全 文 ：即使是相同的条件 o也可能对它们产生不同的影响 ∀
但由综合评分的方差分析显示 o在 v个因素中 o只有
…因素对炮制甘草的质量有显著影响k Θ  s qsxl o
而分别以两者含量为指标得到的最佳工艺皆有 Βv o
因此 o可认为分别以甘草次酸 o黄酮类化合物含量为
指标得到的最佳工艺与综合评分得到的最佳工艺并
无显著差别 ∀但由于综合评分兼顾了炮制品的外观
颜色及甘草次酸 !黄酮类化合物的含量 v个方面 o故
最佳工艺仍以 Αu Βv Χu为好 ∀
3 q3 在最佳工艺条件 Αu Βv Χu 下进行验证实验 ∀
按此工艺炮制的甘草外观呈均匀的深黄色 o不粘手 o
甘草次酸 o黄酮类化合物的平均含量分别是
s q{vx{ h和 t qxty| h o综合评分 { qvss o高于 |个样
品中最高分 { qsuz ∀验证实验证明了该工艺简单 o
可行 ∀因此 o在本实验条件下 o筛选得到的最佳蜜制
工艺为 }加入药材重量 ux h的炼蜜 o闷润透心后在
ys ε 下烘 ys °¬±∀
≈参考文献 
≈t  郑虎占 o董泽宏 o佘 靖 q中药现代研究与应用 q第二卷 q北京 }
学苑出版社 ot||z qtuzt q
≈u  杨建江 o韩桂如 o冯 丽 o等 q薄层扫描法测定甘草次酸的含量 q
中国中药杂志 ot||u otykwl }uvu q
≈v  孙秀梅 o黄树明 o王英姿 q甘草 ≥…∞法与 • ∞法的成分比较 q中
国中药杂志 ot||z ouwk|l }xwu q
≈责任编辑 刘  
补肾益精方水提物和醇提物
化学指标及药效的比较研究
史万忠t o徐德生u o沈培芝t o石印玉t
kt q上海市中医药研究院 骨伤科研究所 o上海 usssvu ~
u q上海中医药大学 附属曙光医院 o上海 usssutl
≈摘要  目的 }评价中药补肾益精方水提物和醇提物对化学成分指标含量以及对绝经后骨质疏松症大鼠模型
骨矿密度的影响 o考察化学成分指标与药效的相关性 o探讨复方有效组分 ∀方法 }分别采用水提和醇提工艺制备补
肾益精方的提取物 o用 ‹°≤ 法测定淫羊藿苷和柚皮苷含量 o并观察两种提取物预防性给药对切除卵巢诱导的绝
经后骨质疏松症大鼠模型的作用 ∀结果 }水提物和醇提物均具有抗骨质疏松作用 o且水提物的作用略强于醇提物 o
而水提物中的淫羊藿苷和柚皮苷的含量低于醇提物 o淫羊藿苷和柚皮苷的含量与复方抗骨质疏松作用非正性相
关 ∀结论 }补肾益精方以水提为佳 o复方中水溶性成分和醇溶性成分都具有抗骨质疏松的作用 o复方的提取工艺筛
选以药效为指标较妥 ∀
≈关键词  补肾益精方 ~提取工艺 ~骨质疏松症 ~骨矿密度 ~高效液相色谱法
≈中图分类号  • u{v qysv ~• u{v qysx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsz2sv|w2swyu2sw
中药补肾益精方k密骨胶囊l系上海中医药大学
附属曙光医院医院制剂 o经临床试验和实验研究证
明具有独特的防治原发性骨质疏松症的作用≈t ou  o
它是由制何首乌 !淫羊藿 !骨碎补等 z味中药组成的
中药复方制剂 o长期以来以水煎提取制备 ∀从目前
天然抗骨质疏松症药物的研究进展来看 o认为植物
雌激素≈v 是最有研究价值的抗骨质疏松天然药物中
≈收稿日期  usss2sv2ut
≈基金项目  国家/九五0攻关资助项目k|y2|sy2s|2sxl
的活性成分 o已发现的植物雌激素的化学结构有黄
酮k异黄酮l类 !二苯乙烯类 !三萜和甾醇等 ∀补肾益
精方中含有较多的黄酮类成分及二苯乙烯类成分 o
这些成分无论是以苷或以苷元存在 o都能在中等浓
度的乙醇中有较好提取 ∀复方中淫羊藿和骨碎补的
抗骨质疏松作用已较为肯定≈w ox  o因此选用这两味
药中的黄酮成分淫羊藿苷和柚皮苷为指标 ∀结合经
典的切除卵巢诱导的绝经后骨质疏松症大鼠动物模
型实验 o对水提和醇提工艺制备的提取物进行比较 ∀
