全 文 ：骨碎补不同炮制品中总黄酮及柚皮苷含量测定
杨中林t o韦英杰t o何执静u o唐登峰t
kt q中国药科大学 o江苏 南京 utsss| ~
u q南京大学医学生物技术国家重点实验室 o江苏 南京 utssssl
≈摘要 目的 }考察炮制对骨碎补有效成分总黄酮及柚皮苷含量的影响 ∀方法 }用分光光度法测定骨碎补不
同炮制品中总黄酮的含量 o°≤ 法测定柚皮苷含量 ∀结果与结论 }骨碎补经去毛净制后 o可提高总黄酮及柚皮苷
含量 ~经砂烫 !酒制 !盐制后 o并不影响总黄酮及柚皮苷含量 o却有利于有效成分的溶出 ∀
≈关键词 骨碎补 ~炮制 ~总黄酮 ~柚皮苷
≈中图分类号 u{v qw ~ u{w ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlts2sy{u2sv
骨碎补是较常用中药 o具有补肾强骨 o续伤止
痛之功效 ∀用于肾虚腰痛 o耳鸣耳聋 o牙齿松动 o跌
扑闪挫 o筋骨折伤等症≈t ∀骨碎补活性成分为柚皮
苷等二氢黄酮类化合物≈u ov o而烫制骨碎补能明显
提高二氢黄酮苷溶出率≈w ∀另外酒骨碎补长于疗伤
接骨 o盐骨碎补长于补肾健骨≈x ∀为考察不同炮制
方法对骨碎补有效成分的影响 o我们用分光光度法
测定骨碎补不同炮制品k生品骨碎补 !砂烫骨碎补 !
酒骨碎补 !盐骨碎补l中总黄酮的含量 o用 °≤ 法
测定柚皮苷的含量 o以期寻找不同炮制品有效成分
含量变化和药效差异的关系 o为不同的临床应用选
择不同的骨碎补炮制品提供依据 ∀
1 实验材料
1 q1 药品
骨碎补购自杭州 o经本文作者鉴定为水龙骨科
植物槲蕨 ∆ρψναρια φορτυνει k∏±½¨ l q≥° q的干燥
根茎 ~柚皮苷对照品k本实验室自制 o用薄层层析 o红
外 ot 2 鉴定 ~经 °≤ 归一化法计算 o其纯度
达 || qs h l ∀
1 q2 炮制品
生品 !砂烫骨碎补按5中国药典6一部方法制
备≈t ~酒骨碎补与盐骨碎补按文献≈x oy 方法制备 o
在酒炙和盐炙之前药材均已砂烫 ∀
1 q3 仪器
zxus型分光光度计 otsxs型液相色谱仪k惠普
公司l ~2usw型电子天平k常熟市衡器厂l ∀
≈收稿日期 usss2tt2tx
2 实验方法与结果
2 q1 总黄酮含量测定方法与结果
2 q1 q1 标准曲线制备
精密称取柚皮苷对照品 w q| °ªo置 xs °¯ 容量
瓶中 o甲醇定容至刻度 o作为对照品溶液 o再分别吸
取对照品溶液 s qx ot qs ot qx ou qs ou qx ov qs °¯ 于 ts
°¯ 容量瓶中 o用甲醇定容至刻度 o以甲醇为空白 o在
u{v ±°处测吸收度 o以吸收度k Αl为纵坐标 o浓度
k Χl为横坐标 o经回归得标准曲线方程为 Α
s .su|u Χp s .sxzz , ρ s q|||{ o线性范围为 w q| ∗
u| qw Λª# °¯ p t ∀
2 q1 q2 样品溶液制备方法
周铜水等≈z 和李孟广等≈w 分别测定了骨碎补中
总黄酮的含量 o但两者样品溶液制备方法存在两大
差异 }是否先用乙醚脱脂及提取时间长短不同 ∀因
此我们对样品溶液制备方法进行了进一步考查 ∀
2 q1 q2 q1 骨碎补不同提取时间总黄酮含量
精密称取 y份骨碎补生品干燥粉末k经 {s ε 干
燥 w «o过 ws目筛lt ªo置索氏提取器中 o分别用 xs
°¯ 甲醇提取 u ow oy o{ ots otu «o将提取液转移至 tss
°¯ 容量瓶中 o甲醇定容至刻度 o精密吸取 t °¯ 于 ux
°¯ 容量瓶中 o甲醇定容至刻度 o于 u{v ±°处测定吸
收度 ∀按回归方程计算总黄酮含量 o并以 tu «时总
黄酮含量为 tss h o计算不同提取时间总黄酮溶出
百分率 ∀结果表明骨碎补经甲醇提取 ts otu «时 o
总黄酮已近完全溶出 ∀详见表 t ∀
#u{y#
第 uy卷第 ts期
usst年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qts
¦·qousst
表 t 骨碎补不同提取时间总黄酮含量及溶出率
取样量
rª
提取时间
r«
含量
r h
溶出率
r h
s q|txw u v quy zu qw
s q{|w| w v qwt zx q{
s q{{|{ y v q|v {z qv
s q|ss{ { w qtu |t qy
s q{|wx ts w qv{ |z qv
s q{|yz tu w qxs tss qs
2 q1 q2 q2 骨碎补乙醚脱脂后总黄酮含量
精密称取 w份骨碎补各炮制品干燥粉末k经 {s
