全 文 ：图 u ≤¶对受照小鼠肝脏组织形态学的影响
⁄q盐水对照组k⁄t ≅ {ss ⁄u ≅ ussl ∞q辐射损伤组k∞t ≅ {ss
∞u ≅ ussl ƒ q≤¶tux°ª#®ªp t组kƒt ≅ {ss ƒu ≅ ussl
衰 o且衰老的本质与核酸代谢密切相关≈ts o因
此结合 ≤¶的抗脂质过氧化作用及免疫增强作
用 o提示 ≤¶具有延缓衰老的作用 ∀
机体受ys≤²照射后可产生大量毒性氧自由
基 o引起强烈的脂质过氧化反应 o破坏核酸 !蛋
白质 !酶等生物大分子 o致细胞 !组织损伤≈tt ∀
可见辐射的损伤效应与脂质过氧化作用密切相
关 o本实验 ≤¶治疗组能明显促进受照射小鼠
红细胞内 ≥⁄活性及脾脏核酸含量的恢复 o抑
制肝脏脂质过氧化物的形成 ∀表明 ≤¶的辐射
防护作用与其防止自由基的损害有重要关系 ∀
组织形态学也表明 ≤¶可使受照射后损伤的肝
脾组织结构恢复良好 o且能促进核酸的恢复 o提
示 ≤¶的辐射防护作用也与其抗脂质过氧化作
用有关 o其机制有待进一步深入探讨 ∀
4 参考文献
t 高海谦 1 中成药研究 ot|{w ~ttkttl }vw
u 佐藤 调等 1 国外医学#中医中药分册 ot|{z ~|kyl }vv
v 李巧茹等 1 上海中医药杂志 ot||s ~kttl }uu
w 余南才等 1 中国中药杂志 ot||s ~txkyl }uu
x 张龙翔等 1 北京 }人民教育出版社 ot|{w }utz
y 丁克祥等 1 老年学杂志 ot|{z ~zkul }wu
z «²∏ ·¨¤¯ q
¬²¦«¨ °¬
¬²³«¼¶ot|{y ~w }zt
{ 陈顺忠等 1 ≤ ¬¯± ¤¥ × ¦¨«ot|{w ~ukwl }z
| 吴立等 1 老年学杂志 ot||s ~tskyl }vxv
ts 刘俊达 1 老年学杂志 ot||v ~tvkyl }vzx
tt ¨µª²±²± ƒ ·¨¤¯ q
¬²¦«¬°¬ot|{t ~yv }xxx
t||y ) sw ) tz收稿
鸽鳖口服液对小鼠免疫功能的促进作用
吕圭源 熊跃康 范春雷 王平 3
k浙江中医学院 杭州 vtsss|l
摘要 鸽鳖口服液能使强的松和环磷酰胺损伤小鼠的胸腺和脾脏重量增加 o增强单核细胞吞噬功
能和迟发型超敏反应 o并能促进脾淋巴细胞转化和提高 细胞活性 ∀
关键词 鸽鳖口服液 免疫器官 淋巴细胞转化 细胞 免疫功能
鸽鳖口服液由鸽鳖水解液和枸杞子 !桃仁
等中药提取液精制而成 o具有益气养血 !滋补肝
肾 !活血生肌等功效 ∀临床上可用于创伤 !烫伤
等开放性损伤 !软组织损伤 !手术后及妇女产
后 !人工流产后等病人使用 o能加速创口愈合 !
