全 文 ：中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月· 659·
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和葡萄糖苷链组成，这种分子结构使其总体具有一
定的极性和亲水性，有利于弱极性和极性树脂吸附。
体积比表面积是影响树脂吸附量的主要因素，
丁香苦苷相对分子质量为494，有利于被孔径较大的
树脂吸附，在孔径适合时，树脂的吸附量随比表面积
增大。但在某些情况下，吸附作用力过强不利于解
吸，女IHPD400、HPD500、X一5型树脂的吸附量较大，
但解吸率并不突出，不适用于分离。另外，树脂的孑L
径越大，吸附大分子杂质越多，从而造成树脂的吸附
选择性下降，如AB一8和D一101、HPD400、HPD500型
树脂的比表面积相近，但由于D一101型树脂的孔径
远大于AB一8，因此吸附量有所下降。HPD400、
HPD500型树脂由于孔径大，吸附选择性低，而以
AB-8解吸液中丁香苦苷量最高。
综上所述，树脂的吸附能力是由极性、比表面
积、孔径以及被分离物质的理化性质等综合因素决
定。弱极性AB一8型树脂的极性、比表面积和孔径均
适合，吸附量大，易于解吸，解吸液中丁香苦苷量最
高，采用适宜的工艺条件，可获得最佳生产效果。
参考文献：
E13王丹丹，刘盛泉，陈英杰，等．紫丁香有效成分的研究[J]．
药学学报，1982，17(2)：95卜954．
[z]米靖宇，宋纯清．大孔吸附树脂在中草药研究的进展[J]．中
成药，2003，23(12)：914-917．
乳块消片HPLC指纹图谱的研究
孙宁，秦培勇’，谭天伟
(北京化工大学生命科学与技术学院生物加工过程重点实验室，北京 100029)
摘要：目的研究乳块消片的高效液相指纹图谱，为科学评价及有效控制乳块消片的质量提供了有效可靠的方
法。方法利用高效液相色谱法测定了10批乳块消片样品，色谱条件为：KromasilC。。色谱柱(250mm×4．6mill，
5肛m)，流动相：0．1％醋酸水溶液(A)一甲醇(B)，梯度洗脱l体积流量：1mL／min；检测波长：280am；柱温：25℃I
进样量：20pL。结果精密度、重现性和稳定性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积RSD均小于3％，所得
的色谱图各色谱峰分离较好，基线平整，符合指纹图谱有关规定。结论乳块消片的指纹图特征性及专属性强，可
作为全面控制乳块消片质量的依据。
关键词：乳块消片#丹酚酸B#指纹图谱
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)11—1659—04
乳块消片是由橘叶、丹参、皂角刺、川楝子、地龙
和王不留行组成，具有疏肝理气、活血化瘀、消散乳
块的作用，临床治疗乳腺增生疗效显著。由于乳块消
片药味较多，成分复杂，仅仅测定其中的一个或几个
收稿日期：2008—01—23
基金项目：813项目(2005AA022245)I973项目(2007CB714304)l国家自然科学基金资助项目(20636010，20806006)，北京市科技计划
项目(D0205004040211)；北京化工大学青年教师基金(QN0616)
作者简介：孙 宁(1982一)，男，吉林省吉林市人，北京化工大学硕士研究生。研究方向为中药制剂．
·通讯作者 秦培勇Tel：(010)64448962E—mail：qinq)r@mail．butt．edu．cn
万方数据
·1660· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月
有效成分难以较好地控制整个片剂的质量。指纹图
谱为分析中药提供了有效的手段，能从整体上进行
质量控制n~3]。因此本实验采用梯度洗脱的方式对
乳块消片的指纹图谱进行了研究，为全面控制乳块
消片的质量提供了可靠的方法。
1仪器与试药
Alheeh高效液相色谱仪，Chemstation色谱工
作站。
甲醇(色谱纯，北京试剂公司)；水(超纯水)；丹
酚酸B对照品(中国药品生物制品检验所)；乳块消
片由北京中医药大学药厂提供的未包衣的素片。
2方法与结果
2．1 色谱条件：KromasilC18色谱柱(250mm×
4．6mm，5弘m)；流动相：0．1％醋酸水溶液(A)一
甲醇(B)，梯度洗脱，0min，5％B，45min，35％B，90
min，65％B；体积流量：1mL／min；检测波长：280
nm；柱温：25℃；进样量：20肛L。
2．2对照品溶液的制备：精密称取丹酚酸B对照品
0．100mg，用甲醇溶解并定容在10mL量瓶中，
即得。
2．3供试品溶液的制备：采用均匀取样法从每批乳
块消片中取出2片素片，研成粉末，精密称取100
mg，用超纯水定容在25mL量瓶中，超声溶解，0．45
pm滤膜滤过，即得。
2．4方法学考察r4]
2．4．1 精密度试验：取批号为73074的样品，制备
供试品溶液，连续进样6次，结果其相对保留时间的
RSD小于3％，各共有峰相对峰面积比值的RSD小
于3％。
