全 文 ：·772· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
参考文献： [3]
113江苏新医学院．中药大辞典(下册)[M]．上海：上海科学技
术出版社，2001．
1-23柯珉珉，张宪德。吴练中，等．岩黄连有效成分的研究口]． [4]
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黄小平，张毅，钟国跃．不同产地和生长年限黄连的总生
物碱含量测定[J]．现代中药研究与实践，2004．18(1)：42—
43．
李慧粱．岩黄连活性成分系统研究及藜芦毒性成分研究
[D]．上海；第二军医大学，2006：110—114．
不同产地龙葵药材中澳洲茄碱量的分析研究
袁海建h2，贾晓斌¨，陈彦¨，刘中秋3，邵振中1
(1．江苏省中医药研究院江苏省现代中药制剂工程技术研究中心，江苏南京210028，2．江苏大学药学院，
江苏镇江212013，3．南方医科大学药学院，广东广州510515)
摘 要：目的测定龙葵中澳洲茄碱的量以评价不同产地龙葵药材质量。方法采用AgilentZorbaxSBC-s色谱柱
(150mm×4．6mm，5肚m)，以乙腈一1％磷酸溶液为流动相梯度洗脱，体积流量1．0mL／min，柱温30℃，检测波长
205am。结果6个不同地区龙葵茎叶中澳洲茄碱的平均量在0．5445～1．5049mg／g；果实中澳洲茄碱的平均量
在0．8555～3．4408mg／g。连云港灌南地区龙葵茎叶和果实中澳洲茄碱的量最高，分别为1．5049、3．4408mg／g；
南京栖霞地区茎叶中量最低，为0．5445mg／g，南京江宁地区果实中量最低，为0．8555mg／g。结论同一时期、不
同产地龙葵药材茎叶和果实中澳洲茄碱量差异较大。
关键词：龙葵；澳洲茄碱；反相高效液相色谱法 ．
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)05—0772一03
龙葵SolanumigrumL．是茄科植物龙葵的干
燥地上部分，民间常用于抗炎、抗病毒。近来研究表
明，龙葵具有很好的抗肿瘤活性，其中的药理活性物
质是甾体生物碱类成分[1]，主要包括澳洲茄碱
(solasonine)、澳洲茄边碱(solamargine)等，苷元为
澳洲茄胺。研究表明澳洲茄碱在体外抗肿瘤实验中
表现出很好的抗肿瘤活性[2]。
目前文献报道除了梁生旺等[33用薄层扫描法对
龙葵中澳洲茄胺做定量分析外，尚未见使用反相高
效液相色谱法对龙葵中甾体生物碱类成分进行定量
分析的研究报道。本研究建立了龙葵药材中澳洲茄
碱的反相高效液相色谱的分析方法，测定了不同产
地龙葵药材中澳洲茄碱的量，以期为龙葵药材的质
量控制提供科学依据。
1仪器与试药
1．1 仪器：Agilent1200高效液相色谱仪(美国
Agilent公司)包括柱温箱、在线脱气机、四元泵、二
极管阵列检测器及ChemStation色谱工作站；Buchi
旋转蒸发仪。
1．2 试药：澳洲茄碱对照品(郑州牧业工业高等专科
学校化学教研室提供，经高分辨质谱鉴定并用HPLC
法检测质量分数>98％)；龙葵药材分别采自南京江
宁、南京栖霞、泰州泰兴、连云港灌南、徐州新沂、镇江
丹徒(采收时间在2007年10月16-20日)，经南京中
医药大学吴德康教授鉴定为茄科茄属龙葵Solanum
n grumL．干燥地上部分，乙腈、磷酸(TEDIA公司，
色谱纯)；纯净水；其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1色谱条件：AgilentZorbaxSBC18色谱柱(150
mm×4．6mm，5pm)；流动相：乙腈(A)一1％磷酸溶
液(B)，梯度洗脱条件为：0～5min，A：22％，B：
78％；5～20rain，A：22％～25％，B：78％～75％；
20～25rain，A：25％，B：75oA；体积流量：1．0mE／
min；进样量：20pL；检测波长：205nm：
2．2对照品溶液的制备：精密称取澳洲茄碱对照品
10．75mg，置10mL量瓶中，用10％醋酸溶解并稀
