全 文 ：猫豆胍镇静催眠和抗震颤麻痹作用研究
黄增琼1 ,2 ,蒋伟哲1 3 ,黄兴振1 ,黄 　敏1 ,巫世红1 ,韦永冠1
(11 广西医科大学药学院 ,广西 南宁 　530021 ; 21 右江民族医学院 药学系 ,广西 百色 　533000)
摘 　要 :目的 　研究从猫豆中提取的单体成分猫豆胍 (MD G) 的镇静催眠、抗惊厥和抗震颤麻痹作用 ,为猫豆的综
合利用奠定基础。方法 　采用小鼠自主活动法、戊巴比妥钠阈下剂量催眠法、延长戊巴比妥钠睡眠时间法、抗硝酸
士的宁致惊厥试验法和氧化震颤素致小鼠震颤试验法 ,观察 MD G 的镇静催眠、抗惊厥和抗震颤麻痹作用。结果
在 375 mg/ kg 剂量下 MD G 能减少小鼠自主活动次数和活动路程 ( P < 0105) ;500、625 mg/ kg MD G 能增加阈下
剂量戊巴比妥钠入睡小鼠只数 ( P < 0105、0101) ;625 mg/ kg MD G 能延长戊巴比妥钠睡眠时间 ( P < 0105) 和显著
延长小鼠发生惊厥的潜伏期和死亡时间 ( P < 0101) ;MD G在 375 和 625 mg/ kg 剂量时 ,对小鼠震颤潜伏期和持续
时间均无显著影响 ( P > 0105) 。结论 　猫豆中提取的 MD G 具有一定的镇静催眠和抗惊厥作用 ,但没有抗震颤麻
痹作用。
关键词 :猫豆 ; 镇静 ; 催眠 ; 震颤麻痹
中图分类号 :R286114 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0220276203
　　猫豆又名猫爪豆、狗爪豆、白藜豆、龙爪豆、狗踭
豆 ,是豆科藜豆属植物龙爪藜豆 S ti z olobi um co2
chi n2chi nensis (Lour. ) Tang et Wang 的种子[1 ] ,广
西是其最主要的产区。猫豆中含左旋多巴 ,是国内
提取左旋多巴最主要的原料药材。提取左旋多巴后
的猫豆渣饲喂猪后表现出一定的镇静、催眠作用 ,提
示猫豆中可能含有引起镇静催眠的物质。为此 ,本
实验采用经典的药理学实验方法 ,对从猫豆中分离
得到的单体成分猫豆胍 (MD G) 开展镇静催眠、抗
惊厥和抗震颤麻痹作用研究 ,为阐明猫豆的药理活
性提供可靠的实验依据。
1 　材料
111 　药材及提取物制备 :猫豆由广西邦尔植物制品
有限公司提供 ,经右江民族医学院附属医院刘春荣
副主任中药师鉴定。猫豆干燥后粉碎 ,用盐酸浸泡
渗漉提取 ,采用 732 强酸性苯乙烯系阳离子交换树
脂进行分离 ,以氨水洗脱 ,洗脱液分两部分收集。第
1 部分洗脱液主要成分为左旋多巴 ,第 2 部分洗脱
液经分离纯化得到猫豆胍 ( MD G) (经 H PL C 检
测 ,质量分数 > 90 %) 。样品临用前用蒸馏水配制 ,
并调节 p H 至中性。
112 　药品与试剂 :盐酸 ,广东省廉江市爱廉化试剂
有限公司 ,批号 06051808 ;氨水 ,广东光华化学厂有
限公司 ,批号 20051222 ;戊巴比妥钠 ,东京化成工业
株式会社 ,批号 035131 ;地西泮片 ,上海医药集团有
限公司信宜制药总厂 ,批号 070401 ;硝酸士的宁注
射液 ,上海禾丰制药有限公司 ,批号 060921 ;氧化震
颤素 ,南京德宝生化器材有限公司 ;左旋多巴片 ,广
西河丰药业有限责任公司 ,批号 070610。
113 　动物 :清洁级昆明种小鼠 ,体质量 18～22 g ,
雌雄各半 ,由广西医科大学实验动物中心提供 ,实验
动物许可证号 :SYKG 桂 2003 —0005。
114 　仪器 :Dig Behv2CPP 动物行为分析系统2条件
性位置偏爱视频分析系统 ,上海吉量软件科技有限
公司。
2 　方法
211 　对小鼠自主活动的影响[ 2 ] :取小鼠 50 只 ,随
机分成 5 组 ,即空白对照组 (蒸馏水 10 mL/ kg) ,阳
性对照组 (安定 1 mg/ kg) , MD G 大、中、小剂量
(625、500、375 mg/ kg) 组。给药前把各小鼠投入动
物行为分析系统活动箱中适应 5 min ,记录 2 min
内小鼠活动路程和穿梭次数。然后各组小鼠分别
ig 给药 1 次 ,给药 60 min 后 ,同法测定小鼠活动路
程和穿梭次数。
212 　对戊巴比妥钠阈下催眠剂量小鼠睡眠的影
响[3 ] :动物分组及给药方法同 211 项。给药 30 min
后 ,各组小鼠分别 ip 30 mg/ kg 戊巴比妥钠 ,以注射
戊巴比妥钠后 15 min 内小鼠翻正反射消失达 1
