回收率低 o血清蛋白杂质峰较多 o明
显干扰测定 ∀最终确定乙酸乙酯提取 o杂质峰与芍
药苷峰实现了基线分离 o不干扰芍药苷的分析 o且提
取率高 o萃取一步完成 o无乳化现象 o简便快速 ∀流
#|{y#
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表 t 犬灌胃川芎Β赤芍 tΒu组及 uΒt组
芍药苷的药代动力学参数
药代参数 川芎Β赤芍 tΒ u组 川芎Β赤芍 uΒ t组
Ž¤r°¬±p t s qss{u ? s qssts s qss{{ ? s qsstt
Ž¨r°¬±p t s qssys ? s qsstx s qsszt ? s qsss{
τtruŽ¤r°¬± {y qts ? tu qv{ z| qtt ? t{ qy|
τtruŽ¨r°¬± tt| q|x ? uz quv |{ qtw ? ts q{u
τ³¨ ¤®r°¬± ty| qty ? ut q{t tw| qv| ? u| qxt
χ°¤¬rΛª#p t v{wx q{| ? zty qzs tyvx q{t ? uvs q|xul
„ ˜≤s ∗ ] r
Λª#p t#°¬±p t xs|utz q{v ? tysytz quu uutuzx q|y ? xwuuy qxutl
¦°¤¬r„ ˜≤r°¬±p t s qsszz ? s qsst{ s qsszx ? s qssut
注Β ξ ? σ ν € y tl两组比较 Π s qst ul两组比较 Π s qsst
动相曾试用陈崇宏≈u  !蒋学华≈v 二文的流动相 o陈法
的保留时间较短 o可分离空白犬血清中的芍药苷单
体 o但不能分离芎芍制剂复方灌胃后犬血清中的芍
药苷 o芍药苷峰与多个杂峰重叠在一起 o无法定量分
析 ∀蒋法所用流动相用冰乙酸调 ³‹ 至 v qs ? s qt o
但芍药苷在酸性条件下极易分解破坏 o实验中发现
虽可明显延长保留时间 o但标准曲线各浓度点的峰
面积标准差太大 o且回收率很低 o无法达到定量分析
的要求 ∀本文选用中性流动相 o经反复摸索甲醇2水
的比例 o发现甲醇2水kuxΒzxl的条件下 o芍药苷峰与
其它杂峰可实现基线分离 o且保留时间为 ts °¬±o比
较适中 !快速 ~而若再减低甲醇2水的比例 o则保留时
间明显延长 o峰形不理想 o理论塔板数明显下降 ∀本
实验曾试用间羟基苯甲酸 !邻羟基苯甲酸 !对二甲胺
基苯甲醛 !间羟基苯酚 !水杨酸等作为内标物 o由于
芎芍制剂吸收入血的成分及其代谢产物较复杂 !给
药后不同时点血中经时成分谱变化较大 o导致色谱
峰较多且色谱图经时变化较大 o加入内标后均无法
在合适的保留时间实现基线分离 o采用外标法严格
操作亦能保证高回收率和准确性 o故本实验采用外
标法进行定量分析 ∀本文建立的芎芍制剂中芍药苷
血清浓度的 ‹°≤ 测定方法专一性 !准确性 !灵敏度
较高 o操作简便快速 o且所用血清量少 o为其他中药
复方中芍药苷的血药浓度分析提供了较有参考价值
的方法 ∀
经检索 o中药复方中芍药苷的药代动力学研究
至今未见文献报道 ∀蒋学华等≈v 检测兔口服百合固
金汤冲剂后芍药苷的血浆浓度 o结果未能检测出芍
药苷 ∀我们在研究芎芍制剂中芍药苷在犬体内的药
代动力学时 o试图探索中药间不同比例配伍对其中
某种成分的药代动力学参数的影响 ∀犬灌胃川芎Β
赤芍 tΒu和 uΒt芎芍制剂后芍药苷的体内过程均符
合一室开放模型 o我们所测犬灌胃川芎Β赤芍 tΒu和
uΒt芎芍制剂芍药苷的生物半衰期 τtruŽ¨为ktt| q|x
? uz quvl °¬±和k|{ qtw ? ts q{ul °¬±o与陈崇宏≈u 
等所报道的犬静注芍药苷单体的生物半衰期ktvv q
wt ? {w q{|l °¬±较接近 o表明其具有中等水平的消
除速度 ∀其半吸收期 τtruŽ¤为k{y qts ? tu qv{l °¬±
和kz| qtt ? { qy|l °¬±o血药浓度达峰时间 τ³¨ ¤®为
kty| qty ? ut q{tl °¬±和ktw| qv| ? u| qxtl°¬±o表明
吸收较慢 o达峰较迟 ∀根据文献≈w ox „ ˜≤s ∗ ] 作为
药物吸收程度指标 oΧ°¤¬r „ ˜≤ 作为吸收速度指标
用于评价药物的生物有效性 o本文川芎Β赤芍 tΒu组
的血药峰浓度¦°¤¬和 „ ˜≤s ∗ ] 大致上是川芎Β赤芍 u
Βt组的 u倍 o且两组间 Χ°¤¬r „ ˜≤ !表观一级吸收
速率常数 Ž¤和半吸收期 τtruŽ¤差异无显著统计学意
义k Ё s qsxl o表明川芎赤芍配伍比例对芍药苷的
吸收程度和吸收速度的影响不大 ∀两组间表观一级
消除速率常数 Ž¨ 和生物半衰期 τtruŽ¤无显著差异
kЁ s qsxl o表明川芎赤芍配伍比例对芍药苷的消
除速度影响不明显 o且两组间血药浓度达峰时间
τ³¨ ¤®差异无显著统计学意义k Ё s qsxl o表明不同
比例的川芎赤芍配伍对芎芍制剂中芍药苷的药代动
力学行为无明显影响 ∀此结果提示中药配伍比例并
