全 文 ：3 2B232乙酸酯3 2B232acetate
图 1　清炒法 (A)、烘法 (B)、酒炒法 (C)、药典盐炙法 (D )、樟帮盐炙法 (E)、建昌帮盐炙法 (F)、盐麸法 (G)、
樟帮麸炒法 (H)、生饮片 ( I)样品和泽泻醇 B23-乙酸酯对照品 (J)的 HPLC 图谱
F ig11　HPLC chromatogram s of samples with methods of parched (A) , toasted (B) , wine-baked (C) , sa lt solution -baked
of Ch P (D ) , sa lt solution -baked of Zhangbang (E) , sa lt solutionbaked- of J ianchangbang (F) , sa lt solution -bran
parched (G) , bran-parched of Zhangbang (H) , pr imary processed ( I) , and al isol B23-acetate reference substance (J)
降, 而其他用盐做辅料的炮制品, 盐在药粉中占了一
定比例而使原药粉的量相对减少, 导致泽泻醇B 232
乙酸酯的质量分数相对下降。药理研究表明, 生品与
各炒制品均有一定的利尿作用, 而盐泽泻几乎不见
利尿作用, 临床应用时为保证质量应注意炮制方法。
412　《中华人民共和国药典》2000 年版中没有泽泻
药材的质量分数测定。采用流动相乙腈2水 (60∶40)
时, 出峰时间长, 用乙腈2水 (65∶35) 为流动相时[4 ] ,
出峰时间还是过长。用流动相乙腈2水 (70∶30) 时,
峰形良好并可达到完全分离且保留时间较短。
413　提取方法和提取时间不同对泽泻醇B 232乙酸
酯的提取能力也不一样。结合文献资料和常规提取
方法, 考察了索氏提取法、回流提取法和超声提取
法, 结果表明超声提取法明显优于其他两种提取方
法。考察了超声提取 30、45、60 m in 的提取能力, 结
果三者的提取能力差异无显著性, 故超声时间确定
为 30 m in。
References:
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石菖蒲挥发油中 Β-细辛醚在兔体内的药动学研究
魏立平, 吴玫涵Ξ
(解放军总后卫生部药品仪器检验所, 北京　100071)
摘　要: 目的　研究石菖蒲挥发油中 Β2细辛醚在新西兰兔体内的药动学。方法　采用气相色谱法测定 Β2细辛醚的
血药浓度, 并以气相色谱2质谱联用法确认 Β2细辛醚。色谱柱: H P235 毛细管气相色谱柱; 程序升温: 起始温度为 30
℃, 6 ℃öm in 升至 220 ℃, 保持 5 m in; 进样口温度: 250 ℃; F ID 检测器温度: 320 ℃; 进样量: 210 ΛL ; 无分流进样;
溶剂: 甲醇; 载气: 氦气; 柱头压: 55 kPa; 内标物: Α2萘酚。质谱条件: 电离方式: E I; 电子能量: 70 eV ; 接口温度: 280
℃; 离子源温度: 200 ℃; 四极杆温度: 100 ℃; 质量扫描范围: 35～ 500 am u; 溶剂延迟: 210 m in。结果　Β2细辛醚与内
标物的峰面积之比 (Y )与质量浓度 (C )线性关系良好, 回归方程为: Y = 01018 89 C + 11755×10- 3, r= 01999 9。线
性范围: 0104～ 40 ΛgömL。新西兰兔全血中最低检测质量浓度为 0104 ΛgömL。结论　新西兰兔口服石菖蒲挥发油
后, Β2细辛醚在体内药时过程为线性动力学过程, 符合一级吸收二室模型, t1ö2Α为 1813 m in, t1ö2Β为 11415 m in。
关键词: 石菖蒲; Β2细辛醚; 药动学; 气相色谱
中图分类号: R 286102　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2005) 01 0048 04
·84· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 36 卷第 1 期 2005 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2004204211
Pharmacok inetic study of Β-a sarone in vola tile o il from A corus ta ta r inow ii in rabb its
W E I L i2p ing, W U M ei2han
( Inst itu te of D rug Contro l of Peop le’s L iberat ion A rm y, Beijing 100071, Ch ina)
Key words: A corus ta ta rinow ii Scho t t1; Β2asarone; pharm acok inet ics; GC
　 　 石 菖 蒲 为 天 南 星 科 植 物 石 菖 蒲 A corus
