全 文 ：高效液相色谱2电化学法测定
双黄连粉针中黄芩甙和黄芩素的含量
何心 石春伟 冯毅
k黑龙江省医院 哈尔滨 txssvyl
郡修德 井关键 宫崎胜已
k日本北海道大学附属病院 札幌 sysl
摘要 采用高效液相色谱法 o以电化学检测测定双黄连粉针中黄芩甙和黄芩素的含量 ∀流动相
s1t°²¯r磷酸二氢钾2乙酸2四氢呋喃ktsssΒtssΒt|sl o色谱柱 ∞ ≤2⁄≥2ttytky°° ≅ tss°°l o检测电
压 n yxs°∂ o柱温 xx ε o流速 s1{ °¯ r°¬±∀结果 }本法的最小检测限为 ux±ª和 xs±ªo平均回收率为
tss1t h和 ||1z h o重现性好 ∀本法测定快速 !简便 !准确 o适用于含黄芩甙和黄芩素的中药材和制剂的
含量测定 ∀
关键词 高效液相色谱2电化学法 黄芩甙 黄芩素 双黄连粉针
黄芩甙k¥¤¬¦¤¯¬±¨ l和黄芩素k¥¤¬¦¤¯ ¬¨±l均为
黄芩中的主要成分 o结构相似 o常同时存于同一
药材或同一中药制剂中 o在进行含量测定时常
难以分离 ∀我们采用高效液相色谱2电化学法
可同时测定这 u个化合物的含量 ∀双黄连粉针
为国家级新药 o其中主要原料是黄芩 o我们以该
药为例 o不经分离直接测定其中黄芩甙和黄芩
素 ∀
1 实验材料
111 实验仪器 高效液相色谱仪 o日立2yxx ~
检测器 ∞≤⁄2tss型 o日本 ∞¬¦²°株式会式 ∀
药品与化学试剂 双黄连粉针 o哈尔滨中
药二厂生产 o批号 |xsvws ~黄芩甙和黄芩素对
照品 o日本和光纯药工业株式会社 o含量
tss h ~化学试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
211 标准储备液制备 精密称取黄芩甙和黄
芩素对照品各 ts°ªo分别置 tss °¯ 容量瓶 o分
别用 xs h甲醇和甲醇溶液溶解至刻度 o即配成
tssΛªr°¯ 的标准储备溶液 ∀
212 色谱条件 色谱柱 ∞ ≤2⁄≥2ttytky°°
≅ tss°°l o柱温 xx ε ~检出器为电化学检测
器 o电压 n yxs°∂ ~流动相 s1t°²¯r磷酸二氢
钾2乙酸2四氢呋喃 ktsss Β tss Β t|sl ~流速
s1{ °¯ r°¬±~内标物为 u ov2二羟基萘 ∀
213 标准曲线制备 取黄芩甙的标准储备液 o
用甲醇稀释配成浓度为 uss±ªr°¯ 溶液 o然后分
别取 s1x ot ou °¯ o减压下挥去溶媒 o加含有内标
物的流动相溶液溶解至 w °¯ o充分溶解后取
xsΛ¯ 进样 ∀另取黄芩素的标准储备液 o用甲醇
稀释配成浓度为 wss±ªr°¯ 溶液 o然后分别取
s1ux os1x os1zx ot °¯ o减压下挥去溶媒 o加含有
内标物的流动相溶液溶解至 t °¯ o充分溶解后
取 xsΛ¯ 进样 ∀保留时间黄芩甙为 y1u°¬±o黄芩
素为 uu°¬±o内标物 u ov2二羟基萘为 tz°¬±∀
经线性回归得标准曲线回归方程为 Ηρ≈甙 p
s1wvw n t|w1yt Χ, ρ s1||{s ; Ηρ[素] p
t1|ux n s1swvu Χ∀最小检测限量黄芩甙为
ux±ªo黄芩素为 xs±ªr°¯ ∀
214 样品测定 称取双黄连粉针 ts°ª于
#wsy# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 ts期
tss °¯ 容量瓶中 o用流动相溶液溶解至刻度 o即
成 tssΛªr°¯ 样品溶液 ∀将该溶液用含有内标