考察化学成分指标与药效的相关性 o探讨复方有效
#uyw#
第 uy卷第 z期
usst年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qz
∏¯ qousst
组分 o为该复方的进一步研制和开发奠定基础 ∀
1 淫羊藿苷和柚皮苷含量测定
1 q1 实验材料和方法
1 q1 q1 实验材料
补肾益精方水提物和醇提物系分别为复方经水
提和 yx h乙醇回流提取 o浓缩 !干燥制备而得 o由上
海中医药大学附属曙光医院制剂室提供 ∀
淫羊藿经鉴定为小檗科植物朝鲜淫羊藿
Επι µεδιυ µ Κορεανυ µ ‘¤®¤¬的干燥地上部分 ∀骨
碎补经鉴定为水龙骨科植物槲蕨 ∆ρψναρια φορτυνει
kŽ∏±½¨ lq≥°的干燥根茎 ∀均由上海市药材公司提
供 ∀
• ¤·¨µ¶高效液相色谱仪k包括 xts泵 ozzux¬进
样阀 o• ¤·¨µ¶w{w 紫外检测器 o≤⁄ ≤2u„ 数据处理
机l ~≥…uuss超声波发生器k中美合资上海必能信超
声有限公司 o{s • l ∀
1 q1 q2 淫羊藿苷含量测定色谱条件及方法学考察
色谱条件 ‘²√¤2°¤® ≤t{色谱柱kv q| °° ¬§≅
vss °° ox Λ°l o‘²√¤2°¤® ≤t{预柱 ~流动相甲醇2水2
醋酸kwxΒxsΒxl o使用前经减压抽滤脱气 ~流速 s qz
°¯ #°¬±p t ~检测波长 uzs ±° ~灵敏度为 s qsx „ ˜ƒ≥ ~
纸速为 u °°#°¬±p t ~保留时间约 tw °¬±~理论塔板
数按淫羊藿苷计为 u sss ~数据处理定量方法为外标
峰面积测定法 ∀采用上述色谱条件 o与淫羊藿缺味
空白样品对照 o方中的其他药物不干扰淫羊藿苷的
测定 ∀
方法学考察 精密称取淫羊藿苷对照品 ts qt{
°ªo加甲醇配制成 s qsusvy °ª# °¯ p t的对照品溶液 ∀
按淫羊藿苷色谱条件测定 o求得淫羊藿苷含量测定
的线性回归方程为 Ψ € twz| .wvz n wxxsxt .uvt Ξ , ρ
€ s q|||| o线性范围为 s qsxs| ∗ s q{tww Λª~精密度
试验 ΡΣ∆ € t .z|%( ν € x) ;稳定性试验(t ,u ,v §)
ΡΣ∆ € v .{y%( ν € vl ~经加样回收试验得平均回收
率为 || qs h oΡΣ∆为 u .ww%( ν € xl ∀
1 q1 q3 柚皮苷含量测定色谱条件及方法学考察
色谱条件 Λ…²±§¤³¤® ≤t{色谱柱kv q| °° ¬§≅
vss °° ots Λ°l oΛ…²±§¤³¤® ≤t{预柱 ~流动相乙腈2
水2磷酸kuuΒzxΒs qstl o使用前经减压抽滤脱气 ~流
速 t qs °¯ #°¬±p t ~检测波长 u{v ±° ~灵敏度为 s qsx
„ ˜ƒ≥ ~纸速为 u °°#°¬±p t ~保留时间约 tv °¬±~理
论塔板数按柚皮苷计为 x sss ~数据处理定量方法为
外标峰面积测定法 ∀采用上述色谱条件 o与骨碎补
缺味空白样品对照 o方中的其他药物不干扰柚皮苷
的测定 ∀
方法学考察 精密称取柚皮苷对照品 | qwv
°ªo加甲醇配制成 s qsvzzu °ª# °¯ p t的对照品溶液 ∀
按柚皮苷色谱条件测定 o求得柚皮苷含量测定的线
性回归方程为 Ψ € uvwy .zsx n uyyvyx .xw{ Ξ , ρ €
s q|||| o线性范围为 s qszxww ∗ t qtvty Λª~精密度
试验 ΡΣ∆ € u .s%( ν € xl ~稳定性试验kt ov ox §l
ΡΣ∆ € u .zx%( ν € v) ;经加样回收试验得平均回收
率为 tst .x% , ΡΣ∆为 u .s%( ν € xl ∀
1 q2 淫羊藿苷 !柚皮苷含量测定方法及结果
精密称取水提物 !醇提物各 s qtx ªo置锥形瓶