ta ta rinow ii Scho t t 的根茎。石菖蒲中挥发油具有镇
静抗惊、解痉平喘及抗心律失常等作用, Β2细辛醚
(顺22, 4, 52三甲氧基212丙烯基苯) 是其中的主要有
效成分之一。因此, 本实验建立了气相色谱法测定Β2
细辛醚的血药浓度的方法, 并对其在新西兰兔体内
的药动学进行了研究。
1　材料与仪器
石菖蒲购自同仁堂药店, 经解放军总后卫生部
药品仪器检验所中药室鉴定为天南星科植物石菖蒲
的干燥根茎。Β2细辛醚对照品为 F luka 试剂 (质量分
数: 7019% )。甲醇 (H PL C 级) ; Α2萘酚、乙醚、氯化
钠、氟化钠均为分析纯, 超纯水 (自制)。新西兰兔, 雌
雄各半, 由北京科宇动物养殖中心提供, 许可证号:
SCXK (京) 200220005。
　　H P 5890 气相色谱仪 (惠普公司) , H P 5989A
质谱仪 (惠普公司) , Sarto riu s R 200D 电子天平 (赛
多利斯公司)
2　实验方法
211　色谱条件: H P235 毛细管气相色谱柱 (内径:
0125 mm ; 长: 30 m ; 涂膜厚: 0125 Λm ) ; 程序升温:
起始温度为 30 ℃, 6 ℃öm in 升至 220 ℃, 保持 5
m in; 进样口温度: 250 ℃; F ID 检测器温度: 320 ℃;
进样量: 210 ΛL ; 无分流进样; 溶剂: 甲醇; 载气: 氦
气; 柱头压: 55 kPa; 内标物: Α2萘酚。质谱条件: 电离
方式: E I; 电子能量: 70 eV ; 接口温度: 280 ℃; 离子
源温度: 200 ℃; 四极杆温度: 100 ℃; 质量扫描范
围: 35～ 500 am u, 溶剂延迟: 210 m in。
212　石菖蒲挥发油的提取: 采用水蒸气蒸馏法 (参
照《中华人民共和国药典》2000 年版一部附录 XD
挥发油测定法) 提取石菖蒲中的挥发油, 产率为
210%。
213　样品预处理: 取含待测药物的全血 500 ΛL (肝
素抗凝) 于离心管中, 加入 015 mL 水, 150 m g 氯化
钠, 25 m g 氟化钠摇匀, 加 Α2萘酚, 加 110 mL 乙醚
振摇提取, 3 000 röm in 离心 10 m in, 吸取乙醚层, 再
分别用 015 mL 乙醚提取两次, 合并乙醚液, 氮气流
吹干, 以甲醇 100 ΛL 溶解, 即得。
214　新西兰兔 ig 给药的药动学研究: 兔禁食 12 h
后, 按 011、012、014 gökg ig 石菖蒲挥发油 (含 Β2细
辛醚 6010% ) , 分别于给药后 5、10、20、30、40、50、
60、90、120、150、180、240、360、420 m in 耳缘静脉取
血 015 mL , 收集于肝素化的离心管内, 按样品预处
理方法处理。气相色谱法分析样品, 用 3P87 药动学
程序处理血药浓度2时间数据。
　　为测定 Β2细辛醚 ig 给药后的绝对生物利用度,
以 1, 22丙二醇为溶剂, 将石菖蒲挥发油制成 0125
gömL 的注射液, 兔耳缘 iv 给药, 剂量为 011 gökg,
于给药后的 5、10、20、30、40、50、60、90、120、150、
180、240、360、420 m in 耳缘静脉取血 500 ΛL , 收集
于肝素化的离心管内, 按样品预处理方法处理。测定
血药浓度, 用 3P87 药动学程序处理血药浓度2时间
数据, 并计算绝对生物利用度。
3　实验结果
311　Β2细辛醚气相色谱行为及方法专属性: 称取 Β2
细辛醚对照品适量, 加 114 m gömL Α2萘酚的甲醇溶
液溶解, 制成含 Β2细辛醚 0190 m gömL、Α2细辛醚
0134 m gömL 的对照品溶液。进样 210 ΛL , 记录色谱
图。取空白兔血 (肝素抗凝) 015 mL , 按 213 项下处
理后, 加甲醇 011 mL 溶解, 进样 210 ΛL , 记录色谱
图。取空白兔血 (肝素抗凝) 015 mL , 用微量进样器
加 710 ΛL 607 ΛgömL Β2细辛醚甲醇溶液, 加入 Α2萘
酚, 混匀后按 213 项下处理, 用甲醇溶解, 进样 210ΛL , 记录色谱图, 结果见图 1。
312　被测药物 Β2细辛醚的确认: 兔给药后全血中Β2
细辛醚的出峰时间与Β2细辛醚对照品的出峰时间完
全一致, 初步判断其为Β2细辛醚。为了进一步确认被
测组份, 采用气相色谱2质谱联用法进行结构鉴定。
对出峰时间为 2815 m in 的色谱峰进行分析, 结果分
子离子峰m öz 208 的丰度最高, 与 Β2细辛醚的质量
数完全吻合。经检索, 此峰与谱库中的Β2细辛醚的吻
合程度为 98%。综上确定, 此峰为 Β2细辛醚峰。
313　标准曲线的制备: 取空白全血 (肝素抗凝) 015
mL , 加入不同量 Β2细辛醚对照品使全血中药物质量
浓度分别为 0104、0108、0140、116、810、4010 Λgö
mL , 按实验方法所述进行样品处理。以 Β2细辛醚与
内标物的峰面积比 (Y ) 对 Β2细辛醚的血药浓度 (C )