释至刻度，摇匀，制成1．075mg／mL对照品溶液。
2．3供试品溶液制备：取连云港灌南产龙葵药材粉
末1．0g(40目)，精密称定，加入5％醋酸一甲醇溶液
50mL，称定质量，超声提取30min，再称定质量，用
提取液补足质量，摇匀，滤过，滤液置50mL量瓶中，
用提取液定容至刻度。从中精密量取25mL溶液减
收稿日期：2007—09，10
基金项目：江苏省中医药领军人才基金项目(2006)；江苏省中医药局项目(H05021)
作者简介：袁海建(198l一)，男，在读硕士生，研究方向为中药新剂型与新技术。E—mail：yuanjianSl01@163．eom
*通讯作者贾晓斌陈彦Tel／Fax：(025)85637809

万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月·773·
压蒸干，残渣用10％醋酸溶液溶解，定容到5mL量
瓶中，经0．45pL微孑L滤膜滤过，即得。
2．4 系统适应性试验：精密吸收供试品溶液20pL，
注入高效液相色谱仪，记录色谱图(图1)。以澳洲茄
碱计算，理论塔板数不小于5000。
，，mIn
*一澳洲茄碱
*一solasonine
图1 对照品(A)和龙葵药材(B)HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfreferencesubstance
(A)andHerbaSolaniN g,{(B)
2．5 标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0．2、
0．4、0．8、1．2、1．6、2．0、2．4mL置5mL量瓶中，用
10％醋酸溶液稀释至刻度，摇匀制成0．0430、
0．0860、0．1720、0．2580、0．3440、0．4300、
0．5160mg／mL的对照品溶液；分别吸取上述对照
品溶液20pL注入高效液相色谱仪，记录峰面积；以
质量分数为横坐标(x)，峰面积为纵坐标(y)，进行
线性回归，得方程为Y=282762X一41．863，，．=
0．9997，表明澳洲茄碱在0．86～10．32pg线性
良好。
2．6精密度试验：取0．2580mg／mL的对照品溶
液，连续进样6次，每次20弘L，记录峰面积，计算得
其RSD为0．02％，表明该方法精密度良好。
2．7 重现性试验：取连云港灌南产龙葵药材粉末
(40目)6份，按供试品操作方法平行制备，测定，计
算澳洲茄碱质量分数的RSD为1．17％，结果表明该
方法重现性良好。
2．8稳定性试验：取同一供试品溶液，分别在0、1、2、
4、8、12、24h进样测定，记录峰面积，计算得其RSD为
1．23％，表明样品在室温下24h内稳定性良好。
2．9 回收率试验：以连云港灌南产龙葵药材茎叶粉
末(40目)为研究对象，精密称取药材粉末6份，每份
0．5g，置于50mL三角烧瓶中，分别加澳洲茄碱对
照品0．5688、0．7110、0．8532mg，并按照上述供试
品溶液制备，测定。平均回收率为101．04％，RSD为
1．72％。
2．10不同产地龙葵药材中澳洲茄碱量的测定：精
密称取6个不同产地龙葵药材茎叶和果实粉末1．0g
(40目)，按照“供试品制备”项下制备，以20弘L进
样，测定色谱峰峰面积，根据标准曲线计算质量分
数，结果见表1。
表1不同产地龙葵茎叶和果实中澳洲茄碱的测定(甩一3)
TableDeterminationofsolasonineinherbandfruits
ofS．n喀rumfromdifferenthabitats(厅一3)
3讨论
本实验考察了不同提取溶剂——甲醇、5％醋
酸一甲醇、95％乙醇、5％醋酸一95％乙醇、5％醋酸一水
溶液(均按体积比配制)对澳洲茄碱提取效率的影
响，实验结果证明以5％醋酸一甲醇作为提取溶剂，提
取效率较高；比较了超声和70℃回流两种提取方
法，结果表明超声提取效果较好；进而比较了超声提
取20、30、40rain的提取效果，结果表明随着超声时
间的延长，提取效率提高，但是到达一定时间后，其
提取效率到了一个平台期，故选择超声提取30rain；
比较了25、50、75倍提取溶剂对提取效率的影响，结
