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[ Κεψ ωορδσ] ∆ενδροβιυ µ χηρψσοτοξυ µ ~·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨ ~³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ~„×°
≈责任编辑 王康正 
蜜环菌不同发育阶段多糖成分的研究
陈晓梅 o郭顺星 o王秋颖 o肖培根
k中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|wl
≈摘要  目的 }对蜜环菌不同发育阶段体内多糖的性质和含量进行研究 ∀方法 }提取 !分离 !纯化蜜环菌菌丝
体 !发酵液 !菌索和子实体多糖 o应用红外光谱分析法 !高效液相色谱法 !凝胶渗透色谱法和凝胶色谱法等方法测定
蜜环菌 w种多糖的性质 !多糖组成 !多糖含量和多糖分子量 ∀结果 }蜜环菌菌丝体和发酵液多糖为单一葡萄糖组成
的葡聚糖 ~菌索和子实体多糖由葡萄糖 !木糖组成 o这两种单糖在菌索多糖中的摩尔比为 tΒtw o在子实体多糖中的
摩尔比为 tΒts ∀蜜环菌多糖的分子量为 t万 ∗ z万 ∀蜜环菌不同发育阶段多糖含量分别为菌丝体含 | qss h ~发酵
液含 s q{zª#ktss °¯ l p t ~菌索含 t qtu h ~子实体含 u quz h ∀结论 }蜜环菌不同发育阶段多糖成分的研究 o为综合开
发利用蜜环菌提供了科学依据 ∀
≈关键词  蜜环菌 ~发育阶段 ~多糖
≈中图分类号  • u{u qy ~• u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsy2sv{t2sw
近年来 o药用真菌多糖的研究已引起人们的广
泛注意 ∀先后从香菇 Λεντινυσ εδοδεσ k…¨ µ®ql ° 2¨
ª¯ µ¨!冬虫夏草 Χορδψχεπσ σινενσισ k…¨ µ®¨ ¯¨ ¼l ≥¤¦¦q!
金顶侧耳 Πλευροτυσ χιτρινοπιλεατυσ ≥¬±ªq!槐耳
Τραµετεσ ροβινιοπηιλα  ∏µµq等药用真菌中分离出
多糖≈t ∗ w  o并对多糖的结构进行了研究 o药理实验证
明有些真菌多糖具有抗肿瘤活性≈x  ∀关于蜜环菌
Αρµιλλαρια µελλεα k∂¤«¯ q} ƒµql ± ∏¨¯q的化学成分
已有较多的研究 o仅从该菌中就分离得到 vs多个具
有原伊鲁烷骨架的倍半萜芳香酸酯≈y oz  ∀经药理学
研究证明 o原伊鲁烷倍半萜芳香酸酯类化合物均有
不同程度的抗菌作用≈{  ∀也有从蜜环菌子实体中分
离出多糖的报道≈|  ∀但这些化合物大部分分离自蜜
环菌培养的菌丝部分 o对于该菌不同发育阶段
≈收稿日期  usss2s|2sw
≈资助项目  国家自然科学基金资助项目kv|xzsstul
体内化学成分的变化未见资料报道 ∀本文主要研究
蜜环菌菌丝体 !发酵液 !菌索 !子实体中多糖的性质
和量的变化规律 o为该菌的发育学及应用研究提供
科学依据 ∀
1 实验材料与方法
1 q1 实验材料
菌丝体和发酵液 }蜜环菌 Α . µελλεα 液体发酵
培养 tv §o用尼龙网过滤分开菌丝体和发酵液 ∀菌
丝体用流水冲洗 o彻底去除培养基 oys ε 以下烘干 !
