全 文 ：[ 7 ]　徐叔云, 卞如濂, 陈　修 1 药理实验方法学 [M ]1 北京: 人民
卫生出版社, 20021
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杜鹃花总黄酮对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制①
范一菲1, 王云海2, 张建华3, 陈志武33
(11 安徽医科大学 生理学教研室, 安徽 合肥　230032; 21 安徽医科大学第一附属医院 普胸外科,
安徽 合肥　230032; 31 安徽医科大学 药理学教研室, 安徽 合肥　230032)
摘　要: 目的　观察杜鹃花总黄酮 (T FR S) 对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法　采用在体结
扎大鼠心脏冠状动脉左前降支法, 观察心电图 ST 段和 T 波的变化, T TC 染色法测定心肌梗死面积并测定大鼠血
清乳酸脱氢酶 (LDH )、肌酸激酶 (CK) 活性, 血清丙二醛 (M DA ) 及一氧化氮 (NO ) 水平, 并应用逆转录酶链式反
应 (R T 2PCR ) 方法测大鼠心肌中诱导型一氧化氮合酶 ( iNO S) mRNA 表达情况。结果　T FR S 100 m gökg 对缺血
30 m in 时 ST 段的抬高有明显抑制作用, T FR S 25、50、100 m gökg 对再灌注 30 m in 时 ST 段的抬高有明显抑制作
用; T FR S 50 m gökg 能显著的降低心肌梗死面积; T FR S 50、100 m gökg 能不同程度降低血清中的 LDH、CK 的活
性。T FR S 50 m gökg 可降低血清中M DA 的水平; T FR S 100 m gökg 能显著提高心肌 iNO S mRNA 的表达。结论
　T FR S 对心肌和缺血再灌注损伤有一定的保护作用, 其作用机制可能与抗自由基和提高心肌 iNO S 基因 mRNA
的表达及增加 NO 产生有关。
关键词: 杜鹃花总黄酮 (T FR S) ; 心肌缺血再灌注; 诱导型一氧化氮合酶 ( iNO S)
中图分类号: R 28612　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0240- 05
Protection and m echan ism of tota l f lavones from R hododend ron s im s ii
on m yocard ia l ischem ia-reperfusion in jury ra ts
FAN Y i2fei1, W AN G Yun2hai2, ZHAN G J ian2hua3, CH EN Zh i2w u3
(11D epartm ent of Physio logy, A nhuiM edical U niversity, H efei 230032, Ch ina; 2. D epartm ent of Chest Surgery,
F irst A ffilia ted Ho sp ita l, A nhuiM edical U niversity, H efei 230032, Ch ina; 3. D epartm ent
of Pharm aco logy, A nhuiM edical U niversity, H efei 230032, Ch ina)
Abstract: Objective 　 To study the p ro tect ive effect of to ta l f lavone from R hod od end ron sim sii
(T FR S) on m yocard ia l ischem ia2reperfu sion in ju ry ra ts and its m echan ism. M ethods　T he ischem ic model
w as m ade by occluding the an terio r descending of the lef t artery (LAD ) in ra ts. T he change of ST segm en t
and T w ave of electrocard iograph (ECG) w ere ob served, and the act ivity of lacta te dehydrogenase (LDH ) ,
crea t ine k inase (CK ) , levels of the m aleic d ia ldehyde (M DA ) , and n it ric ox ide (NO ) in serum w ere
m easu red. A nd by tetrazo lium ch lo ride (T TC) sta in ing, the areas of m yocard ia l infarct ion w ere ob served.
T he exp ression of inducib le n it ricox ide syn thase ( iNO S) in ra ts w as detected by emp lo ring the reverse
tran scrip t ion2 po lym erase chain react ion (R T 2PCR ) techn ique. Results　O n the m yocard ia l infarct ion
model by occluding the an terio r descending of the LAD in ra ts, T FR S (100 m gökg) obviou sly reduced the
heigh t of ST segm en t after occluding 30 m in and T FR S (25, 50, and 100 m gökg) obviou sly reduced the
heigh t of ST segm en t after reperfu sion 30 m in. T FR S (50 m gökg) reduced by m yocard ia l infarct ion area.
T FR S (50 and 100 m gökg) obviou sly reduced the act ivity of CK and LDH. T FR S (50 m gökg) decreased
the level of M DA in serum. By R T 2PCR techn ique, it w as found that the exp ression of iNO S mRNA in
m yocard ium in IR rats p ret rea ted w ith T FR S (100 m gökg) w as h igher than that in IR and no rm al group s.