2．4．2重现性试验：取批号为73074的样品6份，制
备供试品溶液，分别进样，结果其相对保留时间的
RSD小于3％，各共有峰相对峰面积比值的RSD小
于3％。
2．4．3 稳定性试验：取批号为73074的样品，制备
供试品溶液，分别在0、2、4、6、12、24h进样测定。结
果其相对保留时间的RSD小于3％，各共有峰相对
峰面积比值的RSD小于3％。结果表明在24h内，乳
块消片的色谱指纹图谱基本稳定，没有明显的变化，
符合指纹图谱的要求。
2．5实验结果：按所建立的测定条件对10批乳块
消片进行测定，其典型的HPLC的色谱指纹图谱见
图1。比较获得的色谱图，确定有29个主要的共有特
征峰，其占总峰面积90％以上，见表1。丹酚酸B为参
照物S(峰26)，以其保留时间和峰而积为1，分别计
0 10 20 30 40 50 60 70 80
t／rain
圈1乳块消片的HPLC指纹谱圈
Fig．1HPLCFingerprintofRukuaixiaoTablets
表1乳块消片指纹图谱共有特征峰面积比
TablelPercentageareaofcommoncharacteristic
peaksinfingerprintofRukuaixiaoTablets
批号共有特征峰面积比例／％ 批号共有特征峰面积比例／％
73020 91．21 73069 91．56
73031 92．63 73071 93．36
73048 91．23 73072 90．85
73053 92．42 73073 93．67
73054 93．12 73074 91．56
算其他各特征峰的相对保留时间和相对峰面积，见
表2、3。
《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》
对HPLC指纹谱图法的方法误差通常认定为：相对
保留时间的RSD为1％，相对峰面积的RSD为10％。
由表2可以看出，29个共有峰的相对保留时间RSD
都小于1％，因此，可以认为它们都分别为同一组分。
由表3可以看出，29个共有峰中，只有峰23、25的相
对峰面积RSD小于10％，其余的相对峰面积都大于
10％，在10％～40％，因此，可以得出峰23、25的量
基本相同，其他的各峰的量存在差异，但差异不大。
3讨论
实验选了3种流动相：甲醇一水一0．1％冰醋酸、甲
醇一乙腈一0．1％的冰醋酸、乙腈一水一0．1％冰醋酸。经
比较发现在色谱条件中甲醇一水一0．1％冰醋酸作为
流动相条件下，色谱图上各个色谱峰的分离度良好，
保留时间适中，因此选甲醇一水一O．1％冰醋酸流动相
系统作为乳块消片HPLC指纹图谱检测的流动相。
实验选择了260、280、320nm3个波长同时进
行测定，结果在波长280nm下出现的色谱峰最多，
峰型较好，分离度高，且基线平稳，故选择280nm作
为乳块消片HPLC指纹图谱的检测波长。
所建立的乳块消片HPLC指纹图谱中，有29个
共有特征(指纹)峰，各特征峰的相对保留时间和相
对峰面积可以作为乳块消片剂质量伪劣的依据。所
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月· 661·
衷2各批样品共有峰的相对保留时间
Table2 Relativeretentionmesofcommoncharacteristicpeaksineverybatchofsamples
万方数据
·1662· 中草黄ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第1I期2008年11月
建立的方法有较好的重现性、精密度和稳定性，为乳
块消片的质量控制以及衡量其质量的优劣提供依据。
参考文献：
i11聂晶，田颂九，王国荣．中药指纹图谱的研究现状[J]．中草
药，2000，31(12)：881—884．
[2]任德权．中药指纹图谱质控技术的意义与作用[J]．中药新药
与临床药理。2001，12(3)：135—140．
[3]谢堵山．中药制剂色谱指纹图谱(图像)鉴别[J]．中成药，
2000．22(63)：391—395．
天花粉多糖的提取、分离与纯化研究
黄晓兰1，吴惠勤1，王蔚2，黄芳1，林晓珊1
(1．中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室，广东广州510070；
2．广州中一药业有限公司，广东广州 510000)
摘 要：目的 系统地研究天花粉多糖分析的样品前处理方法，包括提取、分离及纯化方法，为进一步开展天花粉
多糖的组成及相对分子质量等分析研究，探讨其药理药效奠定基础。方法试验了加热回流、不同温度浸提、超声
波振荡等方法提取天花粉多糖，对天花粉多糖的沉淀分离条件进行了优化，并采用重结晶、透析、柱色谱等方法进
行纯化，采用苯酚一硫酸分光光度法测定多糖的质量分数．并用核磁共振波谱法进行验证。结果 天花粉多糖于
45℃超声波振荡提取效果最佳，不同纯化方法所得天花粉多糖的质量分数不同．重结晶法得到的多糖质量分数为
58．8％，透析法得到的多糖质量分数为51．、3oA，色谱柱纯化后的多糖质量分数最高可达94％。结论本研究建立了
