全 文 ：·1572· 中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第10期2008年10月
中，用氮气吹至近干时发生凝固，若离心会损失部分
农药，使回收率降低，并且色素也存在于测定液中，为
黄色，影响农药检出。而用GPC处理得到的待测液无
色澄清，色素和油脂量大大减少，并且因为从浓缩到
净化为全自动，消除了许多人为的误差，实验精密度
提高。而且操作方便，但溶剂消耗量大，成本高。
3．4杭白菊花期短，采摘后，经蒸、晒等处理，受土
壤影响和受热易降解的农药污染并不严重。
3．5 中药的农药残留问题不仅影响食用安全，而且
严重影响了中药国际化发展和中药现代化进程，发
展快速、简便、可靠、灵敏、实用的农残分析技术显得
尤为重要。GPC—GC—MS是GPC纯化系统和GC—MS
连接而成的在线装置，农残分析将更为自动化、更为
高效。
参考文献：
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柱前衍生一高效液相色谱法测定大蒜中蒜氨酸
杨毅，谢慧明，吴方睿，吴泽宇
(合肥工业大学农产品生物化工教育部工程研究中心，安徽合肥 230009)
摘要：目的建立了柱前衍生化高效液相色谱法测定大蒜中蒜氨酸的方法。方法衍生化试剂为邻苯二甲醛
(0PA)，采用WatersSymetryC18色谱柱(150mm×3．9mm)，以0．05mol／LpH7．0的磷酸缓冲液一乙腈(70l 30)
为流动相，体积流量0．8mL／min．检测波长337nm。结果蒜氨酸在0．01～O．20mg／mL与峰面积线性关系良好，
r=0．99，检测限为0．01mg／mL，平均回收率为93．9oA，RSD为2．1oA(甩=5)。结论本方法检测快速，定量准确。
可用于大蒜中蒜氨酸的定量测定。
关键词：大蒜；蒜氨酸；高效液相色谱，柱前衍生化
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章缩号：0253—2670(2008)1q一1572一03
蒜氨酸是百合科葱属植物大蒜Alliumsativum
L．中的含硫氨基酸，化学名称为．s一烯丙基一L一半胱
氨酸亚砜(S—allyl—cysteinesulfoxide)，具有抗肿瘤、
降血糖、调血脂、保护心血管系统、保肝、降低血糖等
功效。但《中国药典》和食品卫生标准均未规定蒜氨
酸的检测方法，由于大蒜及富含蒜氨酸的产品倍受
关注[1~3]，因此对蒜氨酸检测方法的研究日趋活跃。
蒜氨酸的传统测定方法有定硫法、硝酸汞测定
。法、苯踪法、薄层扫描法，这些测定方法存在专一性
差、结果准确度不高等问题；王伟、黄雪松、常军明
等[1~3]采用反相HPLC直接进样检测大蒜及其制品
中的蒜氨酸，由于选择检测波长为210nm附近，检
测结果易受其他物质的干扰“1；Arnaut等[5“]采用
液质联用(HPLC—MS)测定大蒜及其制品中的蒜氨
酸，但该法因仪器昂贵而限制其应用。本研究参考美
国药典[7]，采用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生化测定
大蒜中的蒜氨酸。
1仪器与试药
1．1 仪器与试剂：Waters2487紫外检测器，
Waters515泵，Empower色谱工作站，SH2501超声
波清洗器(上海普超)，Sigma3k离心机(德国
Sigma)，多功能食品打浆机(上海西贝乐)，万分之
一电子天平(梅特勒)。
蒜氨酸对照品(>95oA)，Fluka；蒜氨酸粉
(52％)，自制；羟甲氧胺半盐酸盐，Sigma；叔丁基硫
醇，Merck；磷酸二氢钠等均为分析纯。
收稿日期：2008-01—15
基金项目：科技部“十一五”科技支撑项目(2006BAl06A14-5)
作者简介：杨毅(1974一)．男．安徽合肥人．讲师．研究方向为农产品加工及贮藏。
Faxt(0551)2901862E—maillyxccxy2176@yahoo．corn

万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第10期2008年10月· 573·
1．2衍生化试剂的配制：准确称取28mg邻苯二甲
醛，置10mL量瓶中，1mL甲醇溶解，再加20pL叔
丁基硫醇，用0．05mol／LpH9．5磷酸缓冲液定容
