全 文 ：·1014· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
大孔吸附树脂分离肿节风中总黄酮的研究
徐国良1，肖兵华2，邹胡斌3，陈奇扩
(1．江西中药学院现代中药制剂教育部重点实验室，江西南昌 330008；2．江中药业股份有限公司，
江西南昌 330077；3．江西中医学院，江西南昌330006)
摘 要：目的 考察11种大孑L吸附树脂对肿节风总黄酮的吸附分离性能。方法采用静态吸附分离法确定适合的
大孑L吸附树脂；采用动态吸附分离法确定分离条件。以总黄酮吸附量、总黄酮质量分数和回收率为考察指标，采用
紫外分光光度法测定总黄酮。结果HPD400大孔吸附树脂对肿节风总黄酮有良好的吸附分离性能，其分离肿节风
总黄酮的工艺条件为：肿节风总黄酮上样质量浓度为10mg／mL，肿节风总黄酮最大吸附量为9．5mg／mL，吸附体
积流量为2．5mL／min，洗脱剂为70％乙醇，洗脱剂用量为3倍柱体积，树脂可重复使用3次。结论采用HPD400
大孔吸附树脂吸附分离肿节风总黄酮简便有效，总黄酮回收率为85％左右。
关键词：肿节风；总黄酮；大孔吸附树脂；吸附分离
中图分类号：R284．2；R286．02文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)07—1014—04
Separationoftotalf avonei Sarcandraglabrabymacroporousadsorptionresi s
XUGuo—lian91，XIAOBin—hua2，ZOUHu—bin3，CHENQi2
(1．KeyLaboratoryofP eparationofModernChineseMatertaMedica，JiangxiCollegeofTraditionalChineseMedicine．
MinistryofEducation，Nanchang330008，China；2．JiangxiJiangzhongPharmaceuticalCo．，Ltd．，Nanchang
330077。China；3．JiangxiCollegeofTraditionalChineseMedicine，Nanchang330006；China)
Abstract：ObjectiveToseupthetechnologyforadsorbingandseparatingtotalf avonei Sarcandra
glabrawithmacroporousadsorptionresi ，1l typesofmacroporousadsorptionresi swereinvestigated．
MethodsThestaticadsorptionandseparationwereusedininvestigationofmacroporousadsorption
resin；thedynamicadsorptionandseparationwereusedinstudyingtheconditionofadsorptionand
separation．Thetotalf avoneadsorptioncapacity，totalflavonecontent，andtotaIflavonerecoveryrate
wereusedasthevaluationcriteria．TheUVspectrophotometricmethodwasusedinthedeterminationof
totalf avonecontent．ResultsTheresultsshowedthatamong11typesofmacroporousadsorptionresins，
theHPD400wasthebestforadsorbingandseparatinghetotalf avonei S．glabrainthefollowing
technologicalcondition：theconcentrationofS．glabrasampleextractwas10mg／mL：themaximum
adsorbingcapacityfortotalf avonei S．glabrawas9．5mg／mL；thecurrentvelocitywas2．5mL／min；
thelutingreagentwas70％ethanol(threetimesa thevolumeoftheresin)；andtheHPD400resincould
beusedthreetimes，repeatedly．ConclusionItiSasimpleandefficienttoseparatethetotalf avonei S．
glabraunderthetechnologicalconditions，andatotalf avonerecoveryrateiSabout85％．
Keywords：Sarcandraglab (Thunb．)Nakai；totalftavone；macroporousadsorptionresi ；
