全 文 ：薄荷醇的止痒作用及对瘙痒相关因子的影响
王 晖1 ,沈非沉1 ,陈 垦2 , 梁 庆1 , 唐晓峰1*
( 11 广东药学院 中药药理学教研室,广东 广州 510006; 21 广东药学院护理学院,广东 广州 510310)
摘 要: 目的 探讨薄荷醇的止痒作用及其可能的作用机制。方法 小鼠 sc 01 05% 组胺+ 01 02% 4-氨基吡啶
( 4-AP) 溶液制备瘙痒模型,于注射造模药物前分别于待注射部位涂抹薄荷醇,观察小鼠的搔抓潜伏期和 30 min
内搔抓次数, 并测定血清中组胺、C-干扰素 ( IFN-C) 和白细胞介素-6 ( IL-6) 的量。结果 与模型组相比, 薄荷醇
中、高剂量组和 30 min 内搔抓次数均显著减少 ( P< 01 05、01 01) ,而搔抓潜伏期均有明显增加 ( P< 01 05)。薄荷醇
低、中、高剂量组小鼠血清中组胺的水平均显著降低 ( P< 01 05、01 01) ,薄荷醇中、高剂量组小鼠血清中 IL-6 的水平
显著减少 ( P< 01 05) , 但薄荷醇各组对 IFN-C均无显著的影响 (P > 01 05)。病理检查显示模型组出现大量炎细胞
的增生、浸润,薄荷醇治疗组 (低、中、高剂量组) 也可观测到少量炎细胞, 但均少于模型组。结论 薄荷醇具显著
的止痒作用, 降低瘙痒小鼠血清中组胺和 IL-6 的量是其作用机制之一。
关键词: 薄荷醇; 瘙痒; 组胺; IL-6; IFN-C
中图分类号: R2851 5 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2009) 10-1617-03
薄荷醇又称薄荷脑、薄荷冰,多年来其一直是多
种常用外用止痒药物的主要成分。但薄荷醇单用时
的明确止痒效果和具体的作用机制近年来少见于文
献报道。国外文献主要围绕其致冷感受体 TRPM8
进行研究,但薄荷醇本身对局部组织的直接影响及
其对机体内与瘙痒相关的细胞因子如组胺、C-干扰
素 ( IFN-C) 和白细胞介素-6 ( IL-6) 等的影响尚不
明确。本实验采用复合因素致瘙痒模型[ 1]来观察薄
荷醇单用时对皮肤感受性瘙痒的止痒作用,观察其
对局部组织的作用, 运用血清 ELISA 方法观察其
对几种与瘙痒相关的细胞因子的影响。
1 材料与方法
11 1 药品与试剂:磷酸组胺, 上海东风生化技术有
限公司; 4-氨基吡啶 ( 4-AP) , M er ck 公司; 薄荷醇
(质量分数\991 5) , 上海香料厂; 醋酸曲安奈德, 上
海医药(集团)有限公司, 批号 060405; 小鼠血清组
胺 ELISA 检测试剂盒和小鼠血清 IFN-CELISA 检
测试剂盒,均为北京天来生物医学科技有限公司;小
鼠血清 IL-6 ELISA 检测试剂盒, 晶美生物工程有
限公司;其他试剂均为分析纯。
11 2 实验仪器: 透明小鼠用观察箱,自制;切片机,
上海先申医教仪器厂; 光学显微镜, 日本 Nikon 公
司;数码摄像机,日本 JVC 公司。
11 3 实验动物: 昆明种小鼠, SPF 级, 体质量 18~
22 g, 雌雄兼用,由广东医学院实验动物中心提供,
动物合格证编号: 2007A035。
11 4 实验分组、造模及给药方案:小鼠随机分为 5
组,分别为模型组,薄荷醇高、中、低剂量 (质量分数
4%、2%、1%) 组, 阳性对照 ( 01 05% 醋酸曲安奈
德) 组。采用小鼠复合瘙痒模型[ 1] , 各组小鼠颈背
部脱毛后, sc 0. 05% 组胺+ 0. 02% 4-A P 混合溶液
(生理盐水配制) ,每只 100 LL 造模。注射造模药物
之前在注射部位周围涂抹治疗药物,薄荷醇及阳性药
