全 文 ：16113、11619、13511、11818、13012。以上数据与
Sadt ler 标准光谱一致, 故鉴定化合物Ì 为水杨酸。
化合物Í : 白色针晶。mp 250～ 252 ℃。溴甲酚
绿反应阳性, 三氯化铁2铁氰化钾反应阳性。
Em erson 反应阳性, 示羟基对位无取代。 1H 2NM R
(300 M H z,DM SO 2d6) ∆: 7144 (1H , b r1s) , 7142 (1H ,
d, J = 817 H z) , 6183 (1H , d, J = 817 H z) , 3180 (3H ,
s,OCH 3)。以上理化性质和数据与文献报道一致[5 ] ,
故鉴定化合物Í 为异香草酸。
化合物Î : 无色针晶。mp 105～ 107 ℃。溴甲酚
绿反应阳性。 1H 2NM R ( 300 M H z, DM SO 2d6 ) ∆:
13193 (1H , s, COOH ) , 8144 (1H , b r1d, J = 811 H z,
H 26) , 7199 (1H , b r1d, J = 710 H z, H 24) , 7126 (1H ,
m , H 23) , 6193 (1H , m , H 25) , 2105 (3H , s, A r2CH 3)。
13C2NM R ( 75 M H z, DM SO 2d6 ) ∆: 16717、11811、
14019、13010、13113、13010、12111、2512。以上数据 与 Sadt ler 标准光谱一致, 故鉴定化合物Î 为 22甲基苯甲酸。致谢: NM R 由本校核磁测试中心李文、沙沂老师测定。References:[ 1 ]　M a Z J , M eng D L , L i X, et a l1 Study on the chem ical cons2t ituen ts from the roo ts and stem s of S p haerop hy sa sa lsu la(Pall1) DC1 [J ]1 J S heny ang P harm U niv (沈阳药科大学学报) , 2003, 20 (2) : 10421061[ 2 ]　W ang Y L , Chen W M , L i G Y1 T he chem ical constituen tsof Carag ana juba ta ( Pall1 ) Po ir1 [J ]1 Ch in T rad it H erbD rug s (中草药) , 1986, 17 (8) : 34423461[ 3 ]　Cai L N , Zhang R Y, W ang B, et a l1 Studies on the chem icalconstituen ts of G ly cy rrh iz a p a llid if lora M axim 1 [J ]1 A ctaP harm S in (药学学报) , 1992, 27 (10) : 74827511[ 4 ]　H irakkura K, M o rita M , N akajim a K, et a l1 Pheno licglyco sides from the roo t of O ueraria loba ta [J ]1P hy tochem istry , 1997, 46 (5) : 92129281[ 5 ]　X ie J B, L i P1 Studies on pheno lic acids from I lex p u rp u reaH assk1 [J ]1 J Ch ina P harm U niv (中国药科大学学报) ,2002, 33 (1) : 762771
柿叶化学成分的研究 (Ê )
陈　光1, 贾澎云2, 徐绥绪3, 张荣庆13 Ξ
(11 清华大学 生命科学与技术系, 北京　100084; 21 承德颈复康药业有限公司, 河北 承德　067000;
31 沈阳药科大学 天然药物化学系, 辽宁 沈阳　110016)
　　柿叶为柿科柿属植物柿D iospy ros kak i L 1 的新
鲜或干燥叶, 其入药始见于明《滇南本草》记载“经霜
叶敷臁疮”,《本草再新》记载用于“治咳嗽吐血, 止渴
生津”。主要用于止血、降压、治疗冠心病、心绞痛及
胃溃疡出血、肺结核出血、功能性子宫出血等内脏出
血病症[1 ]。其化学成分较复杂, 主要含有黄酮、三萜、
酚类等化合物[2 ]。前报[3 ]由柿叶中分离得到 5 个三
萜化合物, 本实验利用液2液萃取法、硅胶柱色谱、
Sephadex L H 220 柱色谱、反相高效液相色谱等手
段, 又从中分离得到 14 个化合物, 分别为: 日柳穿鱼
苷A (linariono side A , É )、linariono side B (Ê )、Α2
香树脂醇 (Ë )、Β2香树脂醇 (Ì )、羽扇豆醇 (Í )、乌
苏酸 (Î )、马尾柴酸 (barb inervic acid (Ï )、野蔷薇
