全 文 ：·1170· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
品，甲醇清洗后即可。硅胶柱色谱分离得到的莫诺苷
粗品含有多种杂质，很难结晶且纯度达不到对照品
的要求，故进一步进行制备高效液相色谱分离纯化。
3．3 曾将硅胶柱色谱后得到的莫诺苷粗品进行薄
层色谱制备，未能得到莫诺苷结晶且纯度不够；制备
高效液相色谱分离后经冷冻干燥得到质量分数达
99％的莫诺苷白色的结晶。
致谢：华北制药集团新药中心牛长群老师帮助
测定质谱和核磁共振谱。
References：
[1]
E2]
[3]
ChP(中国药典)[s]．VolI．2005．
WangTS，PanY，YinF，eta1．Efleetofloganinand
synephrineonrabbitmodelwithsevereh morrhagicshock
口]．JNanjingU ivTraditChinMed(南京中医药大学学
报)，1999，15(6)：345—346．
GUOLL，ZhouY，WangXD．eta1．Efleetofthextractof
thefruitofCornusofficinalisonratspleniclymphocytic
proliferation[J]．JBeqingUnivTraditChinMed(北京中医
药大学学报)，2001，24(3)：38—40．
E4]RecioMC，GinerRM，ManezS，eta1．Structural
considerationson heiridoidsasanti—inflammatoryagentsEJ]．
PlantaMed，1994，60(3)：232—234．
Es]XuHQ，HaoHP，ZhangX，ela1．Morronisideprotects
culturedhumanumbilicalveinendothelialcellsfromdamage
byhighambientglucose[J]．ActaPharm colSin，2004，25
(4)：412—415．
E6]Piwx，CaiBC，PanY，eta1．Studyonenrichmentprocess
ofCornusofficinalisglycosideswithmacroporousresinand
activecarbon[J]．ChinaJChinMaterMed(中国中药杂志)，
2002，27(8)：583—584．
r7]XuLZ，LiHY，TianL，eta1．Studiesonthechemical
constituentsofcommonMacrocarpium(Cornusofficinalis)
口]．ChinTraditHerbDrugs(中草药)，1995，26(2)：62—
65．
[8]HanSY，PanY，DingG，ela1．Applicationof1H—NMR和
13C—NMRonstructureiden“ficationofiridoidsfromFructus
cbMi[J]．ChinArchTraditChinMed(中医药学刊)，2004，
22(1)：56—59．
大孔树脂吸附法富集野菊花总黄酮的工艺研究
盛 萍1，帕丽达·阿不力孜2，刘 波1，刘宏炳1
(1．新疆医科大学中医学院，新疆乌鲁木齐830054；2．新疆医科大学药学院，新疆乌鲁木齐830054)
摘 要：目的 研究大孔树脂吸附法富集野菊花总黄酮的工艺条件及参数。方法 以野菊花总黄酮为考察指标，考
察大孑L树脂富集野菊花总黄酮的最佳工艺条件。结果野菊花提取液(50mg生药／mL)5mL上大孔树脂柱(150
mmX10ram)，吸附30min后，先用100mL蒸馏水洗脱除去杂质，然后用70％乙醇100mL洗脱，洗脱速度为2
mg／mL，洗脱剂用量为9倍量树脂，树脂可重复使用3次，采用此条件为最佳工艺。结论AB一8型大孔树脂在所确
定的工艺条件下，可较好的吸附分离野菊花总黄酮。其70％乙醇洗脱物中总黄酮质量分数达4．34％以上，总黄酮
收率为84．47％以上。采用此法可以较好的富集野菊花中的有效成分。
关键词：野菊花；总黄酮；大孔吸附树脂
中图分类号：R284．2；R286．02文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)08—1170—04