果显示用50倍量提取液的提取效果较好；同时考察
了1％、3％、5％的醋酸对提取效率的影响，结果表明
使用5％醋酸的提取效率较好。
中国龙葵目前主要有1个种和2个变种[4’5]，全
国各地均有分布。为了更好地利用龙葵药材资源，并
保证龙葵药材的质量，因此有必要建立龙葵药材的
质量分析标准。本实验是用同一时期采收的江苏省
北部、中部、南部几个地方龙葵药材，对其中的澳洲
茄碱进行了测定。结果表明南北差异明显，以江苏连
云港地区产龙葵药材中澳洲茄碱的量最高，江苏南
京地区产龙葵中澳洲茄碱的量最低。江苏北部两地
茎叶中澳洲茄碱的平均量较南部三地高76．83％，江
苏北部两地果实中澳洲茄碱的平均量较南部三地高
129．11％。
为了便于比较龙葵果实和茎叶中甾体生物碱存
在的差异，实验中将同一产地龙葵果实和茎叶中澳
洲茄碱的量进行了分别测定。试验结果表明：同一产
地的龙葵果实比龙葵茎叶中澳洲茄碱的平均量高出
7．55％～195．13％，两者差异较大。这也为实践中合

万方数据
·774· 中草嚼 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
理使用龙葵药材、控制龙葵质量提供了实验依据。
本研究未能对不同采收期龙葵药材茎叶和果实
中澳洲茄碱的量进行分析，因此有必要对不同采收
期龙葵药材中甾体生物碱的量做进一步研究。
参考文献：
[1]王蔚，陆道培．龙葵总提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株
的作用[J]．北京大学学报：医学版，2005，37(3)：240—244．
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观察研究[J]．西北植物学报，2000．20(2)s313-316．
HPLC法同时测定穿龙薯蓣中薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷
刘中博1，王铁杰2，卢忠强3，陈晓辉1，毕开顺1t
(1．沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳 110016}2．深圳市药品检验所，广东深圳518029；
3．国药控股深圳中药有限公司，广东深圳518029)一
穿龙薯蓣为薯蓣科薯蓣属植物穿龙薯蓣
DioscoreanipponicaMak．的根茎，收载于《中国药
典》2005年版一部。穿龙薯蓣有活血舒筋、消食利
水、祛痰截疟的功效，用于治疗风湿性关节炎、腰腿
疼痛、麻木、大骨节病、跌打损伤、闪腰岔气、慢性支
气管炎、咳嗽气喘[1]。从穿龙薯蓣根茎中提取的甾体
总皂苷制成的中药制剂地奥心血康胶囊广泛被应用
于治疗冠心病、心绞痛等心脑血管疾病。
穿龙薯蓣的有效成分主要为甾体皂苷类，其中
薯蓣皂苷(dioscin)和原薯蓣皂苷(protodioscin)为
其主要成分。薯蓣皂苷具有增强心脏收缩力、减慢心
率、抗动脉硬化、改善微循环的作用。还有其他药理
作用，如溶血作用、祛痰作用、抗血小板聚集作用、降
血脂作用[21等。原薯蓣皂苷对人类白细胞HL一60的
DNA、RNA和蛋白质的合成及细胞生长有抑制作
用[3]。同时，胡柯等[‘1也发现白血病、结肠癌和前列
腺癌细胞株对原薯蓣皂苷最敏感，而卵巢癌细胞株
不敏感，半数生长抑制浓度(GI。。)为1～7Fmol／L。
经COMPARE程度分析发现，在美国国家癌症研究
所(NCl)抗癌药筛选数据库中，没有化合物的细胞
毒活性与原薯蓣皂苷相似，表明该化合物可能有新
的抗癌机制。这两种皂苷含糖量高、极性大、结构复
杂，难以分离和纯化。目前为止，对其的研究多停留
在药理活性方面，定量测定报道甚少。本实验首次建
立同时测定穿龙薯蓣中薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷的
HPLC分析方法，该方法不仅灵敏度高，专属性强，
操作简单易行，而且将质量控制与活性成分相结合，
为该植物的质量控制提供了新思路、新尝试。
1仪器与试药
美国Waters2695型高效液相色谱仪，美国