中 o精密加入甲醇 ux °¯ o密塞 o称定重量 o超声处理
vs °¬±o取出待冷至室温 o再称定重量 o用甲醇补足
减失的重量 o摇匀 o过滤 o取续滤液 o即得供试品溶
液 ∀另分别精密称取淫羊藿苷 !柚皮苷对照品 o用甲
醇溶解并定容得 s qsusvy °ª# °¯ p t和 s qsvzzu °ª#
°¯ p t溶液 o作为对照品溶液 ∀
取上述溶液分别进样 o测定样品中淫羊藿苷和
柚皮苷的含量 ∀结果见表 t o水提物中的淫羊藿苷
和柚皮苷明显低于醇提物 o分别仅为醇提物的 {x h
和 zz h ∀
2 水提物 !醇提物预防性给药对绝经后骨质疏松症
大鼠模型的骨矿密度的影响
2 q1 材料与方法
2 q1 q1 实验动物
表 t 不同提取工艺的化学成分指标含量及得膏率比较
测定指标
淫羊藿苷
r°ª#ªp t
柚皮苷
r°ª#ªp t
得膏率
r h
水提物r„ u qyw v qtz uu qz
醇提物r… v qtt w qtv t{ qt
„Β… s q{x s qzz
注 }ν € u
{个月龄清洁级健康雌性 • ¬¶·¤µ大鼠 vu只 o体
重 uxs ∗ vss ªo由上海中医药大学动物中心提供k实
验动物合格证号 stx|zl ∀
2 q1 q2 动物饲养
各组大鼠分笼饲养 ~自由摄取标准大鼠饲料k钙
t qst h o磷 s qz{ h l ~自由饮用蒸馏水 ~室温kt{ ? ul
ε ∀
2 q1 q3 实验药物
中药补肾益精方水提物和醇提物由上海中医药
大学附属曙光医院制剂室提供 ∀应用蒸馏水将水提
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第 uy卷第 z期
usst年 z月
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∂ ²¯ quy o‘²qz
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物和醇提物配制成悬浊液灌胃给药 o剂量为 u qw| ª#
®ªp tk以生药量计 o相当于临床剂量的 x倍l ∀
2 q1 q4 动物的分组及相应处理
vu只 {月龄 • ¬¶·¤µ雌性大鼠随机分为 w组 }正
常对照组 !模型组 !水提物给药组和醇提物给药组 o
每组各 {只 ∀模型组 !水提物给药组和醇提物给药
组大鼠摘除双侧卵巢 o同时水提物给药组和醇提物
给药组大鼠分别灌喂中药补肾益精方的水提物和醇
提物 ∀v个月后ktt个月龄l处死各组大鼠 o分别测
定各组大鼠左侧股骨全段 !股骨颈和胫骨近端的骨
矿密度 ∀
2 q1 q5 实验仪器
⁄°÷2型双能 ÷ 线骨密度仪k˜‘„• 美国 o能
谱 v{rz ¤®¨ ∂ o高压稳定 ? s qsx h o仪器精密度
t h l ∀
2 q1 q6 标本处理及观察指标
处死大鼠以后 o取出左侧股骨和胫骨 o放于生理
盐水中 o剥离软组织 ∀分别测定股骨全段 !股骨颈和
胫骨近端骨矿密度 ∀
2 q2 水提和醇提物对绝经后骨质疏松症大鼠模型
骨矿密度的影响结果
由表 u可知 o水提物能明显延缓模型大鼠股骨
全段 !股骨颈和胫骨上端的骨矿的丢失k Π s .sx) ,
醇提物对延缓股骨颈部位的骨矿的丢失作用明显
( Π s .sx) ,而对股骨全段和胫骨上端的作用不明
显( Ё s .sx) ∀在股骨颈 !股骨全段和胫骨上端部
位水提物组的骨矿含量均高于醇提物组 ,但无显著
性差异( Ё s qsxl ∀
表 u 水提和醇提物对绝经后骨质疏松症
大鼠模型骨矿密度的影响
组别 股骨颈 股骨全段 胫骨上端
正常组 s qvxt ? s qsvuul s qvvu ? s qss{ul s qv|{ ? s qsxwul
模型组 s quys ? s qswv s qvs| ? s qstx s qvtv ? s qsw{
水提组 s qvus ? s qswsul s qvuu ? s qst{ul s qv|t ? s qsxvul