Enrichmentprocessingoftotalf avonefChrysanthemumindic
withmacroporousadsorptionresi
SHENGPin91，PALi—da·ABu—Lizi2，LIUB01，LIUHong—bin91
(1．CollegeofTraditionalChineseMedicine，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830054，China；
2．CollegeofPharmacy，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830054，China)
Keywords：啜rysanthemumindicunL．；totalf avone；macroporousadsorptionresi
野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum
indicumL．的干燥头状花序，具有疏风清热、消肿
解毒的功效[】]。现代药理研究表明野菊花总黄酮是
其降压、抗菌、抗病毒的主要有效成分心]。大孔吸附
树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸
附剂，是在离子交换剂和其他吸附剂的应用基础上
发展起来的一类新型树脂，是依靠它和被吸附分子
收稿日期：2005—11—20
之间的范德华力，通过它巨大的比表面积进行吸附
而工作的。合成吸附剂有大的比表面积和类似活性
炭颗粒的内细孑L结构，这些多孔特性使之从水溶液
中有效地吸附有机化合物，且具有选择性吸附有机
化合物的能力，可用于皂苷、黄酮、蒽醌、生物碱、水
溶性酚性成分等的富集，其吸附性能、吸附条件参数
因化合物的理化性质不同而不同[3]。本实验采用该
万方数据
中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1171·
技术，以野菊花中主要成分总黄酮为评价指标，对6
种树脂进行了筛选并着重考察了AB一8型大孔吸附
树脂富集野菊花有效成分的工艺条件与参数，旨在
为新药的研制开发中利用该技术制备野菊花总黄酮
提供帮助，也为该技术的规范应用积累资料。
1仪器、材料和试剂
Spectrumlab54紫外分光光度计(上海市棱光
有限公司)；KQ一400DB型数控超声清洗器(昆山
市超声仪器有限公司)；电子天平(Sartorius德国
产)；DZF--6021型真空于燥箱(上海精密实验设备
有限公司)；DRT～SX型恒温电热套(郑州长城科
工贸有限公司)；RE一52旋转式蒸发器(上海安亭
电子仪器厂)。
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所，批号
0080—9705)，野菊花(购于新疆参茸药业有限公司)，
AB一8、X一5型大孔吸附树脂(天津市光复精细化工
研究所)，HPD一100、HPD一400、HPD一450树脂(河北
沧州宝恩化工有限公司)，HP一20树脂(日本三菱公
司)。所用试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1野菊花总黄酮的测定[4]
2．1．1对照品溶液的制备：精密称取在120℃减压
干燥至恒重的芦丁对照品10mL，置50mL量瓶
中，加蒸馏水少许，置水浴上微热使溶解，放冷，加蒸
馏水至刻度，摇匀即得(每lmL中含芦丁0．2rag)。
2．1．2标准曲线的制备：精密量取芦丁对照品0、
1、2、3、4、5、6mL，分别置25mL量瓶中，各加水至
6mL，加5％亚硝酸钠溶液1mL，使混匀，放置6
min，加10％硝酸铝溶液1mL，混匀，放置6rain，加
氢氧化钠溶液10mL，再加水至刻度，混匀，放置15
rain，在512nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵
坐标，质量浓度为横坐标绘制标准曲线，标准曲线方
程为A一18．375C+0．0493，r=0．999。
2．1．3供试品溶液制备和总黄酮测定：野菊花药材
50g，加10倍量75％乙醇回流提取2次，每次30
rain，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，离心，取
