全 文 ：取斜面培养好的菌种接种于 种子培 养基
内 , 在 25 一 26 ℃摇床振荡培养 ,一` 天。
(二 ) 二级种子
将一级种子接至种子培养基 , 接 种 量为
10 沁(培养基组成及培养条件同一级种子 ) 。
三 、 发醉培养
将二级种子接人发酵培养基 , 每瓶接种量
为 10 一20 毫升 。 接种后务必摇匀 , 使其能充分
生长 ,置 25 一 2 7℃ 培养 。
接种后 3 天左右 , 蜜环菌即开始生长 , s一
1。天菌丝体可布满培养基表面 , 15 一20 天菌丝
体生长丰满旺盛 , 在暗处均可见到有明显的荧
. 光 , 以后颜色逐渐变深 (浅棕褐或棕褐 ) , 25 一 30
天呈褐黑色 , 即已老熟 , 此时即可收获 。
四 、 收获
将已成熟的发酵物取出 , 在 70 一 80 ℃ 下烤
千 , 磨成细粉 , 过 20 目筛 , 即可压片。 天麻蜜环
片每片含生药最 .0 2 , 克 。
讨 论
1
. 采用玉米粉和麦鼓 (培养基 1及 2 )作为
培养基进行蜜环菌固体发酵 , 取得了较好的效
果 。 经临床试用证明 , 固体发酵物和液体发酵
物具有同样疗效 , 且无明显副作用 。
2
. 蜜环菌固体发酵培养 , 设备简单 , 操作方
便 ,原料来源容易 , 适于在广大基层单位推广使
用 。
3
. 在蜜环菌固体发酵培养过程中 , 应注意
防止杂菌污染 , 如发现有污染的试管及培养瓶
应及时灭菌处理 。
参 考 文 欲
周杖 ; 中草药通讯 , 19 73 年第 5期 , 7 一 80 页 , 第 6 期 ,
5 1一5 8 页 。
中国医学科学院药物研究所等 : 天底 , 人民卫生出版
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T o k y习 , 4 : l一 6 6 , 19 1 1 0
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大蒜油 、 贯众 、 大青叶对流行性感冒病毒的抑制效果
连云港市卫生防疚站*
我们选用民间常用的防治流行性感冒 (以
下简称流感 )的中草药贯众 、 大青叶及大蒜油 ,
对我市分离到的新甲: 型病毒进行了鸡 胚半体
内法抑制试验 。 结果报告如下 :
材料和方法
一 、 材料
(一 ) 贯众 、 大青叶水煎荆
将贯众、 大青叶分别加水煮沸后持续 1一 2
小时 , 浓缩成 10 拓 ( I 毫升含生药 1克 ) , 经滤
纸过簿 ,将滤液水浴煮沸消毒后 ,置 4℃ 冰箱备
用 。
(二 ) 大蒜油
上海第二制药厂出品 ,用吐温 80 ( T ’w e n 8 0)
配成 .0 3多注射液 。
(三 ) 流感病毒
连防 7 7一 2 : 系 1 9 7 7 年 8 月自我市流感病
患者分离得到 , 经中国医学科学院流行病防治
研究所鉴定为新甲 : 型病毒 。
(四 ) 鸡胚
9一 10 日龄来亨鸡胚 。
(五 ) 鸡血球
. 本文由刘庆武 、 赵文彬两同志整理 .
DOI : 10. 13344 /j . mi crobi ol . chi na . 1979. 02. 008
1务浓度来亨公鸡血球 , 经生理盐 水洗涤
三次 。
二 、 方法
(一 ) 病毒鸡胚半数感染童 ( EI D劝浏 定
取一 20 ℃冰箱保存之尿囊液 , 以 H a kn 氏
液 10 倍稀释 , 每个稀释度接种鸡胚 4 个 , 每个
鸡胚尿囊腔接种 0 . 1毫升 , 置 35 ℃培养 48 小时
后 ,置 4℃冰箱过夜 ,取尿囊液做直接血凝试验 ,
用 R e d一M ue cn h 法计算 EI D , , 实验时用肉汤
配成 0 . 1毫升含 12 0曰D , 的病毒悬液应用 。
(二 ) 药液在鸡胚内抑制病毒的试验方法
1
. 先给药液后接种病毒 (下称药一毒 ) 组 :
取 0 . 1毫升药液注入尿囊腔 , 置 35 ℃培养 60 分
钟 ,然后接种 0 . 1 毫升病毒 , 35 ℃培养 48 小时 ,
置 4℃ 冰箱过液 , 取尿囊液测定血凝滴度 , 并
计算各组血凝几何平均滴度 , 用药组比对照组
血凝几何平均滴度降低 4 倍以上者为有抑制作
用 。
2
. 先接种病毒后给药 (下称毒一药 )组 : 将
0
.
