全 文 ：补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素
的鼻粘膜吸收研究 3
李爱群 王洪彪 k广东省中医院中心实验室 广州 xtstusl
摘要 目的 }研究不同浓度补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的鼻粘膜吸收规律 ∀方法 }建立大鼠鼻
腔重循环模型 o用 °≤ 法测定循环液中补骨脂素和异补骨脂素的含量变化 ∀结果 }补骨脂中补骨脂素
和异补骨脂素在鼻粘膜的吸收符合零级动力学特征 o随着药液浓度的增加 o补骨脂素和异补骨脂素的吸
收存在饱和现象 ∀结论 }在开发补骨脂鼻腔给药制剂时 o要控制恰当的浓度 ∀
关键词 补骨脂素 异补骨脂素 在体鼻腔重循环法 鼻腔吸收
鼻腔给药 o起效快 o生物利用度高 o可达全
身性用药的目的 o已成为国际药剂药理学界研
究的热点≈t ∀我国在这方面的研究还不多 o祖
国医学虽然自古就有鼻疗的传统 o但大多数是
一些临床应用的病例总结 o作者尚未见系统的
中药鼻粘膜吸收实验研究的报道 ∀我院应用中
药补骨脂注射剂治疗哮喘取得了理想的疗
效≈u o但由于发生了过敏反应而限制了其在临
床的广泛使用 o因而尝试将其开发成鼻腔给药
制剂 o为此用大鼠鼻腔重循环法研究了补骨脂
素和异补骨脂素鼻粘膜吸收规律 ∀
1 仪器与材料
111 仪器 • ¤·¨µ¶高效液相色谱仪k°≤l
k包括 yss泵 !||y二极管阵列检测器 !usts色
谱工作站l o⁄
2 电子蠕动泵k浙江定山仪器
厂l ∀
112 药品 补骨脂素 !异补骨脂素标准品k中
国药品生物制品检定所l ~补骨脂药材 o购自广
州市药材公司 o经本院董玉珍主任中药师检定
为豆科植物 Πσοραλεα χορψλιφολια 1 的成熟果
实 ~甲醇k色谱纯l o冰醋酸k分析纯l ∀
113 动物 ≥⁄大鼠雌雄均有 okvss ? yslªo
k广东省实验动物中心l ∀
2 实验方法与结果
211 实验动物模型及实验装置 选择体重
kvss ? yslª的 ≥⁄大鼠 o戊巴比妥钠 ws°ª#
®ªp t麻醉 o然后放在平板上手术≈v ~在颈部作一
切口 o气管内插入聚乙烯套管 ~另一根管通过食
道插至鼻腔后部 o用一根聚乙烯套管同插入大
鼠鼻腔后部的管子相连接 o管子的另一端与药
液接触以使药液循环 ∀用电子蠕动泵使药液通
过鼻腔循环 o定时取样用高效液相色谱法测定
循环液中药物浓度 o以确定药物吸收量 ∀实验
装置如图 t所示 ∀
图 t 大鼠鼻腔重循环装置示意图
212 补骨脂素和异补骨脂素的测定 • ¤·¨µ¶
²√¤2°¤® ≤t{柱kv1|°° ≅ txs°°l o柱温 vx ε ~
||y二极管阵列检测器 o波长 uwx±° ~流动相 }
甲醇2t h冰醋酸kwxΒxxl o流速 }t °¯ # °¬±p t o进
样量 usΛ¯ o外标法定量 o用以上条件样品中各峰
得到满意分离 o以峰面积为纵坐标 o标准品浓度
为横坐标 o进行线性回归 o得补骨脂素回
3 广东省科委重点科技攻关资助项目
#|{y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期
归方程为 Ψ p |tuvs1y n uwuz{t1| Ξ o线性范
围为 t ∗ tssΛª# °¯ p t oρ s1|||| ~异补骨脂素
回归方程为 Ψ wwvwz1u n tzs|us qu Ξ o线性范
围为 t ∗ tssΛª# °¯ p t oρ s1|||t ∀
213 试验用药液的配制 将补骨脂粉碎过 us
目筛 o醇提水沉法提取有效部位 o加适当的增溶
剂分别配成 tΒtss otΒys otΒxs ~tΒws的水溶液 o
其对应的补骨脂素的浓度分别为 }s1vuzx o
s1xvvs os1ywzs os1zuyx°ª# °¯ p t异补骨脂素的