作图, 其回归方程为 Y = 01018 89 C + 11755×10- 3,
·94·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 36 卷第 1 期 2005 年 1 月
12Α2萘酚　22Β2细辛醚　32Α2细辛醚
12Α2m aph tho l　22Β2asarone　32Α2asarone
图 1　对照品 (A)、空白血样 (B)和含 Β-细辛醚血样 (C)的 GC 图谱
F ig1 1　GC chromatogram s of reference substance (A) , blank blood (B) , and blood sample with Β-asarone (C)
r= 01999 9, 线性范围为 0104～ 40 ΛgömL。兔全血
中最低检测质量浓度为 0104 ΛgömL。
314　精密度试验: 配制 01098、01981、9181 ΛgömLΒ2细辛醚全血样品, 于当日取 015 mL 全血样品, 按
213 项下处理并测定药物浓度, 测定后置室温保存, 每
种浓度平行做 5 份, 计算日内精密度; 于第 1、2、3、4、5
日重复测定, 计算日间精密度, 结果见表 1。表明, 在上
述 3 种质量浓度下, 日内与日间R SD 均< 1110%。
表 1　精密度试验结果 (x±s, n= 5)
Table 1　Prec is ion test (x±s, n= 5)Β2细辛醚质
量浓度ö
(Λg·mL - 1) 日内质量浓度ö(Λg·mL - 1) RSDö% 日间质量浓度ö(Λg·mL - 1) RSDö%
　01098 01091±0109 1012 01081±01009 1016
01981 01931±01061 615 01937±01020 211
9181　 91730±01190 210 91370±01270 219
315　准确度试验: 配制 01099 6、01498、01996、
1199、3198 ΛgömL Β2细辛醚全血样品, 按样品预处
理方法处理, 每种质量浓度各做 5 份, 计算 Β2细辛醚
与内标的峰面积比值, 按标准曲线法计算质量浓度,
所得质量浓度与实际质量浓度的比值即为相对回收
率, 结果见表 2。
表 2　相对回收率试验结果
Table 2　Relative recovery test (x±s, n= 5)Β2细辛醚质量浓度ö(Λg·mL - 1) 测得质量浓度ö(Λg·mL - 1) 回收率ö%
　　　　01099 6 01096 4±01008 4 9715±719
01498 01498　±01022　 9812±414
01996 01977　±01025　 9810±214
1199 1197 　±0103 　 9911±113
3198 3191 　±0107 　 9811±117
316　提取回收率试验: 配制 01099 6、01498、01966、
1199、3198 ΛgömL Β2细辛醚全血样品, 按样品预处
理方法处理, 每种质量浓度各做 5 份, 以 Β2细辛醚对
照品溶液为标准计算回收率, 结果表明, 在 5 种质量
浓度下绝对回收率在 9012%～ 9913% , 见表 3。
表 3　提取回收率 (x±s, n= 5)
Table 3　Absolute recovery of extraction (x±s, n= 5)Β2细辛醚质量浓度ö(Λg·mL - 1) 测得质量浓度ö(Λg·mL - 1) 回收率ö%
01096 6 01089 9 ±01009 5 9013±915
01498　 01466　±01021　 9315±413
01996　 01944　±01024　 9418±215
1199　 11980　±01030　 9913±113
3198　 31930　±01070　 9817±117
317　兔给药后的吸收药动学: 兔 ig 石菖蒲挥发油,
测得的血药浓度2时间曲线见图 2。兔耳缘 iv 给药,
测得的血药浓度2时间曲线见图 3。经模型拟合, Β2细
辛醚 ig 给药体内过程符合一级吸收二室模型, 药动
学参数见表 4。各剂量组的半衰期与剂量无关, 药时
曲线下面积 (AU C) 及峰值浓度与剂量基本成线性。
说明 Β2细辛醚在 011～ 014 gökg 剂量属于线性动力
学。结果表明, 兔 ig 石菖蒲挥发油后, Β2细辛醚的绝
对生物利用度为 910%。
12ig 014 gökg　22ig 012 gökg　32ig 011 gökg
图 2　兔 ig 石菖蒲挥发油后 Β-细辛醚
的血药浓度-时间曲线
F ig1 2 　Blood concen tration - time curve of Β-asarone
af ter ig d ifferen t dose of vola tile o il from
A 1 ta ta r inow ii to rabbits
4　讨论
411　据文献报道, Β2细辛醚是石菖蒲挥发油中的主
·05· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 36 卷第 1 期 2005 年 1 月
