全 文 ：牙痛酊质量标准的研究
王京辉 o金红宇 o周富荣
k北京市药品检验所 o北京 tsssvxl
≈摘要 目的 }制订牙痛酊质量标准 ∀方法 }采用薄层色谱法鉴别荜菝 !川芎 !白芷 o高效液相色谱法测定胡椒
碱的含量 ∀结果 }薄层斑点清晰 o重现性好 o含量测定平均回收率为 || qz h oΡΣ∆为 t q{ h ∀结论 }方法简便 o准确 o
可供本品质量控制 ∀
≈关键词 高效液相色谱法 ~薄层色谱 ~胡椒碱
≈中图分类号 u{v qysv ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlsz2swyz2su
牙痛酊是由荜茇 !藁本 !川芎 !白芷 !花椒 x味中
药组成 o为国家三类新药 ∀采用提取挥发油 o水煮醇
沉等工艺加工制成 ∀具有祛风散寒 !活血止痛的功
能 o用于治疗风寒牙痛 o龋齿牙痛等疾病 ∀为控制产
品质量 o确保临床疗效 o本文建立了荜茇 !川芎 !白芷
的薄层色谱鉴别方法 o方法简便 !可行 o重现性好 ∀
并采用高效液相色谱法对其君药荜茇的主要成分胡
椒碱k³¬³¨µ¬±¨ l进行含量测定 o文献报道胡椒碱的含
量测定方法有高效液相色谱法≈t ∗ w o本实验研究采
用改进的四氢呋喃2甲醇2水系统为流动相 o更适用于
本中药复方制剂复杂成分的分离 ∀
1 仪器 !试剂与样品
岛津 ≤2y型高效液相色谱仪 o≥°⁄2y ∂ 紫外
可见检测器 ∀硅胶 预制薄层板k烟台市化工研究
所l ∀四氢呋喃 !甲醇为优级纯 o其他试剂均为分析
纯 ∀胡椒碱 !欧前胡素k中国药品生物制品检定所l ∀
牙痛酊k北京市科信中医科技开发公司l ∀
2 薄层色谱鉴别
2 q1 荜茇
取本品作为供试品溶液 ∀按处方比例称取除荜
茇外各药材 o按工艺提取 o同法制成缺荜茇空白对照
液 ∀另取胡椒碱对照品 o加乙醇制成每 t °¯ 含 u °ª
的溶液 o作为对照品溶液 ∀吸取上述溶液各 x Λ¯ o分
别点于同一硅胶 预制薄层板上 o以苯2醋酸乙酯2
丙酮kzΒuΒtl为展开剂 o喷以碘化钾碘试液显色 ∀供
试品色谱中 o在与对照品色谱相应的位置上 o显相同
颜色的斑点 o且空白无干扰k见图 tl ∀
2 q2 川芎
≈收稿日期 usss2su2st
图 t 胡椒碱薄层色谱图
t q胡椒碱 u q样品 v q空白对照
取本品 us °¯ o置水浴上蒸至约 v °¯ o加水 tx
°¯ o混匀 o用氨试液调节 ³ 值为 ts o用氯仿萃取 o萃
取液蒸干 o残渣加乙醇 t °¯ 使溶解 o作为供试品溶
液 ∀按处方比例称取取川芎外各药材 o按工艺提取 o
同法制成缺川芎空白对照液 ∀另取川芎对照药材 u
ªo加 yx h乙醇 ws °¯ o置水浴中加热回流 t «o滤过 o
滤液浓缩至约 v °¯ o加水 tx °¯ o同法制成对照药材
溶液 ∀吸取上述两种溶液各 v Λ¯ o分别点于同一硅
胶 预制薄层板上 o以环己烷2醋酸乙酯k|Βtl为展
开剂 o展开 o取出 o晾干 o喷以碘化钾碘试液 ∀从试品
色谱中 o在与对照药材色谱相应的位置上 o显相同颜
色的斑点 o且空白溶液无干扰k见图 ul ∀
图 u 川芎薄层色谱图
t q川芎对照药材 u q样品 v q空白对照
2 q3 白芷
取本品 us °¯ o置水浴上蒸至约 v °¯ o加水 tx
#zyw#
第 uy卷第 z期
usst年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qz
∏¯ qousst
°¯ o混匀 o用乙醚提取 o乙醚液用无水硫酸钠脱水滤
过 o滤液挥干 o残渣加乙醇 t °¯ 使溶解 o作为供试品
溶液 ∀按处方比例称取除白芷外各药材 o按工艺提
取 o同法制成缺白芷空白对照液 ∀另取欧前胡素对
照品 o加乙醇制成每 t °¯ 含 t °ª的对照品溶液 ∀
