全 文 ：2111　样品测定: 精密吸取各供试品溶液 10 ΛL , 进
样分析, 每个样品测定3 次峰面积, 根据回归方程计
算样品中士的宁、脂蟾毒配基和华蟾酥毒基的质量
分数, 结果见表1。
表 1　仙蟾胶囊中士的宁、脂蟾毒配基与华蟾酥毒基的测定
Table 1　D eterm ination of strychn ine, bufogen in,
and c inobufogen in in X ianchan Capsula
批号
士的宁ö
(m g·粒- 1)
脂蟾毒配基ö
(m g·粒- 1)
华蟾酥毒基ö
(m g·粒- 1)
脂蟾毒配基+
华蟾酥毒基ö
(m g·粒- 1)
040802 01293 01319 01283 01602
040805 01285 01317 01293 01610
040808 01274 01329 01308 01637
　　《中国药典》2005 年版一部规定, 蟾酥药材中脂
蟾毒配基与华蟾酥毒基总量不得少于610% , 仙蟾制
剂中蟾酥药材为粉末直接入药, 如果按生产时药材
粉碎和制剂过程中蟾酥损失率不超过 10% , 并综合
考虑蟾酥药材的来源、加工炮制、制剂生产、储藏等
因素及本实验的测定结果, 建议仙蟾胶囊的质量规
格下限暂定为脂蟾毒配基与华蟾酥毒基总量不少于
0154 m gö粒。
3　讨论
　　由士的宁、脂蟾毒配基、华蟾酥毒基对照品溶液
紫外扫描图谱, 可见各成分最大吸收波长分别为
254、298、294 nm , 从检测灵敏度和分离度考虑, 选
取 254 nm 作为士的宁的定量检测波长, 296 nm 作
为脂蟾毒配基与华蟾酥毒基的定量检测波长。
　　原仙蟾片质量标准中采用薄层扫描法测定士的
宁, 供试品溶液的制备采用多次萃取法, 方法操作繁
琐、重现性差、准确度较低。本研究参照《中国药典》
2005 年版一部马钱子项下士的宁的测定法, 采用反
相离子对色谱法测定, 并且供试品溶液的制备采用
碱化后加热回流法, 操作简便, 杂质干扰少, 分离度
佳, 结果准确, 重现性好。此外, 流动相以十二烷基磺
酸钠代替《中国药典》2005 年版马钱子药材中士的
宁测定法采用的价格昂贵的庚烷磺酸钠。
参考文献:
[ 1 ]　国家中成药标准汇编 [S ]1 口腔肿瘤儿科分册, 20021
[ 2 ]　中国药典 [S ]1 一部1 20051
[ 3 ]　黄喜茹, 曹　东 1 马钱子研究进展 [ J ]1 上海中医药杂志,
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[ 7 ]　梁秀兰, 许廷生, 黄 新, 等 1 蟾酥及其成方制剂的合理应用
[J ]1 中国药物与临床, 2004, 4 (3) : 2171
野菊花中绿原酸的微波辅助萃取研究
凌伫怡1, 王　娟2, 沈平　2Ξ
(11 华东理工大学化学与分子工程学院, 上海　200237; 21 国家中药制药工程技术研究中心, 上海　201203)
摘　要: 目的　研究微波辅助萃取野菊花中绿原酸的提取工艺。方法　以产品得率和绿原酸质量分数为指标, 均匀
设计410 软件设计的U 10 (108)均匀试验表对野菊花的微波辅助萃取工艺参数进行优化。结果　优化出的最佳工艺:
微波功率 340 W、辐射时间20 m in、溶剂乙醇体积分数60%、乙醇用量为9 倍, 浸泡时间30 m in。与传统加热回流野
菊花产品得率和绿原酸质量分数 (分别为 1618%、01889% )比较, 优化的微波辅助萃取野菊花所得相应指标分别为
1813%、11212%。结论　微波辅助萃取野菊花中绿原酸具有萃取时间短、溶剂用量少、目标组分得率高等优点。
关键词: 野菊花; 微波辅助萃取; 绿原酸; 均匀设计
中图分类号: R 28611　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 025322670 (2008) 0120060203
　　野菊花又名山菊花、苦薏、疟疾草, 为菊科植物
野菊Ch ry san them um ind icum L 1 的干燥头状花序,
具有清热解毒、疏风平肝的功效。野菊花具有广谱抗
菌、抗病毒等作用[1 ] , 其中绿原酸是主要活性成分。
由于传统的加热回流方式存在提取时间长、溶剂用
量多、能耗大、生产成本高等缺陷, 一些新型的提取
工艺应运而生, 如超临界萃取、微波辅助萃取、超声
萃取等, 其中微波辅助萃取工艺在中药制药领域中
的应用研究越趋活跃。因此本实验采用微波辅助萃
取方法, 借助微波“体加热”的方式对野菊花中的绿
·06· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2007205219
基金项目:“十五”国家科技攻关项目 (2004BA 721A 40)
作者简介: 凌伫怡 (1981—) , 男, 硕士研究生, 研究方向为中药研究与开发。T el: (021) 50805522　E2m ail: lzy11981@ho tm ail1com
原酸进行萃取研究, 以绿原酸的量为指标, 通过均匀