均使用 70% 乙醇配制,模型组涂抹 70% 乙醇。
11 5 观察指标:观察造模后小鼠的搔抓潜伏期、30
min 内搔抓次数, 按试剂盒方法测定血清中组胺、
IFN-C、IL-6 的水平,观察注射部位周围真皮组织的
变化 ( HE 染色)。
11 6 统计学处理: 数据采用 x ? s 表示, 用 SPSS
111 0 统计软件进行 t或 tc 检验。
2 结果
21 1 行为学实验结果:与模型组相比, 薄荷醇中、高
剂量组 30 min 内搔抓次数均显著减少 ( P< 01 05、
01 01) ,薄荷醇中、高剂量组和阳性药组对搔抓潜伏
期有明显延长作用 ( P< 01 05)。结果见表 1。
21 2 血清 ELISA 检测结果:按血清 ELISA 检测
试剂盒说明书要求分别检测小鼠血清中组胺、
IFN-C、IL-6 的水平,结果发现薄荷醇低、中、高剂量
组及阳性药组小鼠血清中组胺的质量浓度均显著降
低 ( P< 01 05、01 01) , 薄荷醇中、高剂量组小鼠血清
#1617#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 10 期 2009年 10 月
* 收稿日期: 2008-12-07 基金项目:广东省科技计划项目 ( 2007A060305006) ; 广州市科技计划项目 ( 2007J1-C0281)作者简介:王 晖,男,教授,硕士生导师,研究方向为皮肤黏膜药理学和定量药理学。
Tel: ( 020) 39352180 E- mai l: gdw anghui2006@ 126. com
中 IL-6的质量浓度显著减少 ( P< 01 05) , 但薄荷醇
各组和阳性组对 IFN-C均无显著的影响 ( P >
01 05)。结果见表 2。
21 3 HE 染色镜下观察结果:在薄荷醇止痒作用的
研究中,病理检查显示模型组出现大量炎细胞的增
生、浸润,薄荷醇低、中、高 3个剂量组和阳性药组也
表 1 薄荷醇对瘙痒小鼠搔抓行为学的影响 ( x? s)
Table 1 Effect of menthol on scratching behavior
in pruritus of mice (x ? s)
组别 质量分数/% 动物/只 30 min 内搔抓次数 搔抓潜伏期/ s
模型 - 10 281 50 ? 81 40 841 70? 451 01
薄荷醇 1 9 211 78 ? 101 31 1461 33? 711 42
2 10 191 32 ? 61 49* 1951 90? 991 21*
4 10 151 20 ? 51 73* * 2221 31? 1031 19*
阳性药 01 05 9 131 70 ? 61 22* * 2051 10? 951 71*
与模型组比较: * P < 01 05 * * P < 01 01
* P < 01 05 * * P< 01 01 v s m odel group
可观察到少量炎细胞, 但均明显少于模型组。渗出
的炎细胞以中性粒细胞为主, 结果见图 1。结合行
为学观察的实验结果, 可以推测 3个薄荷醇治疗组
和阳性药组对动物模型出现的急性炎症反应有一定
抑制作用。
表 2 薄荷醇对瘙痒小鼠血清细胞因子的影响 ( x ? s)
Table 2 Effect of menthol on serum cytokines
in pruritus of mice (x ? s)
组别 质量分数/
%
动物/
只
组胺 /
( ng# mL- 1)
IFN-C/
( pg # mL- 1 )
IL-6/
( pg# mL- 1)