至10mL。
2方法与结果
2．1 色谱条件：WatersSymmetryC18柱
(150mm×3．9mm，5肛m)l柱温：室温；检测波长：
337nm；流动相：0．05mol／LpH7．0磷酸缓冲液一
乙腈(70：30)；体积流量o．8mL／min，进样lO弘L。
2．2对照品溶液制备：精密称取蒜氨酸对照品并溶
于甲醇一水(50·50)，配制使其质量浓度为0．01～
0．2mg／mL。取对照品溶液0．1mL，加O．5mL衍生
化试剂，反应2min，进样10pL检测。
2．3供试品溶液制备：精密称取去皮蒜籽两粒(6～
9g)，置食品打浆机中，加0．01mol／L羟甲氧胺半
盐酸盐溶液50mL，高速匀浆1min，将匀浆液转移
至100mL量瓶中并以甲醇一水(50t 50)定容至刻
度。取该溶液用甲醇一水(50t 50)稀释10倍，取0．1
mL溶液，加0．5mL衍生化溶液，反应2rain后进样
10弘L检测。
2．4 标准曲线的绘制：将质量浓度分别为0．01、
0．02、0．05、0．10、0．20mg／mL蒜氨酸对照品溶液，
分别进样3次取平均值，以峰面积为纵坐标，质量浓
度为横坐标作标准曲线，得到标准回归曲线方程为：
Y=404．3X一0．402，r=0．990，可见蒜氨酸在
0．Ol～O．20mg／mL与峰面积的线性关系良好。蒜
氨酸保留时间为14．7rain，蒜氨酸对照品与样品色
谱图见图1。
2．5精密度试验：0．05mg／mL蒜氨酸对照品液衍
裔
山乙L
蒜氨j
“U
圈l蒜氨酸对照品(A)与样品(B)色谱圈
Fig．1Cbromtogramsofalllinreference
substance(A)andgarlicsample(B)
生化后，准确吸取10弘L连续5次进样，计算得峰面
积的RSD为1．3％。
2．6 重现性试验：取同一批样品(合肥产)5份，制
备成供试品溶液，衍生化后进样检测，测定峰面积，
计算蒜氨酸质量分数，得其RSD为1．82％。
2．7稳定性试验：取同一样品(合肥产)，制备供试
品溶液，衍生化后分别于0、0．5、1．0、2．0、3．0、4．0h
精密吸取10弘L进样检测，测定蒜氨酸峰面积，计算
得其RSD为1．69％。结果表明供试品溶液衍生化后
4h内稳定。
2．8 加样回收率试验：精密称取去皮蒜籽40．7g，
置食品打浆机中，加0．01mol／L羟甲氧胺半盐酸盐
溶液250mL，高速匀浆1rain，将匀浆液转移至500
mL量瓶中并以甲醇一水(50：50)溶液定容至刻度。
平行取该溶液5份各100mL，每份加入40mg蒜氨
酸。置食品打浆机中，高速匀浆1min。取该溶液用甲
醇一水(50t 50)稀释10倍，取此溶液衍生化后进样
检测，测定蒜氨酸面积计算其质量分数，结果蒜氨酸
的平均回收率为93．9％，RSD为2．12％。
2．9样品测定：取不同产地的大蒜，制备供试品溶
液，衍生化后进样10pL检测，采用外标法计算蒜氨
酸的质量分数，结果见表1。
裹l不同产地大蒜中蒜氨酸的测定结果沏一3)
TableDeterminationof lili garlic
fromvarioushabitats(拜=3)
产地 蒜氨酸／％ 产地 蒜氨酸／％
安徽合肥0．97 山东菏泽 1．08
安徽阜阳 1．15 山东泰安 1．29
安徽淮北 1．22 山东巨野 1．13
3讨论
3．1用邻苯二甲醛(OPA)加巯基试剂，30s内与
氨基酸在碱性条件下反应生成1一硫代一2一烷基异吲
哚，在紫外下其检测限可达到1×10．12mol。该法优
点是衍生反应迅速，灵敏度高，成本低，且过量衍生
试剂不干扰分离[8]。
3．2色谱条件优化：实验考察了磷酸缓冲液的pH
及磷酸缓冲液一乙腈的比例对分离效果的影响。研究
发现，随pH值的升高，蒜氨酸的出峰时间延长，峰
响应值升高，其他干扰物峰对蒜氨酸峰的干扰降低，
选择pH7．0的磷酸缓冲液分离效果较好；随乙腈比
例升高，蒜氨酸的出峰时间加快，当磷酸缓冲液一乙
腈(70：30)时既不影响分离，又可以缩短时间，较为
理想。故选0．05mol／LpH7．0磷酸缓冲液一乙腈
(70，30)为流动相。
3．3检测波长的选择：在Waters996二极管阵列

万方数据
·1574· 中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs39卷第10期2008年10月
