全 文 ：表 1 　麻黄碱、伪麻黄碱、草麻黄提取物对组胺致
喘豚鼠的平喘作用 ( x ±s , n = 6)
Table 1 　Anti2asthmatic effects of ephedrine , pseudo2
ephedrine and E. sinica extract on asthmatic
guinea pig induced by His ( x ±s , n = 6)
组别
剂量/
(ng·kg - 1 )
延喘时间/
s
组别
剂量/
(ng·kg - 1 )
延喘时间/
s
对照 - - 11160 ± 3145 伪麻黄碱 　670 68121 ± 5125 3 3
沙丁胺醇 1 920 369123 ±22195 3 3 　67 46165 ± 7109 3 3
　192 266111 ±17137 3 3 　　617 24141 ± 4178 3 3
　1912 170162 ±14155 3 3 草麻黄提取物 5 450 178173 ± 7191 3 3
麻黄碱 　670 166120 ± 5123 3 3 　545 95184 ±11187 3 3
　67 　98100 ± 9112 3 3 　5415 73185 ± 3146 3 3
　　617 　54177 ± 7196 3 3
　　与对照组比较 : 3 3 P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs cont rol group
基的氧化、代谢脱氧 ,可使药物的作用时间延长 ,但
伪麻黄碱的α碳原子上引入甲基的构象正好同麻黄
碱相反 ,阻碍了铵离子与受体下部的结合因而活性
较小[ 11 ] 。虽然β2 肾上腺素受体的晶体结构刚刚被
解析 , 但受体与激动剂的构效关系还不十分明
确[12 ] 。麻黄碱与伪麻黄碱的构效关系见图 5。
图 5 　麻黄碱与伪麻黄碱的构效关系分析
Fig. 5 　Structure2activity relationship of ephedrine
and pseudo2ephedrine
　　在不同产地的麻黄药材中 ,麻黄碱的量一般高于
伪麻黄碱可以达到 3～4 倍[1 ] 。结合本实验结果 ,不
论是细胞受体、离体器官还是整体动物水平 ,麻黄碱
均表现出较相同浓度的伪麻黄碱有更强 (2～4 倍) 的
平喘效果。因此在麻黄提取物或制剂中 ,麻黄碱的平
喘效果可以达到伪麻黄碱 6～15 倍。故可以推测麻
黄碱是麻黄及其制剂具有平喘效果的主要因素。
参考文献 :
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蕨麻提取物对小鼠缺血再灌注心肌损伤的保护作用
叶 　立1 ,2 ,陈 　洋3 ,李灵芝2 ,3 3 ,张永亮2 ,3
(11 天津医科大学总医院 ,天津 　300052 ; 21 天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室 ,天津 　300162 ;
31 中国人民武装警察部队医学院 ,天津 　300162)
摘　要 :目的 　研究蕨麻乙醇提取物的抗心肌缺血再灌注损伤作用。方法 　采用垂体后叶素 + 硝酸甘油建立小鼠
急性心肌缺血再灌注损伤模型 ,监测心电图变化 ; H E 染色法观察心肌病理改变 ;Nagar2Olsen 特殊染色观察心肌缺
血损伤程度 ;生化方法检测血清乳酸脱氢酶 (LD H) 、肌酸激酶 ( CK) 、超氧化物歧化酶 ( SOD) 活性和丙二醛
(MDA) 水平。结果 　蕨麻乙醇提取物能减轻缺血再灌注导致的心电图 J 点抬高 ,提高 SOD 活性 ,降低血清
·477· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 5 期 2009 年 5 月
3 收稿日期 :2008211212　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30672774)