模型 - 10 01 27 ? 01 07 11 49 ? 01 72 181 34 ? 51 06
薄荷醇 1 9 01 19 ? 01 08* 11 62 ? 01 54 161 72 ? 31 23
2 10 01 18 ? 01 11* 11 83 ? 01 45 141 16 ? 31 54*
4 10 01 16 ? 01 05* * 11 96 ? 01 78 131 19 ? 41 06*
阳性药 01 05 9 01 20 ? 01 10* 11 88 ? 01 56 141 87 ? 21 51
与模型组比较: * P< 0105 * * P< 01 01
* P< 01 05 * * P < 01 01 v s model gr ou p
图 1 各组小鼠真皮组织 HE 染色结果
Fig. 1 Results of HE stain of skin tissue from mice in every group
3 讨论
大多数皮肤病都可产生瘙痒症状,常见的有:过
敏性皮肤病 (湿疹、接触性皮炎)、特应性皮炎、疱类
皮肤病 (类天疱疮、疱疹样皮炎)、真菌性皮肤病、扁
平苔藓、虱病、疥疮、日光性皮炎、干燥症、皮肤淋巴
瘤、银屑病等。皮肤瘙痒的发生可能是一个多因素
相互作用的结果, 相同的致痒介质在不同疾病瘙痒
的发生中发挥的作用可能不同, 在同一疾病发展的
不同阶段中可能有不同的介质参与瘙痒的发生 [ 2]。
薄荷醇为唇形科植物薄荷的提取物, 具有明显
的抗炎、镇痛、止痒、局麻、促透、降温等作用 [ 3] ,已成
为皮肤科常用的抗炎止痒药物之一。50 年前,有学
者也已经证实薄荷醇可以激活一些对冷刺激敏感的
外周无髓纤维的终末, 提示这种物质可能是冷觉感
受器的激动剂[ 4] 。2002年 Julius 和 Patapout ian领
导的两个实验组分别用不同方法同时克隆并鉴定出
冷觉感受器基因及其蛋白功能 (分别命名为 CMR1
或 T RPM 8) , 并证实其属于 TRP 超家族 T RPM 亚
家族的成员, 即 TRPM 8 或 CMR1。TRPM 8 主要
分布在三叉神经节和背根神经节的小直径神经元。
克隆的该通道可被冷刺激 ( 8~ 28 e ) 激活,也可被
薄荷醇激活, 使非选择性阳离子通道开放, 主要引起
Ca2+ 内流[ 5] , 因此推测薄荷醇的止痒作用除与其清
凉与局麻作用有关外, 有可能通过多种瘙痒介质和
细胞因子的影响发挥其止痒作用。研究证实薄荷醇
对组胺诱导的人体皮肤瘙痒有显著的抑制作用 [ 6] ;
薄荷醇在离体状态下对家兔、豚鼠的回肠、子宫活动
的张力、强度、强度-张力差均有明显的抑制作用, 并
能对抗组胺、乙酰胆碱、氯化钡等引起的肠管活动亢
进[ 7]。也有研究表明其对该类瘙痒的强度和持续时
间的影响无显著性意义 [ 8] , 表明薄荷醇的止痒作用
也可能与组胺无关。有研究表明薄荷醇在体外对白
三烯 B4、前列腺素 E2和 IL-1B的生成有显著抑制作
用[ 9] ,对 IL-6受体的合成及其所在细胞的生长具有
抑制作用[ 10] 。
从本实验的结果来看, 薄荷醇能抑制由组胺和
4-AP 共同引起的瘙痒, 从血清 ELISA 检测的结果
也发现,薄荷醇对小鼠的血清组胺浓度有显著的减少
作用,但薄荷醇对血清 IFN-C无显著的影响。结合病
理切片的结果来看, 表明薄荷醇具有显著的止痒作
用,其止痒作用可通过影响一些相关因子发挥作用。
参考文献:
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#1618# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 10 期 2009年 10 月