上清液，加蒸馏水定容至l000mL(50mg生药／
mL)作为样品液。从中吸取5mL定容于50mL量
瓶中，从中精密吸取5mL，照标准曲线项下方法“加
水至6mL⋯⋯”依法测定吸光度，测得野菊花总黄
酮的质量分数为5．138％，RSD为1．7％(咒=5)。
2．2大孔吸附树脂的预处理：以乙醇湿法装柱。用
95％乙醇在柱上流动清洗，不时检出流出液至乙醇
液与水混合(1：5)不呈白色混浊为止，然后以大量
蒸馏水洗去乙醇至无醇味。
2．3树脂的筛选：精密吸取4mL野菊花液分别通
过6种不同型号的已预处理好的树脂柱，静置30
rain，依次用蒸馏水、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇
洗脱液，蒸干，用甲醇定容于50mL量瓶中，从中精
密吸取5mL，照标准曲线项下方法“加水至6
mL⋯⋯”依法测定吸光度，测定野菊花总黄酮，与原
液的测定结果比较，计算总黄酮回收率(总黄酮回收
率=过柱后野菊花总黄酮质量／过柱前野菊花总黄
酮质量×100％)，结果见表1。可见，在筛选的6种
树脂中，用AB一8树脂纯化分离野菊花总黄酮，乙醇
洗脱物中总黄酮和总黄酮回收率均最高，故确定
AB一8树脂为分离纯化野菊花总黄酮的最佳树脂。
表1不同树脂对总黄酮的影响
Table1 Effectofvariousre insontotalflavone
2．4考察AB一8树脂纯化分离野菊花总黄酮的工
艺参数
2。4。l洗脱剂的确定：精密吸取4mL野菊花供试
品溶液分别通过4根AB一8树脂柱(150mmx10
ram)，4根树脂柱分别用水洗脱至洗脱液近无色，再
分别用30％、50％、70％、90％乙醇洗脱，分别回收
乙醇，蒸干，用甲醇定容于50mL量瓶中，从中精密
吸取5mL，照标准曲线项下方法“加水至6
mL⋯⋯”依法测定吸光度，测定野菊花总黄酮，与原
液的测定结果比较，计算总黄酮回收率，结果见表
2。结果显示，70％乙醇洗脱液中总黄酮和回收率均
最高，且洗脱剂用量最小，故确定70％乙醇液为最
佳洗脱剂。
表2洗脱剂体积分数对总黄酮的影响
Table2 Effectofeluentconcentrationontotalf avone
2．4．2最佳上柱量的确定：分别吸取野菊花供试品
溶液4、5、10、15、20、25mL，上柱且静置20rain，依
次用蒸馏水100mL，70％乙醇100mL洗脱，蒸干，
甲醇定容于50mL量瓶中，测定总黄酮，计算总黄
酮回收率，结果见表3。结果显示，5mL上柱量与其
万方数据
·1172· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
表3不同上柱量对总黄酮的影响
Table3 Effectofvariousad orptioncapacities
ontotaIflavone
上柱量／总黄酮／总黄酮回 上柱量／总黄酮／总黄酮回
mL ％ 收率／％ mL ％ 收率／％
4 4．34 88．57 15 3．79 77．35
5 4．79 97．76 20 3．16 64．49
10 3．97 81．02 25 2．50 51．02
他各上柱量通过树脂后，70％乙醇洗脱液中总黄酮
无显著差异，这说明5mL上柱量为饱和上柱量，超
过5mI。即超过了树脂的吸附容量，且5mL上柱量
过柱后野菊花总黄酮量与5mI。样品原液中总黄酮
量接近，故5mL为最佳上柱量。
2．4．3洗脱速度的确定：分别吸取野菊花供试品溶
液5mI。上3根树脂柱，以70％乙醇洗脱，分别以1、
2、3mI。／rain的速度洗脱，测定其总黄酮，计算总黄
酮回收率，结果见表4。可见，洗脱流速2mL／min
时，洗脱剂的用量最少，总黄酮与回收率均最大，故
确定洗脱流速为2mL／min。
表4不同洗脱流速的比较
Table4 Comparisonofvariousc rrentvelocities
洗脱速度／(mL·rain一·)洗脱剂用量／mI，总黄酮／％总黄酮回收率／％
2．4．4最佳吸附时间的确定：分别吸取5mL供试
品溶液4份，通过4根树脂柱，分别静置5、15、30、
60min，依次用蒸馏水、70％乙醇洗脱，收集70％乙
醇洗脱液，测定总黄酮，计算总黄酮回收率，结果见
表5。可见，静置30min后总黄酮与其回收率均最
高，时间过长或过短均偏低，这可能与时间过长解吸
