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RP-HPLC法测定木蝴蝶中黄芩苷



全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月·1083·
较多,要及时拔除,结合除草进行中耕,一般需中耕
3~4次。早期中耕宜深,以后渐浅,以免伤根。追肥以
氮肥为主,在五叶期时适当追施一次,一般地块追施尿
素150kg/hm2,越冬前要盖2cm厚的腐熟农家肥,以
利越冬;第二年植株返绿时追施尿素10kg左右;五月
中旬追施尿素15kg;在开花前20d,每7天叶面喷施
磷酸二氢钾一次。追肥后立即灌水,后期视苗情适量灌
水,保持地面湿润即可,且忌水涝。
4.4防治虫害:细叶益母草在生长过程中的虫害主
要是蚜虫,可用1000倍的菊马乳油或40%乐果乳
化剂1500倍液进行喷洒,注意忌用剧毒型农药,采
收前30d停止用药。
4.5采收加工:细叶益母草生长2年即可采收。当
夏、秋问花开时,割取地上全草,除去杂质,切段,晒
干备用。
5小结
开展人工引种、栽培细叶益母草,是解决资源面
临濒危状态和供求矛盾的有效途径之一。在临近野
生生长地带开展人工驯化栽培,结果表明:人工栽培
的细叶益母草适应性强,生长状况良好,其产量和经
济效益都很可观,经甘肃张掖市药品检验所化验,栽
培种含盐酸水苏碱(C,H。。NO。)达o.52%,与野生种
盐酸水苏碱(C,H。。NO。)0.56%相接近,且明显高于
《中国药典>>2000年版中记载的益母草生物碱质量
分数限度,可进一步大面积推广种植。
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UniversityPublisher,2000.
RP—HPLC法测定木蝴蝶中黄芩苷
王克英
(贵州省药品检验所,贵州贵阳550004)
木蝴蝶为紫葳科木蝴蝶Oroxylumindicum
(L.)Vent.的干燥成熟种子。具有清肺利咽、疏肝
和胃作用。木蝴蝶为常用中药,也是中药复方制剂的
常用药。为《中国药典》历版收载的品种,2000年版
质量控制仅限于鉴别项,为此2005年版一部重新起
草修定该品种。木蝴蝶其主要有效成分为黄芩苷,为
控制其质量,笔者在起草质量标准时,采用RP—
HPLC测定木蝴蝶的黄芩苷。通过测定20批不同产
地木蝴蝶,实验结果稳定,重现性好,为新版药典木
蝴蝶品种质量控制,提供了可靠的依据。
1仪器与试药
惠普1100高效液相色谱仪,超声波清洗器(北
京医疗设备二厂),实验所用甲醇为色谱纯,磷酸为
分析纯,水为重蒸馏水,其他试剂均为分析纯。黄芩
苷对照品购自中国药品生物制品检定所。木蝴蝶药
材来自全国20个产地,20批样品见表1。
2方法与结果
收稿日期:2004一i0—12
表I木蝴蝶样品中黄芩苷测定结果白一3)
Table1 Determinationofba calinin0.indicum(咒一3)
万方数据
·1084· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月
2.1 色谱条件:色谱柱:Diamonsi/C18(250mm×
4.6mm,5pm,流动相:甲醇-如磷酸(45:55:
0.2),体积流量:1.0mL/min,检测波长280nm;理论
塔板数按黄芩苷计算应不低于3000,进样量10弘L。
2.2对照品溶液的制备:精密称取黄芩苷对照品适
量,加50%甲醇制成80弘g/mL溶液,即得。
2.3供试品溶液的制备:取木蝴蝶(通过三号筛)粉
末约0.1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加
70%乙醇50mL,称定质量,置水浴上回流30rain,
放冷,用70%乙醇补足质量,滤过,用0.45nm微孔
滤膜滤过,即得。
2.4可行性试验:分别取供试品溶液与黄芩苷对照