Conclusion s　T FR S has the sign if ican t p ro tect ion again st m yocard ia l ischem ia2reperfu sion in ju ry via a t te2
·042· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007205211
基金项目: 安徽省科技攻关重点资助项目 (0613059A ) ; 安徽医科大学科研基金资助项目 (2005Z031)
作者简介: 范一菲 (1977—) , 女, 安徽宁国市人, 讲师, 在读博士, 研究方向为心脑血管药理学。
T el: (0551) 5161132　E2m ail: fanyifei100@yahoo. com. cn3 通讯作者　陈志武　T el: (0551) 5161133　E2m ail: w zcx iong@m ail. hf. ah. cn
nuat ing oxygen free radica l and increasing the exp ression of iNO S mRNA and NO p roduct ion.
Key words: to ta l f lavone of R hod od end ron sim sii P lanch. (T FR S) ; m yocard ia l ischem ia2reperfu sion;
inducib le n it ricox ide syn thase (iNO S)
　　杜鹃花总黄酮 ( to ta l f lavones of R hod od en2
d ron sim sii, T FR S) 是从杜鹃科植物杜鹃 R hod o2
d end ron sim sii P lanch. 花中提取的有效部位, 其主
要成分为槲皮素、金丝桃苷及映山红素等, 而金丝桃
苷[1 ]、槲皮素[2 ]等对心肌缺血损伤有明显保护作用,
因此, 推测 T FR S 对心肌缺血性损伤可能也有保护
作用, 本研究室前期研究也曾报道过 T FR S 对大鼠
离体心脏的抗心肌缺血作用[3 ]。本实验通过在体大
鼠心肌缺血再灌注模型, 研究 T FR S 对心肌缺血及
再灌注损伤的保护作用, 并对其可能的机制进行初
步的探讨。
1　材料与方法
111　药品与试剂: T FR S 由安徽医科大学药理学教
研室提供, 黄色粉末, 总黄酮质量分数达 80% 以
上; 硝酸甘油, 北京益民药业有限公司, 批号
20050530; 乳酸脱氢酶 (LDH ) 试剂盒、肌酸激酶
(CK) 试剂盒、丙二醛 (M DA ) 试剂盒、一氧化氮
(NO ) 试剂盒, 均由南京建成生物工程研究所提供。
TR IZOL R eagen t, 大连宝生物公司, 批号 BK502;
琼 脂糖, 捷瑞生物工程 (上海) 有限公司, 批号
3211G25; PCR 试剂盒, 大连宝生物公司, 批号
BK3301; 其余试剂为国产分析纯。
112　动物:W istar 大鼠, 体重 250～ 300 g, 雄性, 由
安徽医科大学实验动物中心提供, 普通级。
113　方法: 大鼠随机分为 6 组, 分别为假手术组, 模
型组, T FR S 25、50、100 m gökg 3 个剂量组, 硝酸甘
油 10 m gökg 阳性药对照组。氨基甲酸乙酯 (1 gö
kg) ip 麻醉后, 固定, 持续记录肢体导联心电图 (Ê
导, ECG)。气管插管, 连接小动物呼吸机, 呼吸频率
为 70 次öm in, 潮气量 12 mL。沿左锁骨中线切开皮
肤 2 cm , 在第三四肋间打开胸腔, 暴露心脏, 剪开心
包, 在动脉圆锥与左心耳之间冠状静脉处进针, 使左
冠状动脉前降支 (LAD ) 位于其上, 稳定 10 m in
后, 套上双层塑料套管, 收紧扎线即完成左冠状动脉
闭塞致心肌缺血。心肌缺血的判断标准为心电图出
现心肌梗死表现 (ST 段抬高及 T 波高尖) 及心脏
局部紫绀。心肌缺血 30 m in 后抽出内层套管, 即松
开线结实施再灌注 60 m in。给药方法为造模前 3 d
尾静脉推注, 每日 1 次。
实验结束后, 腹主动脉取血, 并迅速取出心脏,
去除心脏内的瘀血, 重新结扎冠状动脉左前降支, 从
主动脉注入 0125% 伊文思蓝溶液, 立刻放入
- 80 ℃ 冰 箱 冻 存 备 用。 血 液 离 心 取 上 清,
置 - 20 ℃ 冰箱冻存。全部实验结束后严格按试剂
盒操作测LDH、CK、M DA、NO 等生化指标。将冷冻
后的心脏取出, 将心脏从心尖到心基底部平行切成
2 mm 的小片, 置于 1% 氯化三苯基四氮 (T TC) 溶
液中, 37 ℃ 温孵 30 m in, 染色, 置 10% 福尔马林中
固定并照相, 未缺血区为红色, 梗死区为白色, 在图
像分析软件 ( Im age J ) 下计算出梗死区 ( IS) 的面
积, 心肌梗死程度以 ISöAA R (梗死心肌面积ö全心
面积) 来表示。另设假手术组, 模型组, T FR S 大剂
量组 (100 m gökg) , 每组各 3 只大鼠, 实验方法相
同, 再灌注结束后迅速取心脏, 液氮保存, 待测诱导
型一氧化氮合酶 ( iNO S) mRNA 基因的表达情况
(R T 2PCR )。
114　统计学方法: 各项指标结果以 x ±s 表示, 配对