困难，时间过短吸附不完全有关。故确定最佳吸附时
间为30min。
表5不同吸附时间的比较
Table5 Comparisonofvariousad orptiontimes
吸附时间／min 总黄酮／％ 总黄酮回收率／％
5 4．02 8Z．04
15 4．13 84．29
30 4．82 98．37
60 4．16 84．90
2．4．5洗脱曲线的考察：按上述确定的吸附洗脱条
件，取野菊花供试品溶液5mL进行上柱，分段收集
洗脱液，每个树脂体积(湿体积)收集1份，共收集
18份，分别测定吸光度，计算总黄酮，结果见表6。可
见，第10份洗脱液中总黄酮已经很少，可认为树脂
柱上吸附的总黄酮已经洗脱完全，故确定洗脱剂用
量为9倍量树脂体积。
表6不同流份中总黄酮的比较
Table6 Comparisonoftotalf avoneinvarious
flowingcapacities
流份(序号) 总黄酮／％ 流份(序号) 总黄酮／％
1 0．403 10 0．093
2 1．216 11 0．064
3 0．862 12 0．036
4 0．676 13 0．028
5 0．422 14
—
6 0．325 15
—
7 0．238 16
—
8 0．163 17 一
9 0．138 18 —
2．4．6树脂重复使用次数考察：按上述确定的吸附
洗脱条件，取野菊花供试品溶液过柱，在同一根树脂
柱上重复操作5次，分别计算5次的总黄酮与其回
收率，结果见表7。可见，树脂重复使用3次后，对黄
酮的吸附量已经明显下降，需要再生才可以继续使
用，故树脂可重复使用3次。
表7树脂重复过柱对总黄酮的影响
Table7 Effectofresinrepeatedadsorptions
ontotalf avone
次数 总黄酮／％ 总黄酮回收率／％
3讨论
3．1 本实验证实了AB一8型大孑L吸附树脂富集总
黄酮不仅具有吸附快、解吸率高等特点，而且具有吸
附容量较大，洗脱率高，树脂再生简单等优点，在野
菊花富集总黄酮工艺中具有一定的推广应用价值。
3．2 AB一8型树脂对野菊花总黄酮有良好的吸附性
能，其工艺条件为野菊花提取液上样质量浓度为50
mg／mL，洗脱剂为70％乙醇，洗脱剂用量为9倍量
树脂体积，洗脱速度为2mL／min，树脂可重复使用
3次。在此条件下，用AB一8树脂吸附分离总黄酮，乙
醇洗脱物中野菊花总黄酮质量分数达4．34％以上，
总黄酮回收率达84．47％以上。
3．3 大孔吸附树脂技术虽在工业化进程中还存在
一些实际应用问题[5’6]，比其他天然吸附剂具有不可
替代的优点，尤其是其孔径和孔度的大小，比表面
积、极性等性能都可以人为控制调节，供任意选择，
因此在中药、中成药制剂研究中已日趋成熟，应用前
景广泛。
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1173·
References：L4J
E13JiangsuNewMedicalCo lege．DectionaryofChi eseM口terin
Medica(中药大辞典)[M]．Shanghai：ShanghaiPeople’
PublishingHouse，1979． [5]
[2]BeijingChrysanthemumCooperatesGroup．Thepreparation
clinicalobservationofChrysanthemumencloses430casesof
curativeeffectanalysis[J]．BullChinMaterMed(中药通 r¨
报)，1983，8(4)：39—40．
⋯
I-3]LiuzQ，LaiXP，wuYH，eta1．Studyonenrichment
processofBaohePillswithmacroporousresin[J]．Chin
TraditPatMed(中成药)，2001，23(8)：550—552．
LinCR．Thed terminationofflavonoidc ntentofflowersof
Chtysanthemumindicum[J]．Guihaia(广西植物)，2002，22
(5)：467—468．
LiBT，WangX，LiXJ．Theapplicationofseparationof
naturalproductbymacroporousresin[J]．ChinTraditHerb
