全 文 ：·766· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
[5]TakayukiS，ToshifumiH．Biotrans[ormationfexogenous
substrateshyplantcellcultures[J]．Phytochemistry，1990。
29：2393．
[6]刘长军，侯嵩生．抗癌活性物质鬼臼类木脂素的研究进展
[J]．天然产物研究与开发，1997。9(3)：81—89．
[7]KondoK，09uraM．MidorikawaY，eta1．Conversionof
deoxypodophyllotoxintOpodophyllotoxinrelatedcompounds
bymicrobes[J]．AgricBiolChem，1989，53：777．
[83KondoK，OguraM，MidorikawaY，et／．Theconversionof
deoxypodophyllotoxintoepip dophyllotoxinbyPenicillium
F-0543LJJ．AgricBiolChm，1990，52：2673．
[93UdenWvan，BoumaAS，BrachtWakerJF，以a1．The
productionofp dophyllotoxinandits5-methoxyderivative
throughbio．-conversionofcyclodextrin．．complexeddesoxy··
podophyilotoxinbyplantcellcultures[J]．PlantCel 竹Ⅱ
OrgCult·1995·42：73．
[10]KoulmanA BeekmanAC，PrasN，“a1．The
bioconversionp ocessfdeoxypodophyllotoxinwithLinura
flavumcellcultures口]．PlantaMed，2003．69(8)l739．
[11]BrewerCF，LoikeJD，HorwitzSB，eta／．Conformationai
analysisofpodophyllotoxinanditscongeners．Structure-
activityrelationshipinmicrotubuleass mbly口]．JMed
Chem，1979．22(3)：215．
[12]AyresDC，HarrisJA．Lignanaandrelatedphenols，part
XI．applicationotnuclearm gneticdoubler sonanceto
aryhetrahydronaphthalene[J]．JChonSocPcrkin，1972，
1I1343．
[13]杨世海，刘晓峰，果德安，等．9种活性物质在掌叶大黄组织
培养系统中的生物转化[J]．吉林农业大学学报，2005，27
(4)：408．412．
何首乌和夜交藤药材指纹图谱研究与评价
苏 建1，袁志芳1，吴一兵2，张兰桐¨，王春英1
(1．河北医科大学药学院药物分析教研室，河北石家庄050017l2．河北医科大学药学院
新药开发教研室，河北石家庄050017)
摘要：目的建立何首乌、夜交藤药材指纹图谱分析方法，并依据指纹图谱对两种药材进行比较，为科学评价与
有效控制何首乌、夜交藤药材质量提供新方法。方法何首乌和夜交藤分别用甲醇和醋酸乙酯超声处理，提取液用
HPLC进行测定。HPLC法采用C。8色谱柱，乙腈一0．1％磷酸梯度洗脱，检测波长分别为265和290nm，体积流量1
mL／min，柱温30℃。结果建立了何首乌、夜交藤药材HPLC指纹图谱，并对不同产地何首乌、夜交藤药材进行了
相似度比较。测定结果显示不同产地药材存在较大差异，化学成分组成及质量分数存在一定差异。结论所建立的
方法简便、可靠，可用于不同产地何首乌、夜交藤药材的指纹图谱测定和质量评价，为全面有效控制何首乌药材的
内在质量提供了依据。
关键词：何首乌；夜交藤；高效液相色谱法f指纹图谱
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)05—0766—04
FingerprintsforRadixPolygoniMultifloriandCaulisetFoliumPolygoniMultiflori
SUJianl，YUANZhi—fan91，WUYi—bin92，ZHANGLan-ton91，WANGChun—yin91
(1．DepartmentofPharmaceuticalAnalysis，SchoolofP armacy，HebeiMedicalUn versity，Shijiazhuang050017，
China，2．DepartmentofRes archandDevelopmentofNewDrug，SchoolofPharmacy，Hebei