苷 (Ð )、胡萝卜苷 (Ñ )、Β2谷甾醇 (Ò )、原儿茶酸
( Ó )、苯甲酸 (ÒÊ )、对羟基苯甲酸 (ÒË )、丁二酸
(ÒÌ )。其中, É、Ê、Ï、Ð 为首次从该属植物中分 离得到, Ë、Ì、Í 为首次从该植物中分离得到。1　仪器与材料熔点用 Yanaco 熔点测定仪测定 (温度未校正)。红外光谱用B ruker IFS 55 型光谱仪测定。E I2M S 用 V G7070E 型 质 谱 仪 测 定。 ES I2M S 用F inn igan L CQ L C2M S 联用仪测定。1D 和 2D 2NM R用B ruker- A RX- 300 型核磁共振仪测定, 以TM S为内标。柱色谱用硅胶 (100～ 140 目和 200～ 300目) , 薄层色谱用硅胶 H、硅胶 G 和 GF 254均为青岛海洋化工厂产品。所用试剂为沈阳化学试剂厂产品,均为分析纯。H PL C 用日产L C- 10A 制备型H PL C色谱仪。色谱柱为美国A lltech 公司的OD S 色谱柱(22 mm ×250 mm , 10 Λm )。柿叶于 1998 年秋季采自河北省邢台市郊区, 经许春泉和孙启时教授鉴定为柿叶D 1 kak i L 1。2　提取与分离
·62· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 36 卷第 1 期 2005 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2004204216
作者简介: 陈　光 (1974- ) , 男, 辽宁沈阳人, 博士, 研究方向为天然产物。
T el: (010) 62772900　E2m ail: g2chen@m ail1tsinghua1edu1cn3 通讯作者　T el: (010) 62772900　E2m ail: rqzhng@ tsinghua1edu1cn
柿叶 (10 kg) 粉碎后, 以 70% 乙醇回流提取 3
次, 每次 2 h, 合并提取液, 浓缩得浸膏依次用氯仿、
醋酸乙酯、正丁醇萃取。正丁醇萃取部分 (80 g)经硅
胶柱, 用氯仿2甲醇 (50∶1、30∶1、10∶1、5∶1、2∶
1 ) 梯度洗脱, 50∶1 洗脱部分得到化合物Ñ (30
m g)、ÒÊ ( 13 m g ) ; 30∶1 洗脱部分经 Sephadex
L H 220 柱色谱, 以甲醇2水洗脱得到化合物Ó (17
m g)、ÒË (10 m g)、ÒÌ (7 m g) ; 10∶1 洗脱部分经反
相高效液相色谱, 得到化合物É (23 m g )、Ê (11
m g)、Ð (25 m g) , 氯仿萃取部分 (100 g) 经硅胶柱,
用氯仿2醋酸乙酯 (50∶1、30∶1、10∶1、5∶1、2∶1)
梯度洗脱, 50∶1 洗脱部分得到化合物Ò (27 m g) ;
30∶1 洗脱部分得到化合物Ë (21 m g)、Ì (23 m g)、Í (16 m g) ; 10∶1 洗脱部分得到化合物Î (30 m g) ;
5∶1 洗脱部分得到化合物Ï (49 m g)。
3　结构鉴定
化合物É : 白色针状结晶 (M eOH ) , C 19H 34O 7。
10% H 2SO 4 显色呈红色斑点,M o lish 反应阳性, 酸
水解检出葡萄糖。 (+ ) ES I2M S: 375[M + H ]+ , 392
[M + N H 4 ]+ , 771[ 2M + N a ]+ , 213[M - H - 162 ]+ 。
1H 2NM R (300 M H z, CD 3OD ) ∆: 0196 (3H , s, H 211) ,
1102 (3H , s, H 212) , 1136 (3H , d, H 210) , 1162 (3H , s,
H 213) , 1166 (1H , m , H 22) , 1169 (2H , m , H 28) , 2106
( 1H , m , H 27) , 2109 (1H , m , H 22) , 2116 (1H , m , H 2
4 ) , 2147 ( 1H , m , H 27) , 2148 ( 1H , m , H 24) , 3196
( 1H , m , H 25′) , 3198 (1H , m , H 29) , 4100 (1H , m , H 2
2′) , 4125 (1H , m , H 23′) , 4126 (1H , dd, H 24′) , 4133
( 1H , m , H 26′) , 4152 (1H , m , H 26′) , 5105 (1H , d, H 2
1′)。 13C2NM R (7510 M H z, CD 3OD ) ∆: 2010 (C213) ,
2312 (C210) , 2515 (C27) , 2818 (C211) , 3013 (C212) ,
3817 (C21) , 3918 (C24) , 4017 (C28) , 4715 (C22) ,
