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蜜制紫菀饮片的质量标准研究①
李国文 1 , 程雪梅 2 , 吴　 1, 2 , 郑善松 1 , 王峥涛 1, 2*
( 1. 上海中医药大学中药研究所 中药标准化教育部重点实验室 ,上海　 201203;
2. 上海中药标准化研究中心 ,上海　 201203)
　　紫菀为菊科植物紫菀 Aster tataricus L. f. 的
干燥根及根茎 ,具有润肺下气、止咳祛痰之功效 ,临
床用于治疗气逆咳嗽 ,痰吐不利 ,肺虚久咳 ,痰中带
血等症 [1 ]。紫菀中的紫菀酮是其祛痰镇咳作用的有
效成分之一 [2 ]。紫菀药材中紫菀酮的测定已有报
道 [3, 4 ]。但是紫菀在临床应用上以蜜制饮片为主 ,因
此 ,本实验采用 TLC法和 HPLC法对蜜制紫菀饮
片进行质量标准研究。
1　仪器与试药
　　 Agilent 1100型高效液相色谱仪 (自动进样器 ,
四元泵 ,柱温箱 , DAD检测器 ) ( Agilent ,美国 ) ,
KQ250DB数控超声波清洗仪 (昆山市超声仪器有
限公司 ) , BP211D型电子天平 ( Sa to rius Co. Ltd. ,
德国 ) , Autosampler 3自动点样仪、 Repro star 3薄
层色谱摄像仪 、 Plate HeaterⅢ薄层色谱加热显色
仪、双槽展开缸 (瑞士 CAM AG)。
紫菀酮、表木栓醇对照品均由上海中药标准化
研究中心提供 (定性鉴别用质量分数大于 95% ,定
量测定用质量分数大于 98% ) ,硅胶 G( DC-Fertig-
plat ten SIL G-25, M ACHEREY-NAGEL, MN ) ,
高效液相色谱所用的乙腈为色谱纯 ,水为双蒸馏水 ,
其余试剂均为分析纯。
蜜制紫菀饮片样品共 11批 ,购自不同产地 ,由
上海中药标准化研究中心吴立宏博士鉴定。
2　紫菀酮、表木栓醇的薄层色谱鉴别
2. 1　对照品溶液制备:称取紫菀酮、表木栓醇对照
品适量 ,加氯仿制成 1 mg /mL的溶液 ,作为对照品
溶液。
2. 2　供试品溶液制备: 取紫菀粉末 1 g ,加氯仿 25
mL,超声处理 30 min,滤过 ,滤液挥干 ,残渣加氯仿
1 mL使溶解 ,作为供试品溶液。
2. 3　薄层色谱分析: 照薄层色谱法 (《中国药典》
2005年版一部附录Ⅵ B)试验 ,吸取上述两种溶液各
3μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以石油醚
( 60～ 90℃ ) -醋酸乙酯 ( 9∶ 1)为展开剂 ,展开 ,取
出 ,晾干。喷以 10%硫酸乙醇溶液 ,于 105℃加热直
至斑点清晰。置紫外灯 ( 366 nm )和可见光下检视 ,
结果供试品溶液色谱中 ,在与对照品色谱相应的位
置上 ,显相同颜色的斑点。见图 1。
3　紫菀酮的 HPLC法测定
3. 1　色谱条件及系统适应性: Polaris C18色谱柱
( 250 mm × 4. 6 mm , 5μm); 流动相: 乙腈 -水
( 98∶ 2) ; 检测波长: 200 nm;体积流量: 1. 0 mL /
min ;柱温: 40℃ ;进样量: 20μL。 按紫菀酮计算理
论板数应不低于 2 000。 见图 2。
3. 2　对照品溶液的制备:取紫菀酮对照品 5. 5 mg,
精密称定 ,置 50 mL量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至
刻度 ,摇匀 ,即得。
3. 3　供试品溶液的制备: 取样品 1. 0 g ,精密称定 ,
置 50 mL具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇 25 mL,称
定质量 , 40℃温浸 1 h后 ,超声处理 15 min,放冷 ,
再用甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,用微孔滤膜 ( 0. 45
μm)滤过 ,取续滤液 ,即得 。
3. 4　标准曲线的绘制: 取紫菀酮对照品溶液 0. 5、
1、 3、 5、 10、 20、 30、 40、 50μL进样 ,测定。以进样质量
为横坐标 ,峰面积为纵坐标进行回归 ,得回归方程:
Y= 1 070. 1X - 5. 092 4, r= 0. 999 9,结果表明紫菀