吸取上述溶液各 u Λ¯ o分别点于同一硅胶 预制薄
层板上 o以环己烷2苯2醋酸乙酯ktxΒtxΒul为展开剂 o
展开 o取出 o晾干 o置紫外光灯kvyx ±°l下检视 ∀供
试品色谱中 o在与对照品色谱相应位置上 o显相同颜
色的斑点 o且空白对照无干扰k见图 vl ∀
图 v 白芷薄层色谱图
t q欧前胡素 u q样品 v q空白对照
3 含量测定
3 q1 色谱条件
≠ • ≤t{色谱柱 kw qy °° ¬§ ≅ uxs °° ots
Λ°l ~流动相四氢呋喃2甲醇2水kvsΒvsΒxsl ~流速 t
°¯ #°¬±p t ~对照品胡椒碱与杂质峰分离度大于 t qx ~
层析柱的理论板数按胡椒碱峰计算 o应大于 t xss ∀
3 q2 线性关系考察
精密吸取胡椒碱对照品乙醇溶液kts qv{ °ªψ
xs °¯ lt qs ou qs ov qs ow qs ox qs °¯ o分别置 ux °¯ 棕色
量瓶中 o加乙醇稀释至刻度 o摇匀 o分别精密吸取 ts
Λ¯ o注入高效液相色谱仪 o测定峰面积 o并绘制标准
曲线 ∀结果表明胡椒碱的含量与峰面积在 s qs{v ∗
s qwtx Λª呈线性关系 o回归方程 Ψ vwtvt{y Ξ p
zwyz .z , ρ s q|||| ∀
3 q3 供试品溶液和对照品溶液的制备
供试品溶液的制备 精密量取本品适量 o置 ux
°¯ 棕色量瓶中 o加无水乙醇稀释至刻度 o摇匀 o于冰
箱中冷藏 t qx «o取出 o滤过 o取续滤液 x °¯ o置 ux °¯
棕色量瓶中 o加乙醇稀释至刻度 o摇匀 o即得 ∀
对照品溶液的制备 精密称取胡椒碱对照品 o
加乙醇制成每 t °¯ 含 us Λª的溶液 o作为对照品溶
液 ∀
牙痛酊中胡椒碱的高效液相色谱图见图 w ∀
3 q4 样品测定结果
图 w 牙痛酊中胡椒碱的高效液相色谱图
q胡椒碱对照品
q牙痛酊样品 ≤ q空白对照 ¤q胡椒碱
v批样品k|{sxsx o|{sxs{ o|{sxtsl测定结果分
别为 u qz h ou qz h ou q{ h ∀
3 q5 精密度试验
精密吸取供试品溶液 o重复进样 o求得 ΡΣ∆
s .|%( ν yl ∀
3 q6 重现性试验
分别精密量取同一批牙痛酊样品 o依法测定 o结
果 ΡΣ∆ s .x%( ν yl ∀
3 q7 空白试验
按处方中药味比例自配不含荜茇的群药 o制成
空白溶液 o按样品方法测定 o结果空白溶液在胡椒碱
相同保留时间处未显示明显的色谱峰 o故认为空白
无干扰 ∀
3 q8 回收率试验
采用加样回收法 o精密量取已知含量的同一批
样品 o分别精密加入定量胡椒碱对照品乙醇溶液 o依
法测定 o结果平均回收率为 || qz h oΡΣ∆ t .{%( ν
yl ∀
3 q9 荜茇药材测定
取本品粉末 s qt ªo精密称定 o置 tss °¯ 棕色量
瓶中 o加乙醇 xs °¯ o超声处理 vs °¬±o放冷 o加乙醇
稀释至刻度 o滤过 o取续滤液作为供试品溶液 o依法
测定 ∀由于样品测定的色谱条件与5中国药典6≈t 方
法略有不同 o故对两种方法测定结果进行了比较 o见
表 t ∀
由上表可知 o两种方法测定结果基本相同 ∀ 5中
国药典6采用内标法测定含量 o结果准确 ∀但鉴于中
药复方制剂成分复杂 o采用内标法时分离度难以满
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 t 荜茇中胡椒碱含量测定结果 h
方法 含量
正文方法k外标法l v qy v qt w qs
药典方法k内标法l v qx v qu v q|
足要求 ∀因此本研究采用外标外更为实际 !可行 ∀
4 讨论
4 q1 处方中同时含有藁本和川芎两味药 o两者均含
有藁本内酯和阿魏酸 o故在制订标准时 ~选用川芎中
生物碱类成分为鉴别指标 o更具有专属性 o经空白实