天花粉多糖的样品前处理分析方法。解决了天花粉中淀粉、蛋白以及柠檬酸等化合物的干扰问题，获得了质量分数
较高的天花粉多糖，可用于天花粉多糖的进一步分析．
关键词：天花粉}多糖}分离；纯化
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)11—1662一04
天花粉是葫芦科植物栝楼Tmchosanthes
kiHlowiiMaxim．的干燥块根，又名栝楼根、蒌根，
具有清热生津、消肿排脓的功效，用于治疗热病烦
渴、肺热燥咳、内热消渴、疮疡肿毒[1]。临床上常用的
消渴症方如玉泉丸、玉液汤、玉女煎等均将天花粉作
为主药。天花粉在增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗艾
滋病毒方面具有很好的功效[2]。天花粉多糖具有降
血糖的活性[3]。天花粉中具有活性的多糖的量很低，
而富含淀粉，虽然这些淀粉也属于多糖类，但没有降
糖功效，并且对天花粉多糖的提取纯化干扰很严重。
天花粉中含有的天花粉蛋白属于水溶性的天然高分
子化合物，也严重干扰天花粉多糖的分离提取和分
析。有关天花粉有效成分的提取分离的研究大多是
针对天花粉蛋白[‘~7]，对天花粉多糖的研究较
少[8一]。因此本实验对天花粉多糖测定前处理中的提
取、分离和纯化方法作了研究，比较了不同方法提取
天花粉多糖，并优化了天花粉多糖的沉淀分离条件，
采用重结晶、透析、柱色谱等方法纯化，然后采用分
光光度法测定多糖，并采用核磁共振波谱法进行验
证，得到了较满意的结果。
1仪器与试剂
721N型分光光度计，上海分析仪器厂；核磁共
振波谱仪；超声波振荡仪。
无水乙醇、丙酮、苯酚、硫酸均为AR级；
SephadexG一50和SephadexG一100葡聚糖凝胶；葡
萄糖，AR级，质量分数大于99．9％，使用前经105℃
烘4h；试验用水为Millipore超纯水。
2方法与结果
2．1 天花粉多糖的测定：采用苯酚一硫酸分光光度
法。称取一定量的天花粉多糖样品，用水溶解并定
容，取1mL溶液加入1mL5％苯酚，再加入5mL
浓硫酸摇匀，于沸水浴中反应15min，取出放置至室
温，于490nm波长处测定吸光度值。以水作空白，以
葡萄糖溶液作对照同时测定，得到标准曲线，根据标
准曲线方程计算出多糖的量。
2．2天花粉多糖的提取
2．2．1提取方法的选择：取经粉碎后的天花粉，加
入10倍量的水提取，比较了加热回流(100℃)、不同
温度浸提和超声波振荡提取等方法结果见表1。若按
传统的加热回流提取方法，由于天花粉中富含淀粉，
收稿日期：2007—12-15
基金项目：广东省科技计划资助项目(2006835605009)
作者简介：黄晓兰(1964一)，女，广东潮州人，研究员，主要从事药物及食品分析工作。Tel；(020)87686536E—mailzwenhxl@126．corn
万方数据
乳块消片HPLC指纹图谱的研究
作者： 孙宁， 秦培勇， 谭天伟
作者单位： 北京化工大学生命科学与技术学院,生物加工过程重点实验室,北京,100029
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(11)

参考文献(3条)
1.聂晶;田颂九;王国荣 中药指纹图谱的研究现状[期刊论文]-中草药 2000(12)
2.任德权 中药指纹图谱质控技术的意义与作用[期刊论文]-中药新药与临床药理 2001(03)
3.谢堵山 中药制剂色谱指纹图谱(图像)鉴别[期刊论文]-中成药 2000(63)

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2. 李建勋.王庆珍 HPLC法检测中风复原丸中丹酚酸B的含量[期刊论文]-中国中医药现代远程教育2010,08(6)
3. 陈丕烈.李雪峰 消块饮和消3贴剂治疗乳腺瘤样增生30例临床观察[期刊论文]-陕西中医学院学报2000,23(3)
4. 曾安贵.王乔.ZENG An-gui.WANG Qiao 中药内服和外敷联合治疗乳腺增生临床效果评价[期刊论文]-内蒙古中医
药2011,30(10)
5. 吴旭彤.朱育凤.张源.周继法 四通颗粒的定性定量研究[期刊论文]-中国中医药信息杂志2004,11(12)
6. 何琳.龙晓英.谢礼新.陈馥.林丹荣.HE Lin.LONG Xiao-ying.XIE Li-xin.CHEN Fu.LIN Dan-rong 地龙配方颗粒
的质量标准研究[期刊论文]-中成药2007,29(8)
7. 史佩琥 “乳康方”对乳腺增生治疗作用的临床研究[学位论文]2010
8. 周文政.廖劲强 乳块消片一步制粒法工艺研究[期刊论文]-中国医院药学杂志2008,28(8)
9. 毛红岩 乳块消胶囊联合归芍调经片治疗乳腺增生的疗效观察[期刊论文]-中国热带医学2004,4(3)
10. 魏生杰.翁运腾 薄层色谱法鉴别乳块消丹中王不留行等3味药材[期刊论文]-海峡药学2010,22(10)


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