全 文 ：此为相转变温度,因此控制搅拌乳化温度在65～71
℃得到的微乳相对稳定。
温度/℃
图5　微乳的电导率-温度曲线
Fig. 5　Conductivity-temperature curve of silybin
microemulsion
2. 5　稳定性考察
2. 5. 1　离心加速试验:根据《中国药典》2005年版
一部附录 IO 乳剂离心稳定性标准, 以 4 000 r / min
离心15 min,无分层现象, 无药物析出,提示该微乳
均一稳定。
2. 5. 2　高温和光照试验: 微乳充氮、密封, 分别于
40、60 ℃, 4 500 1x 条件下放置10 d,分别于0、5、10
d 考察微乳的外观、平均粒径、有效成分的质量浓
度,见表5。可见该乳剂在室温下3个月内能维持均
一稳定。60℃的10 d 留样的外观变化尤为明显,有
效成分的质量浓度下降量略高于其他条件, 并且有
少量乳滴凝聚情况发生,说明该微乳应低温或室温
贮藏。但是从平均粒径变化来看, 3种条件对粒径的
影响都不大, 说明即使发生凝聚只是局部发生, 而微
乳整体仍比较稳定。
3　讨论
　　计算稳定性参数K e 时采用离心加速比较微乳
的分层速度, 以紫外分光光度法测定微乳离心前后
表 5　高温和光照试验
Table 5　High temperature and illumination
条件 外观 平均粒径/
nm
有效成分
相对量/ %
3个月室温 均一,无沉淀 32 97. 8
40℃ 0 d 均一,无沉淀 31 98. 3
5 d 均一,无沉淀 31 98. 1
10 d 均一,无沉淀 32 97. 5
60℃ 0 d 均一,无沉淀 31 98. 3
5 d 有少量乳滴挂壁 33 97. 2
10 d 有少量乳滴挂壁 35 96. 0
4 500 lx 光照 0 d 均一,无沉淀 31 98. 3
5 d 均一,无沉淀 31 97. 7
10 d 均一,无沉淀 33 97. 0
的吸光度,相差越小,说明乳剂越稳定。该方法简便
快捷,是评价乳剂稳定性的重要指标。
　　乳化剂和助乳化剂的种类及配比对微乳质量起
着重要作用,本实验由简单方法入手,逐步提高筛选
精度,先后通过测表面张力、绘制拟三元相图和正交
设计进行处方筛选,在达到实验目的的前提下尽量
减少工作量。
　　水飞蓟宾难溶于水和油, 本实验将其制备为口
服微乳。性质考察结果表明, 该工艺得到的微乳外
观、稳定性良好,符合要求,为进一步研究提供参考。
参考文献:
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药动学[ J ] . 中国药科大学学报, 2005, 36( 5) : 427-431.