t 检验处理。所有数据分析均用 SPSS 1115 统计软
件分析处理。mRNA 表达量的比较采用核酸ö蛋白
凝胶图像分析管理系统对电泳条带的灰度值进行测
定, 以 iNO SöΒ2act in 灰度值作为半定量分析指标,
并做组间比较。
2　结果
211　T FR S 对缺血再灌注后 ECG 的影响: 如表 1
和 2 所示。假手术组大鼠在整个实验期间的各个时
间点 ST 段均无明显偏移, 模型组大鼠在心肌缺血
2、30 m in 及再灌注时 ST 段抬高 (△ST ) 明显, 与
假手术组比较, 差异显著 (P < 0101)。T FR S 50、100
m gökg 组对缺血 2 m in 时 ST 段的抬高有明显的抑
制作用, 硝酸甘油与 T FR S 100 m gökg 处理组对缺
血 30 m in 时 ST 段的抬高有明显的抑制作用。硝酸
甘油与 T FR S 25、50、100 m gökg 组对再灌注 30
m in 时 ST 段的抬高有明显的抑制作用, 与模型组
比较差异显著 (P < 0105、0101)。
从表 2 可以看出, 假手术组大鼠在心肌缺血及
再灌注的各个时间点 T 波高度均无明显变化, 模型
组大鼠在心肌缺血 2、30 m in 及再灌注时 T 波抬高
(△T ) 明显, 与假手术组比较, 差异显著 ( P <
0101)。T FR S 100 m gökg 对缺血 30 m in 时 T 波的
抬高有明显的抑制作用。硝酸甘油与 T FR S 25、50
·142·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
表 1　TFRS 对心肌缺血再灌注损伤大鼠心电图 ∃ ST 的影响 (x±s, n= 8)
Table 1　Effect of TFRS on ∃ ST of ECG in myocardia l ischem ia-reperfusion in jury rats (x±s, n= 8)
组　别
剂量ö
(m g·kg- 1)
∃STömV
缺血 2 m in 缺血 30 m in 再灌注 5 m in 再灌注 30 m in 再灌注 60 m in
假手术 - 01029±01013 01021±01011 01014±01005 01016±01010 01015±01006
模型 - 01115±01026# # 01092±01035# # 01096±01032# 01089±01029# # 01051±01026# #
T FRS 100 01078±010213 3 01046±010153 3 01072±01021 01050±010263 01036±01018
50 01044±010233 3 01050±010253 01069±01019 01058±010203 01045±01017
25 01099±01032 01085±01031 01083±01027 01069±010183 01059±01020
硝酸甘油 10 01082±01039 01042±010203 3 01066±01026 01042±010163 3 01028±010133
　　　与假手术组比较: # P < 0105　# # P < 0101; 　与模型组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　# P < 0105　# # P < 0101 vs Sham group; 　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs model group
表 2　TFRS 对心肌缺血再灌注损伤大鼠心电图 ∃ T 的影响 (x±s, n= 8)
Table 2　Effect of TFRS on ∃ T of ECG in myocardia l ischem ia-reperfusion in jury rats (x±s, n= 8)
组　别
剂量ö
(m g·kg- 1)
∃T ömV
缺血 2 m in 缺血 30 m in 再灌注 5 m in 再灌注 30 m in 再灌注 60 m in
假手术 - 01129±01025 01132±01021 01129±01028 01127±01024 01129±01027
模型 - 01289±01108# # 01268±01116# # 01248±01095# 01251±01109# # 01169±01048
T FRS 100 01283±01113 01138±010493 01183±01056 01173±01062 01163±01047
50 01196±01056 01226±01075 01175±01069 01123±010673 01145±01050
25 01234±01075 01159±01076 01182±01086 01133±010573 01126±01048
硝酸甘油 10 01238±01079 01128±010323 3 01168±01052 01129±010473 01128±01039
　　　与假手术组比较: # P < 0105　# # P < 0101; 　与模型组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　# P < 0105　# # P < 0101 vs Sham group; 　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs model group