作者简介 :叶　立 (1966 —) ,女 ,浙江杭州人 ,副主任药师 ,主要从事临床药学研究。3 通讯作者　李灵芝　Tel : (022) 60578184 　E2mail : llzhx @tom. com
LD H、CK 活性和 MDA 水平 ,缩小心肌组织缺血再灌注损伤面积。结论 　蕨麻乙醇提取物能对抗缺血再灌注导致
的心肌损伤。
关键词 :蕨麻 ; 缺血再灌注 ; 垂体后叶素
中图分类号 :R28612 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 2670 (2009) 05 0774 04
　　蕨麻为蔷薇科植物蕨麻 (鹅绒委陵菜) Poten2
t i l l a anseri ne L . 的地下膨大块根 ,始载于《西藏常
用中药材》,主要产于青海、西藏、甘肃等高寒地带 ,
其富含蛋白质、脂质和人体必需的多种氨基酸、微量
元素及维生素 C 和 E 等 ,并含有皂苷、委陵菜苷和
黄酮类成分[ 1 ,2 ] 。研究表明蕨麻具有抗氧化、耐缺
氧、抗疲劳、抗衰老作用[ 3 ,6 ] ,亦具有肝保护作用[7 ] ,
并能提高机体免疫力与应激能力[8 ] 。但迄今未见关
于蕨麻对心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究报
道。本实验采用垂体后叶素 + 硝酸甘油方法建立小
鼠心肌缺血再灌注损伤模型 ,研究蕨麻乙醇提取物
的抗缺血再灌注损伤作用。
1 　材料
111 　药品及试剂 :蕨麻乙醇提取物由武警医学院药
物化学教研室提取 (相当于生药 3 g/ g ,生药购自青
海) ,其中含亚油酸 0167 %。复方丹参片 ,天津泰达
药业有限公司生产 ;垂体后叶素 ,上海第一生化药业
有限公司生产 ;硝酸甘油 ,北京益民药业有限公司生
产。乳酸脱氢酶 (LD H) 、肌酸激酶 ( C K) 、超氧化
物歧化酶 (SOD) 、丙二醛 (MDA) 试剂盒及考马斯
亮蓝试剂盒均购于南京建成生物工程公司。
112 　实验仪器 :UV —1601 紫外分光光度计 (日本
岛津) ,RM2135 型组织切片机 (德国 Leica 公司) ,
CH —2 型光学显微镜 (日本 Olymp us 公司) ,高速
低温离心机 (德国 Eppendorf 公司) ,Bio2Rad 550
型酶标仪 (美国) 。
113 　实验动物 :雌性昆明种小鼠 ,军事医学科学院
实验动物中心提供 ,许可证号 : SC K2(军) 2002201 ,
体质量 (25 ±3) g。
2 　方法
211 　建立心肌缺血再灌注损伤模型 :各组动物连续
给药 20 d 后参考文献方法[9～11 ]制备模型。第 21 天
ig 给药 50 min 后 ,在乌拉坦 (1 g/ kg) ip 麻醉下 ,动
物心电图机记录每只小鼠心电图 Ⅰ。除对照组外均
ip 垂体后叶素 20 U/ kg ,对照组 ip 等体积生理盐
水。30 min 后记录小鼠心电图 Ⅱ。除对照组外均
ip 硝酸甘油 10 mg/ kg ,对照组则 ip 等体积生理盐
水 ,50 min 后记录小鼠心电图 Ⅲ。观察心电图 Ⅰ、
Ⅱ、Ⅲ的 J 点变化情况 ,将心电图 ⅡJ 点降低或抬高
大于 012 mV、在心电图 Ⅲ上恢复到心电图 Ⅰ水平
的小鼠纳入实验。纳入实验的小鼠 ip 硝酸甘油 2 h
后 ,经股动脉取血 1 mL ,冰上静置 1 h 后 ,低温离心
10 min (4 ℃、5 000 r/ min) ,取血清 ,置于 4 ℃冰盒
待测。
212 　实验分组与给药 :造模成功的小鼠随机分为模
型组 ,蕨麻乙醇提取物高、中、低剂量 (5、10、20 g/ kg)
组 ,复方丹参 (015 g/ kg) 组 ,每组 10 只。同时取 10
只正常小鼠设为对照组 ,对照组和模型组 ig 给予