大孔吸附树脂纯化达原滴丸处方提取液的工艺研究
廖茂梁1,张铁军1, 高文远2, 薛　艳1

( 1. 天津药物研究院 中药现代研究部, 天津　300193; 2. 天津大学 药物科学与技术学院, 天津　300193)
摘　要: 目的　研究大孔吸附树脂对达原滴丸提取液的吸附性能, 考察精制工艺。方法　以达原滴丸中黄芩苷质量
分数和收率为主要考察指标 ,考察了大孔吸附树脂 NKA-12、HPD-600、HPD-500、HPD-300、HPD-100、D101、AB-
8、NKA-9对达原滴丸中黄芩苷的吸附和解吸特性以及纯化能力。结果　达原滴丸提取液上HPD-300 树脂,上样液
黄芩苷质量浓度为 2. 65 mg / mL , 体积流量为3 BV / h, 50%乙醇解吸5 BV 时,水洗4 BV , 解吸效果较好。结论　
HPD-300 树脂可用作达原滴丸的精制。
·54· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第39卷第 1期 2008 年1 月

收稿日期: 2007-04-23基金项目:天津市科技攻关培育项目( 033101911)作者简介:廖茂梁( 1981—) ,男,江西南康人,主要从事中药研发。T el: ( 022) 23003935　E-mail: l iamaoliang@ 163. com
关键词: 达原滴丸;黄芩苷; 大孔吸附树脂
中图分类号: R286. 1; R286. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253-2670( 2008) 01-0054-04
Purification of Dayuan Dropping Pills extract with macroporous resin
LIAO M ao-liang
1, ZHANG T ie-jun
1, GAO Wen-yuan
2 , XUE Yan
1
( 1. Depar tment o f Modern Chineae Mater ia M edica , T ianjin Institute o f Pharmaceut ical Research, T ianjin 300193, China ;
2. School of Pharmaceutical Science and Technolog y , T ianjin Univ ersity , T ianjin 300072, China)
Abstract: Objective　T o study the adsorpt ion funct ion of macroporous resin for purify ing the ex t ract
of Dayuan Dropping Pills and to investig ate the purif icat ion process o f Dayuan Dr opping Pills by macro-
po rous adsorpt ion r esin. Methods　T aking the content and the ex t ract ion rate of baicalin as the main stan-
dard index , and the adsorpt ion characters as w ell as the purif icat ion capacit ies o f eight types o f macro
po rous adsorption resins, such as NKA-12, HPD-600, HPD-500, HPD-300, HPD-100, D101, AB-8, and
NKA-9, used to tr eat baicalin o f Dayuan Dropping Pil ls w ere invest ig ated preliminarily. Results　The ap-
propriate adsorption condit ions were: the concentr at ion of baicalin w as 2. 65 mg / mL, f low rate was 3 BV/
h, the ef fect o f desorpt ion w as sat isfactor y w hen 50% alcohol ( 5 BV ) and w ater ( 4 BV) w ere used as elu-