图 3　兔 iv 石菖蒲挥发油 011 gökg 后 Β-细辛
醚的血药浓度-时间曲线
F ig1 3　Blood concen tration - time curve of Β-asarone
af ter iv 011 gökg of vola tile o il from
A 1 ta ta r inow ii to rabbits
表 4　兔 ig 及 iv 给药后的药动学参数
Table 4　Pharmacok inetic parameters of Β-asarone
af ter ig or iv adm in istration to rabbits
参数 单　位 iv 011
gökg ig 011gökg ig 012gökg ig 014gökg
A Λg·mL - 1 12514 416 1412 2316Α m in- 1 01061 8 01036 7 01042 8 01043 5
B Λg·mL - 1 4122 1123 1158 2156Β m in- 1 01008 8 01006 6 01006 9 01005 2
K a m in- 1 01103 01102 01103
t1ö2Α m in 1112 2013 1714 1711
t1ö2Β m in 7815 10517 10017 13711
t1ö2ka m in 7156 6185 7101
K 21 m in- 1 01010 6 01017 3 01013 4 01011 6
K 10 m in- 1 01051 7 01014 0 01023 1 01019 5
K 12 m in- 1 01008 4 01012 0 01013 1 01017 7
AU C Λg·m in·mL - 1 2 508 227 422 737
tm ax m in 　2313 　1911 　1912
Cm ax Λg·mL - 1 1193 5155 7183
要有效成分之一, 所以, 本实验选取Β2细辛醚作为研
究对象。石菖蒲挥发油中的另一有效成分 Α2细辛醚
与 Β2细辛醚互为顺反导构体, 两者性质极为相近。本
实验条件下, 两者分离很好, 且两者与内标物 Α2萘
酚亦分离完全。空白血浆无杂质峰干扰。
412　经兔 ig Α2细辛醚对照品 (F luka 试剂, 纯度为
99% ) 试验证明, 在本实验剂量下, 石菖蒲挥发油中
的 Α2细辛醚在体内不会转化成 Β2细辛醚, 所以不会
影响 Β2细辛醚的药动学研究。
413　本法在样品预处理步骤中加入 015 mL 水,
150 m g 氯化钠, 25 m g 氟化钠摇匀后提取, 目的是
使血细胞破裂, 从而使与血细胞结合的 Β2细辛醚释
放出来。结果证明, 不经过此处理的提取回收率仅为
8116% , 远远低于本实验预处理方法的回收率。
414　石菖蒲挥发油中 Β2细辛醚的药动学特征可以
归纳为以下几点: (1) 用 3P87 药动学程序处理血药
浓度2时间数据, 经模型拟合, 以A IC 最小原则结合
相关系数等指标进行最佳模型判别, 石菖蒲挥发油
中 Β2细辛醚经 ig 给药, 在兔体内过程符合一级吸收
二室模型。(2)兔 ig 3 种剂量 (011、012、014 gökg)的
石菖蒲挥发油后, 各剂量组的半衰期与剂量无关,
AU C 及Cm ax与剂量基本成线性关系。说明 Β2细辛醚
在 011～ 014 gökg 属于线性动力学。 (3) 兔 ig 石菖
蒲挥发油后, Β2细辛醚在体内吸收迅速, 20 m in 左右
血药浓度达峰值。 t1ö2Α为 18 m in, t1ö2Β为 114 m in 左
右, 说明 Β2细辛醚在体内吸收、分布均较快。(4)兔 ig
石菖蒲挥发油后, Β2细辛醚的绝对生物利用度很低,
仅为 910%。
小半夏加茯苓汤中药效物质的正交试验筛选
刘　文, 冯　泳Ξ
(贵阳中医学院, 贵州 贵阳　550002)
摘　要: 目的　确定小半夏加茯苓汤中药效物质。方法　采用L 9 (34)正交试验制成不同提取工艺的处方, 测定呕吐
潜伏期、呕吐次数和总生物碱的质量分数, 对数据进行线性回归。结果　呕吐潜伏期与总生物碱呈良好线性关系,
呕吐次数与总生物碱也呈良好线性关系。结论　小半夏加茯苓汤中总生物碱是其药效物质。
关键词: 小半夏加茯苓汤; 正交试验; 生物碱
中图分类号: R 284; R 28614　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2005) 01 0051 02
·15·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 36 卷第 1 期 2005 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2004204206
作者简介: 刘　文 (1968—) , 辽宁鞍山人, 硕士, 贵阳中医学院副教授, 主要从事中药新药的研究与开发。
T el: (0851) 5929169　Fax: (0851) 5930605　E2m ail: lw @gyctcm 1edu1cn