adsorptionandseparation
肿节风为金粟兰科植物草珊瑚Sarcandra
glabra(Thunb．)Nakai的于燥全株，民间称为九节
茶、接骨木、驳骨茶、骨风消等，为多年生常绿草本或
亚灌木。全草能祛风清热、活血、止痛、通经、接骨。用
于治疗常见炎症性疾病，也用于治疗绦虫病、类风湿
性关节炎及预防感冒等。对多种恶性肿瘤如胰腺癌、
胃癌、直肠癌、肝癌和食道癌等效果显著。肿节风主
含黄酮苷、氰苷、香豆素、内酯、挥发油。黄酮为主要
有效部位，但尚未有系统分离鉴定报道，已知有落新
妇苷(astibin)。大孔吸附树脂是近年来国内外新发
展的分离技术，并在医药领域(特别是天然药物精
制)中广为应用，是提取分离中草药中水溶性有效成
收稿日期：2005—09—24
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30260122)；江西省教育厅课题(23—7一B一03)
作者简介：徐国良(1966一)，江西新建人，博士，副教授，研究方向：中药药理及成分研究。Tel：(0791)7118657
*通讯作者陈奇Tel：(0791)6825769E—mail：chenqi606@263．net
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1015·
分的一种有效方法口]。同时，大孔吸附树脂分离技术
也是我国制药工业亟需推广的高新技术之一[2]。本
实验采用大孔吸附树脂分离技术，通过对11种树脂
的静态吸附筛选试验，寻找到对肿节风总黄酮具有
较好吸附分离性能的树脂，并研究了该树脂吸附分
离的工艺条件。该研究为肿节风总黄酮的提取分离
提供实验方法，为大孔吸附树脂在大生产中的应用
提供技术参数。
1仪器、材料与试剂
756MC紫外可见分光光度计(上海第三分析仪
器厂)；HL一2恒流泵(上海精科实业有限公司)；
AB204一N型1／10万电子分析天平(Mettler
Toledo)。D4006、AB一8树脂为南开大学化工厂产
品；24—6树脂为上海树脂厂产品；LD605、LD606、
LD607为化工部晨光化工研究院精化所产品；
HPDl00、HPD300、HPD400、HPD500、HPD600树
脂为河北沧州宝恩化工有限公司产品；肿节风由江
中药业股份有限公司提供。芦丁(中国药品生物制品
检定所，批号：0080—9705)。水为双蒸水，洗脱用乙醇
为食用级，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1肿节风浸膏溶液的制备：肿节风全草8倍水煎
煮2h，4～6倍水再煎煮1．5h，合并煎煮液浓缩至
密度为1．05g／mL(20‘C)。乙醇终体积分数为
65％醇沉48h，回收乙醇浓缩至密度为1．25g／mL
(20℃)，得肿节风浸膏(含生药15．6g／mL)。取肿
节风浸膏72g，用水稀释至1200mL，得肿节风浸
膏溶液。
2．2树脂的预处理：以乙醇湿法装柱，用95％乙醇
洗脱，检查乙醇流出液，至乙醇一水(1：1)流出液不
呈白色浑浊为止，然后用大量的蒸馏水洗去乙醇。取
出树脂，备用。
2．3总黄酮的测定：采用以芦丁为对照品的紫外一
分光分光光度法[3]。
2．4吸附量的测定：准确移取2mL各种经预处理
树脂于50mL具塞锥形瓶中，精密加入30mL肿节
风浸膏溶液。室温于空气浴振荡器中振荡24h(振
荡频率为140r／min)。充分吸附后，滤过，测定滤液
中的总黄酮，按下式计算各树脂室温下的吸附量，结
果见表1。可见，各树脂在达到饱和吸附后，吸附量
几乎没有差异。
Q一(Co—C，)×Vl／y2
Q为吸附量(mg／mL)，Co为起始质量浓度(mg／mL)，C。
为剩余质量浓度(mg／mL)，V，为溶液体积(mL)，Vz为树脂
体积mL)
2．5解吸率的测定：吸附树脂在分离中药有效成分
方面的应用是利用吸附的可逆性(即解吸)。由于树
脂极性不同，解吸难易亦不同。因此，解吸剂及其解
吸率的测定是树脂筛选试验的重要环节。
取充分吸附后的树脂，分别精密加入50％乙
醇、95％乙醇、甲醇各20mL，浸泡振荡20h，滤过，
测定滤液中总黄酮，计算解吸率，结果见表2。解吸率一篇瓣糯×，00％
表1 不同吸附树脂对肿节风总黄酮吸附量的影响
Table1 Effectofdifferentmacroporousadsorption
resinsonadsorptioncapacityof otal
flavonei S．glabra
树脂 吸附量／(mg·mLl)树脂 吸附量／(mg·mL-1)
AB一8 177 HPDl00 179
24—6 175 HPD300 179
LD605 175 HPD400 179
LD606 176 HPD500 178
LD607 177 HPD600 177
D4006 176
表2不同溶剂对肿节风总黄酮解吸率的影响
Table2 Effectofdifferentsolventsonelution
rateoftotalf avonei S．glabra