6217 (C26′) , 7117 (C24′) , 7512 (C22′) , 7718 (C25′) ,
7811 (C23′) , 10213 (C21′) , 12510 (C25) , 13815 (C2
6)。以上数据与文献报道一致[4 ] , 故确定为
linariono side A。
化 合 物 Ê : 无 色 粉 末 状 结 晶 (M eOH ) ,
C 19H 34O 7。10% H 2SO 4 显色呈红色斑点,M o lish 反应
阳性, 酸水解检出葡萄糖。 1H 2NM R ( 300 M H z,
CD 3OD) ∆: 1106 (3H , s, H 211) , 1108 (3H , s, H 212) ,
1123 (3H , d, H 210) , 1166 (3H , s, H 213) , 1169 (1H ,
m , H 22) , 1178 (2H ,m , H 28) , 210 (1H , m , H 27) , 2109
( 1H , m , H 22) , 2118 (1H , m , H 24) , 2140 (1H , m , H 2
7) , 2148 ( 1H , m , H 24) , 3193 ( 1H , m , H 25′) , 3198
( 1H , m , H 29) , 4102 (1H , m , H 22′) , 4121 (1H , m , H 2
3′) , 4126 (1H , dd, H 24′) , 4137 (1H , d, H 21′) , 4139
(1H ,m , H 26′) , 4152 (1H ,m , H 26′)。13C2NM R (7510
M H z, CD 3OD ) ∆: 1917 (C210) , 2010 (C213) , 2513 (C2
7 ) , 2819 (C211) , 3014 (C212) , 3818 (C21) , 3819 (C2
8) , 4310 (C24) , 4915 (C22) , 6219 (C26′) , 7118 (C2
4′) , 7512 (C22′) , 7718 (C25′) , 7812 (C23′) , 10212 (C2
1′) , 12513 (C25) , 13814 (C26)。以上数据与文献报道
一致[4 ] , 故确定为 linariono side B。
化合物Ë : 白色针状结晶 (CHC l3 ) , C 30H 50O。
10% H 2SO 4 显色呈红色斑点。 1H 2NM R和13C2NM R
数据与文献报道一致[5 ] , 故确定为 Α2香树脂醇。
化合物Ì : 白色针状结晶 (CHC l3 ) , C 30H 50O。
10% H 2SO 4 显色呈红色斑点。 1H 2NM R和13C2NM R
数据与文献报道一致[5 ] , 故确定为 Β2香树脂醇。
化合物Í : 无色针状结晶 (M eOH ) , C 30H 50O。
L ieberm ann2Bu rchard 反应阳性。与L upeo l 标准品
共薄层, R f 值及斑点颜色完全一致, 混合熔点不下
降, 故确定为羽扇豆醇。
化 合 物 Î : 无 色 粉 末 状 结 晶 (M eOH ) ,
C 30H 48O 3。 L ieberm ann2Bu rchard 反 应 阳 性。
1H 2NM R 和13C2NM R 数据与文献报道一致[5 ] , 故确
定为乌苏酸。
化合物Ï : 无色针状结晶 (M eOH ) , C 30H 48O 5。
L ieberm ann2Bu rchard 反 应 阳 性。 1H 2NM R 和
13C2NM R 数 据 与 文 献 报 道 一 致[5 ] , 故 确 定 为
barb inervic acid。
化合物Ð : 无色针状结晶 (M eOH ) , C 36H 58O 10。
L ieberm ann2Bu rchard 反应阳性,M o lish 反应阳性,
酸水解检出葡萄糖。 13C2NM R 数据与文献报道一
致[6 ] , 故确定为野蔷薇苷。
化 合 物 Ñ : 无 色 颗 粒 状 结 晶 (M eOH ) ,
C 35H 60O 6。L ieberm ann2Bu rchard 反应阳性, M o lish
反应阳性, 酸水解检出葡萄糖。与标准品胡萝卜苷共
薄层R f 值及斑点颜色均一致, 混合熔点不下降。故
确定为胡萝卜苷。
化合物Ò : 无色针状结晶 (CHC l3 ) , C 29H 50O。
L ieberm ann2Bu rchard 反应阳性, 与标准品 Β2谷甾
醇共薄层 R f 值及斑点颜色均一致, 混合熔点不下
降, 故确定为 Β2谷甾醇。
化合物Ó : 白色针状结晶 (M eOH ) , C7H 6O 4。
10% H 2SO 4 显黄褐色, FeC l3 反应阳性。 1H 2NM R、
13C2NM R 数据与文献报道一致 [7 ] , 故确定为原儿
茶酸。
化合物ÒÊ : 无色针状结晶 (M eOH ) , C7H 6O 2。