·672· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
3 收稿日期 :2008205212
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 ( 30760309) ; 广西科学基金项目 (桂科自 0832014Z) ; 广西研究生教育创新计划项目
(2007105981007M15)
作者简介 :黄增琼 (1979 —) ,男 (壮族) ,广西百色市人 ,讲师 ,硕士研究生 ,研究方向为新药研究与开发。
Tel : (0771) 5358955 　E2mail : huangzengqiong @163. com3 通讯作者　蒋伟哲　Tel : (0771) 5358955 　Fax : (0771) 5358269 　E2mail : jiangweizhe6812 @yahoo. com. cn
min 以上为入睡指标 ,记录各组入睡小鼠的只数及
睡眠时间。
213 　延长戊巴比妥钠睡眠时间的作用[3 ] :动物分组
及给药方法同 211 项。给药 60 min 后 ,各组小鼠分
别 ip 戊巴比妥钠 40 mg/ kg ,以注射戊巴比妥钠后
15 min 内小鼠翻正反射消失时间为睡眠潜伏期 ,以
动物翻正反射消失至恢复为睡眠持续时间 ,观察并
记录各组小鼠睡眠潜伏期和睡眠持续时间。
214 　对硝酸士的宁致小鼠惊厥作用的影响[3 ,4 ] :动
物分组及给药方法同 211 项。给药 60 min 后 ,各组
小鼠分别 sc 硝酸士的宁 1. 5 mg/ kg ,记录出现惊厥
反应的时间、动物数和死亡时间。
215 　对氧化震颤素致小鼠震颤作用的影响[3 ] :取小
鼠 40 只 ,随机分成 4 组 ,即空白对照组 (蒸馏水 10
mL/ kg) ,阳性对照组 (左旋多巴片 125 mg/ kg) ,
MD G 大、小剂量 (625、375 mg/ kg) 组。各组小鼠
连续 ig 给药 5 d ,末次给药后 1 h ,各组小鼠分别 ip
氧化震颤素 0. 15 mg/ kg ,记录小鼠发生震颤的潜伏
期和持续时间。
216 　统计学处理 :计量资料以 x ±s 表示 ,组间比
较采用 t 检验。计数资料用χ2检验进行统计分析。
3 　结果
311 　对小鼠自主活动的影响 : MD G 小剂量可减少
小鼠活动路程和穿梭次数 ,与空白对照组比较差异
显著 ( P < 0105) ,表明 MD G 小剂量对小鼠自主活
动有抑制作用。结果见表 1。
表 1 　MDG对小鼠自主活动的影响 ( x ±s , n = 10)
Table 1 　Effects of MDG on autonomic mobility
in mice ( x ±s , n = 10)
组　别
剂量/
(mg·kg - 1 )
给药前
活动路程/ mm 穿梭次数/次
给药后
活动路程/ mm 穿梭次数/次
空白对照 - 5 590176 ±1 528171 519 ±311 4 583143 ±1 758122 411 ±310 3
安定 　1 4 840186 ±1 330120 510 ±313 1 423142 ± 993151 3 3014 ±013 3 3
MDG 375 4 908191 ± 916152 417 ±313 3 433123 ± 827193 3 113 ±019 3
500 6 391124 ±1 280114 712 ±411 4 019105 ±1 305114 312 ±119
625 4 638142 ±1 134116 319 ±214 4 181136 ±1 943130 314 ±113
　　与空白对照组比较 : 3 P < 0105 　3 3 P < 0101
　　3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 vs blank cont rol group
312 　对戊巴比妥钠阈下催眠剂量小鼠睡眠的影响 :
MD G 中剂量和大剂量可增加入睡小鼠只数 ,与空
白对照组比较差异显著 ( P < 0105、0101) ,表明
MD G 中剂量和大剂量具有催眠作用。结果见表 2。
313 　延长戊巴比妥钠睡眠时间的作用 : MD G 各剂
量组对小鼠入睡潜伏期无显著影响 ,但大剂量组能
延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间 ,与空白对照组比较
