全 文 ：#研究简报#
中成药及中药材中黄曲霉毒素 …t含量的调查实验研究
汤 扬
k贵州省药品检验所 o贵州 贵阳 xxssstl
中药大多为天然植物药 o在采收贮藏过程中极
易发霉 o污染黄曲霉毒素 ∀黄曲霉毒素是强致癌物
质 ∀因此对中药污染黄曲霉毒素含量进行调查研
究 o为制定其限度标准提供依据 o是一个急待解决的
问题 ∀本调查实验研究采用酶联免疫吸附分析法
k∞Œ≥„l≈t  o对中成药及中药材进行抽样检测 o检测
了不同剂型 ww个品种 ttw批中成药 o以及 uw个品
种 xt批中药材中黄曲霉毒素 …tk„ƒ…tl的含量 ∀
1 仪器和材料
⁄Švsuu型酶联免疫检测仪 k华东电子仪器
厂l ∀
„ƒ…t 标准品 !„ƒ…t2抗原结合物 !„ƒ…t 抗体
k ´抗l !酶标羊抗兔辣根过氧化物酶k µ抗l !聚苯乙
烯酶标板 o均为中国预防医学科学院营养与食品卫
生研究所提供 ∀
³‹ |1y碳酸盐缓冲液 !°…≥×k³‹ z qw磷酸盐缓
冲液吐温2usl !底物溶剂 !底物溶液临用时配制 o终
止液为 u °²¯#p t硫酸 o邻苯二胺为化学纯 o甲醇为
分析纯 ∀
样品 }贵阳地区药厂 !医院 !药品销售公司采样 ∀
2 方法原理
将固相 „ƒ…t 复合抗原预先包被在酶标板上 o
当加入样品提取液和 „ƒ…t2抗体 o酶标板上的固相
抗原与样品提取液中的 „ƒ…t 竞争性地与 „ƒ…t2抗
体结合 o洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的羊抗兔
抗体k µ抗l o经充分反应后洗涤 o加入显色液 o所显
的颜色深浅与样品液中 „ƒ…t 含量成反比 ow|s ±°
测定显色吸收度 o参照标准曲线计算样品中的 „ƒ…t
含量 ∀
3 样品提取液制备
将样品研细或粉碎k片剂 !水丸研碎 o胶囊剂去
胶囊 o中药材打粉l o取tsª置有塞锥形瓶 o加入
≈收稿日期  t|||2sw2uz
zs h甲醇 °…≥× xs °¯ o振摇约 v °¬±o静置 o取上清
液过滤 o置 w ε 过夜 ∀取出 o置室温 o取上清液 tss
Λ¯ 加入盛有 |ss Λ¯ z h甲醇 °…≥× 中混匀待检 ∀
4 样品测定及标准曲线制备
4 q1 抗原包装 用 ³‹ |1y碳酸盐缓冲液将 „ƒ…t2
抗原结合物作 tΒtss稀释 oxs Λ¯r孔包被于酶标板 o
w ε 放置 uw ∗ w{ «o取出置室温后洗涤甩干 ∀
4 q2 测定 每次测定设空白对照及阴性对照 o取上
述抗原包被板标准曲线孔内加入不同浓度ks1w ∗
t1x ±ª# °¯ p tl „ƒ…t 标准液 o各 ux Λ¯r孔 o样品孔内
加入样品提取液 o每份样品平行 u孔 oux Λ¯r孔 o以
上各孔内随即加入 „ƒ…t2抗体 ux Λ¯r孔 o经 vz ε 避
光孵育 t1x «后洗涤 v次 o加入酶标 µ抗 xs Λ¯r孔 o
置 vz ε 孵育 t «o洗涤 v次 o加入显色液 xs Λ¯r孔 o
置 vz ε 避光放置约 ts °¬±o取出 o加终止液 xs Λ¯r
孔 o立即用酶联兔疫检测仪测定吸光值k Αlkw|s
±°l ∀
4 q3 制作标准曲线及计算 以 „ƒ…t 标准浓度作
为横坐标 o对应的 „ h k阴性对照 „ 值为 tss h l为
纵坐标 o制作标准曲线 ∀查出样品 „ h 值对应的
„ƒ…t浓度 o按下式计算 }
样品中 „ƒ…t含量k±ª#ªp tl € ≈对应标准曲线 „ƒ…t 浓
度k±ª# °¯ p tl ≅ 提取液体积k °¯ l ≅ 样品稀释倍数 r样品量
kªl ∀
中成药中 „ƒ…t含量测定结果见表 t ∀
表 t ww个品种 ttw批中成药中 „ƒ…t含量 ±ª#ªp t
剂型 品种
检测
批数
„ƒ…t检出
批数
„ƒ…t含量r
±ª#ªp t
冲剂 v z x tv ∗ t|1x
片剂 tt tz tz w{1tz ∗ tuy1sw
丸剂 ts uv uv t| ∗ txv1t|
胶囊剂 ty vw uw { ∗ ty|1vw
含发酵类
中药原料
w vv vv vx ∗ tvw
合计 ww ttw tsu { ∗ ty|1vw
#zvw#
第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qz∏¯¼ ousss