m gökg 对再灌注 30 m in 时 T 波的抬高有明显的抑
制作用, 与模型组比较差异显著 (P < 0105)。
212　T FR S 对缺血再灌注后心肌梗死面积的影响:
图 1 表明心脏缺血再灌注损伤后, 与假手术组比较,
模型组大鼠心肌梗死面积 ( ISöAA R ) 明显增加, 表
明模型成功。与模型组比较, 硝酸甘油及 T FR S 各
组均能不同程度地降低 ISöAA R , 其中 T FR S 50
m gökg组的降低梗死面积与模型组比较有显著意
与假手术组比较: # # P < 0101
与模型组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
# # P < 0101 vs Sham group3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs model group
图 1　TFRS 对心肌缺血再灌注损伤大鼠 ( ISöAAR) 的
影响 (x±s, n= 8)
F ig. 1　Effect of TFRS on ISöAAR in myocardia l ische-
m ia-reperfusion in jury rats (x±s, n= 8)
义 (P < 0105)。
213　T FR S 对缺血再灌注损伤大鼠血清LDH、CK
活性及NO、M DA 水平的影响: 从表 3 可以看出, 模
型组大鼠血清中 LDH、CK 的活性明显升高, 与假
手术组相比, 差异显著 (P < 0101)。与模型组相比,
硝酸甘油和 T FR S 100 m gökg 能够显著减少 CK
的漏出, 差异显著 (P < 0101) ; T FR S 100、50 m gö
kg 及硝酸甘油能够显著减少LDH 的漏出, 差异显
著 (P < 0105)。经缺血再灌注后, 模型组大鼠血清中
表 3　TFRS 对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清 LD H、CK
活性及 NO、MDA 水平的影响 (x±s, n= 8)
Table 3　Effect of TFRS on activ ities of CK and LD H, and
level of NO and MDA in serum in myocardia l
ischem ia-reperfusion in jury rats (x±s, n= 8)
组　别
剂量ö
(m g·kg- 1)
CKö
(U ·mL - 1)
LDHö
(U ·L - 1)
NO ö
(Λmo l·L - 1) MDA ö(Λmo l·L - 1)
假手术 - 0159±0110 4 016±679 8114±3013 815±211
模型 - 1122±01213 3 6 665±6703 3 5010±20113 1315±3183 3
TFRS 100 0179±0110△△5 652±680△ 9117±2618△△1216±118
50 1101±0114 5 788±673△ 8312±2519△ 913±119△
25 1123±0115 6 377±772 7514±2918 1317±214
硝酸甘油 10 0172±0110△△4 122±497△△8217±3415△ 915±211△△
　　　与假手术组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　与模型组比较: △P < 0105　△△P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs Sham group
　　　△P < 0105　△△P < 0101 vs model group
·242· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
NO 水平显著低于假手术组, 与模型组相比, T FR S
100、50 m gökg 与硝酸甘油均可显著增加NO 的生成
量(P < 0105)。另外模型组大鼠血清中M DA 水平显
著高于假手术组, 与模型组相比, T FR S 50 m gökg 及
硝酸甘油可显著减少M DA 的生成量(P < 0105)。
214　T FR S 对缺血再灌注大鼠心肌组织中 iNO S
mRNA 表达的影响: 采用 R T 2PCR 技术半定量检
测了 100 m gökg T FR S 对缺血再灌注大鼠心肌组
织中 iNO S mRNA 的表达量的影响, 结果见图 2。结
果表明假手术组大鼠心肌组织中 iNO S mRNA 表
达很低, 模型组大鼠心肌组织中 iNO S mRNA 表达
有所增强; 100 m gökg T FR S 大鼠心肌组织中 iNO S
mRNA 表达显著增强, 提示 T FR S 能显著促进
iNO S mRNA 的表达, 见表 4。
图 2　TFRS 对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织
iNOS mRNA 表达的影响