品溶液各lo肛L,注入高效液相色谱仪中,在上述色
谱条件下测定,色谱图见图1。
O 5 10 15 20 25
t/min
图1黄芩苷对照品(A)和木蝴蝶样品(B)HPLC色谱图
Fig.1HPLCchromatogramsfbaicalin
and0.ind如um
2.5 线性关系考察:精密称取黄芩苷对照品适量,加
50%甲醇制成163.68、491.04、818.4、1145.76、1
436.2弘g/mL溶液。精密吸取E述溶液各10肛L、按顺序
进样,按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积为纵坐标,黄
芩苷质量浓度为横坐标绘制标准曲线,得回归方程:Y一
26.155X+2.842,r一0.9993 结果表明黄芩苷在
0.16368~1.43625弘g与峰面积的线性关系良好。
2.6 精密度试验:精密吸取同一对照品溶液10
牡L,重复5次,黄芩苷峰面积RSD为2.70%(咒一
5),精密度良好。
2.7稳定性试验:取本品制备供试品溶液,精密吸
取供试品溶液10pL,每5h进样一次,各测5次,黄
芩苷峰面积RSD为0.94%,可见供试品溶液中黄
芩苷在20h内稳定。‘、
2.8重现性试验:取山东产地的木蝴蝶(通过三号
筛),平行制备5份供试品溶液,进样,5份样品中黄
芩苷质量分数的RSD为2.16%。
2.9回收率试验:采用加样回收法。精密称取已知
质量分数(6.27%)样品,各5份,分别精密加入一定
量的黄芩苷对照品溶液,按供试品溶液的制备方法
处理,在上述色谱条件下测定黄芩苷,计算回收率,
结果平均回收率为102.55%,RSD为0.78%。
2.10样品测定:取本品按上述方法制备供试品溶
液,分别精密吸取供试品溶液和黄芩苷对照品溶液
各10弘L,注入高效液相色谱仪中,按上述色谱条件
测定,按外标法计算供试品溶液中的黄芩苷,结果见
表1。
3讨论
3.1样品的制备:木蝴蝶中翼纤维较多不易打成粉
末,故在打粉之前剪掉种翼,粉末应通过三号筛。
3.2样品提取的选择:通过实验预试得知木蝴蝶含
成分比较复杂,高效液相测出峰较多,因此本实验采
用50%、70%不同浓度的乙醇考察,用不同时间30、
60rain超声和回流提取方法,进样分析,结果表明
采用70%乙醇回流30min:黄芩苷量最高。故选用
了该方法。
3.3 流动相的选择:本实验考察了甲醇一水一磷酸
(49:51:0.2);(47:53:0.2);(45:55:0.2);结
果以(45:55:0.2)分离效果最佳。故予以采用。
通过实验结果表明本实验选用的方法,测定木
蝴蝶中黄芩苷,色谱分离度好,样品测定稳定,重线
性好,精密度高,可控制木蝴蝶药材的质量。
RP—HPLC法测定沙苑子中沙苑子苷
刘春宇1,孙雄华1,张经硕1,胡延维1,顾振纶2
(1.苏州大学医学院药学系,江苏苏州215007;2.苏州大学医学院药理教研室,江苏苏州215007)
沙苑子,又名潼蒺藜,为豆科植物扁茎黄芪As—
tragaluscomplanatusR.Br.的种子,是补益肝肾的
传统中药。主要含有黄酮类、三萜类、有机酸类、氨基
酸、多肽、蛋白质、甾醇、多糖及铁、锌、锰、铜等微量
收稿日期:2004—09—21
作者简介:刘春宇(1961一),女,副教授,主要从事中药有效成分及药理作用研究。
Tel:(0512)65221518E—mail:chunyu@publicl.sz.js.cn
l
i.二iii¨.,ll一2 童
万方数据
RP-HPLC法测定木蝴蝶中黄芩苷
作者: 王克英
作者单位: 贵州省药品检验所,贵州,贵阳,550004
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(7)
被引用次数: 2次

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