浓 度 分 别 为 } s1v{st o s1xzus o s1zzuz o
s1{zyz°ª# °¯ p t过滤 o备用 ∀
214 补骨脂素和异补骨脂素鼻粘膜吸收 取
不同浓度的药液 x °¯ o以 t1s °¯ #°¬±p t流速在大
鼠鼻腔循环 o于 s ox ots otx ous oux ovs ows oxs o
ys°¬±各取样 usΛ¯ o用流动相稀释至 t °¯ o用
212所述 °≤ 法测定药物含量 o将不同浓度
药液中补骨脂素的经时累积吸收量列于图 u o
异补骨脂素的经时累积吸收量列于图 v ∀
图 u 不同浓度补骨脂素的经时吸收
图 v 不同浓度异补骨脂素的经时吸收
从图 u和图 v可见 o补骨脂素和异补骨脂
素都是在开始时吸收得较快 o随着药液与鼻粘
膜接触时间的延长 o补骨脂素和异补骨脂素的
吸收都逐渐增加 ~在一定的浓度范围内 o随着浓
度的增加 o补骨脂素和异补骨脂素的鼻粘膜吸
收量亦增加 o但超过一定的浓度后 o浓度增加 o
药物在鼻粘膜的吸收反而减少 o表明补骨脂素
和异补骨脂素在鼻粘膜的吸收存在饱和现象 ∀
将补骨脂素和异补骨脂素的经时累积吸收量与
时间作线性拟合 o并作线性相关的显著性检验 o
结果列于表 t和表 u ∀
表 t 不同浓度补骨脂中补骨脂素
鼻粘膜吸收量与时间关系式
浓度 °ª# °¯ p t ν ∗ τ 相关系数
s1vuzx ν s1ssxzτ n s1svyt s1|zzxt)
s1xvvs ν s1stuxτ n s1sz{x s1|{wyt)
s1ywzs ν s1sttzτ n s1xtzw s1|{sst)
s1zuyx ν s1stwxτ n s1uuzx s1||y{tl
注 }ν | tl Π s1sstk下同l
表 u 不同浓度补骨脂中异补骨脂素
鼻粘膜吸收量与时间关系式
浓度 °ª# °¯ p t ν ∗ τ 相关系数
s1v{st ν s1sszuτ n s1sx{v s1|zs{t)
s1xzus ν s1sttwτ n s1tutt s1|yxut)
s1zzuz ν s1stw|τ n s1wttw s1|z|st)
s1{zyz ν s1stvuτ n s1vzws s1|x|ttl
从表 t和表 u的数据可见 o补骨脂素和异
补骨脂素的经时累积吸收量均与时间呈直线关
系 o表明补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的鼻
粘膜吸收符合零级动力学特征 ∀并且除 tΒtss
浓度外 o其余 v个浓度条件下 o补骨脂素和异补
骨脂素的吸收速率常数基本一致 o亦表明补骨
脂素和异补骨脂素的鼻粘膜吸收存在饱和现
象 ∀
3 讨论
311 药物的鼻粘膜吸收的研究方法通常有离
体法和在体法 ∀离体法目前使用最广泛的是一
种被称为 ¶¶¬±ª室的扩散装置≈w ~在体法又有
在体鼻腔循环法和体内血药浓度法以及药理效
应法 o药理效应法要求找到一个敏感的药理指
标 o例如胰岛素的鼻腔吸收就选用血糖的变化
来反映吸收的情况 ∀有文献指出≈x o用在体鼻
腔循环法求得的吸收速率常数同体内血药浓度
法所得数据有一定相关性 o并且该法只需测定
循环液中药物浓度变化 o避免了血样处理的麻
烦 o不仅可用于研究药物吸收机制 o还可用于研
究鼻粘膜给药的影响因素以及处方筛选 ∀所以
大鼠在体鼻腔循环法具有简便易行科学实用的
特点 o因此本实验选用该法研究补骨脂中补骨
脂素和异补骨脂素的鼻粘膜吸收规律 ∀
#s|y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期
作者在实验中发现 o大鼠禁食 uw«后进行
动物实验 o其切口处出血及鼻腔分泌液少 o造模
成功率高 ∀也有文献≈y 认为每一大鼠模型可反
复使用 o但作者在本实验中发现 o同一大鼠模型
