全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第5期2005年5月·699。
于岗松油的主成分分析和确认。
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HPLC法测定夏天无注射液中原阿片碱
朱才庆1’2，范其坤1，熊胜泉1，姚闽1，余 华”，魏东芝2
(1．江西省药物研究所天然药物研究室，江西南昌 330029；2．华东理工大学
生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237)
夏天无为罂粟科植物伏生紫堇Corydalis
decumbens(Thunb．)Pers．的于燥块茎或全草，又
名一粒金丹、野延胡、伏地延胡索，具有降压镇痉、活
血通络、祛瘀、行气止痛等功效，临床上用于脑梗死、
周围神经损害性瘫痪、腰椎间盘突出症、坐骨神经
痛、高血压等疾病及中小学生假性近视的治疗[1]。药
理研究表明，夏天无可明显拮抗东莨菪碱或D一半乳
糖引起的动物(／b鼠或大鼠)记忆获得障碍，并能显
著降低动物脑内乙酰胆碱酯酶的活性，具有显著的
促智作用及增强动物学习记忆的功能∽’3]。夏天无中
有效部位为生物碱，原阿片碱为其中的主要活性成
分。夏天无及其制剂中原阿片碱的测定方法有比色
法、薄层扫描法‰53和高效液相色谱法‘6|。本实验采
用HPLC测定夏天无注射液中原阿片碱的方法简
便快速、结果准确且重现性好，可作为夏天无注射液
的质量控制方法。
1仪器与试药
高效液相色谱仪(大连依利特分析仪器有限公
司)，包括P200Ⅱ型高压恒流泵，UV20011紫外可
变波长检测仪，Rheodyne7725i高压六通进样阀，
20tLL定量环；Hw色谱工作站(南京千谱软件有限
公司)；M3型百万分之一电子天平(瑞士Mettler公
司)。
夏天无注射液(江西余江制药厂)；原阿片碱对
照品(中国药品生物制品检定所，批号：110853—
200201)；甲醇为色谱纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为HypersilBDSC，8柱(200
mm×4．6mm，5弘m)；流动相为1％三乙胺一甲醇
(40：60)，使用前用孔径为0．45肛m有机滤膜减压
滤过，超声20min；体积流量：1．0mL／min，检测波
长：286nm；柱温：25。C，进样量：20pL。
2．2可行性试验：精密称取经105℃干燥至恒重的
原阿片碱对照品0．658mg，置25mL量瓶中，加
1％盐酸溶液溶解，定容，混合均匀，制成26．32pg／
mL对照品溶液。另取夏天无注射液，制备成供试品
溶液，分别进样，结果原阿片碱峰保留时间为7．681
min，分离具有很好的效果，见图1。
t／舢
*一原阿片碱
*一protopine
图1原阿片碱对照品(A)和夏天无注
射液(B)的HPLC图谱
Fig．1HPLCchromatogramofprotopineref rence
substance(A)andXiatianwuI jection(B)
2．3线性关系考察：精密称取经105℃干燥至恒重
的原阿片碱对照品1．291mg，置25mL量瓶中，加
1％盐酸溶液溶解并加至刻度，摇匀，制成51．64
ug／mL储备溶液。分别取上述储备液1、2、3、4、5、6
mL，用1％盐酸定容至10mL。精密吸取上述对照
收稿日期：2004—09—14
基金项目：江西省重大科技攻关项目(赣科发计字E2002164号)
作者简介：朱才庆(1973一)，男，江西信丰人，工学博士，现为华东理工大学、江西省药物研究所联合培养博士后，研究方向为天然药物有
效成分的分离纯化。E—mail：zhucqing@sohu．eom
R-通讯作者Tel：(0791)8106317Fax：(0791)8101739E—mail：jxyuhua@sina．corn．en
万方数据
·700· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第5期2005年5月
品溶液20肛L，注入高效液相色谱仪，测定。以峰面
积为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。结
果原阿片碱5．164×10-3～3．098×10卅mg／mL与
峰面积具有良好的线性关系，回归方程为y一2×
107x+615．88，r一0．9999，检测限为9．4×10叫
mg／mL。
2．4精密度试验：精密吸取原阿片碱对照品溶液
(7．2／-g／mL)20肛L重复进样6次，测定峰面积，计
