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浙产猕猴桃属植物根、茎、叶中多糖的比较



全 文 :中草芮ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1099·
26一位葡萄糖基,F一环自动环合得到相应的次级皂
苷,所以应避免加热。而且C一22一OH易被甲基化,不
能用甲醇提取、溶解。因此本研究选择超声提取,重
蒸水溶解,乙腈为流动相。
3.2采用超声提取法,考察了水,35%、65%、95%
乙醇作为提取溶剂的提取效果,发现以35%乙醇作
为溶剂,原薯蓣皂苷提取效率高,干扰峰较少,分离
度较好,故采用35%乙醇作为提取溶剂。样品经溶
剂提取后,考察了直接进样、正丁醇一步萃取后进
样、醋酸乙酯一正丁醇两步萃取后进样,发现醋酸乙
酯一正丁醇两步萃取后进样,杂质干扰少,重现性好。
3.3该属植物中所含甾体皂苷类成分种类繁多,结
构相似,在紫外区处于末端吸收,分离难度较大。对
于液相色谱条件,曾考察了不同填料的色谱柱,不同
比例的甲醇一水、乙腈一水、乙腈一醋酸水溶液、乙腈一甲
醇一水等流动相,结果表明以XterraTM0DS为固定
相,乙腈一水(27:73)为流动相,分离效果最好,灵敏
度高。通过二极管阵列检测器检测,色谱峰纯度良
好,分析方法具有专属性。
3.4 首次采用RP—HPLC方法测定穿山龙及其同
属植物中原薯蓣皂苷,结果显示穿山龙富含原薯蓣
皂苷,质量分数为11.24~27.05mg/g,黄山药次
之,山药较少。该方法简便、快速,可用于该生药、提
取物及其制剂的质量控制。
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浙产猕猴桃属植物根、茎、叶中多糖的比较
吴瑾瑾1,石森林2,张小寅2,魏颖慧2
(1.杭州第四医院,浙江杭州 310003;2.浙江中医学院,浙江杭州310053)
近年来,猕猴桃属(ActinidiaLindl.)药用植物
资源种类及药理作用日益受到国内外医药界的重视,
其中浙江产的主要有中华猕猴桃A.chinensis
Planch.、镊合猕猴桃A.valvataDunn、大籽猕猴桃
A.macrospermaC.F.Liang、毛花猕猴桃AP一一
anthaBenth.、软枣猕猴桃A.arguta(Sieb.et
Zucc.)Planch.etMiq 、长叶猕猴桃A.hemsleyana
Dunn、葛枣猕猴桃A.polygama(Sieb.etZucc.)
Maxim.、异色猕猴桃A.callosaLindl.var.discolor
C.F.Liang等,其中前4种在浙江资源相对较丰富,
药材主要有藤梨根(中华猕猴桃的根)和猫人参(镊合
猕猴桃、大籽猕猴桃的根)。现代药理研究发现猕猴桃
属多糖成分具有抗肿瘤、增强免疫机能、消除活性氧自
由基等作用,且无副作用。随着其药用价值的凸现,猕
猴桃属药材利用率增加,由于药用部位为根,造成其自
然资源人为破坏严重,为了科学合理地利用药材资源,
收稿日期:2005—12—11
基金项目:浙江省自然科学基金(课题编号300431)
笔者对浙江主产的猕猴桃属植物中华猕猴桃、镊合猕
猴桃、毛花猕猴桃和大籽猕猴桃的根、茎、叶含多糖的
量进行比较,以寻找新的药用部位。
1仪器、材料和试剂
1.1 仪器:万能粉碎机(河北黄骅齐家务科学仪器
厂);CQ250超声清洗器(上海船舶电子设备研究
所);国家统一标准筛(浙江上虞华康化验仪器厂);
电子天平ARll40/C(奥豪斯);751一GW分光光度
计(安捷伦科技上海分析仪器有限公司);DKS一24
型电热恒温水浴锅(沈阳中新电器厂)。
1.2材料和试剂:药材来自猕猴桃科猕猴桃属的镊
合猕猴桃、大籽猕猴桃、毛花猕猴桃、中华猕猴桃,均
产自浙江,由罗国海副教授鉴定;D(+)葡萄糖购自
中国生物制品检定所。硫酸(中国浙江衢州巨化试剂
有限公司)、碳酸氢钠(中国上海虹光化工厂)、苯酚
(浙江杭州双林化工厂),以上均为分析纯;铝片
万方数据
·1100· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
(99%,中国医药上海化学试剂公司)。
2方法与结果
2.1供试液制备:取供试药材细粉适量,加80%乙
醇100mL强超声20min,滤过,滤渣连同滤纸再加
入80%乙醇50mL强超声20min,滤过,再用80%
乙醇洗涤至基本无色,干燥。然后,加入50mL蒸馏
水强超声20min,滤过,滤渣加蒸馏水30mL强超