MedicalUniversity，Shijiazhuang050017，China)
Abstract：ObjectiveToestablishHPLCfingerprintsforRadixPolygoniMultifloHandCauliset
FoliumPolygoniMultiflori，tocompareth fingerprintsoftheabovetwocruderugscollectedfrom
differenthabitats，andtoprovidean wmethodforscientificevaluationandqualitycontrolofthem．
MethodsRadixPolygoniMultifloriandCaulisetFoliumPolygoniMultifloriwe extractedby
supersonicwavewithmethanolandethylacetate．Thechromatographicp ocedurefofingerprintswas
carriedoutusingC18asananalyticcolumn，gradientelut dwi hamixtureconsistingofacetonitrileand
0．1％H3PO‘．ResultsThisexperimentestablisheda p cificmethodforthequalitycontrolofRadix
PolygoniMultifloriandCaulisetFoliumPolygoniMultiflori，andcomparedthesimilarityofRadix
PolygoniMultifloriwithCaulisPolygoniMultiflorifromdifferenthabitats．ConclusionThismethodis
verysimple，reliable，andcanb useforthefingerprintassayndqualitycontrolofRadixPolygoni
收稿日期：2007～09—15
基金项目：河北省自然科学基金资助项目：何首乌降血脂作用的药效物质基础研究(C2006000791)
作者简介：苏建(1980一)，男，河北秦皇岛人，河北医科大学2004级硕士研究生。
*通讯作者张兰桐Tel：(0311)86266419Fax：(03 1)86052053E—mail：zhanglantong@263．net

万方数据
中革菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月·767·
MultiJToriandCaulisetFoliumPolygoniMultiflori．Itprovidesanewmethodasacomprehensivequality
controlitemforRadixPolygoniMultifloriandCaulisetFoliumPolygoniMultiflori．
Keywords：RadixPolygoniMultiflori；CaulisetFoliumedygoniMultiflori；HPLC；fingerprint
何首乌为蓼科植物何首乌Potygonum
multiflorumThunb．的干燥块根。性微温，味苦、
甘、涩，具有补肝肾、益精血、乌须发、延年益寿等功
效。何首乌主要含3大类有效成分：二苯乙烯类化合
物、蒽醌类化合物及聚合原花青素，此外还含有卵磷
脂和多种微量元素。二苯乙烯苷类化合物是一类具
有显著药理活性的水溶性成分，其代表成分二苯乙
烯苷(2，3，5，47一四羟基二苯乙烯一2一O—pD一葡萄糖
苷)具有显著的降脂作用，《中国药典>>2005年版将
二苯乙烯苷作为何首乌质量的评价指标[1]。夜交藤
又名首乌藤，为蓼科植物何首乌的干燥藤茎或带叶
藤茎，味甘、微苦，性平，有养心、安神、通络、祛风止
痛等功效[2]，用于治疗失眠、劳伤、多汗、血虚身痛。
何首乌与夜交藤虽为同一植物的不同部位，但功效
却不尽相同。同时由于受地理因素和生长环境的影
响，不同产区何首乌、夜交藤的化学成分及其质量也
有一定的差异[3]，仅凭单一化学成分的量难以全面
评价药材质量的优劣。近年来，指纹图谱技术被用于
中药的质量控制，其优点在于可全面反映中药复杂
体系中的化学成分及其相对比例，在大多数中药有
效成分尚未阐明的情况下仍可有效地表征中药材质
量n]。本实验对来自不同产地的何首乌、夜交藤样品
进行了HPLC指纹图谱分析，建立何首乌、夜交藤药
材的指纹图谱，并对不同来源的药材进行比较研究，
为何首乌、夜交藤的质量控制提供有效方法。
1仪器与试药
1．1药品与试剂：Waters高效液相色谱仪，Waters
Empower色谱工作站，Waters2996二极管阵列检
测器(DAD)，DiamonsilTMCl8柱(250mm×4．6mm，
5肛m)。甲醇、乙腈为色谱纯(美国迪马公司)，其他
试剂均为分析纯，水为自制重蒸水。