013 % CMC2Na 溶液 ,其余 4 组分别 ig 给予蕨麻乙醇
提取物及复方丹参片 ,溶媒为 CMC2Na 溶液。
213 　心电图观察 :观察心电图 Ⅱ的 J 点位移。以
PR 段为基线 ,每个时间点测 5 个连续的波型 ,取各
波型 J 点高度的平均值 ,计算 J 点位移的绝对值。
214 　组织形态学观察 :4 % 多聚甲醛液固定心肌组
织 ,石蜡包埋、切片 ,进行常规 H E 染色及心肌组织
Nagar2Olsen 特殊染色 ,树脂封片。光镜下观察组
织形态变化。
215 　生化指标检测 :按照试剂盒说明进行操作 ,分
别检测血清 LD H、C K、SOD 活性及 MDA 水平。
216 　统计学处理 :数据以 x ±s 表示 ,应用 SPSS
1115 统计软件进行单因素方差分析 ,组间比较采用
t 检验。
3 　结果
311 　对心电图的影响 :与对照组相比 ,模型组小鼠
ip 垂体后叶素后 ,心电图 ( Ⅲ) J 点明显位移 ( P <
0101) ,蕨麻乙醇提取物 5、10、20 g/ kg 组小鼠心电
图 J 点位移明显减小 ,与模型组相比 ,差异非常显著
( P < 0101) ,见表 1。
表 1 　蕨麻提取物对心肌缺血小鼠心电图 J 点的影响
( x ±s , n = 10)
Table 1 　Effect of extract from P. anserine on J
spot in electrocardiograms of myocardial
ischemia mice ( x ±s , n = 10)
组　别 剂量/ (g ·kg - 1) J 点位移/ mV (心电图Ⅱ)
对照 　　- 01021 ±01 038
模型 　　- 01223 ±01 035 3 3
复方丹参片 　　015 01107 ±01 036 △△
蕨麻乙醇提取物 5 01169 ±01 032 △△
10 01114 ±01 034 △△
20 01107 ±01 032 △△
　　与对照组比较 : 3 3 P < 01 01 ; 　与模型组比较 : △△P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs cont rol group ; 　△△P < 01 01 vs model group
·577·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 5 期 2009 年 5 月
312 　对血清中 LDH、CK、SOD 活性和 MDA 水平的
影响 :与对照组相比 ,模型组小鼠血清 LDH、CK、
MDA 水平显著升高 ( P < 0101) , SOD 活性则降低
( P < 0101) ;与模型组相比 ,蕨麻乙醇提取物 5、10、20
g/ kg 组小鼠血清 LDH、CK、MDA 水平均降低 ( P <
0101、0105) ,SOD 活性则升高 ( P < 0101) ,见表 2。
313 　对小鼠心肌组织病理学的影响 :光镜下心肌组
织常规 H E 染色切片可见 :正常功能的心肌组织呈
淡红色 ,核蓝染。心肌纤维排列整齐 ,无细胞肿胀。
受损伤的心肌组织细胞胞体浓缩 ,胞核固缩 ,胞浆着
色不均 ,呈同质性嗜酸性着色。蕨麻乙醇提取物各
剂量均可缩小小鼠心肌组织缺血再灌注损伤面积 ,
减轻损伤的程度。
心肌组织 Nagar2Olsen 特殊染色切片可见 :正
常心肌组织呈黄色 ,受损伤的心肌组织呈红色。与
正常心肌组织相比 ,模型组心肌呈现大片红染。与
模型组比较 ,各剂量蕨麻乙醇提取物组小鼠心肌组
织红染面积均缩小 ,黄染面积相应增大 ,见图 1。
表 2 　蕨麻提取物对心肌缺血再灌注损伤小鼠血清 LD H、CK、SOD 活性和 MDA 水平的影响 ( x ±s , n = 10)