ant . Conclusion　HPD-300 resin can be applied to refine the Dayuan Droppingp Pil ls.
Key words : Dayuan Dropping Pills ; baicalin; macroporous adsorpt ion r esin
　　达原滴丸处方源于明代吴又可《瘟疫论》中的达
原饮, 由厚朴、槟榔、草果、白芍、知母、黄芩、甘草组
成,功在达膜原、辟秽浊,对病毒感染性发热、湿热发
热以及一些不明原因的高热均有良好疗效 [ 1]。大孔
吸附树脂法是纯化精制中草药水溶性成分的有效方
法[ 2, 3] ,故本实验采用大孔吸附树脂对达原滴丸提取
液进行精制, 以黄芩苷的质量分数和收率为指标,对
大孔树脂型号、上样质量浓度、流量、洗脱剂乙醇的
体积分数及洗脱剂的用量等参数进行了考察,为达
原滴丸处方药材提取液中的有效成分的精制及相应
药剂的研制开发提供依据。
1　仪器和材料
　　戴安高效液相色谱仪,包括P680四元泵、自动
进样器、UVD170U 检测器、Chromeleon 色谱工作
站; HPD-100、HPD-300、HPD-500、HPD-600 大孔
吸附树脂(沧州宝恩化工有限公司) ; NKA-9、NKA -
12、AB-8大孔吸附树脂(南开大学化工厂) ; D101大
孔吸附树脂(天津农药股份有限公司) ;黄芩苷对照
品由中国药品生物制品检定所提供, 甲醇为色谱纯,
其他试剂均为分析纯。各药材均购于天津市中药饮
片厂,由本院张铁军研究员鉴定。
2　方法和结果
2. 1　黄芩苷的HPLC法测定
2. 1. 1　色谱条件: T ianhe C18色谱柱( 250 mm×4. 6
mm , 5
m) ; 以甲醇-水-磷酸( 47∶53∶0. 2)为流动
相;检测波长为280 nm。理论板数按黄芩苷计算应
不低于2 500。
2. 1. 2　标准曲线的绘制: 精密称取在 60 ℃减压干
燥4 h 的黄芩苷对照品适量, 加甲醇制成 56
g / mL
黄芩苷对照品溶液。精密吸取上述溶液1、5、10、15、
20、25
L 进样,测定峰面积。以黄芩苷峰面积值为
纵坐标,进样质量为横坐标绘制标准曲线,进行线性
回归, 得线性方程 Y = 176. 38 X - 9. 100 9, r =
0. 999 9,线性范围为0. 056～1. 400
g。
2. 1. 3　样品测定 :吸取样品液适量, 用50%甲醇适
当稀释后,过 0. 45
m 滤膜,弃去初滤液,取续滤液
进样,测定。
2. 2　树脂类型的选择
2. 2. 1　树脂的预处理: 取各型号树脂适量,用乙醇
浸泡24 h,充分溶胀,用适当体积分数的乙醇洗至洗
出液加适量蒸馏水无白色浑浊现象, 再用蒸馏水洗
至无醇味,备用。
2. 2. 2　上样液的制备:按达原饮处方比例称取槟榔
300 g ,厚朴、黄芩、知母、白芍各150 g, 甘草、草果各
75 g ,加热提取3次,每次1h, 每次加12倍量水,回流
时间1 h。合并提取液,减压浓缩,浓缩液加95%乙醇
使乙醇体积分数达到70%, 静置过夜,离心,上清液
减压回收乙醇, 水液加一定量蒸馏水稀释至以黄芩
苷计3. 5 mg / mL, 即得,备用。
2. 2. 3　静态吸附量与解吸率的比较:称取各型号树
脂4 g ,置于250 mL 锥形瓶中, 加50 mL 上样液, 静
置12 h, 前6 h每隔0. 5 h 振摇1次,待吸附完成后分
离出上清液。树脂再用20 mL 水洗涤1次,合并入上
清液,备用。各树脂再依次用30%、60%乙醇各 50
mL 浸泡洗脱6 h,收集洗脱液,测定吸附后药液和洗
脱液中黄芩苷质量浓度, 计算吸附量和洗脱率。结果
·55·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第39卷第 1期 2008 年1 月
见表1。结果表明, HPD-100和HPD-300的吸附量与
解吸率均好, 所以选择了HPD-100和HPD-300采用
动态吸附法作进一步考察。
　　Q= ( C0- CX )×V　M= 50×CX 2　E= M /Q×100%
　　Q 为黄芩苷的吸附量, C0 为上样液中黄芩苷的质量浓
度, CX 为吸附后药液中黄芩苷的质量浓度, V 为溶液体积,
CX 2解吸后药液中黄芩苷的质量浓度,M 为黄芩苷的洗脱质
量, E 为洗脱率
表 1　各种树脂的吸附与解吸性能