F ig. 2　Effect of TFRS on expression of iNOS mRNA
in myocardium of myocardia l ischem ia-
reperfusion in jury rats
表 4　TFRS 对缺血再灌注损伤大鼠心肌组织中
iNOS mRNA 表达的影响 (x±s, n= 3)
Table 4　Effect of TFRS on expression of iNOS mRNA
in myocardium of myocardia l ischem ia-
reperfusion in jury rats (x±s, n= 3)
组　别 剂量ö(m g·kg- 1) iNO SöΒ2actin
假手术 - 01337±01035
模型 - 01450±01056#
T FRS 100 01800±010893 3
　　　与假手术组比较: # P < 0105; 　与模型组比较: 3 3 P < 0101
　　　# P < 0105 vs Sham group; 　3 3 P < 0101 vs model group
3　讨论
　　心肌缺血再灌注损伤是心血管临床中溶栓术、
经皮腔内冠状动脉成形术、冠脉搭桥术等治疗的严
重并发症之一。结扎 LAD 致大鼠心肌缺血及再灌
注是一种常用的心肌缺血动物模型[4 ] , 可致大鼠心
电图 ST 段及 T 波的抬高。并且由于心脏缺血缺
氧, 心肌细胞膜的损伤, 可致细胞内 LDH、CK 等酶
的外漏。本研究发现, T FR S 可明显抑制大鼠 ECG
中 ST 段和 T 波的抬高。本研究还发现 T FR S 可显
著抑制缺血再灌注所致的血清中LDH、CK 活性的
升高, 也提示 T FR S 对大鼠心肌缺血损伤有一定的
保护作用。
急性心肌梗死后, 各项心功能指标的改变及其
恢复的程度与速度均与心肌梗死面积呈负相关。因
而缩小心肌梗死面积可作为抗心肌缺血药物的主要
疗效指标。在实验中发现心脏缺血再灌注损伤后, 模
型组大鼠心脏左心室 ISöAA R 明显增加, 说明结扎
LAD , 中断了左室壁的血供, 左室心肌出现严重缺
血。与模型组相比较, T FR S 各组均能不同程度地降
低 ISöAA R , T FR S 50 m gökg 降低梗死面积与模型
组相比较有显著意义, 提示 T FR S 对心肌缺血具有
保护作用。以上结果表明 T FR S 对在体大鼠心脏缺
血再灌注损伤有一定的保护作用, 这与文献报道
T FR S 中两种活性成分金丝桃苷[1 ]和槲皮素[2 ]的抗
心肌缺血作用是一致的。
自由基在心肌缺血及再灌注损伤中占有十分重
要的作用。M DA 系自由基的脂质过氧化产物, 可反
映自由基对生物膜过氧化程度。本研究发现 T FR S
能显著抑制M DA 水平的升高, 提示 T FR S 的抗心
肌缺血作用与其抗自由基有关。
本实验还发现假手术组大鼠心肌组织中 iNO S
基因mRNA 呈低水平表达, 符合 iNO S 在生理情况
下很少表达这一特性; 模型组大鼠心肌组织中 iN 2
O S mRNA 表达有所增强, 这可能是对缺血刺激的
一种应激性反应; 大剂量 T FR S 组大鼠心肌组织中
iNO S mRNA 表达显著增强, 即大剂量 T FR S 能显
著提高 iNO S mRNA 的表达。有文献报道 iNO S 的
基因治疗可在基因转移后 3 d 预防心肌梗死的发
生[5 ] , 这也支持 T FR S 可通过促进 iNO S mRNA 表
达产生抗心肌缺血再灌注损伤的作用。但是本研究
模型组大鼠心肌组织中测得 NO 水平较假手术组
显著下降, 似乎与模型组大鼠心肌组织中 iNO S
mRNA 表达有所增强这一点矛盾。根据文献报道,
心肌缺血时其对结构型 NO S (cNO S) 表达的抑制
作用明显强于其促进 iNO S mRNA 表达的作用, 因
此总体结果是模型组血浆中NO 水平显著下降[6 ]。
综上所述, T FR S 对心肌缺血再灌注损伤有明
显的保护作用, 其机制可能与减轻细胞膜脂质过氧
·342·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
化、抗自由基、提高 iNO S mRNA 的表达和增加NO
合成有关。
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小檗碱对 HeLa 细胞凋亡及其凋亡相关蛋白表达的影响①
来丽娜1, 赵　娜2, 郭春花1, 张晓一1, 范毅敏1
(11 长治医学院 药理教研室, 山西 长治　046000; 21 天津医科大学总医院 外科研究所, 天津　300052)
摘　要: 目的　研究小檗碱对人宫颈癌 H eL a 细胞株增殖及凋亡的影响及其发生机制。方法　采用M T T 法观察小
檗碱对 H eL a 细胞增殖的影响, DNA ladder、流式细胞仪等方法进行细胞凋亡检测, 用W estern b lo tt ing 方法检测
凋亡过程中相关蛋白Bcl22 和Bax 表达的变化。结果　小檗碱在体外试验中能明显抑制 H eL a 细胞的增殖, 在一定
的时间、剂量范围内呈时间2剂量依赖关系。20、40 m göL 小檗碱作用 48 h 后, 细胞DNA 片段分析可看到凋亡时降
解形成的梯带, 流式细胞仪检测到了细胞凋亡峰, 各组的凋亡率分别是 (1617±218) %、(2916±414) % , 与对照组