粉碎 !过 ws目筛 ~发酵液低温保存待用 ∀
菌索 }采自上述蜜环菌培养的菌索 oys ε 以下
烘干 !粉碎 !过 ws目筛 ∀
子实体 }采自上述蜜环菌培养的子实体 oys ε
以下烘干 !粉碎 !过 ws目筛 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 多糖的提取 !分离和纯化≈ts  精确称取蜜
环菌菌丝体粉 !菌索粉 !子实体粉各 ts ªo分别加入
#t{v#
第 uy卷第 y期
usst年 y月
中 国 中 药 杂 志
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∏±¨ ousst
tss °¯ 石油醚回流提取除去脂溶性成分 ∀残渣挥干
石油醚 o加 x倍量水热提 v次 o每次 u «∀合并提取
液浓缩至一定体积 o添加 |x h 乙醇使含醇量达
{s h ∀静置 uw «后过滤 ∀取絮状沉淀物 o用适量蒸
馏水加热溶解 o采用 ¶¨√¤ª法脱蛋白 v ∗ x次至无蛋
白层出现 ∀去蛋白后的水溶液加入 u h的活性炭脱
色 o并用透析袋除去无机离子等杂质 o再醇析 ∀沉淀
部分干燥即为蜜环菌多糖 ∀取发酵液 uss °¯ 浓缩
至一定体积后 o参照上述步骤提取多糖 ∀
1 q2 q2 多糖的红外光谱分析 取 t °ª左右经干燥
的蜜环菌多糖样品与 tss ∗ uss °ª干燥的 Ž…µ粉
末共研均匀 o用压片机压成薄片 o用 ° ®¨¬±2∞¯ ° µ¨
|{vŠ型红外光谱仪测定 ∀
1 q2 q3 多糖的组成及摩尔比测定 取少量多糖样
品 o用 w °²¯#pt的 ‹≤¯溶液水解 u «o用 ‘¤’ ‹ 溶
液调 ³‹ 至中性 o过滤 !定容后上机测定 ∀采用高效
液相色谱法k‹°≤l≈tt otu  o标准单糖 ∆2葡萄糖 !∆2
甘露糖 !∆2半乳糖 !Λ2阿拉伯糖 !∆2木糖 ∀色谱条件
为仪器 • ¤·¨µ¶uww型 ‹°≤ ~色谱柱 ≥∏ª¤µ³¤®ks qyx
¦° ≅ vs ¦°l ~流动相 ‹u ’ ~流速 s qz °¯ #°¬±p t ~检测
器 • Œw÷ ~柱温 |s ε ∀根据多糖样品水解后各单糖
的峰面积所求出的含量除以各自的分子量即为摩尔
比 ∀
1 q2 q4 多糖的分子量测定 采用凝胶渗透色谱法
kŠ°≤l≈tv  ∀色谱条件同上 o以葡聚糖为对照 ∀
1 q2 q5 多糖的含量测定 采用凝胶色谱法≈tt  o以
∆2葡萄糖 !∆2木糖为标样 ∀样品水解后用外标法定
量 ~色谱条件同多糖的组成分析项下 ∀
2 实验结果
2 q1 蜜环菌多糖的性质
蜜环菌菌丝体多糖 !发酵液多糖均为白粉末 ~菌
索多糖 !子实体多糖浅灰色 ∀取上述多糖少量分别
加热溶解 oƒ «¨¯¬±ª试验为阳性 ~加硫酸2苯酚试剂为
阳性反应 ∀多糖的红外光谱定性分析结果表明 o在
v yss ¦°p t处出现宽而强的吸收峰 ot sxs ¦°p t处也
出现一强吸收峰 o均显示碳水化合物的特征k图 tl ∀
2 q2 蜜环菌不同发育阶段体内多糖的组成及摩尔
比分析
实验结果表明 o菌丝体 !发酵滤液的多糖均由单
一葡萄糖组成 ~菌索和子实体多糖由葡萄糖和木糖
组成 ∀葡萄糖与木糖的摩尔比在菌索多糖中为 tΒ
tw o在子实体多糖中为 tΒtsk图 u o图 vl ∀
图 t 不同发育阶段蜜环菌多糖红外光谱图
t q菌丝体 u q发酵液 v q菌索 w q子实体
图 u 标准品 ‹°≤ 图
t q∆2葡萄糖 u q∆2木糖 v q∆2甘露糖
图 v 样品 ‹°≤ 图
„ q菌丝体多糖 …q发酵液多糖 ≤ q菌索多糖 ⁄q子实体多糖
t q∆2葡萄糖 u q∆2木糖
2 q3 蜜环菌不同发育阶段体内多糖的分子量测定
实验结果表明 o蜜环菌多糖的分子量约为 t万
∗ z万 ∀
2 q4 蜜环菌不同发育阶段体内多糖的含量测定
实验结果表明 o自蜜环菌菌丝体 !发酵液 !菌索 !