Drugs(中草药)，1990，21(8)：42—44．
HOUSX，TianHK．Theapplicationofseparationand
purificationprocessofcompoundinTCMbymacroporous
adsorptionresirJ]．TraditCh nDrugResClinPharmacol
(中药新药与临床药理)，2000，11(3)：131—133．
党参颗粒的质量标准研究
李 松，隆龙
(江阴天江药业有限公司，江苏江阴 214434)
党参颗粒为桔梗科植物党参Codonopsis
pilosula(Franch．)Nannf．的干燥根制成，具有补
中益气、健脾益肺的功效，用于脾肺虚弱、气短心悸、
食少便溏、虚喘咳嗽、内热消渴等症，是临床常用的
补益药[1]。党参中主要有多糖、聚乙炔醇、甾醇类、三
萜类、苯丙素苷类、生物碱、内酯类、酚酸、黄酮等多
种化学成分[2]。现代药理研究表明党参有免疫增强
作用，同时具有一定的双向调节作用，对胃黏膜损伤
具有保护作用，对记忆障碍有改善作用，具有对心血
管和血液系统的作用、抗衰老作用、抗应激作用等。
《中国药典))2005年版一部“党参”项下仅有薄层鉴
别，缺少对党参质量的有效控制指标。为控制党参颗
粒的质量，保证产品均一稳定，本实验以党参炔苷为
指标成分对党参颗粒进行定性和定量测定[3]，结果
满意，可作为产品的质量控制方法。
1仪器与试药
Waters600E高效液相色谱仪，Waters2487双
通道紫外检测器(美国Waters公司)；JS～3030色
谱工作站(大连江申分离科学技术有限公司)；超声
清洗机(无锡超声电子设备厂)；REPROSTAR3薄
层成像系统(CAMAG)。
党参炔苷对照品(自制，经高效液相色谱分析，
质量分数≥98％)。硅胶G(青岛海洋化工厂，薄层色
谱用)；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为
分析纯。党参颗粒由江阴天江药业有限公司提供。
2方法与结果
2．1薄层色谱定性鉴别：取本品约1g，加甲醇25
mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水2
mL使溶解，置C，。固相萃取小柱(500mg，用甲醇、
50％甲醇、20％甲醇各10mL预洗)中，先用20％甲
醇洗脱、再用50％甲醇各5mL洗脱，收集50％甲
醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供
试品溶液。另取党参炔苷对照品适量，加甲醇制成1
mg／mL的溶液，作为对照品溶液。按照《中国药典》
2005年版一部附录YlB薄层色谱法试验，吸取供试
品溶液10弘L、对照品溶液2pL，分别点于同一硅胶
HF删薄层板上，以三氯甲烷一甲醇一水(16：5：0．5)
为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶
液，105℃加热5min，置紫外光灯(365nm)下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相
同颜色的荧光斑点。见图1。
2．2定量测定
1～10一为党参颗粒s一为党参炔苷
l一10一DangshenGranuleS—lobetyolin
图1党参颗粒的TLC图谱
Fig．1TLChromatogramofDangshenGranule
收稿日期：2005—11—05
基金项目：国家“十五”重大科技专项“创新药物和中药现代化”(2001BA701A41)
作者简介：李松(1969一)，男，江苏人，工程师，主要从事中药质量标准研究。Tel：(0510)86408091E—mail：lis@tianjiang．corn
万方数据
大孔树脂吸附法富集野菊花总黄酮的工艺研究
作者： 盛萍， 帕丽达·阿不力孜， 刘波， 刘宏炳， SHENG Ping， PA Li-da·A Bu-Lizi，
LIU Bo， LIU Hong-bing
作者单位： 盛萍,刘波,刘宏炳,SHENG Ping,LIU Bo,LIU Hong-bing(新疆医科大学中医学院,新疆,乌鲁
木齐,830054)， 帕丽达·阿不力孜,PA Li-da·A Bu-Lizi(新疆医科大学药学院,新疆,乌鲁