醇提组 s qvs| ? s qsuzul s qvtw ? s qststl s qvzs ? s qswttl
注 }≠ ν € {  tl与模型组比较 Ё s qsx ul与模型组比较 Π
s qsx
3 讨论
3 q1 指标成分的选择
中药防治骨质疏松症是有效的已成为中国医学
界的共识 o从目前的研究进展来看 o对具有抗骨质疏
松作用的中药的研究多停留于中药的粗提物水平 o
其植物化学研究显得相对滞后 ∀文献报道补肾益精
方中淫羊藿所含的淫羊藿苷具有改善/肾虚0症状 o
补肾阳作用≈y oz  o骨碎补中以柚皮苷为主的总黄酮
的提取物已获批准进行抗骨质疏松临床验证≈{  ~同
时受到植物雌激素研究的启示 o且复方中又含有与
植物雌激素结构相似的黄酮类和二苯乙烯苷类等成
分 o因此选择黄酮类成分淫羊藿苷和柚皮苷作为指
标成分 ∀同时这些指标成分也能反映复方中的总黄
酮及与黄酮极性相似成分的含量 ∀
3 q2 化学成分指标与药效指标的选用
以淫羊藿苷和柚皮苷的含量及干浸膏的得率来
评价 o补肾益精方的醇提工艺优于水提工艺 ~而以对
模型大鼠的药效为指标 o则显示出水提物延缓骨矿
丢失的作用明显优于醇提物的趋势 ∀化学成分指标
与药效指标显示出矛盾的结果 ∀作为临床治疗药
物 o其生命力在于疗效 ∀在提取工艺和方法的选择
时 o提取物的药效优劣应是优先考虑的 o因而认为水
提工艺更适合中药补肾益精方的提取 ∀当前中药复
方制剂工艺研究中 o多只运用某种有效成分作为跟
踪指标 o而这些化学成分含量往往难于评价整个复
方的药效高低 o这使最终得到的制剂工艺难以体现
临床药效 ∀若结合药效实验进行筛选 o则不仅可以
对化学成分指标和药效进行相关性考察 o而且可在
化学成分指标不能代表药效时选择药效作为评价指
标 o使筛选出的工艺更趋科学 !合理 ∀
3 q3 补肾益精方中抗骨质疏松症有效组分的探讨
补肾益精方中淫羊藿苷和柚皮苷含量醇提物比
水提物高 o而药效却不及水提物 o说明淫羊藿苷和柚
皮苷的含量与复方抗骨质疏松活性非正性相关 o提
示复方中某些水溶但醇不溶成分也具有抗骨质疏松
活性 ∀中药复方体现基于证的功能主治的物质基础
是复方中/综合有效中药成分0 o这些成分往往在理
化性质方面差异较大 ∀本复方醇提物虽也具有抗骨
质疏松作用 o但作用不如水提物 o可能与醇提使某些
水溶性成分丢失导致药效下降有关 ∀水溶性成分往
往是一些分子量较大 o结构复杂的化学成分如多糖 !
鞣质等 o有关该类成分的抗骨质疏松作用也有报
道≈|  ∀目前报道的许多抗骨质疏松症有效的中药或
中药复方 o多以水为溶媒提取 o虽未进行不同工艺间
的比较研究 o但某种程度上也提示应重视水溶性成
分在中药抗骨质疏松作用中的研究 ∀
≈致谢  含量测定工作得到上海医药工业研究院中药
室孔德云研究员的帮助 ∀
#wyw#
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∏¯ qousst
≈参考文献 
≈t  宋献文 o石印玉 o沈培芝 o等 q补肾中药对实验性骨质疏松的疗
效观察极其机制探讨 q中国中医骨伤科杂志 ot||y owkvl }x q
≈u  张 戈 o史万忠 o石印玉 o等 q补肾益精中药复方延缓雄性大鼠
骨衰老作用的评价及其机制的推测 q中医正骨 ot||| ottk|l }v q
≈v  何 明 o胡昌奇 q植物雌激素的研究进展 q中成药 ot||| outktl }
wu q
≈w  马克昌 o朱太咏 o刘鲜茹 o等 q骨碎补注射液对培养中鸡胚骨原
基钙化的促进作用 q中国中药杂志 ot||x ouskvl }tz{ q
≈x  李芳芳 o李 恩 q淫羊藿对成骨细胞增殖分化的影响 q全国代谢
性骨病学术研讨会论文集 ot||{ ott }|{ q
≈y  刘富春 o丁光霞 o李菊仙 o等 q淫羊藿苷对 v‹2胸腺嘧啶核苷参
