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RP-HPLC法测定藏药龙胆花的两种原植物白花龙胆和蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷



全 文 :·1738· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月
北两个产地纬度比陕西、河南两个产地高,由此推测
南北的气候差异可能与南五味子木脂素类成分的量
有关,关于这个差异形成的实际原因和5个产地的
南五味子其他成分差异还有待进一步研究。
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RP—HPLC法测定藏药龙胆花的两种原植物
白花龙胆和蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷
刘 圆,孟庆艳,彭镰心,刘 超,尚远宏
(西南民族大学少数民族药物研究所,四川成都610041)
龙胆花为藏医常用品种,分为白花龙胆和杂花龙
胆,在临床上为多品种入药,具有清湿热、泻肝胆实
火、镇咳、利喉、健胃功能,主治感冒发烧、目赤咽痛、
肺热咳嗽、胃热、脑痧、尿道热、阴痒及阴部湿疹、天花
等。白花龙胆为龙胆科植物高山龙胆Gentiana
purdomiiMarq.的花,收载于《四部医典》。《蓝琉璃》
云:“邦见按花色不同可分为白色、蓝色和杂色三类,
白色为上品。”西藏稀有上品白花龙胆,主要以杂花龙
胆入药,就其品种而言为蓝玉簪龙胆或云雾龙胆[1]。
杂花龙胆为龙胆科植物蓝玉簪龙胆G.
veitchiorumHemsl.和云雾龙胆G.nubigena
Edgew.的花。龙胆科植物主要含有的裂环烯醚萜苷
类化学成分龙胆苦苷(gentiopicroside)、当药苷
(sweroside)、当药苦苷(swertiamarin),是龙胆科的
苦味成分和活性成分乜]。藏医认为白花龙胆为上品,
本实验拟对藏药龙胆花的两种原植物白花龙胆和蓝
玉簪龙胆中龙胆苦苷的量进行比较,为龙胆花多品种
人药提供更科学的依据。
1仪器与材料
Waters2695/2690分离系统,2996(2487)检测
器,Empower色谱管理系统。甲醇为色谱纯,水为重
蒸馏水,其他试剂为分析纯。龙胆苦苷对照品由中国
药品生物制品检定所提供(110770—200308,定量测
定用)。白花龙胆和蓝玉簪龙胆均购于西藏拉萨市药
材市场,现二者分别作为三味龙胆胶囊和十味龙胆
花胶囊的原料药之一使用,经笔者鉴定白花龙胆为
龙胆科植物高山龙胆G.purdomiiMarq.的花,蓝
玉簪龙胆为龙胆科植物蓝玉簪龙胆G.veitchiorurn
Hemsl.的花。
2方法与结果
2.1色谱条件:用KromasilC18色谱柱(250mm×
4.6mm,5牲m);甲醇一3oA磷酸(30:70)为流动相;
检测波长为274nm;柱温:30℃,体积流量:1mL/
min。在此色谱条件下,龙胆苦苷与样品中的其他组
分峰达到基线分离,峰形较好。按龙胆苦苷峰计算,色
谱柱的理论塔板数不低于3000。其色谱图见图1。
2.2 对照品溶液的制备:精密称取龙胆苦苷对照品适
量,加甲醇溶解制成0.1020mg/mL的溶液,即得。
2.3供试品溶液的制备:精密量取白花龙胆和蓝玉
簪龙胆粉末(60目)各约0.3g,于25mL量瓶中,加
甲醇15mL,超声45min,放冷,定容至刻度,滤过,
取续滤液,用0.45,um的微孔滤膜滤过,即得。
2.4标准曲线的制备:分别按2.1项色谱条件,精
密进样龙胆苦苷对照品溶液1、2、3、4、5弘L,测定峰
面积,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,进行线
性回归,得回归方程为y一219597X一91280,,J一
0.999。龙胆苦苷在0.102o~0.5100btg进样量
与峰面积线性关系良好。
收稿日期:2006—03—21