检测器上检测发现，蒜氨酸一OPA衍生物峰的最大
吸收波长依次为205、254、337nm，但峰型和分离度
最好的为337am，故选择337rim为检测波长。
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山茱萸不同生长期鞣质的动态积累研究
李君，陈随清。
(河南中医学院药学院，河南郑州450008)
摘 要：目的研究山茱萸不同生长期鞣质的积累动态。方法采用干酪素法测定不同生长期山茱萸中鞣质的量。
结果 山茱萸中鞣质的量呈规律性变化，以青果时量较高。结论为山茱萸规范化种植及药材的质量评价提供了
一定的科学依据。
关键词：山茱萸；鞣质，动态积累
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253-2670(2008)10—1574—02
山茱萸为山茱萸科植物山茱萸Comus
彬；cinalisS eb．etZucc．的干燥果肉。该药始见于
《神农本草经》，《中国药典》2005年版一部有收载，
味酸、涩，微温，归肝肾经，有补益肝肾，涩精固脱的
功效，主治眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、遗尿尿
频、崩漏带下、大汗虚脱、内热消渴，是中医临床常用
的抗衰老药物之一[1]。山茱萸中含有多种成分，如有
机酸类、环烯醚萜苷类、鞣质类、多糖类、氨基酸、维
生素及矿质元素等，鞣质类成分为其有效成分之
一[2]。本实验采用紫外一可见分光光度法结合于酪素
法测定了不同产区、不同生长期山茱萸中鞣质的量。
I仪器与试药
Aglient8455型紫外一可见分光光度计，
HS6150D超声提取仪(昆山市超声仪器有限公司)，
BS224S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公
司)。山茱萸样品由河南西峡山茱萸GAP基地(河南
宛西制药股份有限公司)、浙江临安山茱萸GAP基
地(北京同仁堂浙江中药材有限公司)、陕西佛坪山
茱萸GAP基地(汉中汉江山茱萸科技开发有限责任
公司)提供，经河南中医学院生药教研室陈随清教授
鉴定为山茱萸科植物山茱萸C．officinalisSieb．et
Zuee．的果实。没食子酸对照品(中国药品生物制品
检定所)，干酪素(北京双旋微生物培养基制品厂)，
无水碳酸钠(天津市化学试剂三厂)。
2方法与结果
2．1对照品溶液的制备：精密称取没食子酸对照品
50mg，置100mL棕色量瓶中，加水稀释至刻度，精
密量取5mL，置50mL棕色量瓶中，用水稀释至刻
度，摇匀，即得(没食子酸0．05mg／mL)。
2．2供试品溶液的制备：取山茱萸粉末约2g，精密
称定，置250mL棕色量瓶中，加水150mL，放置过
夜，超声处理10min，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，
静置(使固体物沉淀)，滤过，弃去初滤液50mL，精
密量取续滤液20mL，置100mL棕色量瓶中，用水
稀释至刻度，摇匀，即得。
2．3 标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0．5、
1．0、2·0、3·0、4·0、5．0mL，分别置25mL棕色瓶
中，各加入磷钼钨酸试液1mL，再分别加入11．5、
收稿日期：2007．12-28
基金项目：科技部。十一五”科技支撑项目(2006BAl09800—8)
作者简介：妻～茎(1983--)-男．河南南阳人，现为河南中医学院生药学专业2005硬士研究生，主要从事中药材规范化种植及质量标准
的研究。 ‘。一
-通讯作者 陈随清Tel(0371)65680002E—mail：suiqingehen@sohu．COIRI

万方数据
柱前衍生-高效液相色谱法测定大蒜中蒜氨酸
作者： 杨毅， 谢慧明， 吴方睿， 吴泽宇
作者单位： 合肥工业大学农产品生物化工教育部工程研究中心,安徽,合肥,230009
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(10)

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