入骨髓细胞的影响 q上海中医药杂志 ot|{z okul }wz q
≈z  熊跃华 o周楚华 q淫羊藿及菟丝子提取物对雄性生殖功能的影
响 q中国药学杂志 ot||w ou|kul }{| q
≈{  国家药品监督管理局 q关于已批准临床研究的新药品种公告
k第 t号l ot||| qsw qu| q
≈|  王拥军 o宋莉君 o孙爱贞 o等 q黄芪多糖的提取及对体外培养成
骨细胞成骨能力的影响 q中国中医骨伤科杂志 ot||| ozkyl }t q
≈责任编辑 李 禾 
大蒜油中二烯丙基二硫与
二烯丙基三硫的热稳定性实验研究
刘丽梅 o陈 琳 o王瑞海 o沈联慈
k中国中医研究院基础理论研究所 o北京 tsszssl
≈摘要  目的 }探讨大蒜油中二烯丙基三硫k简称为 ⁄„×≥l !二烯丙基二硫k简称为 ⁄„⁄≥l的热稳定性 ∀方
法 }采用气相色谱法 !高效液相色谱法测定大蒜油在 tss ε 加热不同时间后 ⁄„×≥ o⁄„⁄≥的相对含量变化以及单
一的 ⁄„×≥ o⁄„⁄≥在 tss ε 加热 s qx «后 o⁄„×≥相对含量变化 o比较其热稳定性 ∀结果 }大蒜油 tss ε 加热 s qx «
后 o⁄„×≥相对含量下降 t| qwx h o⁄„⁄≥相对含量升高 tu qzt h ~单一的 ⁄„×≥ o⁄„⁄≥k含量在 |s h以上l在 tss ε
加热 s qx «后 o⁄„×≥ 相对含量下降 y qu{ h o⁄„⁄≥ 相对含量下降 u qxy h ∀结论 }大蒜油中 ⁄„⁄≥ 热稳定性较
⁄„×≥为好 ∀
≈关键词  大蒜油 ~二烯丙基三硫 ~二烯丙基二硫 ~热稳定性
≈中图分类号  • u{w ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsz2swyx2su
大蒜油是从大蒜 Αλλιυ µ σατιϖυ µ q中提取的
挥发油 o具有降压 !降血糖 !降血脂 !扩张血管 !增加
纤维蛋白溶解性 !抗血小板凝集 !抗病菌 !抗病毒 !抗
肿瘤 !抗衰老 !调节机体免疫 !保护胃 !肝脏等作
用≈t ou  o⁄„×≥k合成品称大蒜素l和 ⁄„⁄≥是大蒜油
中的两个主要成分k⁄„×≥含量 vx h ∗ xs h o⁄„⁄≥
含量 vs h ∗ ws h l≈v  o⁄„×≥ 具有抗癌活性已有报
道≈t ou  o我们在实验中发现 ⁄„⁄≥ 同样具有抗癌活
性 ∀有关大蒜油在室温自然条件及冰箱内储存 u ¤
各主要成分相对含量的变化情况已有资料报道≈w  o
本实验重点探讨大蒜油中的 ⁄„×≥ o⁄„⁄≥及单一的
⁄„×≥ o⁄„⁄≥在高温下的热稳定性 ∀结果表明 o大
蒜油中的 ⁄„⁄≥热稳定性较 ⁄„×≥为好 ∀
≈收稿日期  usss2sv2ut
1 仪器与材料
1 q1 药物 天然大蒜油由河南省中牟县购进 o经气
相色谱测定 o⁄„⁄≥ 含量为 ux q{ h ~⁄„×≥ 含量为
yv qu h ∀单一的 ⁄„⁄≥ o⁄„×≥由天然大蒜油经减压
蒸馏制备而得 o经高效液相测定 o⁄„⁄≥ k批号
|zs{ut2tl含量为 |z qtu h o⁄„×≥k批号 |zszsw2ul
含量 |t qxw h ∀ ⁄„×≥ o⁄„⁄≥均为淡黄色油状液体 ∀
1 q2 仪器 克氏蒸馏烧瓶 o˜ 型水银压力计 o÷ ’2
t型旋片式真空泵 o岛津 Š≤2z„Š液相色谱仪 o岛津
≤«µ²°¤·²³¤¦≤2∞t…数字处理机 o• ¤·¨µ¶yss泵高压
液相色谱仪 ∀
2 方法与结果
2 q1 气相实验条件 }≥∞2xw石英毛细管色谱柱
ks qvu °° ¬§ ≅ vs °l o柱温 ws ∗ uts ε ow ε #
°¬±p t o气化室温度 uvs ε ~载气为氮气 o柱前压 w|
#xyw#
第 uy卷第 z期
usst年 z月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qz
∏¯ qousst