子实体经水提醇沉后得到的多糖干品 o含量分别为
tt qws h ot q{{x ª#ktss °¯ lp t ot qvs h ov qys h ∀水
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第 uy卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
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溶后 o用 ‹°≤ 测定 o未发现有还原糖存在 ∀但是经
水溶后发现有部分水不溶物 o‹°≤ 测水溶性多糖
在菌丝体 !发酵滤液 !菌索 !子实体多糖中的比例分
别为 {u qws h o{{ qys h o|u q{s h ozt qts h ∀经水解
测多糖的实际含量 }菌丝体k干粉l| qss h ~发酵液
t q{z ª#ktss °¯ lp t ~菌索k干粉lt qtu h ~子实体k干
粉lu quz h ∀
3 讨论
国外有资料报道≈|  o从蜜环菌子实体中分离出
两种多糖 o一种为含有 ∆2半乳糖 !∆2甘露糖和 Λ2岩
藻糖组成的水溶性多糖 ~另一种为多肽葡聚糖 ∀而
本实验从蜜环菌子实体中分离的多糖由葡萄糖和木
糖组成 ∀这说明多糖的分离方法 !原材料产地的不
同 o其多糖的性质也有较大差异 ∀另外 o同样是在实
验室培养的蜜环菌 o本实验从菌丝体和发酵液中分
离的多糖是由单一葡萄糖组成的葡聚糖 o而有资料
报道培养物中分离的多糖为甘露聚糖和由多种杂单
糖组成的多糖 ∀说明不同的培养方法 !不同的培养
基质 !甚至不同的菌珠 o所得多糖在组成上差异甚
大 ∀蜜环菌在自然界具有很强的适应环境能力 o尤
其是生长发育过程中菌丝体 !菌膜 !菌索 !子实体不
同发育阶段体内次生代谢产物质和量的变化仍待系
统和深入的研究 ∀值得注意的是 o真菌复杂的代谢
调控机制 o为我们提供了药用真菌发酵工艺 !遗传育
种 !次生产物分析等方面研究的广阔领域 ∀
≈参考文献 
≈t  雷敬敷 o张 玲 o李兴义 q香菇发酵工艺及香菇多糖的提取 q
中国食用菌 ot||v otukvl }vt q
≈u  李晓明 o戴如琴 o朱 勤 q冬虫夏草发酵滤液多糖的组分分析 q
中国中药杂志 ot|{| otwkul }vt q
≈v  张丽萍 o李 森 o黄丽萍 q金顶侧耳酸提水溶性多糖的研究
) ) ) °≤2v的分离 !纯化与结构确定 q真菌学报 ot||v otukul }
tx{ q
≈w  郭跃伟 o程培元 o陈玉俊 o等 q槐耳菌丝体多糖的研究kŒŒl槐耳
多糖的组成及摩尔比测定 q中国药科大学学报 ot||u ouvkvl }
txx q
≈x  张丽萍 o苗春艳 o许丽艳 o等 q金顶侧耳多糖 °≤2w的结构确定
与抗肿瘤活性的研究 q真菌学报 ot||x otwktl }y| q
≈y  ≥ ≠¤±ªo ≠ ≥∏o ≠  • ¤±ªo ·¨¤¯ qŒ¶²¯¤·¬²± ¤±§≥·µ∏¦·∏µ¨¶²©
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„µ°¬¯¯¤µ¬®¬± q °¯ ¤±· §¨¬¦¤qt|{| oxx }wz| q
≈z  杨峻山 q原伊鲁烷倍半萜醇芳香酸酯的碳谱研究 q波谱学杂
志 ot||u o|kwl }v{t q
≈{  徐锦堂 q中国药用真菌学 q北京 }北京医科大学 !中国协和医
科大学联合出版社 ot||z qxzz q
≈|  杨云鹏 q中国药用真菌 q哈尔滨 }黑龙江科学技术出版社 o
t|{t qt| q
≈ts  郭顺星 o徐锦堂 o王春兰 o等 q不同年龄的野生与家种猪苓菌
核糖类等成分的含量测定 q中国中药杂志 ot||u otzkul }zz q
≈tt  于建国 q现代实用仪器分析方法 q北京 }中国林业出版社 o
t||w q{v q
≈tu  贺良华 o徐 远 o钱伏刚 o等 q高效液相色谱法快速分离测定
单糖混合物 q中成药研究 ot|{x okttl }vu
≈tv  张惟杰 q复合多糖生化研究技术 q上海 }上海科学技术出版
社 ot|{z qtst q
Στυδιεσ ον Πολψσαχχηαριδεσιν ∆ιφφερεντ ∆εϖελοπ µεντ Σταγεσ οφ
Αρµιλλαρια µελλεα (ς αηλ. : Φρ .) Θυελ.