木齐,830054)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(8)
被引用次数： 16次

参考文献(6条)
1.江苏新医学院 中药大辞典 1979
2.Beijing Chrysanthemum Cooperates Group The preparation clinical observation of Chrysanthemum
encloses 430 cases of curative effect analysis 1983(04)
3.Liu Z Q;Lai X P;Wu Y H Study on enrichment process of Baohe Pills with macroporous resin[期刊论文]
-中成药 2001(08)
4.Lin C R The determination of flavonoid content of flowers of Chtysanthemum indicum[期刊论文]-广西
植物 2002(05)
5.Li B T;Wang X;Li X J The application of separation of natural product by macroporous resin
1990(08)
6.Hou S X;Tian H K The application of separation and purification process of compound in TCM by
macroporous adsorption resin 2000(03)

本文读者也读过(3条)
1. 张纪兴.李坚.程国华 大孔树脂吸附法富集地锦草总黄酮的工艺研究[期刊论文]-中药材2002,25(2)
2. 白立群.娄建石.BAI Li-qun.LOU Jian-shi 大孔树脂吸附法分离纯化射干异黄酮的研究[期刊论文]-武警医学院
学报2008,17(10)
3. 刘中秋.赖小平.吴燕红.蔡雄.梁前 大孔树脂吸附法富集保和丸中橙皮苷的工艺研究[期刊论文]-中成药
2001,23(8)

引证文献(16条)
1.樊点莲.严虹霞 野菊花中总黄酮含量测定[期刊论文]-中国药物与临床 2009(7)
2.张道武.刘廷岳 离子交换纤维对银杏叶黄酮静态吸附和解吸的研究[期刊论文]-合成纤维 2009(8)
3.陈兴芬.单承莺.姜洪芳.张卫明 侧柏叶总黄酮的纯化工艺研究[期刊论文]-江苏农业科学 2011(3)
4.刘志祥 大孔树脂在纯化杜仲总黄酮中的应用[期刊论文]-湖北农业科学 2009(6)
5.袁慧.周亚球.光琴 黄蜀葵花总黄酮的大孔树脂纯化工艺[期刊论文]-安徽医药 2009(2)
6.卫强.彭如玉.翟永欢.钱纪伟 滁菊中总黄酮的大孔树脂纯化工艺研究[期刊论文]-中药材 2008(1)
7.张亚梅.张小娟.简晖.冯育林.王跃生.杨世林 大孔吸附树脂纯化山蜡梅叶中总黄酮的研究[期刊论文]-中草药
2009(8)
8.吴晓宁.余陈欢.包启年 杭白菊总黄酮抗炎作用及其机制初探[期刊论文]-中国临床药理学与治疗学 2009(9)
9.刘志祥.曾超珍 大孔树脂法纯化苦丁茶总黄酮的研究[期刊论文]-时珍国医国药 2009(9)
10.黄少伟.池汝安.张越非.吴元欣.巨修炼.郭嘉.黄齐茂 大孔吸附树脂分离纯化土茯苓总黄酮[期刊论文]-中国中
药杂志 2008(10)
11.陈洪涛.蔡丹昭.林立波 大孔吸附树脂分离纯化榕树叶总黄酮的实验研究[期刊论文]-广西中医学院学报
2008(2)
12.曾超珍.刘志祥.韩磊 大孔树脂法纯化柑橘皮中的橙皮甙及其油脂抗氧化活性研究[期刊论文]-中国食品学报
2012(3)
13.刘颖.刘树民.于栋华.刘磊.杨超 大孔树脂纯化穿山龙总皂苷的工艺优化[期刊论文]-医药导报 2011(5)
14.袁源.何瑞.詹若挺.王庆煌.李积华 不同生长方式青天葵中黄酮类成分的质谱比较分析[期刊论文]-时珍国医国
药 2011(11)
15.曾超珍.刘志祥.李军龙 大孔树脂纯化枸骨叶总皂苷及其油脂抗氧化活性研究[期刊论文]-中国粮油学报
2011(8)
16.王国军.唐辉.张淑兰.冯荣.王幻.关丽.刘怡娟 大孔树脂纯化核桃隔膜总黄酮的工艺研究[期刊论文]-中草药
2013(19)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200608020.aspx