促进产妇及流产妇女康复 o效果良好 ∀我们针
对其益气 !养血 !活血 !生肌等方面进行了药效
学研究 o现报道其对免疫功能的促进作用 ∀
1 材料
111 药物 鸽鳖口服液 o浙江星神保健品有限
3 浙江工业大学 杭州 vtssss
#zyv# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 y期
公司生产 o批号 |xstsv o含生药量为 s1zªr°¯ ∀
双宝素 o杨州第四制药厂生产 o批号 |ws|s{ o含
人参和蜂王浆为各 ws°ªr°¯ ∀
112 动物 小鼠 o体重kus ? ulªoα 各
半 ~公鸡 t1y®ªo均由本院动物中心提供 o动物
生产合格证号码为k|wlussv ∀
113 主要试制 强的松龙注射液 o浙江仙居制
药股份有限公司生产 o批号 |wttty otux°ªr
x°¯ ~注射用环磷酰胺 o上海第十二制药厂生产 o
批号 |wsytw ouss°ªr瓶 ~ ° 2tyws完全培养
液 o日本产 o每 tss °¯ 含 ³¨¨¶ux°°²¯ro谷氨
酰胺 u°°²¯rou2 ∞ xsΛ°²¯ro小牛血清
ts h o青霉素 tssr°¯ o链霉素 tssr°¯ ∀刀豆
素蛋白 k≤²±l o≥¬ª°¤产品 o分装成 t°ªr°¯ o
冰箱存放 ∀氚胸腺嘧啶核苷kv 2ק l o中国科
学院上海原子核研究所产 o批号 |wtutz o浓度
为 v1z ≅ tsz
r´ °¯ o比度为 t1xxw ≅ tstu
r´k°²¯
#ptl o临用前用 ¤±®. ¶液配成 z1w ≅ ts{
r´
°¯ ∀闪烁液≈u ox2二苯基口恶唑k°°lw1s ot ow2双
2kx2苯基口恶唑基2ul2苯k°°°ls1wªo二甲苯加
至 tsss °¯ o上海试剂一厂生产 ows ε 水浴箱过
液 o暗室保存备用 ~鸡红细胞k≤
≤l o取自公鸡
静脉血 ~中华墨汁 o购自杭州文化用品商店 ∀
114 仪器 电子分析天平 o °tus2u型 o上海天
平仪器厂生产 ~≤ u 培养箱 o美国 ƒ²µ±∏¤ ≥¦¬¨±2
·¬©¬¦公司生产 ~⁄≠ ±2 µ型变头细胞样品收集
器 o浙江绍兴坡塘机械厂生产 ~液体闪烁计数
仪 o°¤µ®¤µ§ ×µ¬¦²µ§vss 型 ~zxv
微机型紫外
可见分光光度计 o上海第三分析仪器厂生产 ∀
2 方法和结果
211 对免疫器官重量的影响≈t 取小鼠 t{s
只 o体重kt{ ? tlªoα 各半 o按性别随机分成
|组 o第 t ou oy组¬ª水 o第 v ow oz o{组¬ª鸽鳖口
服液 o第 x o|组¬ª双宝素 o每日 t次 o连续 y天
k第 u ov ow ox组于给药后第 t ov ox天分别¬³强
的松龙 tx°ªr®ª~第 y oz o{ o|组于给药后第 w
天¬³环磷酰胺 ys°ªr®ªl o次日先称体重后处
死 o取出胸腺和脾脏精密称重 o并分别计算出胸
腺指数k每 tsª体重胸腺的重量l和脾脏指数
k每 tsª体重脾脏的重量l o进行 τ检验 o结果 o
鸽鳖口服液能明显增加免疫器官的重量 o见表
t ∀
表 t 鸽鳖口服液对小鼠免疫器官重量的影响 °ªrtsª
组别 剂量 ªr®ª 胸腺指数 脾脏指数
水 uu1ys ? w1xs xy1xw ? x1|v
水 n强 z1ux ? u1|wtl vt1s{ ? {1sutl
鸽鳖 n强 x1s {1|v ? u1utul v{1ut ? y1uuvl
ts1s ts1tw ? u1wtvl wt1vt ? z1suvl
双宝素 n强 t1y ts1|u ? w1svvl ws1vu ? x1uzvl
水 n环 tw1wu ? u1|{tl vz1s| ? w1||tl