(119±016) % 和 5 m göL 小檗碱组 (213±018) % 相比差异显著 (P < 0101)。在凋亡过程中,Bax 蛋白表达明显增
高, 而Bcl22 蛋白表达下凋。结论　小檗碱体外能抑制 H eL a 细胞增殖并诱导其发生凋亡, 其机制可能与 Bax 蛋白
表达明显增高, 而 Bcl22 蛋白表达下调有关。
关键词: 小檗碱; H eL a 细胞; Bcl22; Bax
中图分类号: R 28515　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0244- 04
Effect of berber ine on apoptosis and expression of Bax and Bcl-2 prote in s in HeLa cells
LA IL i2na1, ZHAO N a2, GUO Chun2hua1, ZHAN G X iao2yi1, FAN Y i2m in1
(11 D epartm ent of Pharm aco logy, Changzh iM edical Co llege, Changzh i 046000, Ch ina; 2. Inst itu te of Surgery,
General Ho sp ita l of T ian jin M edical U niversity, T ian jin 300052, Ch ina)
Abstract: Objective　To invest iga te the effect of berberine on grow th and apop to sis of hum an cervica l
cancer cell line H eL a and its po ssib le m echan ism. M ethods　T he effect of berberine on grow th of H eL a
cells w as studied by M T T assay. A pop to sis of H eL a cells expo sed to berberine w as ob served by flow cy2
tom etry and DNA gel electropho resis. T he exp ression of Bax and Bcl22 w as studied by W estern b lo t t ing
analysis. Results　Berberine m arkedly inh ib ited the p ro lifera t ion of H eL a cells in a t im e2 and do se2depen2
den t m anner. A fter incubat ion of H eL a cells w ith 20 and 40 m göL berberine fo r 48 h, DNA L adder can be
ob served. A typ ica l“sub2G1 peak”w as checked by flow cytom etry. T here w as a very low rate of natu ra l
apop to sis (1. 9±0. 6) % , w h ile in 5 m göL berberine group , the apop to sis ra te w as (2. 3±0. 8) %. A fter
expo sing H eL a cells fo r 48 h to 20 and 40 m göL berberine, the apop to sis ra te reached (16. 7±2. 8) % (P <
0101) and (29. 6±4. 4) % (P < 0101) , respect ively. W estern b lo t t ing show ed the exp ression of Bax p ro2
tein increased in H eL a cells, a t the sam e t im e, the exp ression of Bcl22 decreased in a do se2dependen t m an-
ner. Conclusion　In v itro berberine cou ld inh ib it the p ro lifera t ion of H eL a cells and induce the apop to sis
by p romo ting Bax and inh ib it ing Bcl22 exp ression in a do se2dependen t m anner.
Key words: berberine; H eL a cell; Bcl22; Bax
　　小檗碱是从毛茛科黄连属植物黄连、黄柏的根 茎中提取的主要成分, 属异喹啉类生物碱, 也称黄连
·442· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007206225
作者简介: 来丽娜 (1974—) , 女, 山西长治人, 硕士研究生, 讲师, 研究方向为中药药理学。
T el: (0355) 3151442　E2m ail: lailina@ 126. com