差异显著 ( P < 0105) ,表明 MD G 大剂量有一定催
眠作用。结果见表 2。
表 2 　MDG对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量和戊巴比妥钠
睡眠时间的影响 ( x ±s , n = 10)
Table 2 　Effects of MDG on sub2threshold hypnotic
dosage and sleep time2prolonging test with
pentobarbital sodium in mice ( x ±s , n = 10)
组　别 剂量/ (mg ·kg - 1 ) 入睡动物数/ 只 入睡率/ % 潜伏期/ min 睡眠时间/ min
空白对照 - 1 10 419 ±116 4113 ±1717
安定 　1 7 70 3 3 318 ±014 12311 ±1610 3
MDG 375 4 40 418 ±217 6617 ±1916
500 5 50 3 615 ±311 4315 ±1316
625 7 70 3 3 411 ±018 7817 ±1118 3
　　与空白对照组比较 : 3 P < 0105 　3 3 P < 0101
　　3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 vs blank cont rol group
314 　对硝酸士的宁致小鼠惊厥作用的影响 : MD G
各剂量组均不能减少发生惊厥小鼠数量 ,但大剂量
组可延长小鼠出现惊厥反应的时间和死亡时间 ,与
空白对照组比较差异显著 ( P < 0101) ,表明 MD G
大剂量可延缓硝酸士的宁致惊厥作用。结果
见表 3。
315 　对氧化震颤素致小鼠震颤作用的影响 : MD G
大、小剂量对小鼠产生震颤的潜伏期和持续时间均
无显著影响 ,与空白对照组比较差异不显著 ( P >
0105) 。表明在实验剂量下 ,MD G 不能对抗氧化震
颤素致小鼠肌肉震颤作用。结果见表 4。
表 3 　MDG对硝酸士的宁致惊厥作用的影响 ( x ±s , n = 10)
Table 3 　Effects of MDG on anti2convulsion induced
by strychnine nitrate in mice ( x ±s , n = 10)
组 　别 剂量/ (mg ·kg - 1 ) 惊厥反应时间/ min 死亡时间/ min 惊厥数/ 只 惊厥率 %
空白对照 - 419 ±017 314 ±311 10 100
安定 　1 810 ±118 3 3 1414 ±112 3 3 　7 70
MDG 375 510 ±113 212 ±113 10 100
500 417 ±019 217 ±118 10 100
625 615 ±112 3 3 818 ±312 3 3 10 100
　　与空白对照组比较 : 3 3 P < 01 01
　　3 3 P < 0101 vs blank cont rol group
表 4 　MDG对氧化震颤素致小鼠震颤作用的影响
( x ±s , n = 10)
Table 4 　Effects of MDG on paralysis agitans induced
by oxotremorine in mice ( x ±s , n = 10)
组　别 剂量/ (mg ·kg - 1) 潜伏期/ min 持续时间/ min
空白对照 - 216 ±81 3 3412 ± 711
左旋多巴 125 314 ±01 4 3 2816 ± 412 3
MD G 375 218 ±21 7 3315 ± 618
625 215 ±01 8 3517 ±1118
　　与空白对照组比较 : 3 P < 0105
　　3 P < 01 05 vs blank cont rol group
4 　讨论
　　猫豆为广西特色药食两用资源植物 ,其主要药
·772·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
效成分为左旋多巴。从猫豆中提取左旋多巴已经在
广西实现工业化生产。为拓展猫豆的用途 ,综合利
用猫豆资源 ,本实验对猫豆中的单体成分猫豆胍
(MD G) 进行了药理活性研究。研究结果表明 ,
MD G 在较低剂量时 ,能抑制小鼠自主活动 ,增大剂
量可协同戊巴比妥钠的镇静催眠作用 ;大剂量时虽
不能减少硝酸士的宁致小鼠惊厥的动物数和死亡动
物数 ,但可延长惊厥反应发生的时间和死亡时间 ;在