1．2对照品与供试药材：大黄素(批号0756—9908)、
大黄素甲醚(批号758—9803)、二苯乙烯苷(批号
0844—200003)对照品和何首乌(批号120934—
200507)对照药材均购于中国药品生物制品检定所，
不同产地何首乌、夜交藤药材样品来源见表1，经河
北医科大学聂凤裎教授鉴定均为正品。
2方法与结果
2．1溶液的制备
2．1．1对照品溶液：取二苯乙烯苷、大黄素和大黄
表1样品来源
Table1 Originsofsamples
素甲醚对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释制
成1mL中分别含0．1mg的溶液，即得。
2．1．2供试品溶液：取何首乌药材细粉(过40目
筛)1g，精密称定，加甲醇25mL，称定质量，超声处
理30rain，放冷，称定质量，用甲醇补足减失的质量，
摇匀，滤过，取续滤液，蒸干，加甲醇5mL使溶解，用
微孑L滤膜(o．45弘m)滤过，即得。
取夜交藤药材细粉(过40目筛)4g，精密称定，
加醋酸乙酯50mL，称定质量，超声处理30min，放
冷，称定质量，用醋酸乙酯补足减失的质量，摇匀，滤
过，取续滤液，蒸干，加甲醇5mL使溶解，用微孔滤
膜(O．45弘m)滤过，即得。
2．2指纹图谱的建立
2．2．1 色谱条件及系统适用性试验：色谱柱为
DiamonsilTMCl8柱(250mm×4．6mm，5肛m)；乙腈
(A)一0．1％磷酸(B)为流动相进行梯度洗脱，何首乌
梯度洗脱时间为70rain，0～5min：A-B(5l 95)，
5～10rain从5：95变化到15：85；10b30min从
15l 85变化到30：70；30～50rain从30：70变化
到70：30；50～65rain从70s 3 变化到100l 0；
65---70min从100：0变化到5：95；夜交藤梯度洗
脱时间为110min，0rain：A—B(5：95)，0～5min从

万方数据
·768· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5,El
5：95变化到20：80，5～60min从20：80变化到
35l 65，60～95min从35l 65变化到100l 0，95～
110min从1001 变化到5：95，体积流量为1．0
mL／min，柱温为30℃，进样量20弘L，理论板数按大
黄素峰计算不低于2500。
2．2．2对照及空白试验：分别精密吸取空白溶液、
对照品溶液及供试品溶液各20pL，注入液相色谱
仪，记录色谱图，考察溶剂干扰情况及确认对照峰，
色谱图见图1、2。
Z
．．卜．止上。． S3～出一⋯’‘-。，-。。-一、一r——1r B
A
——可r—可厂—可r——矿—■F—■矿一一丽
t／min
S1一二苯乙烯苷s2一大黄素s3一大黄紊甲醚
S1一stilbeneglycosideS2·emodinS3一physcion
图1 对照品溶液(A)与何首乌典型样品(B)HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramofreferencesubstances
(A)andRa ixPolygoniMultiflori(B)
B
A
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100】10
t／min
S1一二苯乙烯苷s2一大黄素s3一大黄素甲醚
S1一stilbeneglycosideS2一emodinS3一physcion
图2 对照品溶液(A)与夜交藤典型样品(B)HPLC色谱图
Fig．2HPLCChromatogramofreferencesubstances
(A)andCaul妇etFoliumPolygoniMultiflori(B)
2．2．3精密度试验：分别取同一何首乌与夜交藤药
材粉末，按2．1项下方法制备供试品溶液，按2．2．1
项下色谱条件，重复进样6次，记录指纹图谱，将其
导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)，
计算何首乌与夜交藤6次进样所得指纹图谱相似
度，指纹图谱的相似度均大于0．90，符合指纹图谱研
究技术的要求。
2．2．4重现性试验：分别取同一批何首乌与夜交藤
药材粉末6份，精密称定，按2．1项下方法制备供试
品溶液，按2．2．1项下色谱条件，分别进样，记录指
纹图谱，将其导人中药色谱指纹图谱相似度评价系
统(2004A)，计算6份样品所得指纹图谱相似度，指
纹图谱的相似度均大于0．90，符合指纹图谱研究技
术的要求。
2．2．5稳定性试验：取一批何首乌与夜交藤药材粉
末，精密称定，按2．1项下方法制备供试品溶液，按
2．2．1项下色谱条件，分别于0、2、4、6、8、10、12、24、
36、48h检测指纹图谱，导人中药色谱指纹图谱相
似度评价系统(2004A)，计算48h内进样所得指纹