1毫升病毒液注入尿囊腔 , 置 35 ℃ 培养 60 分
钟 , 再注入 0 . 1 毫升药液 , 以下步骤同 1 组 。
3
. 对照组 : ① 病毒对照组 : 只接种 .0 1毫
升病毒 ; ②药液对照组 : 注人药液 。 . 1毫升 ;③
正常对照组 : 观察存活情况 。 此三组培养条件
与方法均同 1组 。
实 验 结 果
1
. 药液对鸡胚的毒性 : 将 0 . 1 毫升经肉汤
稀释的不同浓度药液分别注 入 3 个鸡胚尿或
腔 , 置 35 ℃ 培养 4 天 , 每 日检卵一次 ,观察鸡胚
存活情况 。 经测定 ,浓度为 ” 多 _的贯众和大青
叶 , 以及 .0 3务 的大蒜油 , 对鸡胚无毒性作用 ,
鸡胚全部存活 。
.2 贯众、 大青叶 、 大蒜油在本实验所用的浓
度 , 用鸡胚半体内法对新甲 , 型病毒有明显抑制
作用 , 用药组血凝几何平均滴度比病毒对照组
降低 24 倍以上 , 结果见表 1。
裹 1 贾众 、大 , 叶 、大旅油对断甲 : 纽病 . 的抑翻作用
组街照均对平比组何药几凝用血组 别 血凝结果* 尿囊液血凝滴度
(稀释度倒数值 . * ) 几何平均滴度 度降低倍数
9己
.月,`Bf`ōO白I户七通.护`61.1口甘,且,`
:…. .二叹J,`,j5加20110一5<575 %贯众 药一毒5 0%贯众 药一毒75 %大青叶 药一毒
0
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3%大蒜油 药一毒
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。 巧%大蒜油 药一 毒
75%贯众 毒一药
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月,Jd口刀,口矛J. J矛尹/了户护`J了1二JZ,1.之一门、
病毒对照组 8 0 1 8 0
* 分子代表鸡胚血凝阳性数 , 分母表示接种数。
讨 论
筛选对流感病毒有抑制作用的中草药 , 是
导找对流感有效的非特异性防治方法的重要途
径之一 。 我们来用先给药 60 分钟 ,再感染病毒
的鸡胚半体内法以模拟预防用药 , 观察结果表
明 , . 几贯众 、大青叶 、 大蒜油在一定浓度条件下对
新甲:型病毒有较明显的抑制效果。 药物对病毒
的抑制效果与浓度成正比 。 我们对贯众还进行
了先接种病毒后给药的试验。 其抑制病毒效果
亦较明显 。 说明药液的作用不是阻止病毒对细
一 ” 表示尿班液血凝阴性 。
胞的吸附 , 很可能是药液的有效成分作用于病
毒复制过程初期的某一环节〔l] 。
大蒜油是从大蒜中提取分离得到的一种挥
发油 (亦称大蒜素 ) ,是大蒜的主要抑菌成分 。用
大蒜配成复方药防治流感取得较好 的效 果 ;[] ,
本次实验也初步证实了大蒜对流感病毒有较好
的抑制作用 。
. 考 文 欲
【l ] 郑云凯 、 江紫生 、 邹莉玲 : 掀生物学报 , 1 3 ( 2) : 1 62 一
1 6 6
,
1 9 7 3
0
【Z J 康民 : 新医药学杂志 , 1 9 76 年第 1 期 , 42 一科 页 。