反复使用 o使药物的吸收减少 ∀
312 药物的鼻粘膜吸收受药物的理化性质 !药
液浓度 !³ !渗透压 !粘度 !吸收促进剂等多种
因素的影响 o本实验研究了药液浓度对吸收的
影响 o结果表明补骨脂素和异补骨脂素的鼻粘
膜吸收存在饱和现象 o提示在开发补骨脂鼻腔
给药制剂时要选择恰当的浓度 ∀
313 对实验结果 o分别进行了直线拟合和指数
曲线拟合 o结果表明直线拟合较优 ∀
4 参考文献
t ∏¶¶¤¬± o ²¯ ¬¯¦¤ q±·µ¤±¤¶¤¯ ¥¶²µ³·¬²± ²© °«¼¶²¶¬ª2
°¬±¨ ¤±§ µ¨¦²¯¬±¨ q°«¤µ° ≥¦¬ot||t o{sk{l }zxs
u 谭慧淇 o肖玉英 o罗细贞 o等 q补骨脂注射液对支气管哮喘
作用的动物实验和临床观察 q广东医学 ot|{w oxkttl }u|
v ∏¶¶¤¬± o¬µ¤¬≥ o
¤º¤µ¶«¬ o¨·¤¯ q¤¶¤¯ ¥¶²µ³·¬²± ²©
°µ²³µ¤±²¯²¯ ©µ²° ⁄¬©©¨ µ¨±·⁄²¶¤ª¨ ©µ²°¶¥¼ ¤·¶¤±§⁄²ª¶q
°«¤µ° ≥¦¬ot|{s oy|ktul }twtt
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杂志 ot||{ ovvkul }y{
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y 蒋新国 o陆翔 o崔景斌 o等 q药物的油2水分配系数与鼻腔吸
收研究 q药学学报 ot||z ovukyl }wx{
t||{2sz2u|收稿
女贞子多糖免疫调节作用研究 3
阮红 吕志良 k浙江大学生物科学与技术系 杭州 vtssuzl
摘要 目的 }探讨祖国补益中药女贞子的有效物质基础和免调节机理 ∀方法 }采用四甲基偶氮唑盐
k × ×l比色分析法 o对其多糖成分进行了小鼠体内外免疫活性观察 ∀结果 }女贞子多糖对正常小鼠和
肾上腺皮质激素造型的阴虚小鼠的脾 × 淋巴细胞增殖有显著促进作用 ∀结论 }女贞子多糖对正常小鼠
及阴虚小鼠有免疫调节作用 ∀
关键词 女贞子多糖 免疫活性 淋巴细胞增殖 阴虚
女贞子有效成分为多糖及果酸等 o据报
道≈t ∗ v 具有滋阴补肝肾作用 o能增加免疫功能 o
对心血管疾病治疗及癌症防治也有一定的作
用 ∀而多糖作为当前发现的一类主要生物反应
调节剂 o在免疫调节 !抗肿瘤等方面的研究已受
到广泛重视 ∀本文观察了女贞子多糖体内外刺
激后对正常小鼠免疫细胞增殖反应的影响以及
对/阴虚0小鼠的免疫调节现象 o揭示了女贞子
多糖作用的免疫调节机理并进一步探讨中药的
阴阳平衡理论 ∀
1 材料与方法
1 q1 实验动物和材料 ≤ 雄性小鼠 oy ∗ {
周龄 o由浙江省实验动物中心提供 ~° 2tyws
培养液 o美国
≤ 公司生产 ~小牛血清 o杭州
四季青生物材料公司提供 ~ × × o≥ 产
品 ~° o≤²± o°≥ o中科院生物化学所提供 ~
|y孔培养板 o丹麦 ≤ 公司产品 ~氢化可的
松 o扬州制药厂生产 ∀
1 q2 女贞子多糖kƒ°≥l提取 将女贞子粉
碎后依次用乙醚 o丙酮浸泡去除脂溶性色素及
部分水溶性色素 o然后加水煎煮 o过滤浓缩 o加
u ∗ v倍体积的无水乙醇沉淀 o离心取沉淀 o透
析 o用 ≥ ∂ ∞液k氯仿2异戊醇 wΒtl萃取去
除杂蛋白 o冷冻干燥得棕色粉末为女贞子粗多
糖 o粗多糖经 ⁄∞∞2≥ ³¨«¤§¨ ¬ 2ux 层析和
≥ ³¨«¤§¨ ¬ 2xs 分子筛过柱 o洗脱液用硫酸2苯
酚法测定≈w ⁄w|s值分析多糖含量 o收集 ⁄w|s
峰值部分 o经冷冻干燥得女贞子多糖成分 ∀
3 国家自然科学基金资助课题 ²qv|vsstzw
#t|y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期