Table 1　Adsorption and desorption capacities
of various resins
型号 吸附量/ mg 30%乙醇解吸率/ %
60%乙醇
解吸率/% 总解吸率/ %
NKA-12 133. 61 60. 92 32. 81 93. 74
HPD-600 78. 26 63. 29 29. 84 93. 13
HPD-500 95. 89 59. 01 31. 66 90. 67
HPD-300 158. 61 43. 31 44. 57 87. 88
HPD-100 154. 13 45. 41 38. 70 84. 11
D101 109. 38 55. 91 39. 35 95. 25
AB-8 139. 04 54. 63 34. 11 88. 74
NKA-9 45. 41 76. 69 18. 84 95. 53
2. 2. 4　动态法选择树脂: 取处理好的HPD-100和
HPD-300大孔吸附树脂10 mL 湿法装柱( 150 mm×
10 mm) ,调节流量为3 BV/ h,上提取液50 mL, 收集
流出液, 备用;分别用水, 30%、60%乙醇各50 mL 洗
脱,收集洗脱液, 备用; 测定吸附后药液及各洗脱液
中黄芩苷的质量浓度, 计算吸附量和解吸率,结果见
表2。比较HPD-100和HPD-300树脂的静态与动态
吸附、解吸情况, HPD-300 与HPD-100的吸附量和
洗脱率差异不大, HPD-300 稍好, 故选择 HPD-300
作为达原滴丸处方药物的纯化精制树脂。
表 2　HPD-100 和 HPD-300 树脂动态吸附性能
Table 2　Dynamic adsorption capacity of HPD-100
and HPD-300
型号 吸附量/ mg 比吸附量/ ( mg·mL - 1) 解吸率/ %
HPD-100 122. 76 9. 72 97. 67
HPD-300 128. 13 10. 79 98. 80
2. 3　HPD-300的吸附性能和影响因素考察[ 4, 5]
2. 3. 1　上样液质量浓度对吸附量的影响: 取含黄芩
苷2、2. 65、3. 5、4、8 mg / mL 的上样液100 mL, 加入
处理好的HPD-300 树脂中,静态吸附,其余操作同
2. 2. 3项下方法, 计算吸附量,结果见表 3。结果表
明,含黄芩苷2. 65 mg/ mL 时,吸附量较大。
2. 3. 2　上样速度对吸附的影响:取处理好的HPD-
300大孔吸附树脂 10 mL 湿法装柱( 150 mm×10
mm) ,取黄芩苷质量浓度为2. 63 mg / mL 的药液100
mL, 分别以2、3、4 BV / h的流量上柱,考察不同流量
表3　上样液中黄芩苷质量浓度对吸附量的影响
Table 3　Ef fect of baicalin concentration in supernatant
on adsorption capacity
上样液质量浓度/ ( mg·mL- 1) 比吸附量/ ( mg·g- 1)
2. 00 40. 23
2. 65 45. 25
3. 50 42. 65
4. 00 39. 22
8. 00 35. 68
对树脂吸附量的影响,结果见图1。结果表明, 上样速
度以3 BV/ h 较好。
流速/ ( BV·h- 1)
图 1　上样速度对吸附量的影响
Fig. 1　Effect of velocity on adsorption capacity
2. 3. 3　泄漏曲线的绘制:取处理好的 HPD-300 大
孔吸附树脂10 mL 湿法装柱( 150 mm×10 mm) ,将
黄芩苷质量浓度为2. 64 mg/ mL 的提取液, 以3 BV/
h 上柱,每一个柱体积( 10 mL)为一流份,收集流出
液,测定流出液中黄芩苷的质量浓度,至吸附饱和时
为止,以黄芩苷质量浓度为横坐标,上样柱体积为纵
坐标绘制曲线,见图2。结果表明, HPD-300可处理6
倍柱体积的物料液。达吸附饱和时可吸附12倍柱体
积的药液。
上样体积BV
图2　HPD-300 的吸附泄漏曲线
Fig. 2　Adsorption leak curve of HPD-300
2. 3. 4　洗脱剂乙醇体积分数的选择: 取处理好的
HPD-300大孔吸附树脂10 mL 湿法装柱( 150 mm×
10 mm) ,调节流量为3 BV/ h,取提取液60 mL, 以3
BV/ h 速度上样, 依次用40 mL 蒸馏水、30%乙醇50