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阿魏胶囊对高脂血症大鼠血脂相关酶的影响
薛 洁1 ,王 茜2 , 张海英1*
( 11 新疆医科大学附属中医医院,新疆 乌鲁木齐 830000; 21 新疆医科大学, 新疆 乌鲁木齐 830000)
摘 要: 目的 研究阿魏胶囊对血脂相关酶的影响。方法 通过高脂血症动物模型, 应用生物化学的方法研究阿
魏胶囊对血脂相关酶的影响。结果 动物的脂蛋白脂肪酶 ( LPL )、肝脂酶 ( H L) 及羟甲基戊二酰辅酶 A ( HMG-
CoA ) 还原酶活性的值与模型对照组比较,差异有统计学意义 ( P< 01 05、01 01) ,阿魏胶囊组 H L 和 LPL 的酶活性
增加, HMG-CoA 酶活性降低。结论 阿魏胶囊调节血脂主要机制有提升机体内的 H L 和 LPL 的酶活性, 加速血
液中甘油三酯和游离胆固醇的降解, 抑制 HMG-CoA 酶活性。
关键词: 高脂血症; 阿魏胶囊; 血脂酶
中图分类号: R2861 1 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2009) 10-1619-03
高胆固醇和高脂蛋白血症是心血管疾病的主要
危险因素,降低血浆胆固醇水平是治疗动脉粥样硬
化疾病的有效方法。降脂类化学药物具有降脂快速
和效果明显的特点,但由于其潜在的不良反应[ 1] 、患
者对药物的依赖性以及作用靶点较为单一,因而很
难满足不同高脂血症患者的需求。与之相比较而
言,中药制剂对于治疗高脂血症这类复杂的疾病,具
有不良反应小、多靶点协同作用的优势 [ 2]。近年来,
医学科研工作者们通过大量的科学研究和临床实
验,发掘了一批具有显著降脂作用的中药[ 3] 。
随着分子生物学在降脂类药物作用机制研究中
的应用,近 10年来, 国内外的医学科研工作者发现
了很多与脂类代谢作用相关的重要酶和基因。涉及
脂类合成相关酶, 如 HMG-CoA [ 4] (羟甲基戊二酰
辅酶 A )、LPL (脂蛋白脂肪酶)、HL (肝脂酶) 和
LCAT (卵磷脂胆固醇脂酰转移酶) 等重要酶类[ 4] ,
它们在胆固醇的分解吸收代谢过程中也起着极为重
要的作用。涉及脂类转运相关基因, 如 Apo-E (载
脂蛋白 E) [ 5, 6]和 Apo-A4 (载脂蛋白 A4) [ 7] 均为胆
固醇在肝内外的转运,加速胆固醇的代谢。
临床应用和动物实验结果均表明阿魏胶囊在血
脂调节作用方面具有显著的作用[ 8]。但是该药在体
内的什么部位起作用和究竟是如何起作用, 是一个
需要解决的关键问题。因此, 研究阿魏胶囊的降脂
作用机制对于该药的应用具有重要意义。
1 实验材料
11 1 仪器设备: BecM an ( Allegra 64R) 低温冷冻
离心机、紫外分光光度计 ( Cintr a 20)、Sartorius
BS224S 精密电子天平、Sartorius PB ) 19 普及型
pH 计、DK-8D 型电热恒温水浴槽。
11 2 试剂:总脂酶测试盒 ( LPL 和 HL) 购自南京
建成生物工程研究所;胆固醇 (游离型) 测定试剂盒
购自上海名典生物工程有限公司。HMG-CoA 购自
Sigma。其他常规化学试剂均为国产分析纯级。
#1619#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 10 期 2009年 10 月
* 收稿日期: 2009-05-26 基金项目:国家/ 十一五0支撑资助项目 ( 2007BAI20B07)作者简介:薛 洁,女,博士,教授,硕士生导师。