全 文 ：≈x 罗建平 o牛炳韬 o贾敬芬 o等 1 云南红豆杉愈伤组织培养 1 生物
工程学报 ot||z otvkvl }vuy q
≈致谢 医科院药物所方唯硕博士提供了紫杉醇标准
品 o中国科学院生态环境研究中心蒋可研究员和赵国栋高级
工程师代做 °≤2 ≥ ∀
Εφφεχτσ οφ Χυλτυρε Χονδιτιονσ ον Χαλλυσ Γροωτη ανδ
Ταξολ Φορµ ατιον οφ Ταξυσψυννανενσισ Χηενγ ετ Λ . Κ .Φυ
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Ταξυσ ψυννανενσισ. Μετηοδ : ⁄¨ ·¨µ°¬±¬±ª·«¨ ªµ²º·«¬±§¨ ¬¤±§·¤¬²¯ ¦²±·¨±·¬±·«¨ ¦¤¯ ∏¯¶¦∏¯·∏µ¨§∏±§¨µ§¬©©¨µ2
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[ Κεψ ωορδσ] Ταξυσ ψυννανενσισ~¦¤¯ ∏¯¶¦∏¯·∏µ¨ ~·¤¬²¯
≈责任编辑 王康正
不同生长期白羊草中
总黄酮及小麦黄素的含量测定
李兰芳t o张文彦t o张 魁t o张建新t o郝冬生u o段文仲u
kt1 河北省医学科学院 o河北 石家庄 sxssut ~u1 河北省进出口商品检验局 o河北 石家庄 sxssztl
≈摘要 目的 }对采集不同生长期白羊草中的总黄酮和总黄酮中的主要有效成分小麦黄素进行含量测定 o为
合理利用这一野生资源提供理论依据 ∀方法 }总黄酮测定用铝离子显色后测定吸光度的方法 ~小麦黄素测定用
°≤ 法 o色谱柱 ≥³«¨µ¬¶²µ¥≤t{柱 ~流动相甲醇2水2u h乙酸kyxΒvxΒul ~流速 t1s °¯ #°¬±p t ~检测波长 vxu ±° ∀结果
与结论 }白羊草中总黄酮和小麦黄素含量因生长期不同而异 o总黄酮和小麦黄素含量都以 z月份最高 o具有同步相
关性 ∀
≈关键词 白羊草 ~总黄酮 ~小麦黄素分光光度法 ~高效液相色谱
≈中图分类号 ≥u{w ~ u{u qzts qu ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussslsx2suzu2sv
白羊草 Βοτηριοχηλοα ισχηαε µ υ µ kql ¨±ª系
≈收稿日期 t|||2s{2sw收稿
≈资助项目 河北省科技专项基金资助k|zsutzl
多年生禾本科孔颖草属草本植物 o多生于山坡 !草
地 !路旁 o我国大部分地区均有生长 ∀其有效成分总
黄酮对实验动物具有多方面生物活性≈t ∀本文测定
了连续 v年采收的白羊草中的总黄酮 o并测定了 t
#uzu#
第 ux卷第 x期
usss年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o²qx¤¼ ousss
年中不同生长期中小麦黄素的含量 o为白羊草的深
加工提供了依据 ∀
1 仪器 !试剂及药品
zuu光栅分光光度计k上海第二分析仪器厂l ~
高压液相色谱仪 • ¤·¨µ¶xts具 • ¤·¨µ¶w{w可变波
长紫外检测器 o
¤¶¨ ¬¯±¨ {ts色谱工作站 o色谱柱 ux
°° ≅ w1y ¦° oo不锈钢柱 o内填 ≥³«¨µ¬¶²µ¥≤t{ o粒径 x
Λ° ~小麦黄素系作者从白羊草中分离得到 o纯度大
于 || h ~芦丁k中国药品生物制品检定所l ~©¯²µ¬¶¬¯
kys ∗ tss目l于 yss ε 高温炉中灼烧 v «后 o使用前
于 tvs ε 烘箱活化 v «o储于干燥器中备用 ~无水硫
酸钠 o分析纯 o于 yss ε 高温炉中灼烧 w «后 o储于
干燥器中备用 ~其余试剂除特殊注明外均为分析纯 ∀
白羊草 ot||x ∗ t||z年采自河北省丘陵地区 o经中