Table 2 　Effect of extract from P. anserine on activities of LD H, CK, SOD and level of MDA in serum
of myocardial ischemia2reperfusion mice ( x ±s , n = 10)
组　别 剂量/ (g ·kg - 1) LD H/ (U ·L - 1) CK/ (U ·mL - 1) SOD/ (U ·mL - 1) MDA/ (nmol ·mL - 1)
对照 　- 3 643127 ±4111 12 371 47 ±13175 302197 ±341 13 51 08 ±01 66
模型 　- 4 662154 ±6511 99 3 3 771 43 ±16131 3 3 211167 ±341 49 3 3 71 38 ±01 80 3 3
复方丹参片 　01 5 3 709162 ±6481 07 △△ 451 13 ±18163 △△ 301118 ±301 59 △△ 51 19 ±01 73 △△
蕨麻乙醇提取物 5 3 868127 ±7081 68 △ 511 13 ±25152 △ 270182 ±521 62 △△ 61 67 ±01 47 △
10 3 736154 ±4571 61 △△ 471 60 ±18150 △ 280196 ±401 60 △△ 51 68 ±01 93 △△
20 3 765139 ±6441 10 △△ 501 33 ±22107 △△ 288122 ±411 24 △△ 51 73 ±11 07 △△
　　与对照组比较 : 3 3 P < 0101 ; 　与模型组比较 : △P < 0105 　△△P < 01 01
　　3 3 P < 0101 vs cont rol group ; 　△P < 01 05 　△△P < 0101 vs model group
图 1 　小鼠缺血再灌注后心肌组织 Nagar2Olsen 染色
Fig. 1 　Nagar2Olsen stain of myocardium in mice injured by myocardial ischemia2reperfusion
4 　讨论
　　垂体后叶素可引起冠状动脉痉挛 ,造成急性心
肌供血不足 ;通过收缩全身小血管 ,增加外周阻力 ,
使心脏负荷增加 ,因此 ,注射垂体后叶素可致动物发
生急性心肌缺血 ,是常用的心肌缺血模型之一。硝
酸酯类药物具有扩冠、降低心脏前、后负荷、降低心
肌耗氧量等作用 ,这些作用可减缓注射垂体后叶素
造成的冠脉痉挛 ,从而实现再灌注。心电图 J 点是
判断心肌缺血发生与否的一个重要指标。本实验通
过心电图 J 点的变化证实 ,注射垂体后叶素后心电
图 J 点明显上抬 ,提示此时已发生急性心肌缺血。
给予 5、10、20 g/ kg 的蕨麻乙醇提取物 ,均可明显逆
转 J 点的抬高 ,表明蕨麻乙醇提取物可减轻垂体后
叶素所致的急性心肌缺血。
LD H 是反映组织细胞胞膜完整性的重要检测
指标。肌酸激酶 (C K) 是重要的心肌酶之一 ,也是
心肌受损时较早漏出细胞的酶 ,其释放量反映了心
肌缺血损伤的程度 ,因此可通过测定血清 LD H 及
C K 水平间接判断心肌细胞损伤程度。本实验结果
证实 ,与对照组相比 ,模型组小鼠血清中 LD H、C K
水平均显著升高 ,表明心肌细胞已受损 ,蕨麻乙醇提
取物干预后 ,小鼠血清 LD H、C K 水平显著降低 ,提
示蕨麻乙醇提取物在缺血再灌注时对心肌细胞具有
一定保护作用。心肌组织 Nagar2Olsen 染色也证
·677· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 5 期 2009 年 5 月
实 ,蕨麻乙醇提取物能使缺血再灌注导致的心肌损
伤面积缩小 ,对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。
本实验结果还显示 ,蕨麻乙醇提取物可提高损伤