图谱相似度，指纹图谱的相似度均大于0．90。由此说
明何首乌与夜交藤的供试液在48h内基本稳定。
2．2．6不同产地何首乌与夜交藤药材指纹图谱的
建立：取不同产地的何首乌、夜交藤药材，按2．1项
下方法制备供试品溶液，各取20弘L分别进样，按优
选的色谱条件进行HPLC分析，建立指纹图谱。共有
模式图谱见图3、4，不同产地指纹图谱见图5、6，相似
度结果见表2。
t／mIn
图3何首乌共有模式图谱
Fig．3MutualmodeofRadixPolygoniMultiflori
’Ⅵ—可—可—丽—石—丽—万—丽一菇一j面一lij
t／min
图4夜交藤共有模式图谱
Fig．4MutualmodeofCaulisetFolium
PolygoniMultiflori
3指纹图谱分析
中药化学成分的复杂与多样性是其发挥疗效的
物质基础，在其有效成分尚未被阐明的情况下，只采
用单一或少数几个成分作为指标进行质量评价，往
往不能全面反映其质量情况。本实验使用中药色谱
指纹图谱相似度评价系统(2004A)软件，对何首乌、
夜交藤药材进行了指纹图谱分析与评价。根据以上
20批不同来源何首乌与19批夜交藤药材的分析结
果看出，不同何首乌药材指纹图谱相似度较高，绝大

万方数据
中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月·769·
0 13．33 26．66 39．99 53．32 66．65 ‘79．99
t／min
S1～S20一样品R一对照指纹图谱
S1一$20一samples1—20R—referencefingerprint
圈5不同产地何首乌指纹图谱
Fig．5FingerprintsofRadixPolygoniMultiflori
fromdifferenthabitats
I 山^ ‘—咄t，“一、，—～^ 一．
幕褒 、—。，、JL．^一J。一。祭～ ． ．一C灿
孑一彳别 n ， 铆≈～·．： ‘ S—1．．．-．j “—。。、～S
6绷?一 7—■．、 ．：‘ “一r～；．jk甜oL。—，L——／、．^一 瑚～1 —k^~=蚕
蓑延
^ ， 一^埘^．
一--S1
L—．—^-——-，U瑚卜√ h一·。．^—J。—一∑q!。． ^ ^
、———～耍欺 一⋯卜—√Ⅵ嗣I斟 —o了■广～一§：卜☆刊
0 18．34 36．68 5502 73．36 91．70 11004
t／mln
S1～s19-样品1～19R一对照指纹图谱
S1一S19一samples1—19R—referencefingerprint
图6不同产地夜交藤指纹图谱
Fig．6FingerprintsofCaulisetFoliumPolygoni
Multiflorifromdifferenthabitats
表2不同产地何首乌、夜交藤药材指纹图谱与共有模式比
较的相似度
Table2 ResemblanceamongRadixPolygoniMultifloriand
Cauliset FoliumPolygoniMultiflorifrom
differentsourcesomparedwithmutualmode
批号 何首乎似％交藤 批号 何首乎似％交藤
1 0．874 0．949 11 0．875 0．985
2 0．964 0．986 12 0．981 0．876
3 0．989 0．977 13 0．937 0．965
4 0．901 0．673 14 0．992 0．983
5 0．987 0．949 15 0．989 0．770
6 0．990 0．985 16 0．958 0．805
7 0．988 0．845 17 0．985 0．903
8 0．926 0．757 18 0．920 0．743
9 0．970 0．790 19 0．962 0．837
10 0．977 0．793 20 0．958
多数大于0．9，说明不同产地何首乌药材的化学组成
一致性较好，质量稳定；对于19批夜交藤药材指纹
图谱相似度，有10批相似度在0．876～0．986，有9批
相似度在0．673～0．845，不同商品夜交藤中，安徽产
的商品相似度较差。结果提示，虽然从整体上何首
乌、夜交藤药材质量稳定，但仍然有一定比例的何首
乌、夜交藤药材偏离整体水平较远，在选择药材产地
时应予以注意，缩小药材的产地范围，无疑对保证何
首乌、夜交藤的质量一致性具有重要作用。
4讨论
4．1本实验采用HPLC法，对不同产地的何首乌、
夜交藤样品进行了指纹图谱分析，实验结果反映了
何首乌、夜交藤药材的化学组成及其相对比例，既可
用于定性鉴别，也可用于定量分析，并且对于何首乌
的栽培、生产加工、贮藏运输、临床使用等各个环节
的全面质量监控提供了可靠的依据，为中药何首乌
深入研究奠定了基础。
4．2本实验曾考虑用相同的实验条件对两种药材
进行指纹图谱分析，但实验中发现两种药材虽然为
同一植物的不同部位，但是其所含成分存在很大差
异，不可能在同一提取和色谱条件下得到较好的指