结果检出率为 {|1wz h ∀ 中药材中 „ƒ…t含量测定结果见表 u ∀
表 u uw个品种 xt批中药材 „ƒ…t含量
药名 来源
含量r
±ª#ªp t
药名 来源
含量r
±ª#ªp t
药名 来源
含量r
±ª#ªp t
枳壳 药厂 tuw1us 木香 药厂 zu1{v 陈皮 药厂 tt{1xs
枳壳 医院 {z1ux 木香 医院 ts|1tu 陈皮 医院 |s1v{
银花 药厂 s 神曲 药厂 z{1xw 甘草 药厂 ttu1z|
银花 药厂 ts1sx 神曲 药厂 ttu1z| 甘草 药厂 z|1u|
银花 医院 xs1ss 神曲 医院 yu1ux 甘草 医院 tw|1zx
山药 药厂 zu1{w 生地黄 药厂 zz1vw 当归 药厂 yz1tv
山药 药厂 ww1vs 生地黄 药厂 uv1uv 当归 药厂 zt1xu
山药 医院 ux1ss 生地黄 医院 xs1ss 当归 医院 tut1yu
大黄 药厂 z{1xw 熟地黄 药厂 {x1wy 枳实 药厂 tsz1s{
大黄 医院 t{z1ux 熟地黄 药厂 ww1{{ 枳实 药厂 tsz1s{
杜仲 药厂 yt1wu 黄连 药厂 tx1zt 天麻 药厂 s
杜仲 药厂 xx1zt 黄连 药厂 uz1tz 天麻 药厂 s
杜仲 医院 xu1{{ 黄连 医院 y{1xs 天麻 药厂 s
杜仲 药厂 xs1ss 麦冬 药厂 xs1ss 白豆蔻 医院 txx1{
淡豆豉 药厂 tuw1u 麦冬 药厂 {|1|y 半枝莲 医院 tuy1sw
板蓝根 医院 wz1x{ 麦冬 医院 vw1tu 批杷叶 医院 tx1tu
苡米 医院 |1zs 石榴皮 医院 s 黄芩 药厂 不稳定
结果检出率为 |s1xz h o„ƒ…t 含量为 |1z ∗
t{z1ux ±ª#ªp t ∀
5 „ƒ…t回收实验
为考察测定方法在 „ƒ…t 提取检测过程中 o药
物的剂型 !提取液的 ³‹ 值 !颜色等因素是否影响和
干扰测定的吸收度和结果准确性 o进行回收实验 }选
择已知 „ƒ…t含量k较小l和不含 „ƒ…t的中成药 o分
别研细称取 ts ªo加入 „ƒ…t标准液 o以下操作与样
品提取 !测定步骤相同 o并同时测定空白样品 ∀结果
„ƒ…t平均回收率为 zw h ∀
6 讨论
用酶免疫吸附分析法测定中成药及中药污染
„ƒ…t含量 ∀结果表明 }中药污染 „ƒ…t 情况严重 ∀
中成药中冲剂 „ƒ…t 含量较低 o为 tv ∗ t|1x ±ª#
ªp t ~其他剂型 „ƒ…t 含量为 { ∗ ty|1vw ±ª#ªp t o其
中含淡豆鼓 !神曲k发酵类中药原料l的中成药 „ƒ…t
均在 vx ±ª#ªp t以上 ∀中药材污染 „ƒ…t 含量为
ts1sx ∗ t{z1ux ±ª#ªp t ∀中成药及中药材中 „ƒ…t
的检出率均较高k说明 ∞Œ≥„方法的灵敏度高l ~在
中成药中加入 „ƒ…t 标准品 o回收实验平均回收率
为 zw h k∞Œ≥„方法回收率一般在 {s h左右l ∀
测定中发现某些中成药及中药材提取液在用
z h甲醇 °…≥× 稀释时以及与 „ƒ…t2抗体混合后产
生混浊现象 o这类样品在改用 zs h甲醇 °…≥× 稀释
后再行测定 o其结果不稳定或 „ƒ…t结果为阴性k回
收实验结果也为阴性l ∀在检测中存在的问题有待
于深入研究解决 o或可改用其他方法进行测定 ∀从
本次抽样调查实验结果看 o中药污染 „ƒ…情况较严
重 o必须制定中药 „ƒ…t限度标准 o才能保证中药及
其制剂的质量 o保证中药在防病治病中安全 !有效 ∀
≈参考文献 
≈t  杜平华 o王森民 o杨小峰 o等 q间接竞争酶联免疫吸附法分析检
测中药中黄曲霉毒素 …t 的研究 q中国药事 ot||v ozk增刊l }
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≈责任编缉 李 禾 
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第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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