声10min,洗涤滤渣(2×5mL),合并两次水提液和
洗涤液,用活性炭脱色,并定容于100mL量瓶中。
2.2对照品溶液的制备:精密称取105‘C干燥恒重
的D(+)葡萄糖50mg,用蒸馏水定容于100mL量
瓶中,取50mL再定容于100mL量瓶中,配成250
/-g/mL的对照品溶液。
2.3线性关系的考察与回归方程的建立:分别取对
照品溶液0.1、0.15、0.2l、0.27、0.33、0.39、0.45
mL,分别加蒸馏水至2mL,加15%苯酚水溶液1
mL摇匀,依次加入5mL浓硫酸,静置10min,沸水
浴加热10min,冷却至室温。在490nm波长处测定
吸光度(A),以质量浓度(C)为横坐标、A为纵坐标
作标准曲线,得回归方程:A一0.059C+0.0095,
r一0.9998,表明质量浓度在3.2~14.00/丝g/mL与
A有良好的线性。
2.4精密度试验:精密量取供试液和对照品液,分别
按前述多糖测定方法操作,测定A值,结果对照品
RSD为0.69%(咒一7);样品RSD为1.38%(咒一7)。
2.5重现性试验:同一批样品6份制备供试液,每
份分别取2mL,按前述多糖测定方法操作,测定A
值,结果RSD为1.63%(卵一6)。
2.6稳定性试验:取3批供试液,按前述多糖测定
方法操作,每隔1h测定其多糖的量,共测10h,结
果表明在10h内A值基本不变,RSD一1.85%。
2.7 回收率试验:精密称取中华猕猴桃细粉
3.021、3.005、3.007g,分别加入适量的D(+)葡萄
糖对照品,按测定方法操作,结果平均回收率为
99.54%(,2—9)。
2.8换算因子(厂)的测定:精密称取D(+)葡萄糖
对照品50mg,加蒸馏水稀释到100mL,再取5mL
定容于50mI。量瓶中,摇匀,作储备液。精密量取储
备液1.5mL,按对照品制备下的方法测定其A值,
按下列换算因子厂一w/c,W为实际总多糖量,C为
测得多糖中总多糖量,测得f。一1.16187(毛花猕猴
桃和大籽猕猴桃),f2—1.1865 (中华猕猴桃和镊
合猕猴桃)。
2.9样品的测定:精密称取毛花猕猴桃、大籽猕猴
桃、中华猕猴桃和镊合猕猴桃的根、茎、叶细粉,按供
试液制备(除镊合猕猴桃茎稀释成104mL外)和多
糖测定方法操作,测定结果见表1。
表1样品中多糖的测定(弹一3)
Table1 Determinationofpolysaccharideinsamples(万=3)
品 种 部位 称样量/g 取样量/mL质量分数/%
毛花猕猴桃
大籽猕猴桃
中华猕猴桃
镊合猕猴桃
0.900
0.808
0.779
2.000
1.710
0.700
0.544
1.814
0.405
3.390
0.694
讨论
3.1 猕猴桃多糖采用超声提取有较大的优势[1’2],
可以缩短提取的时间,提高提取率,而且无需加热,
所用仪器简单易行,多糖的提取条件易控制,先用
80%乙醇提取以除去单糖、低聚糖、苷类、脂类等干
扰成分,然后用水提取多糖成分口],实验结果证明了
此法可行。
3.2 苯酚一硫酸比色法是测定多糖较为常用的方
法,原理是多糖在硫酸的作用下,先分解成单糖,并
脱水生成糖醛衍生物和苯酚缩合成有色化合物,在
490nm处测定多糖的量,方法简单可行,显色稳定,
灵敏度好,但是苯酚具有不稳定性,容易被氧化,所
用苯酚最好临时现配。
3.3本实验结果表明浙产猕猴桃属植物中,叶的量
普遍较低,而茎则较高,其中镊合猕猴桃茎含多糖的
量最高,可以利用其茎或叶代替药用部位根,避免不
可再生资源的破坏。人工种植也是一条很好的出路,
但如果仅仅取其根来药用,那将是对药材资源的一
种浪费,可以利用秋、冬季节修剪下来的枝叶加以利
用,这样就能大大提高其经济效益。对于野生的猕猴
桃属植物也没有必要非取其根不可,利用其茎、叶而
有效地保护现有的自然资源,从而更加科学合理地
利用药材资源。
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根茎叶根茎叶根茎叶茎叶
万方数据
浙产猕猴桃属植物根、茎、叶中多糖的比较
作者: 吴瑾瑾, 石森林, 张小寅, 魏颖慧
作者单位: 吴瑾瑾(杭州第四医院,浙江,杭州,310003), 石森林,张小寅,魏颖慧(浙江中医学院,浙江
,杭州,310053)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(7)
被引用次数: 9次

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