鸽鳖 n环 x1s us1zz ? v1xvvl wt1y| ? v1{|vl
ts1s ut1vu ? y1sxvl wz1{v ? tt1y|vl
双宝素 n环 t1y t{1ty ? x1x| w|1xz ? ts1{xvl
注 }≠ ξ ? σ ν us ≈强的松龙k强l的剂量为 tx°ªr
®ªo环磷酰胺k环l的剂量为 ys°ªr®ª …与正常组比较tl Π
s1sx 与水组比较u) Π s1sx v) Π s1st
212 对单核细胞吞噬功能的影响 参照小鼠
碳粒廓清法≈t o取小鼠 ws只 o按性别随机分成
w组 o第 t组¬ª水 o第 u ov组¬ª不同剂量的鸽鳖
口服液 o第 w组¬ª双宝素 o每天 t次 o连续 z天 o
末次给药后 t«尾静脉注射中华墨汁 s1sx °¯ r
tsªo于注射后 t ox°¬±眼眶取血各 usΛ¯ o分别放
入 us °¯ s1t h ¤u≤ v溶液中摇匀 o用紫外可见
分光光度计于 y{s±°处测 ⁄值 o计算吞噬指
数k ²¯ª⁄t p ²¯ª⁄ur·u p·tl o并计算吞噬活
性 Α v≅体重rk肝重 n脾重l o结果鸽鳖口服
液有明显促进单核细胞吞噬作用 o见表 u ∀
表 u 鸽鳖口服液对小鼠单核细胞吞噬功能的影响
组别 剂量 ªr®ª 吞噬指数 吞噬活性
水 s1sv| ? s1ss| w1zuw ? s1wwu
鸽鳖口服液 x1s s1sws ? s1stu w1|xv ? s1|yt
ts1s s1sxz ? s1suuul x1wts ? s1ztstl
双宝素 t1y s1syv ? s1st{ul x1zw| ? s1zysul
注 }≠ ξ ? σ ν ts ≈与水组比较t) Π s1sx u) Π
s1st(下同)
213 对迟发型超敏反应k⁄× l的影响≈u 取
小鼠 ws只 o按性别随机分成 w组 o第 t组¬ª水 o
第 u ov组¬ª不同剂量鸽鳖口服液 o第 w组¬ª双
宝素 o第 u 天每鼠尾静脉注射 ≤
≤ |1yz ≅
tsxr只致敏 o再¬ª相应的治疗药和对照水 o连续
y天 ∀于致敏后的第 x 天把 |1yz ≅ tszr °¯ 的
≤
≤ 和生理盐水各 s1su °¯ 分别注入小鼠后
肢左右脚掌皮下 ouw«后用容积法测定足跖肿
#{yv# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 y期
胀度kƒ° l o以两足 ƒ° 的差值作为 ⁄× 的
指标 o结果 o鸽鳖口服液能明显促进 ≤
≤ 诱导
的 ⁄× 反应 o见表 v ∀
表 v 鸽鳖口服液对小鼠 ⁄× 的影响
组别 剂量 ªr®ª 足肿胀度差值 Λ¯
水 tz1zv ? ts1xz
鸽鳖口服液 x1s u{1|s ? tt1zttl
ts1s vt1u| ? z1uzul
双宝素 t1y ws1vu ? tx1ztul
214 对 ≤²± 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的
影响≈v 取小鼠 ws只 o按性别随机分成 w组 o
第 t组¬ª水 o第 u ov组¬ª鸽鳖口服液 o第 w组
¬ª双宝素 o每日 t次 o连续 ts天 o第 tt天断头
放血处死 o取脾脏 o放入 ¤±®. ¶液中制成单细
胞悬液 o洗涤 u次 o用含 x h小牛血清的 ° 2
tyws完全培养液 o调整细胞浓度为 u ≅ tszr °¯ o
向 |y孔细胞培养板内加入上述悬浮液 tssΛ¯ o
每鼠 u 孔 o再加入含 ≤²± kusΛªr°¯ l的完全
tyws培液 tssΛ¯ o同时设不加 ≤²± 的对照孔 o
将培养板置 vz ε x h ≤ u的环境中培养 zu«o终
止培养前 ty«加入v 2ק v1z ≅ tsw