算得其RSD为1．309％。
2．5稳定性试验：取同一夏天无注射液供试品溶液
(保存于室温条件下)，于0、2、4、6、8、12、24、48h进
样20肛L，测定原阿片碱峰面积，计算得其RSD为
0．346％，结果表明供试品溶液在48h内稳定。
2．6重现性试验：取同一批号夏天无注射液，分别
平行制备5份供试品溶液，进样测定，结果原阿片碱
的质量浓度的RSD为1．171％。
2．7 加样回收试验：精密量取含原阿片碱40．03
Fg／mL样品1．0mL，分别精密加入40．23t-g／mL
原阿片碱对照品溶液1．0mL，稀释至10mL，进样
测定，计算得平均回收率为101．1％，RSD为
1．857％(咒一5)。
2．8样品的测定：取夏天无注射液1mL，定容到
25mL，摇匀，过0．45弘m孔径的有机滤膜，收集滤
液，作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液各20
pL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，计算夏天无
注射液中原阿片碱的质量浓度，结果见表1。
表1夏天无注射液中原阿片碱的测定结果
Table1 ProtopineinXiatianwuI jection
3讨论
夏天无及其制剂中有效成分原阿片碱的测定先
后报道了一些不同方法。利用紫外分光光度法测定
其中原阿片碱，实际上是总生物碱，而夏天无中含有
除原阿片碱之外的多种生物碱类成分，因此，该方法
的专属性不强，另外在生产和检验中发现该方法操
作较为繁琐，存在一定的误差。《中华人民共和国药
典))2000年版采用薄层一紫外扫描法，虽然在一定程
度上提高了专属性，但是在测定过程中溶液要多次
转移，二次展开，操作仍然繁琐，要求高，也很容易产
生误差。
本实验进行HPLC法测定夏天无注射液中的
原阿片碱的方法学研究。利用原阿片碱溶液在紫外
光范围内扫描，发现原阿片碱在286nm处有最大
吸收，因此选择检测波长为286nm。在选择流动相
时，采用甲醇一乙酸钠／冰醋酸缓冲溶液(75：25，pH
5．o)为流动相‘7|，但峰拖尾严重，分离效果差；改用
1％三乙胺一甲醇(30：70)为流动相[83时，出峰时间
为5．700min，时间太短，理论塔板数仅有2420，分
离效果仍不理想。经过摸索，发现采用1％三乙胺一
甲醇(40：60)为流动相，目标物原阿片碱出峰时间
为7．681min，理论塔板数大大增加，高达7657，目
标物分离效果非常好且专属性很强。与报道的
HPLC法相比[6]，本法采用样品稀释后直接进样，流
动相不必使用乙腈，不需用三乙胺调解流动相的pH
值，操作安全性增加，且更为简化，在不影响分离效
果的情况下原阿片碱出峰时间缩短，提高了工作效
率，降低了质量控制成本。
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万方数据
HPLC法测定夏天无注射液中原阿片碱
作者： 朱才庆， 范其坤， 熊胜泉， 姚闽， 余华， 魏东芝
作者单位： 朱才庆(江西省药物研究所,天然药物研究室,江西,南昌,330029;华东理工大学生物反应器工
程国家重点实验室,上海,200237)， 范其坤,熊胜泉,姚闽,余华(江西省药物研究所,天然药
物研究室,江西,南昌,330029)， 魏东芝(华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上
海,200237)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(5)
被引用次数： 5次

参考文献(8条)
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引证文献(5条)
1.周利贤 HPLC法测定夏天无注射液中原阿片碱的含量[期刊论文]-中国药师 2010(10)
2.张俊燕 高效液相色谱法测定胃力康颗粒中延胡索乙素的含量[期刊论文]-黑龙江医药 2011(3)
3.ZHU Cai-qing.吴迪.LI Yan.何南生.ZENG Xian-yi.余华 高效液相色谱法测定复方元胡止痛胶囊中延胡索乙素的
含量[期刊论文]-时珍国医国药 2008(7)
4.朱才庆.余华.范其坤.熊胜泉.徐丽英.魏东芝 超滤膜纯化夏天无总碱的研究[期刊论文]-中草药 2005(9)
5.喻志标 夏天无口崩片的研究[学位论文]硕士 2005


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