小鼠血清 SOD 活力 ,降低 MDA 水平 ,提示其可能通
过增强机体抗氧化能力、减轻自由基堆积导致的膜脂
质过氧化来减轻缺血再灌注造成的心肌损伤。
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聪耳颗粒对实验性老年豚鼠听力的影响
白 　雪1 ,2 ,廖志航2 ,周丽娟2 ,郑 　凯2 ,杨 　炀2 ,吴晓仪2 3
(11 成都市龙泉驿区妇幼保健院 ,四川 成都 　610100 ; 21 四川省中医药科学院中医研究所 ,四川 成都 　610031)
摘 　要 :目的 　研究聪耳颗粒对实验性老年豚鼠听力损伤的保护作用。方法 　选用耳廓反射正常的 3 月龄豚鼠随
机分为对照组 , D2半乳糖模型组、耳聋左慈丸组和聪耳颗粒高、中、低剂量组。另取 10 月龄老年豚鼠作为自然衰老
模型组。除对照组、自然衰老模型组外 ,其余各组豚鼠经腹部 sc D2半乳糖造模。末次给药后测定脑干听觉诱发电
位 (ABR)阈值 ,静脉取血检测超氧化物歧化酶 (SOD) 和丙二醛 (MDA) 。结果 　聪耳颗粒各组豚鼠 ABR 值较 D2
半乳糖模型组和自然衰老模型组明显下降 ;聪耳颗粒高、中剂量组豚鼠的 SOD 活性较 D2半乳糖 (模型组) 和自然
衰老模型组明显升高 ;聪耳颗粒各组 MDA 较 D2半乳糖模型组和自然衰老模型组明显降低。结论 　聪耳颗粒对
D2半乳糖造成豚鼠衰老和听力下降具有明显的保护作用。
关键词 :聪耳颗粒 ; 诱发电位 ; 听力
中图分类号 :R28611 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 2670 (2009) 05 0777 03
　　中医传统理论认为耳的听觉功能与肾气的盛衰
有着密切关系 ,即“肾开窍于耳”,“肾精不足则耳聋
耳鸣”,“窍闭则聋”,所以治疗耳聋历代医家都主张
补肾活血 ,理气开窍。聪耳颗粒正是根据以上中医
传统理论研发而成的中药复方颗粒制剂 ,主要由丹
参、骨碎补、石菖蒲、人工麝香等组成 ,具有改善微循
环 ,开窍聪耳之功用 ,主要用于治疗老年性感音性耳
聋引起的听力下降、耳鸣 ,或伴有腰痛乏力等症。鉴
于此 ,笔者运用耳蜗电生理技术 ,观察了聪耳颗粒对
实验性老年豚鼠听力的影响 ,为其临床应用提供实
验依据。
1 　材料与方法
111 　动物 :健康 3 月龄三色豚鼠 , 60 只 ,体质量
350～400 g ; 10 月龄老年三色豚鼠 ,10 只 ,体质量
600～800 g ;雌雄各半 ,由四川省医学科学院医学实
验动物研究所提供。
112 　药物与试剂 :聪耳颗粒 ,由四川省中医药科学
院中医研究所提供 ,批号 040102。耳聋左慈丸 (浓缩
丸) ,兰州佛慈制药股份有限公司生产 ,批号 20031014。
D2半乳糖 ,上海试剂二厂生产 ,批号 030706。
113 　方法 :选用耳廓反射正常的 3 月龄豚鼠 60 只 ,
按体质量随机分为对照组 , D2半乳糖模型组 ,耳聋
左慈丸组和聪耳颗粒高、中、低剂量组 ,每组 10 只 ,
另取 10 月龄豚鼠 10 只作为自然衰老模型组。除
对照组和自然衰老模型组外 ,其余各组豚鼠每日腹
部 sc D2半乳糖 50 mg/ kg 造模 ,而对照组豚鼠每日
腹部 sc 同体积生理盐水 ,连续 40 d[1 ] 。造模 10 d
后 ,聪耳颗粒高、中、低剂量 (生药 1014、512、216
·777·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 5 期 2009 年 5 月
3 收稿日期 :2008208207　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :白　雪 (1980 —) ,女 ,四川成都人 ,硕士研究生 ,主要从事药物安全性评价与有效性研究。Tel : 13658017918