实验剂量范围内 , MD G 对氧化震颤素所致小鼠震
颤没有明显的对抗作用 ,不能延长小鼠发生震颤的
潜伏期 ,对震颤持续时间影响不显著 ,表明 MD G 在
该实验剂量时 ,没有抗震颤麻痹作用。
综上所述 ,猫豆中存在一种具有镇静催眠的化
学成分 ,但活性较弱 ,经结构修饰有继续研究开发的
价值 ,其镇静催眠作用机制及在其他方面的药理作
用有待进一步深入研究。
参考文献 :
[ 1 ] 　江苏新医学院1 中药大辞典 [ M ]1 上册 1 上海 :上海科学技
术出版社 , 19771
[ 2 ] 　石世德 , 周民伟 , 李建军 , 等1 安可梦口服液镇静催眠作用
的实验研究 [J ]1 广东药学院学报 , 2004 , 20 (6) : 65426561
[ 3 ] 　徐叔云 , 卞如濂 , 陈　修1 药理实验方法学 [ M]1 北京 :人民
卫生出版社 , 20021
[ 4 ] 　陈　奇1 中药药理研究方法学 [ M ]1 北京 :人民卫生出版社 ,
20001
土槿乙酸酰胺对 HeLa 细胞周期的影响
王 　辉1 ,雷志勇2 ,陈 　虹2 3 ,王 　贺3 ,王 　敏1
(11 武警宁夏总队医院 外一科 ,宁夏 银川 　750004 ; 21 武警医学院 生药教研室 ,天津 　300162 ;
31 河北医科大学 寄生虫教研室 ,河北 石家庄 　050017)
摘 　要 :目的 　通过研究土槿乙酸衍生物土槿乙酸酰胺 ( PB2L Y) 对 HeLa 细胞周期的影响 ,探讨 PB2L Y 的抗肿
瘤作用机制。方法 　采用流式细胞术检测 PB2L Y 对 HeLa 细胞周期的影响 ;采用 RT2PCR 法检测 PB2L Y 对 He2
La 细胞周期相关基因 p53 和 p21 mRNA 表达的影响。结果 　PB2L Y可明显减少 G1期的 HeLa 细胞比例 ,明显增
加 G2 + M 期细胞的比例 ,上调 p53 基因的表达 ,同时协同下调 p21 基因的表达。结论 　PB2L Y 可通过增加细胞
周期相关基因 p53 基因的表达和减少 p21 基因的表达 ,使 HeLa 细胞的周期阻断在 G2 + M 期 ,从而阻滞 HeLa 细
胞的生长。
关键词 :土槿乙酸酰胺 ; 细胞周期 ; HeLa 细胞
中图分类号 :R286191 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0220278202
　　土槿乙酸 (p seudolaric acid B , PLAB) 的抗肿
瘤作用近年来引起人们的高度关注 ,最近研究表明
土槿乙酸及其衍生物可破坏肿瘤细胞的微管结构 ,
抑制微管的聚合和解聚 ,阻滞肿瘤细胞周期 ,促进肿
瘤细胞发生凋亡[ 1～3 ] 。土槿乙酸衍生物土槿乙酸酰
胺 (182amide2p seudolaric acid B , PB2L Y) 是将土
槿乙酸与具有组蛋白转移乙酰化酶抑制活性的基因
偶联得到的新颖化合物 (图 1) ,对 HeLa 细胞有很
强的抑制作用。本实验旨在初步探讨 PB2L Y 对
HeLa 细胞周期的影响及其作用机制 ,为 PB2L Y 作
为抗肿瘤新药提供理论依据。
1 　材料与方法
111 　材料 : PB2L Y (质量分数 > 95 % ,由天津武警 图 1 　PB2LY 的化学结构式Fig. 1 　Chemical structrue of PB2LY医学院生药教研室提供) ;人宫颈癌 HeLa 细胞( 中国医学科学院药物研究所药理室提供) ; RMPI 1640培养基 ( Gibeco 公司) ; Trizol ( Invit rogen 公司) ;R T2PCR 两步法试剂盒 [宝生物工程 (大连) 有限公司 ] ; EPICS2XL 型流式细胞仪 ( Com1ter Epics 公
·872· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
3 收稿日期 :2008205209
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30171108) ; 武警总部课题 ( W KH200527)
作者简介 :王　辉 (1981 —) ,男 ,安徽阜阳市人 ,硕士 ,研究方向为抗肿瘤药理学。
Tel : 13895640605 　E2mail : wanghui2178324 @163. com3 通讯作者　陈　虹　Tel : (022) 60578193 　E2mail : chenhongtian06 @yahoo. com