ε 干燥 w «o过 ws目筛lt ªo置索氏提取器中 o分别
用 xs °¯ 乙醚提取 t «o将乙醚液提取转移至 xs °¯
容量瓶中 o乙醚定容至刻度 o精密吸取 t °¯ 于 ux °¯
容量瓶中 o乙醚定容至刻度 o以乙醚作空白 o于
u{v±°处测定吸收度 o按回归方程计算乙醚提取液
中总黄酮含量 ∀经乙醚提取后的样品放在通风橱中
自然晾干 o再按 2 q1 q2 q1 项下的方法分别提取 y o{ o
ts otu «o同法测定吸收度 ∀按回归方程计算甲醇提
取液中总黄酮含量 o并以 tu «时总黄酮含量为
tss h o计算不同提取时间总黄酮溶出百分率k溶出
率l ∀结果表明乙醚提取液中含有一定量的黄酮 o乙
醚处理会使甲醇提取液中总黄酮含量降低 ~同时可
见 o骨碎补经甲醇提取 ts otu «时 o总黄酮已近完全
溶出 o说明样品溶液的制备不需乙醚脱脂 ∀根据文
献≈z o提取时间定为 tu «∀详见表 u ov ∀
表 u 骨碎补各炮制品乙醚提取液中总黄酮含量
取样量
rª
提取时间
r«
含量
h
s q{|sx y t qs
s q{|xs { t qs
s q{|tt ts t qs
s q{|y{ tu t qs
表 v 骨碎补各炮制品甲醇提取液中总黄酮含量及溶出率
取样量
rª
提取时间
r«
含量
r h
溶出率
r h
s q{|sx y v qw| |v q{
s q{|xs { v qyt |z qs
s q{|tt ts v qzs || qx
s q{|y{ tu v qzu tss qs
2 q1 q2 q3 样品溶液制备及测定 精密称取骨碎补
各炮制品干燥粉末k经 {s ε 干燥 w «o过 ws目筛lt
ªo分别按 2 q1 q2 q1 项下的方法提取 tu «o同法测定
吸收度 o按回归方程计算总黄酮含量 o结果见表 w ∀
表 w 骨碎补不同炮制品中总黄酮的含量测定结果
样品
取样量
rª
含量
r h
平均值
r h
生骨碎补 去毛 s q|yys x qsy x qs s q|{vv w q|t
未去毛 s q|y{t w qtx w qt s q|z|u v q|{
砂烫骨碎补 s q|{x{ x qs{ x qs s q|{z| w q|z
酒骨碎补 s q|x{v x qt{ x qt s q|xzt x qtt
盐骨碎补 s q||xx w q|v w q| s q|{vy w q|u
2 q1 q3 回收率测定
精密称取柚皮苷对照品 v q| °ªo置 ts °¯ 容量
瓶中 o甲醇定容至刻度kv|s Λª# °¯ p tl o作为对照品
溶液 ∀精密称取 x份已知含量kwst qzx Λª# °¯ p tl骨
碎补生品粉末 s qx ªo分别加入对照品溶液 s qx °¯
kt|x Λªl ∀按照样品测定方法操作 o计算回收率 o结
果见表 x ∀
表 x 骨碎补样品中柚皮苷的回收率测定结果
加入量
r˪
测得量
r˪
回收率
r h
平均回收率
r h
ΡΣ∆
r h
t|x t|v q{z || qwu
t|x t|y qyu tss q{u
t|x t{{ q{z |y q{y |{ q| t qx
t|x t|t qvz |{ qtv
t|x t|v qtu || qsw
2 q2 骨碎补不同炮制品总黄酮溶出率的比较
因为 ws目粉的不同炮制品的总黄酮含量测定
结果极为相近 o故以此结果为理论溶出量值 o即为
tss h ∀把不同炮制品粗颗粒kv °° ≅ x °°l按照
样品测定方法项下制备不同提取时间k y otu «l的待
测样液并测定之 o将测定结果分别除以各样品的理
论值 o得各样品在不同提取时间ky otu «l下的总黄
酮溶出率 o从而比较骨碎补不同炮制品总黄酮溶出
率 ∀结果分别见表 y oz ∀
#v{y#
第 uy卷第 ts期
usst年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qts
¦·qousst
表 y 骨碎补不同炮制品总黄酮溶出率ky «l
样品 取样量rª
含量
r h
平均值
r h
溶出率
r h
生骨碎补 s q|zu| v qxt v qxy zt qx s q|yyv v qyt
砂烫骨碎补 t qstwx w quz w qvt {x q| t qsswx w qvx
酒骨碎补 s q|zyu w qyx w qy{ |t qt s q|{xy w qzu
盐骨碎补 s q|{vu w qxx w qyu |v qv s q|{ut w qy{
表 z 骨碎补不同炮制品总黄酮溶出率ktu «l
样品 取样量rª
含量