树脂 50％乙醇／％ 95％乙醇／％ 甲醇／％
结果表明，各树脂对总黄酮的解吸率差异较大，
且溶剂不同解吸率亦不同，溶剂的浓度与种类对肿
节风总黄酮的解吸具有很大的选择性。其中
HPD400对肿节风总黄酮的解吸率较高。
2．6 HPD400树脂分离肿节风总黄酮的工艺参数
考察
2．6．1上样液质量浓度的确定：将不同质量浓度的
肿节风总黄酮溶液分别通过HPD400大孑L吸附树
脂柱，进行动态吸附。用l％FeCl。乙醇溶液检测流
出液，待反应呈阳性时，停止上样，记录上样量，计算
总黄酮吸附量。结果见表3。可知，上样液质量浓度
以10mg／mL为佳。
2．6．2吸附体积流量的确定：将lOmg／mLl]5h节风
O
O
O
O
O
5
6
7
S
O
m吣m沁
6似似洲；堇。P
m阱眦蹦跳排∞∞∞胍衄耶邯耶耶邮
万方数据
·1016· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
表3上样液质量浓度对肿节风总黄酮吸附量的影响
Table3 Effectofdifferentco centrationofsampleon
adsorptioncapacityof otalf avonei S．glabra
上样液质量浓度／ 总黄酮吸附量／ 上样液质量浓度／ 总黄酮吸附量／
(mg·mL一1)(mg·raL一1)(rag·mL～1)(rag·mL一1)
3 7．4 lO 24．6
7 15．9 15 18．2
溶液通过HPD400树脂柱，分别以0．5、1．6、2．5
mL／min的体积流量进行动态吸附。用l％FeCl。乙
醇溶液检测流出液，待反应呈阳性时，停止上样，记
录上样量，计算总黄酮吸附量。树脂柱依次用水、
70％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液蒸于，称定质量，测
定总黄酮，计算总黄酮回收率(总黄酮回收率为洗脱
物中总黄酮量与树脂吸附总黄酮量的比值)，结果见
表4。综合考虑工艺的可行性，确定上样体积流量
2．5rflL／min为宜。
表4 不同吸附体积流量对肿节风总黄酮的影响
Table4 Effectofdifferentflowvelocityofsample
solutionontotalf avonei S．glabra
2．6．3动态吸附曲线的考察：按上述确定的上样条
件，取肿节风溶液通过HPD400树脂柱，进行动态
吸附，用1％FeCl。乙醇溶液检测流出液，待反应呈
阳性时，每10mL收集1份，共收集35份。每份进
行总黄酮测定，结果见图1。可以看出，流出液为3
倍柱体积时未有黄酮泄漏，即HPD400树脂的载样
量为3倍柱体积。该条件下的树脂最大吸附量为
9．5mg／mL。
10
8
三
曼6
星
暖4
椒
躅2
0
5 10
梓床体积BV(40mE)
图1 肿节风总黄酮在HPD400树脂柱上的
动态吸附曲线
Fig·1Dynamicadsorptioncurveoftotalf avone
inS。glabrainHPD400resincolumn
2．6．4洗脱剂的确定：按上述确定的上样条件，取
肿节风溶液分别通过4根HPD400树脂柱，进行动
态吸附。4根树脂柱分别用水洗脱至洗脱液无色，再
分别用30％、50％、70％、90％乙醇洗脱至用1％
FeCl。乙醇溶液检测呈阴性。将乙醇洗脱液分别蒸
干，测定总黄酮，计算总黄酮回收率，结果见表5。洗
脱剂可用甲醇、乙醇等。本着安全，无公害的原则，选
择乙醇作洗脱剂。可知，70％乙醇洗脱物中，总黄酮
回收率最高，故确定70％乙醇为最佳洗脱剂。
表5不同洗脱剂对肿节风总黄酮的影响
Table5 Effectofdifferenteluentsontotal
flavonei S．glabra
2．6．5洗脱曲线的考察：按上述确定的吸附和洗脱
条件，取肿节风溶液上样、吸附和洗脱，分段收集洗
脱液。每10mL收集1份，共收集11份，测定总黄
酮，结果见图2。第1流份与第10流份的黄酮的量
相当，即至第10流份黄酮已洗脱完全。以树脂柱体
积计，约为3倍柱体积可完全洗脱肿节风中总酮。
，芝
皂1：
曼6
翼：4
0
20 40 60 80 100
洗脱液体积／mL
图2 HPD400树脂柱上肿节风总黄酮的动态洗脱曲线
Fig．2Dynamicelutioncurveoftotalf avone
inS．glabrainHPD400resincolumn
2．6．6树脂重复使用次数考察：按上述确定的吸
附、洗脱条件，取肿节风溶液进行上柱、吸附和洗脱，
在同一根树脂柱上重复操作5次，分别计算5次总
黄酮的吸附量，结果见表6。可知，上样次数越多，总
黄酮吸附量越低，总黄酮的回收率亦越低。综合考虑
总黄酮吸附量及总黄酮回收率在85％左右，树脂柱
重复使用3次后，树脂柱必须再生才可继续使用。
表6树脂重复使用次数对肿节风总黄酮的影响
Table6 Effectofresintimesbeingusedrepeatedly
ontotalf avonei S．glabra