≤ ‹∞‘ ÷¬¤²2° ¬¨o Š˜’ ≥«∏±2¬¬±ªo • „‘Š ±¬∏2¼¬±ªo ÷Œ„’ ° ¬¨2ª¨ ±
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ ·«¨ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨¶¬± §¬©©¨ µ¨±·§¨ √¨¯²³° ±¨·¶·¤ª¨¶²© Αρµιλλαρια µελ2
λεα qΜετηοδ : °²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨¶¬± µ«¬½²°²µ³«o©µ∏¬·2¥²§¼ o °¼¦¨ ¬¯¤¤±§¬·¶©¨µ° ±¨·¬±ª ¬¯´∏²µ²© Α . µελλεα º µ¨¨
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中 国 中 药 杂 志
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≈责任编辑 王康正 
金钗石斛根系的形态及解剖学研究
张 明t o银福军t o陈仕江t o别之龙u o任凌燕t
kt q重庆市中药研究院 o重庆 wsssyx ~u q西南农业大学 o重庆 wssztyl
≈摘要  目的 }了解金钗石斛根系形态及解剖学特征 o为驯化栽培提供科学依据 ∀方法 }对根的形态发育及内
部结构的状况进行研究 ∀结果与结论 }石斛根有罕见的特殊结构 o决定了需要通水透气性能高的环境条件 ∀
≈关键词  石斛根 ~形态 ~解剖学 ~栽培
≈中图分类号  • u{u qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsy2sv{w2su
金钗石斛 ∆ενδροβιυ µ νοβιλε ¬±§¯ q系兰科多年
生草本植物 o5本草纲目6认为能/强阴益精 o厚肠胃 o
壮筋骨 o暖水脏 o补肾益力 o轻身延年0等 ∀是药用范
围较广的名贵中药 o现代药理研究证明具有增强免
疫 !抗肿瘤 !抗衰老 !抗辐射 !增强体力 !扩张血管 !保
肝护肝 !治疗白内障等作用≈t ou  o需用量日增 ∀但因
过度的开发利用 o生境的破坏及自身生长缓慢等原
因 o石斛已濒于绝灭≈v ow  ∀石斛通常附生于潮湿的
树杆或岩石上 o栽培在普通的泥土中是不能成活的 o
因此其资源的恢复十分困难 ∀本工作旨在从根系的
形态解剖学角度研究其特征 o为石斛的科学栽培提
供理论依据 ∀
1 材料和方法
1 q1 材料
取自栽培在重庆市中药研究院植物园锯木屑 !
碎砖石 !木质中药渣及河砂中的金钗石斛 ∀种源来
自于合江县 ∀
1 q2 方法
对石斛根各生长阶段的外观进行比较 ~徒手做
根尖部 !稍前部 !中部及坏死根的横切片 o用番红 !亮
绿二重染色 o’ ¼¯°³∏¶2…‹u显微摄影观察 o每个样品
重复操作 u ∗ v次 ∀
2 观察结果
≈收稿日期  usst2su2s{
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv|zzs|svl
2 q1 根系的形态学比较
石斛根系属须根系 ∀金钗石斛的根直径粗者可
达到 u °° o细者约 s qy °° ∀t年生的根长者可达
ws ¦°以上 ∀长于锯木屑中的根系较舒展 o长度较
长 ~生长于碎砖及树杆上的根能紧密附生于载体上 o
长度相对较短 ~木质中药渣中生的根分为两种情况 o
药渣未腐烂的生长较好 o已腐烂的 o根处于腐殖质及
含水量很高的环境中 o为病态或为腐烂状 ~生长于河
沙表层的根稍好 o栽培时埋于河沙深处的根易腐烂 ∀
生长正常的根为白色 o裸露在空气中时间较长的根
可为浅绿色至绿色 ∀生长不正常的根为浅黄色或棕
黄色 o其含水量较高 ∀根系健康的石斛其茎叶生长
较好 o反之茎叶萎黄 !长势差或叶片脱落 ∀石斛生长
良好与否 o与其根的长短及多少紧密相关 ∀
2 q2 石斛根的内部解剖结构及其变化过程
2 q2 q1 正常根 根尖解剖结构可见 o初生结构由表
皮 !皮层薄壁组织 !内皮层 !中柱鞘 !初生木质部 !初
生韧皮部及类似于髓部样的组织构成 ∀除根尖分生
区有短小根毛外 o全根几乎无根毛存在k图 t o„l ∀
在初生根的生长过程中 o内皮层外层薄壁细胞
迅速增厚 o初生木质部和初生韧皮部形成 o并有根毛
增长的情况k图 t o…l ∀接着 o可见皮层薄壁组织的
细胞向根外方向延伸增长 o并逐步成为长梭状细胞 o
内皮层内的木质部 !韧皮部及髓部细胞进一步发育
k图 t o≤l ∀大约在根形成 t个月左右 o石斛正常根
的表皮细胞开始分解 o皮层薄壁细胞可见充满状纤
#w{v#
第 uy卷第 y期
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