国科学院植物所扬保珍研究员鉴定为禾本科孔颍草
属植物白羊草 ∀
2 白羊草中总黄酮的动态观察
对白羊草中总黄酮含量进行了 v年样品测定 ∀
野生白羊草采集风干后 o粉碎过 us目筛 o于 {s ε 恒
温干燥 x «o精称 t ª左右 o加 ys h甲醇 vs °¯ o回流
提取 t «o共提取 v次 o合并滤液并过滤 o残渣加 ys h
甲醇洗涤 v次合并到提取液中 o定容至 ts °¯ ∀取上
述样品液 u1s °¯ 加于 ux °¯ 容量瓶中 o加水至 y1s
°¯ o加 x h 亚硝酸钠溶液 t1s °¯ o使混匀 o放置 y
°¬±o加 ts h 硝酸铝溶液 t1s °¯ o使混匀 o放置 y
°¬±o加氢氧化钠试液 ts °¯ o再加水至刻度 o摇匀 o放
置 tx °¬±o随行试剂空白对照 ∀按分光光度法在
xss ±°波长处≈u 测定吸收度 ∀本实验用芦丁做对
照品 o制做标准曲线 ∀结果芦丁的线性范围在
s 1 t|v{ ∗ t1 tyu{ °ª# pt o回归方程为 }Α
s qsswu|v n s qwuwy Χoρ s q||| ∀加样回收率为
tst qvu h k ν xl oΡΣ∆ t qvu h ∀测定结果见表 t ∀
表 t v年中不同采收期白羊草中总黄酮含量表 h
采收年份
总黄酮
x月 y月 z月 {月 |月 ts月
t||x t qzs u qzz v qsy t q{s t qxz t qsx
t||y u qst v qwt v qw| u qvz t qxz t qst
t||z t q|w v qv{ v qvy u qut t qzv t qtu
注 }ν v
3 不同生长期白羊草中小麦黄素的含量
311 提取方法
精称白羊草标本 x ªo加 zs h 乙醇回流提取 v
次 o每次 u «∀合并提取液 o置烧瓶中 o水浴回收乙醇
至剩约 ts °¯ o将残液倒入分液漏斗中 o加石油醚萃
取提取液以除去叶绿素等杂质 ∀水层以乙酸乙酯萃
取 x次 o合并 x次萃取液 ∀滤纸过滤 o回收溶剂 o残
渣加乙酸乙酯溶解并定量至 ux °¯ ∀
312 样品净化
31211 净化柱 }ux °° ≅ ts ¦°具旋塞层析柱 o用乙
酸乙酯湿法装填 u ª©¯²µ¬¶¬¯o上填 t ª无水硫酸钠层
面备用 ∀
31212 净化方法 }用吸管吸取提取液 x °¯ o加到净
化柱上 o调节净化柱旋塞使净化柱中溶液以 u滴r¶
的速度流出并收集于 tw号标准口的心型瓶中 o净化
柱用 v1s °¯ 乙酸乙酯清洗 o洗脱液并入心型瓶 ∀用
旋转蒸发器在 ys ε 水浴中将心型瓶中溶液蒸发至
近干 o然后用干燥空气吹干 ∀用 x1s °¯ 甲醇溶解残
渣 o经 w Λ°滤膜过滤后用高效液相色谱外标法测定
小麦黄素含量 ∀
31213 样品测定 }流动相甲醇2水2u h乙酸kyxΒvxΒ
ul o流速 t1s °¯ # °¬±p t ~柱温 vx ε ~检测波长 vxu
±° o¤∏©¶s1x ~进样量 x Λ¯ ∀根据样品中小麦黄素的
浓度 o选定峰高相近的对照品溶液进样测定 ∀上述
操作条件下小麦黄素的保留时间约为 x °¬±o样品及
对照色谱图见图 t ∀测定结果见表 u ∀
图 t 对照品及白羊草样品的 °≤ 色谱图
t1 小麦黄素 1 标准品
1 样品
表 u 不同生长月份白羊草中不麦黄素的含量
采收月份 小麦黄素含量r °ª#ªp t
x yy quw
y yz qxt
z {w qzs
{ yx qy{
| yw qty
ts x q|x
注 }ν u
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第 ux卷第 x期
usss年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o²qx¤¼ ousss