Alltech2000蒸发散射光检测器和Empower工
作站。
薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷对照品自制，经IR、
MS、1H—NMR、13C—NMR确定结构口’6]，质量分数均
大于99％。乙腈为色谱纯，水为重蒸水(自制)，乙醇
为分析纯。
药材购自沈阳天益堂药店、内蒙古万民药店、深
圳市海王星辰连锁药店、辽宁省铁岭市药材有限公
司、辽宁省清原县龙胆草研究所、吉林靖宁县综艺土
特产购销中心及不同产地的药业公司，经沈阳药科
大学孙启时教授鉴定。产地见表1。药材经40℃干
燥后，粉碎过24目筛，备用。
2方法与结果
2．1 色谱条件与系统适应性试验：色谱柱为
XterraTMODS(250mm×4．6mm，5um)，以乙腈
(A)一水(B)为流动相，梯度洗脱程序：0---6min，5％
A线性变为26％A；6～35min，26％A线性变为
30％A；35-36rain，30％A线性变为50％A；36--。60
rain，50％A线性变为60％A。体积流量1．0mE／
rain，柱温35℃，蒸发散射光检测器漂移管温度为
收稿日期：2007—09—10
基金项目：深圳市无偿资助科技项目(S04055)
作者简介：刘中博(1980一)，女，辽宁省人，在读博士研究生，从事药物分析研究．
Tel：(024)24515539E-mail：liuzhongb02008@sina．corn
*通讯作者毕开顺Tel：(024)23928487Fax：(024)21896050E—mail：bikaishun@yahoo．corn

万方数据
不同产地龙葵药材中澳洲茄碱量的分析研究
作者： 袁海建， 贾晓斌， 陈彦， 刘中秋， 邵振中
作者单位： 袁海建(江苏省中医药研究院江苏省现代中药制剂工程技术研究中心,江苏南京210028;江苏
大学药学院,江苏,镇江212013)， 贾晓斌,陈彦,刘中秋,邵振中(江苏省中医药研究院江苏省
现代中药制剂工程技术研究中心,江苏南京,210028)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(5)
被引用次数： 5次

参考文献(5条)
1.王蔚;陆道培 龙葵总提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株的作用[期刊论文]-北京大学学报(医学版) 2005(03)
2.罗文娟;王光辉;周新兰 螺甾皂苷类化合物的体外抗人肝癌细胞增殖作用[期刊论文]-现代肿瘤医学 2007(03)
3.粱生旺;王浴铭;张广强 薄层扫描法测定龙葵中澳洲茄胺的含量 1997(08)
4.张海洋;姜祥君;董锡文 中国产龙葵数值分类的研究 1999(02)
5.张海洋;徐秀芳;董锡文 三种龙葵表皮毛类型及发育过程观察研究[期刊论文]-西北植物学报 2000(02)

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3. 靳智.周晓英.杨涛.葛亮.JIN Zhi.ZHOU Xiao-Ying.YANG Tao.GE Liang 原子吸收光谱法测定龙葵果中微量元素
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10. 孙瑞莲.周启星.王新.SUN Rui-lian.ZHOU Qi-xing.WANG Xin 镉超积累植物龙葵叶片中镉的积累与有机酸含量
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2.高淑红.苏珍枝.高宝益.刘林凤.杨东方.李慧博 龙葵药材薄层鉴别研究[期刊论文]-中国医药导报 2013(12)
3.刘林凤.高宝益.高淑红 高效液相色谱法测定龙葵中澳洲茄碱与澳洲茄边碱含量的研究[期刊论文]-世界中西医结
合杂志 2013(2)
4.单会娇.张建逵.许亮.韩荣春.徐保利.王冰 24个产地龙葵中澳洲茄碱的含量测定[期刊论文]-中成药 2011(3)
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