设计方法, 对其萃取参数进行优化, 确定出最佳工艺
条件。
1　材料与仪器
　　微波萃取器由V IP272 惠而浦家用微波炉改造
而成; 美国W aters 510 高效液相色谱仪, PDA 检测
器,M illenn ium 32 色谱工作站; SA GA - 50D Y 实验
室级超纯水器。
　　野菊花由上海养和堂中药饮片有限公司提供,
经上海中药研究所鉴定, 属菊科植物野菊 C 1
ind icum L 1 的干燥头状花序; 乙腈为色谱纯, 其他
试剂均为分析纯; 绿原酸对照品 (批号 0753—
200111)购自中国药品生物制品检定所。
2　方法与结果
211　绿原酸的H PL C 法测定[2 ]
21111　色谱条件: YM C 色谱柱 (150 mm ×416
mm , 5 Λm ) ; 流动相: 乙腈2014% 磷酸 (10∶90) ; 体
积流量: 110 mL öm in; 检测波长: 327 nm ; 柱温:
25℃。
21112　线性关系考察: 精密称取绿原酸对照品3198
m g, 置 100 mL 棕色量瓶中, 用 50% 甲醇溶解, 并加
至刻度, 摇匀, 得3918 ΛgömL 对照品溶液。分别进样
2、4、10、16、20 ΛL 测定峰面积。以进样量对相应峰
面积进行线性回归, 回归方程为Y = 117 490 X - 5
28616, r= 01999 9, 线性范围: 0108～ 018 Λg。
21113　精密度试验: 取 3918 ΛgömL 绿原酸对照品
溶液, 连续进样 5 次, 测定色谱峰面积, 计算得其
R SD 为1137%。
21114　重现性试验: 取同一批干浸膏样品 5 份, 制
备供试品溶液, 分别进样10 ΛL , 测定绿原酸峰面积,
计算其质量分数, R SD 为1140%。
21115　稳定性试验: 取供试品溶液10 ΛL , 分别在0、
1、2、4、6 h 测定绿原酸峰面积, 计算得其R SD 为
1118% , 结果表明供试品溶液在6 h 内稳定。
21116　回收率试验: 精密称取含绿原酸11041% 的
野菊花干浸膏样品12191 m g, 各5 份, 分别精密加入
3918 ΛgömL 绿原酸对照品溶液 2 mL , 制备供试品
溶液, 进样测定, 结果绿原酸的平均回收率为
99186% , R SD 为1182%。
21117　样品测定: 精密称取微波辅助萃取工艺所得
的干浸膏样品50 m g, 置于20 mL 量瓶中, 用50% 甲
醇溶解并加至刻度, 作为供试品溶液。取供试品溶
液, 分别进样10ΛL , 测定绿原酸峰面积, 采用外标法
计算各样品中绿原酸的质量分数。
212　微波辅助萃取法及优化: 向微波辅助萃取器中
投入 100 g 野菊花, 以乙醇体积分数、辐射时间、微
波功率、乙醇用量和浸泡时间为考察因素, 见表1。按
照均匀设计 410 软件设计的U 10 (108) 均匀试验表进
行。将萃取液真空浓缩、干燥, 得干浸膏, 进行绿原酸
的测定, 计算产品得率 (Y 1) (Y 1 = 干浸膏质量ö原药
材投料量×100◊ ) 和绿原酸的质量分数 (Y 2) , 结果
见表2。
表 1　因素与水平
Table 1　Factors and levels
水平
因　素
X1 乙醇体积分数ö% X2 辐射时间öm in X3 微波功率öW X4 乙醇用量ö倍 X5 浸泡时间öm in
1 50 10 170 5 0
2 60 20 340 7 20
3 70 30 510 9 40
4 80 40 680 11 60
5 90 50 850 13 80
表 2　均匀试验设计及结果
Table 2　D esign and results of un iform test
试验号 X1 X2 X3 X4 X5 Y1 Y2
1 50 340 10 9 120 21101 01759 7
2 50 510 20 13 90 27129 01772 0
3 60 850 5 7 60 19168 01759 7
4 60 170 15 13 30 15147 01696 0
5 70 340 25 7 0 21141 01868 7
6 70 680 5 11 120 17149 01891 7
7 80 850 15 5 90 14158 01884 0
8 80 170 25 11 60 16188 11095 6
9 90 510 10 5 30 9141 01775 4
10 90 680 20 9 0 12107 01981 8 　　将测定结果通过均匀设计410 版软件中自选变量法进行数据分析, 可分别获取Y 1、Y 2 的回归方程, 进而求出Y 1、Y 2 的优化组合, 同时在此基础上做进一步的综合分析, 得出综合优化参数组合: X 1= 60% , X 2= 20m in, X 3= 340 W , X 4= 9, X 5= 30 m in。213　验证试验: 采用均匀设计优选出的最佳条件制备 3 批样品, 测定, 计算 Y 1 和 Y 2, 结果得 Y 1 =18130% , Y 2= 11212% (n= 6)。　　以优化工艺参数进行微波辅助萃取与传统提取方法比较, 结果见表3。结果表明, 相同萃取条件下,