mL、50%乙醇50 mL、70%乙醇40 mL 洗脱,洗脱液
每10 mL 收集一份, 依次编为1～18号,其中1～4为
水洗液, 5～9为30%乙醇洗脱液, 10～14为50%乙
醇洗脱液, 15～18为70%乙醇洗脱液, 测定洗脱液中
·56· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第39卷第 1期 2008 年1 月
黄芩苷的质量浓度。以黄芩苷质量浓度为纵坐标,洗
脱柱体积为横坐标,绘制洗脱曲线,见图3。
流份
图3　不同体积分数乙醇的洗脱曲线
Fig. 3　Acohol elution curve of diff erent concentration
　　将处理好的HPD-300大孔吸附树脂 10 mL 湿
法装柱( 150 mm×10 mm)装3根小柱,调节流量为3
BV / h, 取含黄芩苷 2. 49 mg / mL 上样液 50 mL 上
柱,收集流出液,备用; 每根小柱先用水40 mL 洗脱,
然后这3根小柱分别用30%、40%、50%乙醇60、50、
40 mL 洗脱, 分别收集洗脱液, 备用;测定流出液及
洗脱液中黄芩苷的质量浓度和干膏量,计算黄芩苷
的洗脱率和产物中黄芩苷的质量分数,见表4。结果
表明, 用30%乙醇洗脱时产物中黄芩苷的质量分数
较高,而用50%乙醇洗脱时洗脱率较高,同时考虑二
者,选择50%乙醇为洗脱溶媒。
表4　洗脱率及质量分数的测定结果
Table 4　Results of purif ication and elution rate
试验号 洗脱量/ mg 干膏/m g 质量分数/ % 洗脱率/ %
30%乙醇洗脱 64. 13 310. 5 20. 65 62. 60
40%乙醇洗脱 79. 32 442. 5 17. 93 77. 42
50%乙醇洗脱 91. 70 517. 0 17. 74 89. 50
2. 3. 5　洗脱剂用量的确定:取处理好的 HPD-300
大孔吸附树脂10 mL 湿法装柱( 150 mm×10 mm) ,
调节流量为3 BV/ h,取提取液60 mL,以3 BV/ h上
样, 依次用蒸馏水 40 mL, 50%乙醇60 mL 洗脱,洗
脱液每 10 mL 收集一份, 依次编为 1～10 号, 其中
1～4为水洗液, 5～10为60%乙醇洗脱液, 收集洗脱
液,测定洗脱液中黄芩苷的质量浓度, 绘制洗脱曲
线,见图4。结果表明,用50%乙醇40 mL( 4 BV)即可
洗脱完全。
流份
图4　HPD-300 树脂洗脱黄芩苷的曲线
Fig. 4　Elution curve of baicalin by HPD-300 resin
2. 4　试验验证: 根据确定的树脂类型和最佳工艺,
用3根树脂柱( 26 cm×5 cm )同时进行达原滴丸处
方药物的纯化精制,结果树脂纯化后黄芩苷的平均
收率为90. 2% ,产物中的黄芩苷的平均质量分数为
17. 8%。
3　讨论
　　达原滴丸提取液中所含化学成分复杂,除黄酮
苷外,还含有生物碱、三萜皂苷类成分, 以及多糖类、
蛋白质等。为了尽可能多的保留有效成分,同时尽可
能多地除去杂质, 以便既提高疗效,又能减小服用
量,同时也方便以后制剂成形的目的,本实验采用了
大孔吸附树脂法纯化达原滴丸提取液, 由于达原滴
丸处方中还有芍药、槟榔、知母等药味, 而仅以黄芩
苷为考察指标进行了树脂条件的筛选, 所以在条件
确定以后, 采用薄层色谱法考察了上样流出液以及
水洗液中化学成分, 未检出芍药苷、槟榔碱和菝葜皂
苷。同时比较了达原滴丸处方药物水提液与达原滴
丸处方药物提取液经过纯化后药理活性差异, 结果
显示二者没有显著性差异。但经过纯化后药液出膏
率由30%降为7%左右,基本达到了纯化目的,并保
证了疗效。
　　在吸附容量确定时实验选择了6倍量柱体积上
样量,但在洗脱剂体积分数选择时发现用水洗也能
把黄芩苷少量洗脱下来, 考虑到可能是上样量过载
所致,因此减小了上样量( 5倍柱体积) ,结果水洗液
中黄芩苷明显减少, 故确定上样容量为5倍柱体积。
　　从结果分析, HPD-300基本适合达原滴丸处方
药物提取液的精制纯化, HPD-300树脂对达原滴丸
处方药物提取液的适宜纯化条件:上样液黄芩苷质量
浓度为2. 65 mg / mL,上5 BV 柱体积提取液,流量为
3 BV/ h;洗脱剂用 50%乙醇洗脱4个柱体积。
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