酮在 0. 055～ 5. 5μg与峰面积呈良好的线性关系。
·220· 中草药　 Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 39卷第 2期 2008年 2月
① 收稿日期: 2007-05-15基金项目: “十五”国家科技攻关项目 (2001BA701A55-43) ;上海市科委项目 ( 05DZ19742)
* 通讯作者　王峥涛　 Tel: ( 021) 51322507　 Fax: ( 021) 51322519　 E-mail: w angzh t@ shutcm. edu. cn
1～ 11为购自于不同产地的饮片　 S1-紫菀酮　 S2-表木栓醇
1— 11-samples obtained f rom various h abi tat s
S1-sh ionone　 S2-ep i-friedelanol
图 1　蜜制紫菀饮片在 366 nm(A)和可见光 (B)下的
TLC图谱
Fig. 1　 TLC Chromatograms of Radix et Rhizoma
Asteris at UV 366 nm (A) and Vis (B)
t /min
1-紫菀酮
1-shionone
图 2　紫菀酮对照品 (A)和蜜制紫菀饮片 ( B)的
HPLC色谱图
Fig. 2　HPLCChromatograms of sh ionone ref erence
substance (A) and Radix et Rhizoma Asteris (B)
3. 5　精密度试验: 紫菀酮对照品溶液 ,分别重复进
样 6次 ,进行 HPLC分析 ,以紫菀酮的峰面积计算
得 RSD为 0. 15%。
3. 6　稳定性试验: 取 11号药材样品 1 g,制备供试品
溶液 ,分别在 0、 1、 2、 4、 6、 8、 12、 18、 24、 48、 72、 96 h进
行测定 ,以紫菀酮的质量分数计算 , RSD为 1. 60% ,
说明供试品溶液中的紫菀酮在 96 h内稳定。
3. 7　重现性试验: 取 11号药材样品 1. 25 g,共 6
份 ,精密称定 ,制备供试品溶液 ,进行 HPLC分析 ,紫
菀酮质量分数平均值为 0. 196 0% , RSD为 2. 27%。
3. 8　加样回收率试验: 取 11号的药材样品约 0. 5
g ,精密称定 ,分别加入 0. 385、 1. 1、 2. 2 mg紫菀酮
对照品 ,制备供试品溶液 ,进行 HPLC分析 ,计算得
平均回收率为 98. 09% , RSD为 2. 39% (n= 9)。
3. 9　样品的测定:精密吸取紫菀酮对照品溶液和供
试品溶液各 20μL,进行 HPLC分析 ,按外标法计算
质量分数 ,结果见表 1。
表 1　蜜制紫菀饮片中紫菀酮的测定结果 ( n= 2)
Table 1　 Determination of shionone in commerc ial
Rad ix et Rhizoma Asteris (n= 2)
样品编号 样品来源 学　名 紫菀酮 /%
1 四川成都　　 橐吾 Ligularia spp. —
2 辽宁锦州　　 　　L . s pp —
3 福建厦门　　 紫苑 Aster ta taricus L. f. 0. 148 59
4 新疆乌鲁木齐 　　 A. tatar icus L. f . 0. 090 31
5 江苏南京　　 　　 A. tatar icus L. f . 0. 174 86
6 河南郑州　　 　　 A. tatar icus L. f . 0. 083 23
7 北京　　　　 　　 A. tatar icus L. f . 0. 134 51
8 山东青岛　　 　　 A. tatar icus L. f . 0. 182 07
9 山东济南　　 　　 A. tatar icus L. f . 0. 153 12
10 甘肃敦煌　　 　　 A. tatar icus L. f . 0. 164 26
11 上海　　　　 　　 A. tatar icus L. f . 0. 201 00
3　讨论
　　根据薄层色谱试验结果可以看出: 来源于四川
成都和辽宁锦州的样品不含有紫菀酮 ,这与 HPLC
法试验结果是一致的。在我国许多地区民间将菊科
橐吾属多种植物的根及根茎作紫菀使用 ,统称山紫
菀 [5 ] ,四川所用山紫菀类药材的原植物主要是鹿蹄
橐吾 Ligularia hodgsonii Hook.、川鄂橐吾 L .