r h
平均值
r h
溶出率
r h
生骨碎补 s q|y|t w quu w qvs {y qv s q|uyv w qv|
砂烫骨碎补 t qstsv w qyy w qzx |w qy s q|{zz w q{w
酒骨碎补 s q|zxs x qsx x qtt || qw s q|yyt x qtz
盐骨碎补 s q|{u| w q|{ w q|u || qw t qst{y w q{y
2 q3 柚皮苷含量测定
2 q3 q1 标准曲线的制备及回收率实验结果 精密
称取对照品柚皮苷 tu .u °ªo以甲醇定容于 ux °¯ 容
量瓶中 o精密吸取 t °¯ o置于 ts °¯ 容量瓶中 o以甲
醇定容至刻度 o此为对照品溶液 ∀分别精密量取对
照品溶液 s qu os qx ot ou ov °¯ o分别置于 ts °¯ 容量
瓶中 o用甲醇定容至刻度 ∀再分别精密吸取 u °¯ o置
于 ts °¯ 容量瓶中 o用甲醇定容至刻度 o待测定 ∀分
别精密吸取定容液 xs Λ¯ o注入液相色谱仪中测定 o
分别得到峰面积为 tt qxx ou| qzz ox| q|v ottx qv{ o
tzx qy| ∀所得数据经统计学处理 o得回归方程 Ψ
t .t|wxsxtu Ξ n s .u|v|uzu , ρ s q|||| o线性范围为
| qzy ∗ twy qw ±ª∀加样回收率实验结果显示回收率
达到 |{ q{ h k ν x) , ΡΣ∆ t q|t h ∀
2 q3 q2 样品溶液制备及测定 按照5中国药典6一
部骨碎补药材项下柚皮苷的含量测定规定≈t o制备
骨碎补不同炮制品kws目粉l待测液 o以 tsxs型高
效液相色谱仪测定柚皮苷的含量 o结果见表 { ∀
3 讨论
骨碎补不同炮制品总黄酮含量测定结果表明 o
表 { 骨碎补不同炮制品中柚皮苷的含量测定结果
样品
取样量
rª
含量
r h
生骨碎补 去毛 s quv{{ t qt
未去毛 s quuxw s q{
砂烫骨碎补 s quvvv t qs
酒骨碎补 s quu|x t qs
盐骨碎补 s quuzz t qs
去毛生品与砂烫骨碎补 !酒骨碎补 !盐骨碎补总黄酮
含量相当 o且去毛生品总黄酮含量高于未去毛生品 ∀
骨碎补不同炮制品总黄酮溶出率量测定结果表
明 o提取 y otu «时 o砂烫骨碎补 !酒骨碎补 !盐骨碎
补总黄酮溶出量明显高于生品 ~且提取 tu «时 o砂
烫骨碎补 !酒骨碎补 !盐骨碎补总黄酮溶出几近相
同 o几近完全 o而生品尚有约 tw h总黄酮未溶出 ∀
骨碎补不同炮制品柚皮苷含量测定结果表明 o
去毛生品与砂烫骨碎补 !酒骨碎补 !盐骨碎补柚皮苷
含量相当 o且明显高于未去毛生品 o这与总黄酮含量
测定结果具平行性 ∀
本实验结果表明 o骨碎补经去毛净制后 o可提高
总黄酮及柚皮苷含量 ~经砂烫 !酒制 !盐制后 o并不影
响总黄酮及柚皮苷含量 o却有利于有效成分的溶出 ∀
通过上述实验结果分析 o临床应用砂烫骨碎补
可净制去毛 o而且用砂烫骨碎补炮制的酒骨碎补 !盐
骨碎补与砂烫骨碎补一样 o不影响总黄酮及柚皮苷
含量 o且有利于有效成分的溶出 ∀本实验为用砂烫
法炮制骨碎补 o及现代用砂烫骨碎补炮制酒骨碎补 !
盐骨碎补提供了依据 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss qus| q
≈u 王维信 o王敖格 q骨碎补双氢黄酮甙对体外培养心肌细胞的影
响及其作用机理分析 q中国药学会庆祝建会 {s周年学术会议
论文集 ot|{z osy22u q
≈v 周铜水 o周荣汉 o刘晓东 q骨碎补对大鼠实验性骨折损伤愈合
的影响 q中草药 ot||w ouxkxl }uw| q
≈w 李孟广 o李晓东 o蔡逢庆 q烫制对骨碎补中二氢黄酮甙含量和溶
出率的影响 q中药材 ot||u otxkvl }u{ q
≈x 国家中医药管理局 q中华本草 q第二册 q上海 }上海科学技术出
版社 ot||| quys q
≈y 王孝涛 q5历代中药炮制法汇典6#现代部分 q南昌 }江西科学技
术出版社 ot|{| qttz q
≈z 周铜水 o林东武 o李瑞洲 o等 qtu种骨碎补黄铜类成分定性定量
分析 q中国药科大学学报 ot||y ouzk|l }xws q
≈责任编辑 刘
#w{y#
第 uy卷第 ts期
usst年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qts
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