基金项目:四川省科技厅应用基础项目(2006);四川省教育厅项目(2005);四川省青年基金项目(2007)
作者简介:刘圆(1968~),女,重庆忠县人,西南民族大学教务处副教授,博士学位,主要从事少数民族药物的研究和教学工作,现在四
川大学华西药学院药学博士后流动站工作。Tel:(028)8552226313808091609E—mail:yuanliu321@126.eom
万方数据
~中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月。1739’
A
2 4 6 8 10 2 4 6 8 10121416 182024
t/rain
圈1龙胆苦苷对照品(A)、白花龙胆(B)和蓝玉■龙胆(c)的色谱圈
Fig.1HPLCChromatogramsf entiopicrinreferencesubstance(A),G.purdomiiflower(B),andG·veitchiorum(C)
2.5 精密度试验:精密吸取龙胆苦苷对照品溶液 表1白花龙胆和蓝玉鲁龙胆中龙胆苦苷(万一3)
10弘L,连续进样5次,龙胆苦苷峰面积RSD—Table1 gentiopicrin
inG’purdomiiflow。’
1.60%,咒一5。结果表明,精密度良好。 andG·谢tchiorum(竺——一
2.6稳定性试验:取白花龙胆样品供试液分别于
0、2、4、6、8h分别进样10肛L,龙胆苦苷峰面积
RSD=0.67%。结果表明,样品供试液在8h时内稳
定性良好。
2.7重现性试验:取白花龙胆样品约0.3g,共5
份,精密称定,按照2.3项下的方法处理,精密吸取
对照品溶液和供试品溶液各10肛L,按2.1色谱条
件测定。结果供试品中龙胆苦苷的量均值为
110.275mg/g,RSD=1.48%,表明该分析方法重
现性良好。
2.8加样回收试验:精密称取白花龙胆样品约92
mg,5份,分别置于25mL量瓶中,精密加入上述对
照品溶液5mL,加入甲醇溶液15mL,超声处理45
min,定容至刻度,滤过,取续滤液,用0.45ym的微
孔滤膜滤过。按照2.1色谱条件测定,结果龙胆苦苷
的平均回收率为99.64%,RSD为1.69%(n一5)。
2.9样品的测定:精密称取白花龙胆和蓝玉簪龙胆
粉末(60目)o.3g。按照2.3项下的方法处理,精密
吸取对照品溶液和供试品溶液各10弘L,按2.1色
谱条件测定。结果见表1。
3讨论
3.1 在筛选龙胆苦苷测定的色谱条件过程中,曾尝
试过的流动相乙腈一水(9:91)[3]、乙腈一水(10:
90)、乙腈一水(11:89)、乙腈一水(12:88)、乙腈一水
(13;87)和甲醇一水(35:65)[4]、甲醇一水(30;70)、
甲醇一0.1%磷酸(30:70)、甲醇一0.2%磷酸(30:
70)、甲醇一0.3%磷酸(30:70)。其中以甲醇一0.3%
磷酸(30:70)分离效果较好。
3.2本实验采用RP—HPLC法测定白花龙胆和蓝
玉簪龙胆中龙胆苦苷的量,通过测定,结果表明蓝玉
簪龙胆中龙胆苦苷的量比白花龙胆中的高。这个结
果和《蓝琉璃》中的叙述和藏医临床认定(白花龙胆
为上品):fi-一定的出入,这就需要对两者的各种成分
做全面的分析,以确定哪一种藏药龙胆入药比较好。
龙胆苦苷具有一定的消炎作用,单纯针对这一作用
来讲,笔者认为蓝玉簪龙胆作为龙胆入药效果比
较好。
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万方数据
RP-HPLC法测定藏药龙胆花的两种原植物白花龙胆和蓝玉簪龙
胆中龙胆苦苷
作者: 刘圆, 孟庆艳, 彭镰心, 刘超, 尚远宏
作者单位: 西南民族大学少数民族药物研究所,四川,成都,610041
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(11)
被引用次数: 7次

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