纹图谱，所以最后对两种药材分别采用不同的提取
溶剂和应用不同的色谱条件进行指纹图谱分析。从
两种药材最后所得的指纹图谱看出，虽然两种药材
中均含有二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚，但是在
量上存在较大差异，并且所含的化学成分也不尽相
同，这可能是何首乌与夜交藤虽为同一植物的不同
部位，但功效却不尽相同的原因。
4．3本实验比较了不同提取溶剂(95％乙醇、70％
乙醇、45％乙醇、50％甲醇、甲醇)的水浴回流、索氏
提取，超声提取等不同提取方法的提取效果，同时还
考察了不同提取时间的提取效率。结果表明，以甲醇
为提取溶剂，当超声提取30min时，各色谱峰的响
应值不再增加，且方法稳定，重现性好。本实验采用
HPLC—DAD检测器分析对何首乌、夜交藤进行了
200---,400am的全波长扫描，得到三维全波长紫外
扫描图，为同时突出二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲
醚的特征峰，最后确定何首乌在265am、夜交藤在
290am能得到峰形较好、峰数较多的色谱图。
参考文献：
Eli中国药典Is]．2005．
[2]宋毅，唐尧，张志勇．等．夜交藤抗炎抑菌作用的实验
研究CJ]．华西药学杂志，2003，18(2)：114—116．
[3]苏建，袁志芳，张兰桐，等．RP．HPLC法测定何首乌、夜
交藤中二苯乙烯苷及葸醌类成分的含量口]．中草药，2007，
38(Z)：278—281． 。
[4]赵明波，邓秀兰．王亚玲，等．红花RP—HPLC指纹图谱的建
立及其质量研究CJ]．药学学报．2004．39(3)：212—216．

万方数据
何首乌和夜交藤药材指纹图谱研究与评价
作者： 苏建， 袁志芳， 吴一兵， 张兰桐， 王春英， SU Jian， YUAN Zhi-fang， WU Yi-bing
， ZHANG Lan-tong， WANG Chun-ying
作者单位： 苏建,袁志芳,张兰桐,王春英,SU Jian,YUAN Zhi-fang,ZHANG Lan-tong,WANG Chun-ying(河
北医科大学药学院药物分析教研室,河北石家庄,050017)， 吴一兵,WU Yi-bing(河北医科大
学药学院)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(5)
被引用次数： 5次

参考文献(4条)
1.中华人民共和国药典 2005
2.宋毅.唐尧.张志勇 夜交藤抗炎抑菌作用的实验研究[期刊论文]-华西药学杂志 2003(02)
3.苏建.袁志芳.张兰桐 RP-HPLC法测定何首乌、夜交藤中二苯乙烯苷及蒽醌类成分的含量[期刊论文]-中草药
2007(02)
4.赵明波.邓秀兰.王亚玲 红花RP-HPLC指纹图谱的建立及其质量研究[期刊论文]-药学学报 2004(03)

本文读者也读过(10条)
1. 高农.韩学俭 夜交藤采收与加工技术[期刊论文]-农村经济与科技2003,14(9)
2. 高农.韩学俭 夜交藤采收与加工技术[期刊论文]-农村实用科技信息2007(6)
3. 王付荣.周洪雷 夜交藤的化学成分研究[期刊论文]-中医药学报2008,36(2)
4. 王争平.丁青龙.李莹 HPLC法测定不同产地夜交藤(首乌藤)中大黄素的含量[期刊论文]-中国现代药物应用
2010,4(4)
5. 闫浩.张红霞 夜交藤、珍珠母在顽固性肝硬化腹水中的应用[期刊论文]-实用中西医结合临床2005,5(3)
6. 闵范忠 提神安眠方[期刊论文]-广西中医药2006,29(4)
7. 黄青松 益气养血安神汤治疗严重神经衰弱200例临床观察[期刊论文]-四川中医2003,21(3)
8. 哈小博 漫谈天麻钩藤饮[期刊论文]-开卷有益（求医问药）2003(2)
9. 张世权.张华东 何首乌的采集与加工[期刊论文]-河北农业科技2002(12)
10. 李洪斌 何首乌的栽培与管理[期刊论文]-脱贫与致富2001,1(1)

引证文献(5条)
1.逄楠楠.毕开顺.闫宝庆.陈晓辉 芫花高效液相色谱指纹图谱研究[期刊论文]-中草药 2010(5)
2.刘成旭.孟宪超 清蒸与黑豆汁蒸对何首乌质量的影响[期刊论文]-黑龙江科技信息 2013(16)
3.陈蓉.沈蓓.吴启南 基于主成分分析和聚类判别模式对不同产地芡实HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-中成药
2012(5)
4.陈庆堂.卓丽红.徐文.黄志海.丘小惠 何首乌炮制过程中5种化学成分的含量变化[期刊论文]-中国实验方剂学杂
志 2012(5)
5.李燕.王慧娟.林冰.赵致.周英 指纹图谱条件下何首乌中二苯乙烯苷的含量测定[期刊论文]-山地农业生物学报
2012(3)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200805042.aspx