次数／嚣I黄TIg黑凳冀黑／次数Lmg。Lm1J凹收翠w0L 。mL1，凹以翠洳
1 7．9 94 4 5．3 74
Z 5．8 94 5 4．6 74
3 5．3 83
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1017·
3讨论
各大孑L吸附树脂对肿节风总黄酮的最大吸附能
力差别不大，但各树脂在不同溶剂中的解吸性能却
有很大差异。HPD400树脂表现出较好的解吸性能，
其吸附、分离肿节风总黄酮的工艺条件为：肿节风总
黄酮上样质量浓度为10mg／mL，肿节风总黄酮最
大吸附量为9．5mg／mL，吸附体积流量为2．5mL／
min，洗脱剂为70％乙醇，洗脱剂用量为3倍柱体
积，树脂可重复使用3次。在此条件下，用HPD400
大孔吸附树脂吸附分离肿节风总黄酮，总黄酮回收
率为85％左右。
树脂对化学成分的吸附及解吸研究，目前文献
报道的有动态吸附法和静态吸附法。动态吸附法筛
选大孔吸附树脂工作量大，静态吸附法则相对工作
量小。本实验采用静态吸附法筛选适合目标分离的
大孔吸附树脂，其结果是否与动态法相一致，还有待
进一步研究。
影响树脂吸附分离中药化学成分的因素很多。
目前，大孑L吸附树脂分离纯化中药中的化学成分还
有许多问题尚未解决，如工艺条件研究的规范性方
法和技术要求等[4]。在实际应用中，只有综合考虑各
种因素，才能确定树脂的型号及最佳吸附分离条件。
本文报道的实验结果是在实验室条件下获得，可为
肿节风总黄酮的提取分离提供实验方法，为大孔吸
附树脂在大生产中的应用提供技术参数。
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制备色谱系统从岩黄连中分离岩黄连碱
蒋伟哲，莫长林，黄兴振，凌玲
(广西医科大学第一附属医院新药研究开发中心，广西南宁 530021)
摘要：目的采用制备色谱系统从岩黄连中分离纯化其活性单体岩黄连碱，建立其纯化工艺和技术。方法用
醇一酸水一氯仿的方法从岩黄连中提取出总生物碱，然后采用制备色谱系统AKTAExplorer100从中分离出岩黄连
碱。结果产品经HPLC检测质量分数达99o／／oo以上。结论该方法先进，重复性好，可用于分离纯化岩黄连碱。
关键词：岩黄连；岩黄连碱；制备色谱；AKTAExplorer100
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)07—1017一03
SeparationofdehydrocavidinefromCorydalissaxicolabypreparativechromatography
JIANGWei—zhe，MOChang—lin，HUANGXing—zhen，LINGLing
(CenterofDrugResearchandDevelopment，TheFirstAffiliatedHospital，
GuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，China)
Keywords：CorydalissaxicolaBunting；dehydrocavidine；preparativechromatography；AKTA
Explorer100
岩黄连是罂粟科紫堇属植物石生黄堇
CorydalissaxicolaBunting的全草，产于广西、贵
州、西藏、湖北、甘肃等地，具有清热、消肿、止痛等作
用。广西民间将其全草用于消肿、止痛、拨毒、治疗疥
疮肿毒，也用于治疗肝炎，肝硬化等疾病Ⅲ。岩黄连
的有效部位为总生物碱。用其总生物碱注射液对
收稿日期：2005—10—15
基金项目：广西科技厅科技攻关项目(桂科攻032204—5G) ⋯
作者简介：蒋伟哲(1968)，男，广西宜州人，副主任药师，副教授，硕士生导师，1991年同济医科大学药学院毕业，从事天然药物、药物
化学研究和新药开发。现承担和参加15项国家和广西省级科研课题，获得2000年度广西壮族自治区科技进步奖三等奖1
项，2005年广西医药卫生适宜技术推广奖一等奖1项，已发表研究论文40篇。
Tel：(0771)5355725E—mail：jiangweizhe6812@yahoo．com．en
万方数据
大孔吸附树脂分离肿节风中总黄酮的研究
作者： 徐国良， 肖兵华， 邹胡斌， 陈奇， XU Guo-liang， XIAO Bin-hua， ZOU Hu-bin，
CHEN Qi
作者单位： 徐国良,XU Guo-liang(江西中药学院,现代中药制剂教育部重点实验室,江西,南昌,330008)
， 肖兵华,陈奇,XIAO Bin-hua,CHEN Qi(江中药业股份有限公司,江西,南昌,330077)， 邹
胡斌,ZOU Hu-bin(江西中医学院,江西,南昌,330006)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 16次

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