不是必然地导致其中某一种成分的药代动力学特征
的变化 o这是中药复方药动学研究中较有意义的发
现 ∀
≈参考文献 
≈t  梁学谦 q芍药甙的分离提取及其药理作用 q新医药学杂志 ot|zw o
ktul }wu q
≈u  陈崇宏 o张 源 o陈光亮 q芍药甙的药代动力学研究 q中国药理学
通报 ot||s oykxl }u|| q
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甙的含量 q中成药 ot||v otxkul }u| q
≈w  黄圣凯 o韩可勤 q生物等效性评价的统计方法 q中国药学杂志 o
t||w ou|kxl }vu q
≈x  ∞±§µ¨±¼¬o ƒµ¬·¶¦« ≥ o ≠¤± • q ≤ °¤¬r„ ˜≤ ¬¶ „ ≤¯¨ ¤µ¨µ  ¤¨¶∏µ¨
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Εφφεχτσ οφ Χηυανξιονγ2Χηισηαο ∆ισπενσινγ Ρατιο ον τηε
Πηαρµ αχοκινετιχσ οφ Παεονιφλοριν ιν τηε Χανινε
‹„‘Š «∏¤±ªu o ≠ „‘ ≠¤±2©¤±ªu o≤ ‹∞‘ Ž¨­¬t
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¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²© ©¨©¨ ¦·¬√¨¦²°³²±¨ ±·¶q Μετηοδσ °¤¨ ²±¬©¯²µ¬± k°ƒl¬± ¶¨µ∏° º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ • °2‹°≤ º¬·«
˜ ∂2§¨·¨¦·²µq׫¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±2·¬°¨§¤·¤ º µ¨¨ ©¬··¨§∏¶¬±ªv°{z °«¤µ°¤¦²®¬±¨ ·¬¦°µ²ªµ¤° o¤±§·«¨ ³«¤µ°¤2
¦²®¬±¨ ·¬¦³¤µ¤° ·¨¨µ¶º µ¨¨ ¦²°³¤µ¨§¥¼ ·2·¨¶·q Ρεσυλτσ: ׫¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±2·¬°¨¦∏µ√ ¶¨²© °ƒ ¬± ¥²·«ªµ²∏³¶²©
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·«¨ ·º²ªµ²∏³¶«¤§±²¶·¤·¬¶·¬¦¤¯ ¼¯ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·§¬©©¨ µ¨±¦¨¶k π  s qsxl qΧονχλυσιον :⁄¬©©¨ µ¨±·©²µ°∏¯¤¨ ²© ≤«¬±¨ ¶¨
«¨ µ¥¶§² ±²·¤¯ º¤¼¶µ¨¶∏¯·¬± ¦«¤±ª¨¶²©³«¤µ°¤¦²®¬±¨ ·¬¦¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²©¶²°¨²±¨ ¦²°³²±¨ ±·q
[ Κεψ ωορδσ] ³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±~³«¤µ°¤¦²®¬±¨ ·¬¦¶~• °2‹°≤
≈责任编辑 方文贤 
全国中药研究与发展学术会议征文通知
为了促进中药的现代研究 o加强中药学领域研究 !生产与临床人员彼此间的信息交流 o推动我国/十五0
期间中药科研进程 o商讨我国入关后中药发展新对策 o积极推动中药与国际接轨 o湖南中医学院药学院与中
国中药杂志社拟于 usst年 ts月中 !下旬在湖南省联合举办/全国中药研究与发展学术会议0 ∀届时将有国
家中医药管理局科教司和国家药品监督管理局有关领导与专家莅会指导 ∀
会议主要内容 }
t !我国/十五0期间中药基础研究主要课题 ∀
u !我国入关后中药发展方向与对策 ∀
v !中药新药开发研究与成果推广 ∀
会议期间将进行中药学各学科k包括中药理论 !质量标准 !工艺制剂 !药事管理 !中药药理 !中药临床药
理 !中药药房 !临床应用等l学术论文交流 ∀
会议征文启事如下 }
t !欢迎中药学界各学科教学 !科研 !临床 !药房等有关人员积极投稿 o参加会议 ∀
来稿请寄 }北京东直门内北新仓 t{号中国中药杂志社 方文贤 !古云霞收 o并在信封注明/征文0字样 o
同时汇寄审稿费每篇 vs元 o汇至北京东直门内北新仓 t{号中国中药杂志社 张尚云收 ∀
u !欢迎各有关企业 !事业单位及药厂赞助会议 ∀联系人 }中国中药杂志社 方文贤 !程志铭 ∀电话 }
kstslywswx{vs ~传真 }kstsl{wsv{y{w
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