·16·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
表 3　微波辅助萃取与传统提取方法比较
Table 3　Compar ison between m icrowave extraction and traditiona l method
萃取方法 溶剂体积分数ö% 萃取时间öm in 溶剂用量ömL 浸泡时间öm in 产品得率ö% 绿原酸质量分数ö%
微波辅助萃取 60 20 900 30 1813 11212
传统加热回流 60 20 900 30 1618 01889
对比传统提取方式, 微波辅助萃取所得的干膏中绿
原酸的质量分数高, 干膏得率大, 具有显著优势。
3　讨论
　　实验发现萃取剂体积分数对微波辅助萃取野菊
花中绿原酸的影响最大。其原因可能是 乙醇体积分
数决定了溶剂的极性大小, 与微波的吸收效果关系
密切, 直接影响微波萃取的效果。乙醇体积分数不
同, 对绿原酸的溶解能力不一样, 从而影响其溶出
度。乙醇体积分数、微波萃取时间、微波辐射功率和
固液比都会影响药材和萃取溶剂对微波辐射能量的
吸收, 所以各参数之间具有一定的交互作用。
　　微波辅助萃取不同于传统加热回流方式, 其微
波直接作用于溶剂和药材, 热量和有效成分均由内
向外传出, 从而使得萃取时间短、提取效率高。结果
表明, 相同提取条件下, 微波辅助萃取具有显著优
势。由此可见, 其产业化应用将为中药制药领域中的
提取技术注入新的活力。
参考文献:
[ 1 ]　石兰萍, 田琳琳, 袁劲松, 等1 野菊花的研究概况[J ]1 中西医
结合心脑血管病杂志, 2005, 3 (5) : 43424361
[ 2 ]　姜丽霞, 徐世芳 1 H PL C 法测定野菊花中绿原酸的含量[J ]1
中国药品标准, 2003, 4 (6) : 542561
胶原纤维吸附剂对银杏叶中鞣质的选择性去除作用
李　娟, 廖学品, 唐　睿, 石　碧Ξ
(四川大学 皮革化学与工程教育部重点实验室, 四川 成都　610065)
摘　要: 目的　研究胶原纤维吸附材料对银杏叶中鞣质的选择性去除作用。方法　以皮胶原纤维为原料, 通过戊二
醛交联反应制备吸附材料。将此吸附材料用于选择性地去除银杏叶提取物中的鞣质, 并用H PL C 和明胶法对吸附
实验结果进行检测。结果　H PL C 图谱和明胶法检测结果说明, 所制备的胶原纤维吸附材料具有较好的吸附选择
性, 可以完全除去银杏叶提取物中的鞣质, 而有效成分基本不损失。结论　胶原纤维吸附材料可用于中药提取物或
制剂中鞣质的高选择性脱除。
关键词: 银杏叶; 胶原纤维; 鞣质; 吸附选择性
中图分类号: R 28611　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 025322670 (2008) 0120062204
　　银杏叶提取物 (G inkg o biloba L 1 ex tract,
GbE) 的主要成分是银杏黄酮和银杏苦内酯[1 ] , 这些
成分具有清除自由基、抗病毒、抗肿瘤、抗辐射、保肾
等作用[2 ]。但银杏叶提取物中含有鞣质、蛋白质等杂
质, 其中含鞣质为12159%～ 13192% [3 ]。鞣质的存在
不仅影响最终产品的稳定性和澄清度, 而且可能产
生副作用[3 ] , 因此必须除去。常用的去除鞣质的方法
主要有氨水沉淀法、明胶沉淀法、铅盐沉淀法、大孔
树脂吸附法等[4 ]。由于银杏黄酮分子与鞣质分子结
构相似, 因此常用方法的选择性较差, 有效成分损失
较多, 而且可能引入其他更加难以去除的杂质。胶原
纤维中含有羧基、氨基和羟基[5 ] , 能与鞣质分子的酚
羟基发生多点氢键2疏水键结合[6 ]。本课题组的前期
研究发现, 胶原纤维对鞣质具有选择性吸附能力[7 ]。
因此本实验以戊二醛为交联剂制备胶原纤维吸附材
料, 用于选择性地去除银杏叶提取物中的鞣质。
1　仪器与材料
　　A gilen t 1100 型高效液相色谱仪、DAD 检测器
(美国A gilen t 公司) , UV —2501PC 型紫外2可见分
光光度计 (日本岛津公司)。
　　落叶松鞣质 (自制, 由落叶松树皮提取[7 ])。胶原
纤维 (实验室自制, 制备方法参阅文献方法[8 ])。1%
·26· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2007203222
基金项目:“973”重大基础前期研究专项 (2004CCA 06100) ; 杰出青年基金资助项目 (20325619)
作者简介: 李娟 (1982—) , 女, 四川省西昌人, 硕士研究生, 研究方向为天然产物的分离。E2m ail: b lackgound@ 1631com3 通讯作者　石　碧　T el: (028) 85400356　Fax: (028) 85400365　E2m ail: sib itann in@vip11631com