31214 回收率 }精称已知含量的白羊草样品 x份 o
各 t ªo加小麦黄素标准品 xss Λª按样品提取和净
化项下操作 o测定加样回收率 ox次测定的平均结果
为 |y1su h oΡΣ∆为 x1wv h ∀
31215 精密度实验 }取样品供试液 x Λ¯ 连续进样测
定 x次 o结果 ΡΣ∆为 v1zx h ∀
31216 重复性实验 }取同一供试品溶液按含量测定
方法重复取样测定 y次 o其含量为 ξ yw qtt °ª#
ªp t oΡΣ∆为 w1su h ∀
4 讨论
411 经对河北产白羊草中总黄酮含量的 v年观察 o
结果表明从 x月份出苗后随着生长过程总黄酮含量
有逐渐蓄积的趋势 o到生长最旺的 z月份含量最高 o
以后随着开花结果的进程含量越来越低 o到 ts月份
成株时 o含量最低 ∀白羊草总黄酮中的主要有效成
分小麦黄素含量也基本符合这一变化规律 ∀这为白
羊草的深加工利用提供了理论依据 ∀
412 经光谱扫描发现 o小麦黄素的甲醇溶液在 vxu
±°处有最大吸收 ∀因此小麦黄素的检测波长选定
为 vxu ±° ∀
413 白羊草中小麦黄素的含量测定方法尚未见文
献报道 o此成分也是我们首次从该植物中分离得到 ∀
准确测定其含量的关键是除去干扰物质且保存小麦
黄素 ∀本实验应用的条件 o取得了满意的结果 ∀
≈参考文献
≈t 陈素青 o李兰芳 o刘赤平 o等 1 白羊草药理作用的实验研究 1 中
国野生植物资源 ot||{ otzktl }vx q
≈u 中国药典 1 一部 1t||x1vtt q
≈责任编辑 王康正
葛根素及其磷脂复合物的体外透皮实验研究
马云淑t o赵浩如u o林以宁u
kt q云南中医学院 o云南 昆明 yxsuss ~u q中国药科大学 o江苏 南京 utssv{l
≈摘要 目的 }考察葛根素及其磷脂复合物的体外透皮渗透情况 o比较二者透皮速率与累积渗透量的差异 ∀
方法 }通过改进 ƒµ¤±½扩散池进行小鼠体外皮肤渗透实验 ∀结果 }葛根素磷脂复合物 t«内累积渗透量大于葛根素 o
以后其增加渐缓 o而葛根素的渗透速率大于复合物 ∀结论 }葛根素磷脂复合物经皮渗透能在短时间内较快地达到
一定药量 o随后缓慢持久地释放药物 ∀
≈关键词 葛根素 ~磷脂复合物 ~经皮渗透
≈中图分类号 u{v qy ~ |y| qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussslsx2suzw2sv
药物的磷脂复合物可改变原形药物的理化性
质 o增强其药理作用 o延长作用时间 o降低毒副作用 o
提高生物利用度 ~将复合物局部用药 o可逐渐释放活
性成分从真皮层进入血循环 o作用较慢≈t o可起长效
作用 ~透皮给药起全身治疗作用 o为近年研究较多 !
发展较快的给药方式 o它避免了首过效应 o胃肠液对
药物的破坏 o药物的刺激作用等诸多胃肠道给药的
局限 o给药方便无痛苦 o患者乐意接受 o并可制备缓
控制剂 ∀目前国内尚未见有关药物磷脂复合物的经
皮渗透作用的研究报道 o为此对葛根素及其磷脂复
≈收稿日期 t|||2sv2tz
合物进行了体外透皮初步实验研究 ∀葛根素为治疗
心绞痛 !心肌梗塞的异黄酮类成分 o其口服吸收差 o
注射给药消除快 o半衰期短 o经皮给药方式可克服上
述缺点 ∀
1 仪器与材料
zxu紫外分光光度计k上海第三分析仪器制造
厂l o改进 ƒµ¤±½扩散池k中国药科大学中药制剂教
研室自制l ∀
葛根素 !葛根素磷脂复合物k中国药科大学中药
制剂教研室l o其中葛根素磷脂复合物制法见 2 q1 ~
葛根素对照品k中国药品生物制品检定所l o磷脂k北
京化学试剂公司经销 o四川大学生化技术实验厂生
#wzu#
第 ux卷第 x期
usss年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o²qx¤¼ ousss