物的流动相溶液 wss倍及 x倍稀释 o取 xsΛ¯ 稀
释液注入高效液相色谱仪测定 o并分别由标准
曲线回归方程求得样品的浓度 ∀结果见表 t ∀
表 t 样品含量测定 Λªr°ª
测得值 ξ ? σ
黄芩甙 t|y1s
uty1y
txv1x tzx1w ? vs
txx1|
txw1{
黄芩素 y1w
x1z
y1w y1t ? s1vw
y1t
y1v
215 回收率测定 按药物制剂中黄芩甙和黄
芩素的比例精密称取黄芩甙 tz1x°ª!黄芩素
s1y°ª!双黄连粉针 ts°ª于 tss °¯ 容量瓶中 o
稀释后按样品测定项下测定 ∀结果见表 u ∀
表 u 回收率测定
加入量°ª
测得量
°ª
回收率
h
ξ ? σ
h
黄芩甙 tz1x tz1wx ||1|
t{1v t{1vs tss1s tss1t ? s1w
tz1s tz1s{ tss1x
黄芩素 s1y s1x| |{1v
s1y s1x{ |y1z ||1z ? v q{
s1x s1xu t|w1s
216 精密度测定 精密配制黄芩甙溶液
s1sux os1sxΛªr°¯ 和黄芩素溶液 s1t os1uΛªr
°¯ w组浓度溶液数份 ∀同上操作测定 ∀一日
内重复 x次测定 o得日内精密度 ~数日内重复 x
次测定 o得日间精密度 ∀结果见表 v ∀
表 v 精密度测定 Λªr°¯
加入量 ξ日内 ? σ ξ日间 ? σ
黄芩甙 ux uw1{ ? t1u uw1| ? t1t
xs xt1{ ? s1{ w|1{ ? s1|
黄芩素 s1t s1tsu ? s1s{ s1s|{ ? s1ss|
s1u s1t|| ? s1s{ s1t|{ ? s1stv
注 }ν x
3 结果与讨论
311 黄芩甙具有利尿 !解毒等药理作用 ∀而黄
芩素的利尿作用要比黄芩甙强 o并且有抗过敏
作用≈t ∀两化合物同时存在于黄芩的根中 ∀
由于黄芩的品种不同 o制剂的加工工艺不同 o常
可导致两化合物的含量也不同 ∀所以同时并分
别考察药品中两化合物的含量是十分必要的 ∀
312 黄芩甙和黄芩素结构只差一个葡萄糖酸 o
用一般的分析方法 o如紫外分光光度法等很难
测定≈u ∀本文采用高效液相色谱2电化学法 o可
不经分离直接测定两化合物的含量 ∀该方法稳
定 !快速准确 !简便可行 o适用于中药材及中成
药中黄芩甙和黄芩素的含量测定 ∀
313 黄芩素在含量测定时 o由于有吸着现象 o
所以在低浓度时线性不是很好 oρ s1|zxx ∀
当浓度大于 xs±ªr°¯ 时线性很好 oρ s1|||| ∀
4 参考文献
t 柯铭清 q中草药有效成分理化与药理特性 1 长沙 }湖南省
科技出版社 ot|{u }tvs
u 栾士香等 1 中国中药杂志 ot||t ~tyktsl }ysu
t||y ) ts ) sv收稿
5李时珍学术研究6征订启事
由全国李时珍学术研究会秘书长 !湖北蕲春李时珍中医药研究所所长王剑副主任中药师主编的5李时珍学术研究6一书 o最近
已由中医古籍出版社出版发行 o该书 tss万字 o全面反应了李时珍及5本草纲目6各个方面的学术研究成果 o该书的出版对加深李
时珍学术研究 o弘扬李时珍学术思想 o促进中医药学事业的发展具有深远的意义 ∀
该书定价 yu qss元k含邮资l o汇款联系人 }湖北省蕲春县李时珍中医药研究所陈向红收 邮编 }wvyvss
#xsy# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 ts期