wilsoniana ( Hems1. ) Greenm.、狭苞橐吾 L . mter-
media Nakai、毛苞橐吾 L . sibirica var. araneasa,
其次是离舌橐吾 L . veitchiana;东北地区所用山紫
菀原植物主要为蹄叶橐吾 L . f ischeri。
　　部分山紫菀类药材含大量吡咯里西啶生物碱 ,这
类生物碱对肝脏、肺及肾脏具明显毒性。因此预试验对
这两个样品是否含有吡咯里西啶生物碱进行了初步研
究 ,取来源于四川成都和辽宁锦州的样品 3 g ,用 80%
乙醇提取 1 h,减压回收溶剂至干 ,用 2. 5%盐酸溶解 ,
滤过 ,滤液用氨水调 pH值至 10～ 11,然后用氯仿萃
取 ,即得样品溶液 ,用氯仿-甲醇 ( 15∶ 1)展开 ,改良碘
化铋钾显色 ,结果表明来源于四川成都的样品中的生
物碱斑点清晰 ,来源于辽宁锦州的样品则未检视到。鹿
蹄橐吾 L . hod gsonii Hook.含大量吡咯里西啶生物
·221·中草药　 Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 39卷第 2期 2008年 2月
碱 [6 ] ,而蹄叶橐吾 L . f ischeri ( Ledeb. ) Turcz.的生
物碱含的量低 ,较难检视。
　　从结果可以看出 ,不同来源的蜜紫菀中紫菀酮的
量有一定的区别 , 9种蜜紫菀中以上海、南京、青岛、
敦煌含紫菀酮的量较高 ,北京、济南、厦门稍差 ,河南、
新疆较差 ,这可能和炮制工艺不同有关 ,因此对蜜制
紫菀的炮制工艺进行规范化研究十分必要。
参考文献:
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RP-HPLC法测定复方柳菊片中蒙花苷①
付辉政1 ,万凯化2 ,刘兰祥 1*
( 1. 江西中医学院 ,江西 南昌 330006; 2. 江西省食品药品检验所 ,江西 南昌 330046)
　　复方柳菊片由旱柳叶、野菊花、白花蛇舌草 3味
药组成 ,具有清热解毒之功效 ,用于肺结核病。 该药
收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方
制剂第 15册 ,但是质量标准中只有野菊花和熊果酸
的薄层色谱法 ,但无定量测定。 因此 ,本实验以野菊
花的有效成分蒙花苷为指标 ,采用 HPLC法测定复
方柳菊片中的蒙花苷。 经方法学考察及阴性对照实
验表明方法专属性强 ,处方中其他成分对蒙花苷的
测定无干扰 ,且方法简便、快速、准确、重现性好。
1　仪器与试药
　　 Agi lent1100高效液相色谱仪 ,包括 VWD检测
器 ,自动进样器 , Agilent1100化学工作站 (美国安捷
伦科技有限公司 ) ; Sar to rius电子天平 ; KQ3200超
声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司 )。
　　甲醇为色谱纯 ;水为二次蒸馏水 ,其他试剂均为
分析纯。蒙花苷对照品批号 111528-200504,购于中
国药品生物制品检定所 ;复方柳菊片和缺菊花的阴
性对照样品由江西国药有限责任公司提供。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱性: Diamonsil C18 ( 250 mm×
4. 6 mm , 5μm);流动相: 甲醇 -4%冰醋酸溶 ( 49∶
51) ;体积流量: 1. 0 mL /min。 理论板数以蒙花苷计
算不得低于 3 000。在以上色谱条件下 ,复方柳菊片
中蒙花苷与其他组分的色谱峰分离度良好。见图 1。
2. 2　供试品溶液的制备: 取质量差异项下的本品 ,
除去薄膜衣 ,研细 ,取约 0. 2 g ,精密称定 ,置 50 mL
t /min
* -蒙花苷
* -buddleoglucoside
图 1　蒙花苷对照品 ( A)、复方柳菊片 (B)和阴性
样品 (C)的 HPLC图
Fig. 1　 HPLC Chromatogrms of buddleoglucoside
reference substance (A) , Compound Liuju
Tablets (B) , and negative sample (C)
量瓶中 ,加甲醇 45 mL,超声处理 (功率 250 W频率
25 kHz) 30 min,放冷 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,取
续滤液 ,即得。
2. 3　阴性对照溶液的制备:按照供试品溶液的制备
方法制备阴性对照溶液。
2. 4　对照品溶液的制备: 精密称取蒙花苷对照品
11. 68 mg ,置 100 mL量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至
刻度 ,摇匀。精密量取 2 m L置 10 mL量瓶中 ,加甲
醇稀释至刻度 ,摇匀 ,作为对照品溶液。
2. 5　线性关系考察: 精密吸取上述对照品溶液 2、
10、 16、 20、 24μL,注入液相色谱仪 ,测定峰面积值。
以进样量为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,得回归方程为
Y= 1 849. 1X+ 5. 657 8, r= 0. 999 7,表明蒙花苷在
0. 046 72～ 0. 560 64μg与峰面积呈良好的线性关系。
2. 6　精密度试验: 精密吸取供试品溶液 (批号
·222· 中草药　 Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 39卷第 2期 2008年 2月
① 收稿日期: 2007-05-08作者简介:付辉政 ( 1978— ) ,男 ,江西安福人 ,中药师 ,江西中医学院在读硕士研究生 ,研究方向为天然药物活性成分研究。
E-mai l: fhzfh z620@ sohu. com