验 o藁本对其无干扰 ∀此方法的建立 o未见文献报
道 o属首创 ∀该方法亦可用于其他含川芎制剂中川
芎的检识 ∀
4 q2 由于样品中所含成分复杂 o给含量测定带来一
定的困难 ∀样品前处理采用无水乙醇稀释 o冰箱中
静置 o除去杂质的方法 o使样品得到净化 o可满足含
量测定的要求 o且重现性好 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 ot||x qus| q
≈u 王 琰 o邵逊生 o高春生 q反相高效液相色谱法测定六味木香丸
中胡椒碱的含量 q中成药 ot||x otzk{l }ts q
≈v 王 琰 o董文玉 o梁玉琴 q反相高效液相色谱法测定五味哺浊散
中胡椒碱的含量 q中国中药杂志 ot||x ouskvl }tyt q
≈w 戴 涌 o孙文基 q中药泻宝中胡椒碱的 °≤ 测定 q中成药 o
t||x otzkvl }tu q
≈责任编辑 李 禾
反相高效液相色谱法测定
银翘散抗流感病毒有效部位群中醉鱼草苷的含量
石 钺 o石任兵 o陆蕴如 o朱 静
k北京中医药大学 中药学院 o北京 tsssu|l
≈摘要 目的 }建立反相高效液相色谱法测定银翘散抗流感病毒有效部位群中醉鱼草苷含量的方法 ∀方法 }
选用 ≠ • 2≤t{色谱柱kw qy °° ¬§≅ uxs °° ots Λ°l o乙腈2v h醋酸水溶液kuxΒzxl为流动相 o紫外检测波长为 vuy
±° o室温下对醉鱼草苷进行含量测定 ∀结果 }醉鱼草苷进样量在 s qux ∗ s q{w Λª与其峰面积积分值呈良好的线性
关系 oρ s .|||z( ν xl o平均加样回收率为 || qv h oΡΣ∆ 为 t q{u h ∀结论 }本法简便 !准确 !快速 ~可作为银翘散
抗流感病毒有效部位群的质量控制方法 ∀
≈关键词 醉鱼草苷 ~反相高效液相色谱法 ~含量测定 ~银翘散 ~抗流感病毒
≈中图分类号 u{vw qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlsz2swy|2sv
银翘散是由金银花 !连翘 !桔梗 !薄荷 !淡竹叶 !
甘草 !荆芥 !淡豆豉 !牛蒡子等 |味药组成的中药复
方制剂 o现代用于治疗流行性感冒 !急性扁桃体炎 !
咽峡疱疹 !麻疹 !腮腺炎 !乙脑 !流脑 !大叶性肺炎等
疾病的初期阶段≈t ∀近代不少学者对银翘散的药
效及毒理进行了大量研究 o结果表明银翘散具有解
热 !抗菌 !抗病毒 !抗炎 !抗过敏 !镇痛 !增强免疫等作
用 o且无明显的毒副作用≈u ∀我们曾对银翘散抗流
感病毒活性进行研究 o结果显示良好的抗流感病毒
作用 o并筛选出了银翘散抗流感病毒有效部位群 ∀
≈收稿日期 usst2su2sy
≈基金项目 国家中医药管理局重点课题k|zuszutl
为阐明银翘散抗流感病毒作用的物质基础 o我们运
用现代分离技术 o对银翘散抗流感病毒有效部位群
进行了系统 !深入的研究≈v o发现其含有大量的黄
酮类物质 o醉鱼草苷为该有效部位群中的活性成分
之一 ∀
银翘散全方的化学成分目前还无人研究 o而从
已有的银翘散组方中各单味药的化学成分研究文献
来看 o也未见到有关醉鱼草苷的报道 ∀因此醉鱼草
苷为首次从银翘散群药中分离得到 o经 °≤ 及
≤r ≥r ≥检测 o其来源于薄荷 ∀关于醉鱼草苷的
测定 o曾有库仑滴定法≈w 和高效液相色谱法≈x oy 的
报道 ∀我们采用 °2°≤ 法测定了银翘散抗流感
病毒有效部位群中醉鱼草苷的含量 o获得了满意的
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第 uy卷第 z期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qz
∏¯ qousst