·72·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 36 卷第 1 期 2005 年 1 月
1H 2NM R (300 M H z, CD 3COCD 3) ∆: 7150 (2H , dd, H 2
4, 6 ) , 7160 ( 1H , t, H 25 ) , 8105 ( 2H , d, H 23, 7 )。
13C2NM R ( 7510 M H z, CD 3COCD 3 ) ∆: 12817 (C24,
6) , 12918 (C23, 7) , 13018 (C22) , 13311 (C25) , 16711
(C21)。与标准品苯甲酸共薄层, R f 值及斑点颜色均
一致, 混合熔点不下降。确定为苯甲酸。
化合物ÒË : 无色针状结晶 (M eOH ) , C 7H 6O 3。
FeC l3 反应阳性。 1H 2NM R (300 M H z, CD 3COCD 3 )∆: 6194 ( 2H , d, H 24, 6 ) , 7192 ( 2H , d, H 23, 7 )。
13C2NM R ( 7510 M H z, CD 3COCD 3 ) ∆: 11513 (C24,
6) , 12119 (C22) , 13211 (C23, 7) , 16210 (C25) , 16714
(C21)。与标准品对羟基苯甲酸共薄层, R f 值及斑点
颜色均一致, 混合熔点不下降。故确定为对羟基苯
甲酸。
化合物ÒÌ : 无色针状结晶 (M eOH ) , C 4H 6O 4。
10% H 2SO 4 显色呈黄褐色斑点, 与标准品丁二酸共
薄层, R f 值及斑点颜色均一致, 混合熔点不下降。故
确定为丁二酸。
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柏子仁促鸡胚背根神经节生长活性成分研究
余正文1, 2, 杨小生13 , 范　明3Ξ
(11 贵州省中国科学院 天然产物重点实验室, 贵州 贵阳　550002; 　21 贵州师范大学 生物技术系, 贵州 贵阳　550001;
31 军事医学科学院基础研究所, 北京　100850)
　　柏子仁为柏科植物侧柏 P la ty clad us orien ta lis
(L 1) F ranco 的干燥成熟种仁。为传统的益智抗衰
中药, 也是药食两用植物。据文献报道[1 ] , 柏子仁生
者养心安神、润肠通便, 炒柏子仁 (柏子仁霜)可免滑
肠泻, 用于便溏而心神不安。临床上用于治疗神经衰
弱、心悸、失眠便秘。在医药和食品工业上已经被另
有报道[2 ] , 柏子仁含脂肪油 3116%～ 4716% , 采用
石油醚 (30 ℃～ 60 ℃) 从柏子仁提取脂肪油, 并甲
酯化后, 经 GC2M S 测试其成分主要含有软脂酸
( 0118% ) , 棕榈酸 (7132% ) , 碳十七酸 (0141% ) , 亚
油酸 (29111% ) , 亚麻酸 (1616% ) , 油酸 (10197% ) ,
硬脂酸 (8121% ) , 碳十九酸 (0125% ) , 花生四烯酸
(21102% ) , 二十碳三烯酸, 二十碳二烯酸 (1194% ) ,
二十碳烯酸 (3190% ) , 二十碳酸 (0164% ) , 二十二烷
酸 (0110% ) , 二十四烷酸 (0113% )。不饱和脂肪酸占
83114%。在开展传统中草药有效部位的神经营养作 用筛选时发现, 柏子仁乙醇提取物的石油醚萃取部分对鸡胚背根神经节生长具有一定的作用。鉴于柏子仁益智抗衰的作用机制及活性成分目前尚不十分清楚, 进而对该部分进行 GC2M S 分析, 结果发现长链不饱和脂肪酸及其酯为该部分的主要成分。1　材料、仪器与条件111　H P6890- H P5973GC- M S 联用仪 (美国惠普公司)。气相色谱条件: 色谱柱为 H P25M S 5%Phenyl M ethyl Siloxane (30 m ×0125 mm ×0125Λm ) , 弹性石英毛细管柱柱温 50 ℃, 以 4 ℃öm in 升温至 100 ℃, 然后以 8 ℃öm in 升温至 260 ℃, 保持至完成分析; 气化室温度 250 ℃; 载气为高纯 H e(991999% ) ; 柱前压 764 Pa, 载气流量 10 mL öm in;进样量 1 ΛL (用乙醚稀释 25 倍的溶液) ; 分流比40∶1。质谱条件: 离子源为 E I 源; 离子源温度 230℃; 四极杆温度 150 ℃; 电子能量 70 eV ; 发射电流
·82· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 36 卷第 1 期 2005 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2004203215
基金项目: 贵州省优秀科技人才培养计划项目[黔科合人字 (2002) 0205 号 ]3 通讯作者　T el: (0851) 3805459