r´孔 o终
止培养 ∀用变头细胞样品收集器将各孔之细胞
分别吸于 w|型玻璃纤维滤膜上 o用双蒸馏水洗
涤 ts次后 o置 {s ε 烘箱中干燥 vs°¬±o用打孔
器将每个样品的滤片取下 o放入含有 z °¯ 闪烁
液的闪烁瓶中 o避光过夜 o次日 o用液体闪烁计
数仪测定样品的每分钟脉冲数k¦³°l ∀用 ¦³°
值来反映细胞内v 2ק 掺入 ⁄ 的量 o用以
表示细胞增殖k转化l的速度 ∀结果 o鸽鳖口服
液可明显促进脾淋巴细胞转化 o见表 w ∀
表 w 鸽鳖口服液对小鼠脾淋巴细胞转化的影响
组别 剂量 ªr®ª ¦³°值
水 tysyu ? y{zz
鸽鳖口服液 x1s uy|tx ? tvusutl
ts1s uzyvu ? tsuz{ul
双宝素 t1y uy{|w ? tusvwtl
215 对小鼠 细胞活性的影响≈w 取小鼠
ws只 o分组 !给药及制备脾细胞悬液的方法均
同前 o细胞浓度也调整为 u ≅ tszr °¯ ∀
21511 靶细胞的制备 取传代后 uw«对数生
长期的 ≠¤¦2t 细胞 o按文献方法≈w 洗涤 ox ≅
tsxr°¯ 的 ≠¤¦2t 细胞加入 t1{x ≅ tsy
´ v2
ק o混匀 o置 vz ε x h ≤ u培养箱中 uw«后 o再
洗涤 u次 o将细胞浓度调整为 u ≅ tsxr °¯ o待用 ∀
21512 细胞活性测定 取 |y孔细胞培养
板 o每孔加入 u ≅ tsz °¯ 脾细胞悬液k效应细胞l
tssΛ¯ ov 2ק 标记的 ≠¤¦2t 靶细胞悬液 xΛ¯ o
效r靶细胞的比例为 ussrt ∀每鼠设复孔 o每批
实验同时设对照孔k以不含效应细胞的 tssΛ¯
完全 tyws培养液代替脾淋巴细胞悬液l o将 |y
孔细胞培养板置 vz ε x h ≤ u 培养箱中培养
ty«o终止培养 o将细胞收集于 w|型玻璃纤维滤
纸上 o用液体闪烁计数仪测定其¦³°值 o先算出
复孔平均值 o再按下式计算 细胞活性k用细
胞毒指数 ≤h表示l }
≤ t p 效应细胞 n靶细胞孔平均 ¦³°完全 tyws培养液 n靶细胞孔平均 ¦³°
结果 o鸽鳖口服液显著提高小鼠 细胞
活性 o见表 x ∀
表 x 鸽鳖口服液对小鼠 细胞活性的影响
组别 剂量 ªr®ª 细胞活性 ≤h
水 xs1ts ? ts1vs
鸽鳖口服液 x1s x{1xs ? x1xstl
ts1s x{1ts ? x1sstl
双宝素 t1y x{1vs ? x1txtl
3 讨论
鸽鳖口服液能明显增强单核巨噬细胞的吞
噬功能 ~对 ≤²± 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化
反应及 ≤
≤ 诱导的小鼠足垫 ⁄× 反应都有
较强的促进作用 o说明本品可促进 × 细胞增生 !
增殖及增强 × 细胞介导的细胞免疫反应 ~本品
两个剂量组均能提高小鼠 细胞活性 ~并能
使强的松龙和环磷酰胺损伤小鼠的胸腺指数和
脾脏指数增加 ∀说明本品不但能促进正常小鼠
的细胞免疫功能 o也能提高免疫低下小鼠的细
胞免疫功能 o这与其具有益气功效相一致 ∀
4 参考文献
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社 ot||t }txx otxz
u 张洪泉等 1 中药药理与临床 ot|{| ~xkul }vt
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w 于永利等 1 中国免疫学杂志 ot|{x ~tkul }u{
t||y ) sz ) ty收稿
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